全 文 ：江西林业科技 2007年第6期
圆齿野鸦椿为省沽油科野鸦椿属常绿小乔木,树高可达
6m,枝无毛,暗红色。花期4～5月,果熟期 9～10月[1]。种子油可
制肥皂;树皮可制栲胶[2];根、果性温,味微苦。祛风除湿,止血
止痛,发表散寒。根治产褥热,跌打损伤。果治睾丸肿痛,子宫
脱垂[3]。
圆齿野鸦椿(EuscaphiskonishiHayata)具有观花、观叶
和赏果的效果,观赏价值高。挂果时间长,从 9月下旬外果皮
变红到翌年 3月果实脱落,观果时间长达半年,红色艳丽的
果给秋冬季节增添了许多喜庆色彩,使人陶醉。野鸭椿作
为观赏树种,应用范围广,可群植、丛植于草坪,也可用于庭
园、公园等地布景[4]。
由于圆齿野鸦椿的种子有深休眠的特点,解除休眠是播
种繁殖的关键。因此,开展圆齿野鸦椿发芽过程及其酶活性
变化的研究对解除其休眠具有重大的意义。
1 种子发芽过程的研究
1.1 试验材料与方法
本次试验材料于 2005年 11月 30日在江西赣州龙南九
连山虾公塘水池边固定 5棵采种母株上采集,采用已催芽半
年的种子,于 2006年 4月 28日开始于人工气候箱(25℃,湿
度为70%,光照为8h)中进行发芽试验。
1.2 种子发芽过程结果与分析
根据圆齿野鸦椿种子发芽过程的变化特征将其发芽出苗
的过程分为吸胀、萌发、发芽和出苗 4个阶段。休眠的种子在
适宜温度下遇水后,吸收水分,种皮软化,体积膨大,生命活动
开始活跃起来,为吸胀阶段。吸水后,种子内储藏的大分子营
养物质开始分解变为可利用的小分子营养物质,供胚利用,胚
体积膨大,胚根首先伸长,穿破种皮而露出,此为初生胚根,这
个过程叫萌发阶段。胚根伸出3～5天后,长出幼芽时,就称为
发芽阶段。初生胚根长出 3～4天后,此时,子叶分开,当苗高
2～3cm时,即为出苗阶段[5]。
圆齿野鸦椿种子发芽过程的4个阶段变化特征见图1。
圆齿野鸦椿种子从发芽试验开始就进入吸胀阶段,3天
时部分种子内种皮出现开裂、14天后进入萌发阶段、18天后
进入发芽阶段和22天后进入出苗阶段。
2 种子发芽过程中酶活性的研究
2.1 试验材料
本次试验采用江西赣州龙南九连山虾公塘水池边固定 5
棵采种母株的种子,2005年分别于 10月31日、11月15日和
11月30日3个时期采集。试验采用已层积催芽1年的种子。
2.2 测定方法
POD与CAT的测定采用李合生主编的《植物生理生化实
验原理和技术》介绍的方法[6]。
2.2.1 POD的测定
1)仪器与药剂
仪器:722分光光度计、离心机、研钵、恒温水浴锅、25mL
容量瓶、10mL量筒、试管、吸管;
药剂:0.05mol/LpH5.5的磷酸缓冲液、0.05mol/L愈创木
酚、2%H2O2、20%三氯乙酸。
2)测定步骤与结果计算
①酶液的制备:分别在圆齿野鸦椿种子发芽各个阶段中
取样,在吸胀阶段取 15个胚乳,萌发阶段取 10棵、发芽阶段
和出苗阶段时各取5棵。洗净后用滤纸吸水,称取 0.1g,放入
研钵中碾碎,加适量(约10mL)的H3PO4。
缓冲液(0.05mol/L,pH5.5)研磨成匀浆,将匀浆全部倒入
离心管中,于 3000转离心机中离心 10min,上清液转入 25mL
容量瓶中,沉淀用 5mLH3PO4缓冲液再提取两次,上清液并入
容量瓶中,定容至刻度,低温下保存备用。
②POD活性的测定:酶活性测定的反应体系包括:
圆齿野鸦椿种子发芽过程及其酶活性变化的研究
覃嘉佳 1,聂海兵 2,龙云英 3,胡松竹 1★
(1.江西农业大学园林与艺术学院,江西南昌330045;2.江西省林业调查规划研究院,江西南昌330046;3.上饶市林业局,江西上饶334000)
摘 要:试验对圆齿野鸦椿发芽过程进行了观察,根据其变化特征将其发芽出苗的过程分为吸胀、萌发、发芽和
出苗4个阶段。通过对不同时期采集的圆齿野鸦椿种子发芽过程中酶活性的变化特征得出 11月30日采集的种子发
芽力较好。
关键词:圆齿野鸦椿;种子;发芽;酶活性
分类号:Q949.755.1:S722 文献标识码:A 文章编号:1006-2505(2007)06-0007-02
收稿日期:2007-09-26;修回日期:2007-10
基金项目:江西省教育厅、上饶市林业局资助项目“优良园林绿化树种圆齿野鸦椿繁育技术研究”(编号:赣教技字[2006]150号)
作者简介:覃嘉佳,女,硕士研究生,研究方向为园林观赏植物栽培。
*通讯作者
7· ·
DOI:10.16259/j.cnki.36-1342/s.2007.06.007
注:1为圆齿野鸦椿的种子;2为种子吸胀后内种皮裂开;3为萌发阶段;4为发芽阶段,5、6为出苗阶段
图1圆齿野鸦椿种子发芽过程
2.9mL0.05mol/lpH5.5 的 磷 酸 缓 冲 液 ;1.0mL2% H2O2;
1.0mL0.05mol/L愈创木酚和0.1mL酶液。用加热煮沸的酶液为
对照,反应体系加入酶液后,立即于37℃水浴中保温15min,然
后迅速转入冰浴中,并加入2.0mL20%三氯乙酸终止反应,然
后在离心机中以 5000转转速离心 10min,适当稀释,于
470nm波长下用722分光光度计测定吸光度。
③计算:POD活性(u/g·min)=△A470×VT/W×VS×0.01×t
其中:△A470为反应时间内吸光度的变化;
W为圆齿野鸦椿种子(幼苗)的鲜重;
T为反应时间(min);
VT为提取酶液的总体积(mL);
VS为测定时取用酶液的体积(mL)。
2.2.2 CAT的测定
1)仪器与药剂
仪器:研钵、50mL三角瓶、酸式滴定管、恒温水浴锅、
25mL容量瓶、离心机、铁架台;
药剂:10%H2SO4、0.2mol/LpH7.8的磷酸缓冲液、0.1mol/L
KMNO4、0.1mol/LH2O2、0.1mol/L草酸。
2)测定步骤与结果计算
① 酶液的制备:分别在圆齿野鸦椿种子发芽各个阶段中
取样,在吸胀阶段取 15个胚乳,萌发阶段取 10棵、发芽阶段
和出苗阶段时各取5棵。洗净后用滤纸吸水,称取 0.1g,放入
研钵中碾碎,加适量(约 10mL)的 H3PO4缓冲液(0.2mol/L,
pH7.8)研磨成匀浆,将匀浆全部倒入离心管中,于 4000转离
心机中离心 15min,上清液转入 25mL容量瓶中,沉淀用 5mL
H3PO4缓冲液再提取 2次,上清液并入容量瓶中,定容至刻
度,低温下保存备用。
② 取50mL三角瓶4个(2个测定,另 2个为对照),测定
瓶中加入酶液 2.5mL,对照加煮死酶液 2.5mL,再加入 2.5mL
0.1mol/LH2O2,同时计时,于 30℃恒温水浴锅中保温 10min,
立即加入10%H2SO42.5mL。
③用 0.1mol/LKMNO4标准液滴定,至出现粉红色(在
30min内不消失)为滴定终点。
④酶活性结果计算:过氧化氢酶活性(H2O2mg/g/min)=
(A-B)×VT/(W×VS×1.7×t)
其中:A为对照KMNO4滴定毫升数(mL);
B为酶反应后KMNO4滴定毫升数(mL);
VT为提取酶液的总体积(mL);
VS为测定时取用酶液的体积(mL)。
注:图中X轴上的1是表示吸胀阶段;2为萌发阶段;3为发芽阶段;
4为出苗阶段
图2不同采种时期对发芽过程中CAT活性的影响曲线
注:图中X轴上的1是表示吸胀阶段;2为萌发阶段;3为发芽阶段;4
为出苗阶段
图3不同采种时期对发芽过程中POD酶活性的影响曲线
8· ·
(上接第 1页)业专家与林农群众面对面地接触,这对我们林
业专家和科技人员也是一次检验和考验。一方面,我们要通
过这次活动,把我们已经掌握并成熟的林业先进实用技术传
播到基层,传授给林农,使我们的林业科技成果尽快通过基
层和群众转化为提高森林质量和效益的现实生产力,成为
帮助老百姓增收致富的科技推动力。另一方面,我们的专家
和科技人员也要通过与基层群众交流,认真听取他们对搞
好林业工作的意见和建议,虚心学习基层群众在实践中总
结出来的好经验、好技术,使我们的林业科研水平和科技人
员的素质在实践中得到检验和提高。
第三,要加强对这次活动的组织领导,确保活动取得圆
满成功。为了组织好这次“送林业科技下乡”活动,省林业厅
成立了专门的领导机构,下发了通知,制订了实施方案。今天
这个启动仪式结束以后,省林业厅在家的厅领导都将亲自带
领一个专家组到基层去。各市、县林业部门要把这次活动作
为当前的一项重点工作,组织专门人员,拿出具体方案,落实
工作经费,积极配合开展好这次活动。我们将把这次活动的
完成情况,作为各设区市年度林业科技工作考核的重要内
容。我相信,有各位专家的大力支持和辛勤工作,有市(县)林
业部门的积极配合和精心组织,这次“送林业科技下乡”活动
一定会取得圆满成功!
谢谢大家!
StudyonEuscaphiskonishi’sSeedGerminationProcessand
ItsEnzymaticActivityTrend
QINJiajia1,NEIHaibing2,LONGYunying3,HUSongzhu1★
(1.ColegeofLandscapeArchitectureandArt,JiangxiAgriculturalUniversity,NanchangJiangxi330045,China;
2.JiangxiAcademyofSurveyandDesignforForestry,NanchangJiangxi330046,China;
3.ShangraoCityForestryBureau,ShangraoJiangxi334000,China)
Abstract:TocircletheobservationofEuscaphiskonishi’sseedgerminationprocess,divideitforabsorbthebulgestage,thebourgeonstage,the
germinationstageandseedling.TrendgoneupfromtheCATandPODactivitytosee,theexaltationsofthePODandCATactivitythatcolecton
November30thinstagesoftheprocessmost.LeadtoPODandCATactivityoftheexaltationbeadvantageoustothegrowthandgrowthoftheplant,
explainthatcolectonNovember30thoftheseedgerminationdintisthebestofthesethreeseedswithperioddiferentseedcolection.
Keywords:Euscaphiskonishi;Seed;Burgeon;Enzymaticactivity
W为圆齿野鸦椿种子(幼苗)的鲜重;
T为反应时间(min);
1.7为1.0mL0.1mol/LKMNO4标相当于1.7mgH2O2。
2.3 结果与分析
从图 2、3中可以看出不同采种时期发芽出苗 4个阶段
的 CAT与 POD酶活性都随着种子萌发的进程而迅速增加[7]。
CAT和POD的辅基均含有血红素铁卟啉玢。它有亚铁和正铁
2种形式的变换,在新陈代谢中占有很重要的地位[8]。从 CAT
与 POD酶活性升高的趋势来看,11月 30日采集的种子酶活
性的提高最多,其次为 10月 31日采集的种子,最后是 11月
15日采集的种子。然而过氧化氢酶和过氧化物酶活性的提高
有利于植株的生长和发育[9]。可以得出 11月 30日采集的种
子发芽力较好。
参考文献:
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