全 文 :喜树叶 、枝水溶性糖提取的研究
王学利
(浙江林学院信息工程与基础科学系 临安 311300)
摘 要 用正交实验结果作方差分析表明:溶剂用量对试验结果有较显著的影响(a=0.10), 提取温度对试验
结果也有较大的影响 ,而提取时间对试验结果的影响不显著。喜树叶中水溶性糖的提取最优方案是 A3C2B3 ,即溶
剂用量为 60ml , 提取温度 80℃, 提取时间 60min;喜树枝中水溶性糖的提取最优方案是A2C2B1 ,即溶剂用量为 40ml ,
提取温度 80℃, 提取时间 20min。通过对喜树叶与枝的成对比较分析 ,叶与枝的水溶性糖含量无显著差异。
关键词 喜树叶 、枝 , 水溶性糖 ,提取
Extraction of Soluble Sugar in Camptotheca Acuminata Decne Leaves and Branchhes
Wang Xueli
(Department of Information Technology and Basic Science , ZheJiang Forestry College , Lin an 311300 Zhejiang ,
China)
Abstract Variance analyses by using the results of orthogonal design experiments show that solvent volume and
extracting temperature both have obvious inf luence on the experimental results(α=0.10).;however , the influ-
ence of extracting time on the experimental results is not obvious.The best scheme of extracting soluble sugar
from Camptotheca acuminata Decne leaves is A3C2B3:solvent volume 60ml , extracting temperature 80℃ and
extracting time 60min;While the best scheme of extracting soluble sugar from Camptotheca acuminate Decne
branches is A2C2B1;Solvent volume 40ml , extracting temperature 80℃, and extracting time 20min.The com-
parative analyses of Camptotheca acuminata Decne leaves and branches show that the contents of soluble sugar
in the leaves and branches make not much difference.
Key Words Camptotheca acuminata Decne leaves and branches , soluble sugar , extract
喜树(Camptotheca acuminata Decne)别名旱莲
木。具有苦 、寒 、有毒 、破血化瘀 、抗癌等性味功能 。
主治急性淋巴细胞性白血病 ,慢性细胞性白血病 ,癌
症 ,血吸虫病肝脾肿大 ,外治牛皮癣 。喜树中含有喜
树碱 、喜树次碱 、10-羟基喜树碱 、甲氧基喜树碱等
多种生物碱[ 1] 。而对其糖类化合物的研究尚未见文
献报道。
糖类化合物普遍存在于自然界的醛糖或酮糖及
形成的糖的多聚物 ,具有多种生物活性 。从 50年代
发现酵母多糖具有抗癌效应以来 ,对植物糖类化合
物的研究越来越引起人们的重视 ,植物糖类化合物
已作为一种免疫调节剂运用于癌症的免疫治疗 ,增
强抗肿瘤作用 ,同时还具有抗病毒 、抗衰老作用[ 2] 。
我国植物多糖资源十分丰富 ,具有巨大的开发潜力 ,
特别是在医药保健行业中的应用具有广阔的前景。
本文报告喜树叶 、枝水溶性糖类提取和测定的结果。
1.材料及方法
1.1 材料 实验样品于 2000年 6月采集于浙江林
学院校园中 ,经本院植物教研室教师鉴定 。分别从
喜树上 、中 、下部采集叶 、枝 ,样品混合后洗净 ,低温
下烘干 ,粉碎 ,分别装入干燥的磨口瓶中平衡 ,喜树
叶的含水率为5.91%,喜树枝的含水率为 4.98%。
1.2 样品的提取 每组称取 1g样品 ,加水 ,水浴加
热回流 ,热水抽提不同的时间后 ,过滤 ,滤液定容 ,待
测水溶性糖的含量 。
1.3 测定方法 采用蒽酮———硫酸法[ 3] ,以葡萄糖
为标准样品 。
2 结果与讨论
17喜树叶 、枝水溶性糖提取的研究
2.1 喜树叶 、枝水溶性糖提取条件的确立
本试验所确定的提取条件有:溶剂用量 、提取时
间 、提取温度三因素 ,采用三水平正交表 L9(34)进行
试验 ,因素水平列表 1。
表 1 考察因素水平
因 素
水平 A溶剂用量(ml)
B提取时间(min)
C提取温度(℃)
1
2
3
20
40
60
20
40
60
60
80
100
根据 L9(34)分 9组试验所得结果见表 2。
表 2 喜树叶 、枝的水溶性糖提取正交试验结果
试验号 溶剂用量 提取时间 提取温度 叶糖含量 枝糖含量
(ml)
A
(min)
B
(℃)
C
(%) (%)
0
1 1(20) 1(20) 1(60) 1.64 3.42
2 1(20) 2(40) 2(80) 5.32 3.99
3 1(20) 3(60)3(100) 6.38 7.48
4 2(40) 1(20) 2(80) 8.26 14.93
5 2(40) 2(40)3(100) 7.68 13.19
6 2(40) 3(60) 1(60) 4.25 5.89
7 3(60) 1(20)3(100) 8.28 8.19
8 3(60) 2(40) 1(60) 7.11 7.36
9 3(60) 3(60) 2(80) 13.07 8.52
叶Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
极差 R
13.34
20.19
28.46
15.12
18.18
20.11
23.70
5.52
13.00
26.65
22.34
13.65
∑ x =61.99
X
-=6.89
∑ x =72.97
X
-=8.11
枝Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
极差 R
14.89
34.01
24.07
19.12
26.54
24.54
21.89
4.65
16.67
27.44
28.85
12.15
2.2 喜树叶的水溶性糖含量分析
由表 2可知:极差最大的是溶剂用量 ,溶剂用量
60ml ,提取的水溶性糖含量平均为 9.49%,溶剂用量
20ml的提取的水溶性糖含量平均为 4.45%;溶剂用
量越大所提取的喜树叶水溶性糖含量越高。其次是
提取的温度 ,温度为 80℃时 ,所提取的水溶性糖含
量平均为 8.88%,温度 60℃时提取的水溶性糖含量
平均为 4.33%,温度升高到 100℃,提取的水溶性糖
含量无增加 ,即温度 80℃时最为适宜。提取时间
20min 、40min 、60min 时所提取的水溶性糖含量无差
别 。试验结果中最好的是第 9号 ,即 A3B3C2 。进一
步作方差分析见表 3。
表 3 喜树叶的水溶性糖含量正交试验方差分析
变差来源 自由度 平方和 均方 均方比 临界值
A(溶剂用量) 2 38.21 19.16 9.46 9.00(a=0.10)
B(提取时间) 2 5.23 2.62 1.30
C(提取温度) 2 32.46 16.23 8.03
E(误差) 2 4.03 2.02
T(总计) 8 79.93
经方差分析可知:溶剂用量对试验结果有较显
著的影响(a=0.10),其次温度对试验结果也有较大
的影响 ,提取的最优方案是A 3C2B3 ,即溶剂 60ml ,温
度 80℃,时间 60min 。
2.3 喜树枝的水溶性糖含量分析
由表2可知:极差最大的是溶剂用量 ,溶剂用量
为 40ml时提取的水溶性糖含量平均为 11.34%,溶
量用量 20ml时提取的水溶性糖含量平均为 4.96%,
且以第二水平为最优。其次是提取的温度 ,温度为
80℃时提取的水溶性糖含量平均为 9.15%, 温度
60℃时提取的水溶性糖含量平均为 5.56%,当温度
100℃时并无增加 。提取时间 20min 、40min 、60min时
所提取的水溶性糖含量无差别。试验结果最好的是
第4号 ,即 A2C2B1 ,其次为第 5 号 A2C3B2 。进一步
作方差分析见表 4。
表 4 喜树枝的水溶性糖含量正交试验方差分析
变差来源 自由度 平方和 均方 均方比 临界值
A(溶剂用量) 2 60.96 30.48 4.59 4.32(a=0.10)
B(提取时间) 2 29.43 14.72 2.19
C(提取温度)
E(误差)
2
2
3.63
23.42 6.71
T(总计) 8 117.35
注:由于因素 B的均方小于误差项均方 , 故将时间这一因素的
平方和合并到误差项
结果表明溶剂用量对试验结果有较显著的影
响 。试验最优方案为 A2C2B1 ,即溶剂用量为 40ml ,
温度为 80℃,时间为 20min 。从提取温度的三个水
平来看 ,第二水平与第三水平相差无几。
2.4 喜树叶与枝水溶性糖含量的比较
将喜树叶中水溶性糖含量与喜树枝中水溶性糖
含量作成对比较试验分析见表 5。 (下转第25页)
18 中国野生植物资源 第 20卷第 4 期
病阴虚 、目暗 、胃弱 、声音嘶哑。是演说家 、歌唱家 、
戏曲家 、播音员 、教师的高级护嗓 ,保健品对声带疲
劳 ,声音嘶哑 ,恢复美容有特殊的疗效。主要野生产
区在文山州 ,附生於密林树干上或岩石上。该种自
然繁殖能力低 ,解放后曾大量出口 ,价值昂贵 ,每公
斤一千三佰美元 ,历来被人们称之为“价值千金的
草” 。六十年代末资源枯竭。思茅地区民族传统医
药研究和有关单位共同努力进行人工集约化栽培 ,
获得成功 ,从而保护了物种基源 ,也为传统畅销栖枫
斗提供了药源。
2 资源组成特点及分布现状
思茅地区国家重点保护野生药用植物资源组成
包括蕨类植物 ,裸子植物 ,被子植物共计 20种 ,地理
分布具有零星分散的特点 ,大多分布在交通不便的
边远地区或森林茂密的环境中 。
3 资源的开发利用
思茅地区国家重点保护野生药用资源植物分布
广 ,具有较高药用价值。如野三七是近几年来发现
人参属中根呈姜状的珍贵的种类。根含齐墩果烷型
五环三萜 ,是治疗心血管疾病的良药。引种的银杏
提取物也是治疗心脑血管疾病的良药 ,受到世界各
国关注 ,黑节草 、龙血树 、山大黄 ,也都为名贵药材 ,
具有很大的开发潜力。但是思茅境内自然野生的国
家重点保护药用植物资源蕴藏量大的种类并不很
多 ,有的种类处於濒危灭绝的地步 ,单纯从发展经济
的角度来开发利用 ,可能会产生资源毁灭的严重后
果 ,因此必须采取保护 ,发展和开发利用相结合的方
针来进行资源的开发。首先大力宣传资源保护的重
要意义 ,加强有关资源保护法的教育 ,提高民众的资
源保护意识 。其次 ,积极开展人工繁殖和栽培研究 ,
采用常规和最先进的生物技术 ,使原来处于野生状
态的国家重点保护野生药用资源植物转为家生 ,在
人为的条件下 ,使其繁衍生长 ,既可保护又可利用。
总之 ,对思茅国家重点保护植物资源进行保护 、发
展 ,可促进国际科技交流和带动思茅旅游业 ,宣传思
茅均具有重要的意义。
参 考 文 献
[ 1] 国家环境保护局 ,中国科学院植物研究所编.《中国珍稀濒危保
护植物名录》 .北京:科学出版社 1987年。
[ 2] 林业部云南珍稀濒特森林植物保护和繁育重点实验室编.《云
南省重点保护野生植物资源调查手册》 .内部资料 1998年.
(上接第 18页)
表 5 成对比较试验
项 目 试 验 结 果
喜树叶中水溶性糖含量 X1 1.64 5.32 6.38 8.26 7.68 4.25 8.28 7.11 13.07
喜树枝中水溶性糖含量 X2 3.42 3.99 7.48 14.93 13.69 5.89 8.19 7.36 8.52
d=X1-X2 -1.78 1.33 -1.10 -6.67 -5.51 -1.64 0.09 -0.25 4.55
t= X
-
1-X-2
sd n-1=
-1.22
3.18 8=-1.08
取α=0.10 ,临界值T a 10(8)=1.86 t
著差异 ,只是喜树枝中水溶性糖含量略高于叶中水
溶性糖含量。
3 结论
通过正交试验结果的方差分析可知:溶剂用量
对水溶性糖的提取有较显著的影响 ,其次为提取温
度 。
喜树叶与枝的水溶性糖含量无显著差异 ,枝中
的水溶性糖含量略高于叶的水溶性糖含量 。
参 考 文 献
[ 1] 《浙江药用植物志》编写组.浙江药用植物志(下册).浙江.浙江
科学技术出版社.1980.869-870.
[ 2] 刘卫军 ,顾振纶 ,周文轩 ,等.植物多糖抗肿瘤活性研究进展.中
国野生植物资源.1997(1):1~ 3。
[ 3] 韩雅珊主编.食品化学实验指导.北京:北京农业大学出版社 ,
1992.19~ 21.
25思茅地区国家重点保护野生药用植物资源研究