全 文 ：收稿日期:2015 － 03 － 10;修回日期:2015 － 03 － 17
基金项目:河北省保定市科技支撑计划项目(13ZF119)
作者简介:周平平(1977 － )，女，讲师，硕士，研究方向为中
药化学提取与分析，zhoupingpinga@ yeah． net．
通信作者:钟秀会(1956 － )，男，教授，博士，博士生导师，研
究方向为中药预防畜禽疾病，clock8078@ 126． com．
葎草有效成分的提取及药理研究
周平平1，宫新城2，3，赵兴华2，3，钟秀会2，3
(1．河北农业大学 理学院，河北 保定 071001;2．河北农业大学 动物医学院，
河北 保定 071001;3．河北农业大学 中兽医研究所，河北 保定 071001)
中图分类号:Ｒ284． 2 文献标识码:B 文章编号:1004 － 7034(2016)01 － 0188 － 03
关键词:葎草;抗氧化;止泻;增强免疫;抗炎;中药提取
摘 要:为了研究葎草的药理作用，试验采用分步法提取葎草中的挥发油、多糖、黄酮，并对各成分的
抑菌、抗炎、抗氧化和止泻作用进行检测。结果表明:葎草挥发油和多糖对链球菌、大肠杆菌和沙门氏
菌有抑制作用;葎草黄酮 A 组和葎草黄酮 B 组的肿胀度分别为(5． 75 ± 1． 67)mg 和(6． 11 ±
1． 71)mg，有明显抑制作用，与生理盐水组相比差异极显著(P ＜ 0． 01);葎草黄酮 A 组血清超氧化物
歧化酶(SOD)的活性为(55． 65 ± 11． 53)U /mL，与生理盐水组相比极显著提高(P ＜ 0． 01);葎草黄酮
A组可以显著抑制由大黄引起的小鼠腹泻，与生理盐水组相比差异显著(P ＜ 0． 05)。说明葎草可以
从抑菌、止泻、消炎和保护组织损伤几个方面治疗动物腹泻。
葎草味甘、苦，性寒，具有清热解毒、主水痢的功
效，是一种传统的中药材，其生命力极强，房前屋后、
田间地头、山坡沟壑都可以发现葎草，但在药材市场
上却鲜有销售;主要是因为葎草茎蔓上生有很多小
刺，导致采集困难;同时葎草粗纤维多，不利于直接添
加到动物饲料中。因此，本试验对葎草有效成分进行
了提取并研究了其药理作用，现将结果报道如下。
1 材料
1． 1 试验动物
昆明系小鼠，购自河北医科大学试验动物中心，
常规饲养 3 d，备用。
1． 2 药品、菌种及主要试剂
葎草，采自河北农业大学中兽医学院标本园;大
黄，购自河北省安国药材市场;大肠杆菌、沙门氏菌、
链球菌，购自中国兽药监察所;超氧化物歧化酶
(SOD)和丙二醛(MDA)试剂盒，购自南京建成生物
工程研究所。
1． 3 主要仪器
紫外 －可见分光光度计(型号为 756sP)，购自上
海光谱仪器有限公司。
2 方法
2． 1 葎草有效成分的提取
准确称取葎草粉末 250 g，放入 3 000 mL锥形瓶
中，乙醚冷浸 24 h;过滤减压回收乙醚，采用水蒸气蒸
馏法提取 2 h;用乙醚萃取 3 次，合并萃取液，无水硫
酸钠干燥，减压回收乙醚，即得到具有特殊浓香气味
的葎草挥发油［1］。
向药渣中加入 10 倍量的纯化水，80 ℃提取 4
次，合并提取液，真空浓缩至适量;加入 4 倍体积的
95%乙醇，冷藏过夜;离心收集沉淀，即得水提粗多
糖［2 － 3］。滤液部分用旋转薄膜蒸发仪回收乙醇，即得
到葎草黄酮 A。
向部分药渣中加入 80%乙醇 300 mL，浸泡 24 h;
提取 2 次，合并滤液，用旋转薄膜蒸发仪回收乙醇，即
得到葎草黄酮 B。
2． 2 葎草不同成分的抑菌试验
在已接种大肠杆菌、沙门氏菌和链球菌的培养基
上均匀挖洞，将葎草提取物注满洞孔，4 ℃放置 2 h，
37 ℃培养 24 h，测定抑菌圈直径的大小，确定药物对
细菌的作用效果。
2． 3 葎草不同成分对二甲苯所致炎症的抑制作用
将 50 只 20 日龄昆明系健康小鼠随机分为 5 组，
10 只 /组，分别灌服生理盐水、葎草挥发油、葎草多糖、
葎草黄酮A、葎草黄酮 B，0． 5 mL /只，每日给药1次，连
续给药 7 d。于末次给药 30 min后，用移液枪将 100%
二甲苯(20 μL)滴涂到小鼠的左耳，1 h后处死小鼠，剪
下左右耳廓，以8 mm直径的打孔器分别在两耳的相同
部位打孔，用分析天平称重，以两耳片重量之差作为炎
症指标，计算各组小鼠耳肿胀度和抑制率。
2． 4 葎草不同成分对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的
影响
将 50 只 20 日龄昆明系健康小鼠随机分成 5 组，
·881·
2016(01):188 － 190
DOI:10.13881/j.cnki.hljxmsy.2016.0059
10 只 /组，分别腹腔注射生理盐水、葎草挥发油、葎草
多糖、葎草黄酮 A、葎草黄酮 B，0． 5 mL /只。用药 2 h
后，每只小鼠腹腔注射 5%鸡红细胞 0． 4 mL;8 h后脱
颈致死，仰位固定，经腹腔注入生理盐水 2． 5 mL;轻
轻转动固定板 1 min;抽取腹腔洗液 1 mL，取 1 滴涂
片，37 ℃湿盒孵育 30 min;取出玻片，漂洗，晾干，以
丙酮 －甲醇液固定 5 min;再用 4%姬姆萨 －瑞特氏
染液染色 5 min;纯化水漂洗，晾干。在油镜下每张玻
片计数巨噬细胞 200 个，计算吞噬百分率和吞噬指
数。计算公式:吞噬百分率 =(吞噬鸡红细胞的巨噬
细胞数 /200 个巨噬细胞)× 100%;吞噬指数 =被吞
噬的鸡红细胞总数 /200 个巨噬细胞。
2． 5 葎草不同成分的抗氧化试验
取 50 只 16 月龄昆明系小鼠随机分成 5 组，
10 只 /组，分别灌服生理盐水、葎草挥发油、葎草多
糖、葎草黄酮 A、葎草黄酮 B，0． 5 mL /只，每日给药 1
次，连续给药 7 d。将小鼠处死，采血分离血清;同时
取肝脏、脾脏、肺脏和肾脏，用匀浆管在冰水中匀浆，
然后 1 200 r /min 离心 30 min，取上清液备用。按照
相应试剂盒操作说明分别测定血清与组织中 SOD活
性和 MDA含量。
2． 6 葎草不同成分的止泻作用
选取优质大黄 200 g，加水 300 mL，煎煮 10 min，
浓缩至 200 mL，备用。取体重为 20 ～ 22 g 的昆明系
小鼠 50 只随机分为 5 组，分别灌服生理盐水、葎草挥
发油、葎 草 多 糖、葎 草 黄 酮 A、葎 草 黄 酮 B，
0． 5 mL /只，每日给药 1 次，连续给药 3 d。于末次给
药后禁食 6 h，每只小鼠灌服大黄水提液 0． 7 mL，灌
服后将小鼠置于钢丝网上，用烧杯罩住，钢丝网下垫
上滤纸，便于观察粪便的情况，记录小鼠排出稀粪的
次数和排出时间。
3 结果与分析
3． 1 葎草不同成分的提取结果
本试验得到具有特殊浓香气味的棕褐色挥发油
(0． 95 ± 0． 08)g，所采葎草中挥发油的含量约为
0． 38%;得到水提粗多糖(2． 98 ± 0． 15)g，葎草中多
糖的含量为 1． 19%;药渣部分得到葎草黄酮 B 为
(0． 75 ± 0． 04) g，滤液部分得到葎草黄酮 A 为
(4． 20 ± 0． 21)g，葎草中总黄酮的含量为 1． 98%。
3． 2 葎草不同成分的抑菌试验
结果见表 1。
表 1 葎草不同成分的体外抑菌试验结果 mm
药物 葎草挥发油 葎草多糖 葎草黄酮 A 葎草黄酮 B
链球菌 17． 50* ± 3． 42 15． 40* ± 2． 28 12． 30 ± 1． 30 12． 50 ± 1． 10
大肠杆菌 22． 20* ± 2． 97 16． 50* ± 2． 12 12． 40 ± 1． 29 12． 70 ± 1． 54
沙门氏菌 16． 30* ± 2． 36 14． 70* ± 2． 31 12． 50 ± 1． 19 12． 40 ± 1． 26
注:同行数据肩标* 表示差异显著(P ＜ 0． 05)。
由表 1 可知，葎草挥发油、葎草多糖对链球菌、大
肠杆菌和沙门氏菌都有一定的抑制作用，和葎草黄酮
A、葎草黄酮 B相比差异显著(P ＜ 0． 05)。葎草挥发
油对大肠杆菌的抑制效果更强，抑菌圈直径为
(22． 2 ± 2． 97)mm。葎草黄酮 A、葎草黄酮 B 对链球
菌、大肠杆菌和沙门氏菌几乎没有抑菌效果。
3． 3 葎草不同成分对二甲苯所致炎症的抑制作用
结果见表 2。
表 2 葎草不同成分对二甲苯所致小鼠耳肿胀影响的结果
组别
小鼠数
量 /只
灌服剂量 /
(mL·只 － 1)
肿胀
度 /mg
生理盐水组 10 0． 5 12． 56 ± 2． 18
葎草挥发油组 10 0． 5 10． 35 ± 1． 67
葎草多糖组 10 0． 5 8． 12 ± 1． 54
葎草黄酮 A组 10 0． 5 5． 75＊＊ ± 1． 67
葎草黄酮 B组 10 0． 5 6． 11＊＊ ± 1． 71
注:与生理盐水组比较，数据肩标＊＊表示差异显著(P ＜ 0． 01)，
无肩标表示差异不显著(P ＞ 0． 05)。
由表 2 可知:小鼠耳朵涂擦二甲苯后，肿胀非常
明显，肿胀度达到了(12． 56 ± 2． 18)mg，而葎草黄酮
A和葎草黄酮 B对这种肿胀有明显的抑制作用，与生
理盐水组相比差异极显著(P ＜ 0． 01);且没发现葎草
挥发油、葎草多糖有这种作用，与生理盐水组相比差
异不显著(P ＞ 0． 05)。
3． 4 葎草不同成分对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的
影响
结果见表 3。
表 3 葎草不同成分对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬
功能影响的结果
组别
小鼠数
量 /只
吞噬百
分率 /%
吞噬指数
生理盐水组 10 42． 50 ± 3． 58 0． 48 ± 0． 05
葎草挥发油组 10 58． 20* ± 3． 36 0． 73* ± 0． 16
葎草多糖组 10 57． 10* ± 3． 31 0． 66* ± 0． 18
葎草黄酮 A组 10 48． 00 ± 2． 89 0． 52 ± 0． 14
葎草黄酮 B组 10 40． 45 ± 3． 48 0． 45 ± 0． 21
注:与生理盐水组比较，数据肩标* 表示差异显著(P ＜ 0． 05)。
由表 3 可知:葎草挥发油、葎草多糖均能提高小
鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率，与生理盐水组相比差
异显著(P ＜ 0． 05);同时葎草挥发油组、葎草多糖组
的吞噬指数也显著高于生理盐水组，吞噬指数分别为
0． 73 和 0． 66(P ＜ 0． 05)。
3． 5 葎草不同成分的抗氧化试验
3． 5． 1 葎草不同成分对老龄小鼠 SOD 活性的影响
结果见表 4。
由表 4 可知，葎草黄酮 A和葎草黄酮 B 可以明
·981·
№，01，2016
表 4 葎草不同成分对小鼠 SOD活性影响的结果
组别
血清 /
(U·mL － 1)
肝脏 /
(U·mg － 1)
脾脏 /
(U·mg － 1)
肾脏 /
(U·mg － 1)
心脏 /
(U·mg － 1)
生理盐水组 31． 57 ± 17． 56 92． 60 ± 15． 61 19． 36 ± 14． 78 23． 96 ± 14． 42 20． 52 ± 7． 43
葎草挥发油组 32． 66 ± 14． 23 93． 40 ± 12． 24 19． 89 ± 10． 31 29． 03 ± 10． 02 24． 72 ± 11． 17
葎草多糖组 31． 54 ± 10． 13 94． 40 ± 11． 21 20． 71 ± 10． 28 30． 07 ± 10． 23 23． 46 ± 10． 68
葎草黄酮 A组 55． 65＊＊ ± 11． 53 132． 70* ± 12． 25 40． 68＊＊ ± 8． 79 53． 32＊＊ ± 9． 53 34． 78* ± 11． 43
葎草黄酮 B组 47． 68* ± 12． 05 111． 96* ± 12． 27 34． 98* ± 10． 24 47． 76* ± 10． 21 25． 14 ± 10． 87
注:与生理盐水组比较，数据肩标* 表示差异显著(P ＜ 0． 05)，
＊＊表示差异极显著(P ＜ 0． 01)，无肩标表示差异不显著(P ＞ 0． 05)。
显提高血清中 SOD 的活性，分别为 (55． 65 ±
11． 53)U /mL和(47． 68 ± 12． 05)U /mL，葎草黄酮 B
组与生理盐水组比较差异显著(P ＜ 0． 05)，葎草黄酮
A组与生理盐水组比较差异极显著(P ＜ 0． 01);在脾
脏和肾脏，SOD 活性变化的规律与血清一致。在肝
脏中 SOD活性比较高，使用葎草黄酮 A、葎草黄酮 B
后，SOD 活性分别为(132． 70 ± 12． 25)U /mL 和
111． 96 ± 12． 27)U /mL，显著高于生理盐水组(P ＜
0． 05)。葎草挥发油和葎草多糖对小鼠 SOD活性的影
响不大，差异不显著(P ＞ 0． 05)。
3． 5． 2 葎草不同成分对老龄小鼠丙二醛含量的影响
结果见表 5。
表 5 葎草不同成分对小鼠丙二醛含量影响的结果
组别
血清 /
(nmol·mL － 1)
肝脏 /
(nmol·mg － 1)
脾脏 /
(nmol·mg － 1)
肾脏 /
(nmol·mg － 1)
心脏 /
(nmol·mg － 1)
生理盐水组 11． 47 ± 2． 57 46． 39 ± 7． 21 50． 39 ± 8． 45 33． 52 ± 2． 62 77． 05 ± 13． 87
葎草挥发油组 11． 09 ± 2． 36 40． 49 ± 4． 25 48． 31 ± 9． 23 32． 46 ± 5． 28 75． 08 ± 10． 68
葎草多糖组 9． 36 ± 2． 31 43． 24 ± 4． 28 49． 79 ± 10． 15 34． 34 ± 6． 36 76． 13 ± 10． 27
葎草黄酮 A组 10． 28 ± 2． 34 30． 01＊＊ ± 4． 14 37． 21* ± 10． 47 30． 45 ± 7． 24 46． 65* ± 11． 29
葎草黄酮 B组 11． 23 ± 2． 19 35． 47* ± 4． 34 42． 19 ± 9． 68 31． 69 ± 6． 78 50． 04* ± 10． 31
注:与生理盐水组比较，数据肩标* 表示差异显著(P ＜ 0． 05)，*
＊ 表示差异极显著(P ＜ 0． 01)，无肩标表示差异不显著(P ＞ 0． 05)。
由表 5 可知，葎草挥发油、葎草多糖、葎草黄酮
A、葎草黄酮 B 对小鼠血清中丙二醛的含量没有影
响，和生理盐水组比较差异不显著(P ＞ 0． 05)。在肝
脏中，葎草黄酮 B 可以显著降低丙二醛含量至
(35． 47 ± 4． 34)nmol /mg(P ＜ 0． 05)，葎草黄酮 A 可
以极显著降低丙二醛含量至(30． 01 ± 4． 14)nmol /mg
(P ＜ 0． 01)。在脾脏中，葎草黄酮 A可以显著降低丙
二醛含量至(37． 21 ± 10． 47)nmol /mg(P ＜ 0． 05)。
在心脏中，葎草黄酮 A、葎草黄酮 B 均可以显著降低
丙二醛含量(P ＜ 0． 05)。在肾脏中，葎草各提取成分
对丙二醛含量无影响(P ＞ 0． 05)。葎草多糖、挥发油
均未发现对血清、肝脏、脾脏、肾脏和心脏中丙二醛含
量有影响，与生理盐水组比较差异不显著(P ＞
0． 05)。
3． 6 葎草不同成分对大黄致泻小鼠的作用
结果见表 6。
表 6 葎草不同成分对大黄致泻小鼠作用的结果
组别 首次腹泻时间 腹泻次数 /次
生理盐水组 6 h 13 min 6． 34 ± 1． 31
葎草挥发油组 7 h 5 min 5． 49 ± 1． 36
葎草多糖组 7 h 30 min 5． 24 ± 1． 28
葎草黄酮 A组 9 h 20 min 2． 11* ± 1． 24
葎草黄酮 B组 7 h 12 min 4． 27 ± 1． 54
注:与生理盐水组比较，数据肩标* 表示差异显著(P ＜ 0． 05)。
由表 6 可知，在试验中，灌服大黄煎剂后 6 h
13 min生理盐水组小鼠首先出现腹泻，其他各组也先
后出现腹泻现象，葎草黄酮 A 组小鼠出现腹泻的时
间最晚，为 9 h 20 min。各组小鼠出现的腹泻次数也
有差异，葎草黄酮 A 组腹泻次数最少，为(2． 11 ±
1． 24)次，和生理盐水组比较差异显著(P ＜ 0． 05)。
4 讨论
《唐本草》认为，葎草有“止水痢、虚热口渴”的功
效”，这也是人们用葎草治疗家兔等动物腹泻的依据
所在。本试验中葎草挥发油的提取量为 0． 38%、多
糖的提取量为 1． 19%、总黄酮的提取量为 1． 98%。
同时试验还发现，葎草挥发油、葎草多糖对链球菌、大
肠杆菌和沙门氏菌都有一定的抑制作用，其中葎草挥
发油对大肠杆菌的抑制效果更强，抑菌圈直径为
(22． 20 ± 2． 97)mm，和参考文献［4］报道的结果相
似。而葎草黄酮 A对大黄导致的腹泻有很好的抑制
作用，这与柳诗全［5］报道的结果一致。葎草黄酮对
二甲苯导致的小鼠耳肿胀也有明显的抑制作用。葎
草挥发油、葎草多糖不仅能提高巨噬细胞的吞噬能
力，同时还可以提高巨噬细胞的活化数量，达到提高
免疫力的目的。葎草黄酮 A、葎草黄酮 B有很强的抗
氧化作用，从而达到保护细胞免受损伤的效果。因此
认为，葎草在治疗动物腹泻时可以从抑菌、止泻、增强
免疫、消炎和保护组织损伤几个方面发挥作用。
参考文献:
［1］ 殷献华，李天磊，潘卫东，等． 葎草挥发油化学成分分析及其抑
菌作用研究［J］．山地农业生物学报，2010，29(5):415 － 418．
［2］ 褚衍亮，王娜，张明川． 葎草多糖的超声提取及抑菌活性研究
［J］．时珍国医国药，2010，21(2):342 － 344．
［3］ 张小灵，丁卓平，褚琳．葎草中多糖微波提取工艺研究［J］．辽宁
农业科学，2011(3):21 － 28．
［4］ 周家驹，谢桂荣，严新建．中药原植物化学成分手册［M］．北京:
化学工业出版社，2004．
［5］ 柳诗全． 律草栓剂止泻作用的实验研究［J］． 医药论坛杂志，
2004，25 (22):15 － 16．
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总第 493 期