全 文 ：收稿日期:2011-07-09; 修订日期:2011-11-10
基金项目:云南省教育厅资助项目(No． 04Y166C)
作者简介:万顺康(1971-) ，男(汉族) ，云南施甸人，现任大理学院讲师，
学士学位，主要从事天然药物化学研究工作．
* 通讯作者简介:张兰胜(1978-) ，男(纳西族) ，云南丽江人，现任大理学
院讲师，硕士学位，主要从事天然药物化学研究工作．
山胡椒挥发油化学成分的研究
万顺康，董光平，张兰胜*
(大理学院，云南 大理 671003)
摘要:目的 对山胡椒挥发油进行化学成分的研究，为山胡椒的进一步开发和利用提供科学依据。方法 采用水蒸气蒸馏
法从山胡椒中提取挥发油，用气相色谱 －质谱法对化学成分进行分析，以归一化法计算各个化学成分的相对含量。结果
共分离出 69 个峰，鉴定了其中 36 个化学成分，占挥发油总量的 75． 11%。结论 山胡椒主要成分为罗勒烯(10． 21%)、β
－水芹烯(8． 26%)、柠檬醛(5． 59%)和沉香醇(5． 39%)。
关键词:山胡椒; 挥发油; 气相色谱 －质谱法
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2012． 06． 067
中图分类号:R284． 1 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2012)06-1470-01
山胡椒 Lindera glauca (Sieb． Zuce)BL为樟科植物山胡椒的
果实，落叶灌木或小乔木，又名山花椒、野胡椒、香叶子，广泛分布
于黄河以南地区，性辛、温，具有温中散寒的功效，主要用于治疗
脘腹冷痛，胸满痞闷，哮喘等［1］。云南产的山胡椒挥发油化学成
分研究尚未见报道。本实验采用云南大理产山胡椒的干燥果实，
以水蒸气蒸馏法提取挥发油，经无水硫酸钠干燥后，用气相色谱
－质谱法分析，共分离出 69 个化学成分，鉴定了其中 36 个化学
成分，以归一化法计算了各个化学成分的相对含量，占挥发油总
量的 75． 11%，对山胡椒的进一步开发和利用提供了科学依据。
1 仪器与试剂
美国 Thermo Quest Trace 2000 GC － MS 联用仪，色谱柱:DB
－ 5MS石英毛细管柱(30m × 0． 25mm，0． 25μm)。山胡椒采自云
南大理花甸坝，经大理学院药学院生药教研室马晓匡教授鉴定为
樟科植物山胡椒 Lindera glauca (Sieb． Zuce)BL。
2 方法
2． 1 挥发油的提取 将山胡椒果实 50g 干燥、粉碎，按水蒸气蒸
馏法提取挥发油［2］，经无水硫酸钠干燥后得样品，挥发油为淡黄
色透明油状物，具有浓郁的特殊气味，出油率为 0． 79%。
2． 2 气相色谱条件 DB － 5MS石英毛细管柱(30 nm × 0． 25 mm，
0． 25 μm) ;色谱柱程序升温条件:初始温度 50℃，保持 3 min 后，
以 5℃ /min的速率升温至 120℃，然后以 1℃ /min 的速率升温至
160℃，再以 10 ℃ /min的速率升温至 260℃，恒温 10 min;载气 He
(1． 0 ml /min) ;进样量 1 μl;无分流进样;接口温度:260℃;气化
温度:260℃。
2． 3 质谱分析条件 电离方式为 EI;电子能量 70 eV;离子源温
度:200℃;质谱检测器电压 350 V;扫描质量范围 35 ～ 450 AMU。
3 结果
用毛细管气相色谱法从山胡椒中分离出 69 个峰，通过 HP －
MSD化学工作站数据处理系统，按面积归一化法测得挥发油各
组分相对含量。按上述气相色谱 －质谱条件对山胡椒挥发油进
行分析，得其总离子流图结果见图 1。
对总离子流图中的各峰通过质谱扫描后得质谱图，经计算机
用 NIST98 标准图库，人工谱图解析，并查对有关质谱资料［3］，从
基峰、质荷比和相对丰度等方面进行直观比较、分析和鉴定，确认
了其中 36 个化学成分。结果见表 1。
图 1 山胡椒挥发油总离子流图
表 1 山胡椒挥发油化学成分分析结果
峰号
保留时间
t /min
化合物 分子式 分子量
相对含量
(%)
1 7． 20 β －蒎烯 β － pinene C10H16 136 1． 17
2 7． 38 6 －甲基 －5 －庚烯 － 2 －酮 6 －Methyl － 5 － hepten － 2 － one C8H14O 126 1． 32
3 8． 53 柠檬烯 limonene C10H16 136 0． 30
4 8． 62 桉叶醇 eucalyptol C10H18O 154 0． 49
5 8． 73 罗勒烯 ocimene C10H16 136 10． 21
6 8． 92 枞油烯 sylvestrene C 10H16 136 1． 28
7 9． 12 月桂烯 myrceme C 10H16 136 2． 17
8 10． 59 沉香醇 linalool C10H18O 154 5． 39
9 11． 97 香茅醛 citronellal C10H18O 154 1． 52
10 12． 19 异香叶醇 isogeraniol C10H18O 154 0． 42
11 12． 64 异龙脑 isoborneol C10H18O 154 1． 07
12 12． 74 α －马鞭烯醇 α － verbenol C10H16O 152 0． 55
13 12． 83 萜烯醇 terpinen － 4 － ol C10H18O 154 0． 60
14 13． 27 α －松油醇 α － terpineol C10H18O 154 0． 62
15 14． 29 香叶醇 geraniol C10H18O 154 1． 37
16 14． 66 柠檬醛 citral C10H16O 152 5． 59
17 15． 14 香叶醇 geraniol C10H18O 154 4． 23
18 15． 23 β －水芹烯 β － phellandrene C10H16 136 8． 26
19 15． 61 α －水芹烯 α － phellandrene C10H16 136 2． 64
20 19． 27 β －石竹烯 β － caryophyllene C15H24 204 4． 52
21 20． 00 β －合金欢烯 β － farnesene C15H24 204 2． 40
22 20． 12 α －石竹烯 α － caryophyllene C15H24 204 0． 35
23 21． 37 β －没药烯 β － bisabolene C15H24 204 0． 33
24 21． 50 榄香烯 elemene C15H24 204 4． 98
25 23． 28 α －石竹烯环氧物 caryophylleneoxide C15H24O 220 3． 10
26 23． 89 葎草烯环氧物Ⅱ humulene oxideII C15H24O 220 1． 18
27 24． 96 β －桉叶醇 β － eudesmol C15H26O 222 2． 18
28 25． 06 9，12，15 －十八碳三烯 － 1 －醇9，12，15 － octadecatrien － 1 － ol C18H32O 264 0． 38
29 25． 33 β － 石竹烯环氧物 β － caryo-phyllene oxide C15H24O 220 0． 23
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时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 6 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL． 23 NO． 6
续表 1
30 31． 45
2 －异亚丙基 －5 －甲基 －4 －己
醛 2 － isopropylidene － 5 － meth-
ylhex － 4 － enal
C10H16O 152 1． 17
31 32． 09
(2，2 －二甲基亚丙基)环己烷
(2，2 － Dimethylpropylidene)cy-
clohexane
C11H20 152 0． 52
32 32． 62 β －马鞭烯醇 β － verbenol C10H16O 152 1． 20
33 33． 03
2，6 －二甲基 －2，6，11 －十一烷
三烯 － 8 － 醇 2，6 － dimethyl －
2，6，11 － undecatrien － 8 － ol
C13H22O 194 0． 23
34 33． 22 β －合金欢烯 β － farnesene C15H24 204 2． 55
35 34． 22 橙花叔醇 nerolidol C15H26O 222 0． 21
36 35． 01 二十烷 eicosane C20H42 282 0． 38
4 讨论
所鉴定出的 36 个化学成分占挥发油总量的 75． 11%，主要
成分为罗勒烯(10． 21%)、β －水芹烯(8． 26%)、柠檬醛(5． 59%)
和沉香醇(5． 39%)。其中单萜类化合物含量最高，其次是倍半
萜类化合物，还含有一些烷烃类化合物［3］。这些物质中不少成
分有芬芳的气味，对人体器官具有刺激或镇静作用，而且有些具
有特殊的药效，如 β －水芹烯既是一种香料和香料中间体，也是
一种具有生物活性的天然杀虫剂，还可以作为原料加工制备很多
重要的化学品;柠檬醛具有杀、驱昆虫作用，用作杀、驱昆虫剂，有
防腐作用，作用比苯酚强，还有抑、杀真菌作用［4］。本研究结果
对山胡椒的进一步开发和利用提供了科学依据。
参考文献:
［1］ 中国科学院．中国高等植物图鉴，第一册［M］．北京:科学出版社，
1972:835．
［2］ 国家药典委员会． 中国药典，一部［S］． 北京:化学工业出版社，
2005:附录 64．
［3］ 丛浦珠，李笋玉． 天然有机质谱学［M］． 北京:中国医药科技出版
社，2001:783．
［4］ 陆凌霄，李 明，赵 梨，等．水芹烯的来源合成及应用［J］．安徽农
业科学，2010，38(26) :14361．
收稿日期:2011-09-10; 修订日期:2011-12-26
基金项目:广西壮族自治区科学研究与技术开发计划项目(No． 0992025 － 22) ;广西壮族自治区自然科学基金(No．桂科自 0991137)
作者简介:赵 杰(1985-) ，女(瑶族) ，广西金秀人，现为广西医科大学在读硕士研究生，学士学位，主要从事海洋药物应用研究工作．
* 通讯作者简介:庞 辉(1962-) ，女(汉族) ，广西博白人，现任广西医科大学基础医学院教授，硕士研究生导师，硕士学位，主要从事海洋药物的应用
研究工作．
螺旋藻激酶对人脐静脉内皮细胞
t － PAmRNA、PAI － 1mRNA表达的影响
赵 杰1，肖云晓1，蒋 浩2，庞 辉1*
(1．广西医科大学，广西 南宁 530021; 2．清华大学，北京 100084)
摘要:目的 研究螺旋藻激酶(Spirulina kinase，SPK)对人脐静脉内皮细胞 t － PAmRNA、PAI －1mRNA表达的影响，探讨其抗
血栓作用机制，为开发新型溶栓药物提供理论依据。方法 体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)，建立肾上腺素(Adr)损
伤模型加入不同浓度的 SPK，并以肝素(Hep)为阳性对照，与空白组对照，经过 12，24，48 h后，逆转录多聚酶链式反应(RT －
PCR)，扩增产物经凝胶电泳分离后，凝胶图像分析仪照相和扫描，测定各组 t － PAmRNA、PAI － 1mRNA与内参基因三磷酸
甘油醛脱氢酶(GAPDH)mRNA的相对表达量。结果 在 Adr损伤模型中，2 mg /ml SPK可以上调 t － PAmRNA表达，超大剂
量 SPK降低 t － PAmRNA表达。SPK还可以随着剂量的增加明显的抑制 PAI －1mRNA的表达，效果强于大剂量的肝素。结
论 SPK可能通过小部分活化 t － PAmRNA的表达，抑制 PAI －1mRNA的表达，从而达到抗血栓的作用。
关键词:螺旋藻激酶; 组织型纤溶酶原激活物; 纤溶酶原激活物抑制物; 逆转录多聚酶链式反应
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2012． 06． 068
中图分类号:R284． 2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2012)06-1471-03
Effects of Spirulina Kinase on the Expression of t － PAmRNA、PAI － 1mRNA in human
Umbilical Vein Endothelial Cell
ZHAO Jie1，XIAO Yun-xiao1，JIANG hao2，PANG Hui1
(1． Department of Physiology，Guangxi Medical University，Nanning，Guangxi，530021，China;2． Qinghua Uni-
versity，Beijing，100084，China)
Abstract:Objective To study the effects of spirulina kinase from spirulina on the expression of t － PAmRNA，PAI － 1mRNA in
human umbilical vein endothelial cells (HUVECs)and to explore the mechanism of its anti － thrombotic and provide theoretical
basis for the development of new thrombolytic drugs．Methods The third to fifth genetation of HUVECs were incubated respective-
ly with adrenaline (Adr)damage model － different concentrations of SPK and heparin (Hep)as a positive control，for 12，24，
48hours． Meanwhile ，cells were also accordingly exposed to 2mg /mlSPK alone． After reverse transcription － polymerase chain reac-
tion (RT － PCR ) ，PCR products were separated by gel electrophoresis，and gel images were analyzed and scanned to measure the
relative expression of t － PAmRNA，PAI － 1mRNA with the reference gene GAPDHmRNA． Results In Adr injury models，2mg /
mlSPK could increase the expression of t － PAmRNA，concentration of SPK to reduce the expression of t － PAmRNA． SPK also sig-
nificantly inhibited the expression of PAI － 1mRNA with increasing concentration． The effect was stronger than high concentration
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL． 23 NO． 6 时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 6 期