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乌桕叶不同溶剂提取物和链霉菌配伍灭螺作用的研究



全 文 :农业论坛 农业研究 然
乌柏叶不同溶剂提取物和链霉菌配伍灭螺作用的研究
文 /李 威
摘 要 利 用乌柏叶不 同溶剂提取物和链霉菌稀释液进行灭螺实验 , 结果显 示 , 乌柏叶具有很好的 灭螺效果 , 不 同溶剂提取物和
链霉菌稀释液配伍灭螺具有很明显 的协 同效应 。 具体试验结果表明 : 乌柏叶不 同溶剂 (无氯清水 、 乙醇 、 氯仿 、 乙酸 乙醋 ) 提取
物的提取效率中 , 乙 醇提取效率最高 ( 40 3 。% ) ; 混合配伍灭螺 4 8 h 后 , 钉螺死亡率在 5 0 0 % 一 8 5 0 % , 其中乙 酸 乙醋提取液
以及和链霉菌的组合液毒杀效果最强 , 但乙醇提取液和链霉菌稀释液组合相对于单独溶剂提取液处理死亡率增加最大 ( 4 7 67 % ) ,
协同增效最明显 。
关键词 灭螺 ; 乌柏叶 ; 不 同溶剂提取物 ; 链霉菌稀释液
血吸虫病是一种慢性寄生虫病 ,
可寄生于多数脊椎动物 。 而钉螺是血
吸虫唯一的中间宿主 , 也是 吸血虫的
生活周期中最脆弱的环节 , 杀灭钉螺
是切断和控制血吸虫病蔓延的重要环
节之一 l1] 。 目前用的灭螺方法着重于
化学灭螺法和物理灭螺法 , 常用的灭
螺剂主要也是化学灭螺剂 , 如早期使
用氯硝柳胺 、 五氯酚钠 , 后来推广氯
代水杨胺 的田间现场灭螺 l2] , 这些灭
螺剂不仅造成环境污染 , 对人们健康
也有害 。 物理灭螺法工程浩大 、 耗资多 ,
很难一次性彻底灭螺 l3] 。 近年来 , 新
发 明的灭螺药物和新开创的灭螺方法
具有高效 、 安全 、 低污染等特点 , 如
新型植物农药黄姜灭螺药的推广应用 。
2 00 4 年 , 杨建明等从疫区钉螺孽生地
的土壤 中筛选出一株有杀螺活性的紫
红链霉菌 lrt] 。 微生物灭螺单独使用启
效缓慢 , 用量大且成本高 ls] 。
乌柏的系统溶剂提取物和链霉菌
联合灭螺的研究报道较少见 。 现利用
乌柏叶不同溶剂提取物和链霉菌配伍
对钉螺毒杀活性评价 , 旨在为生态抑
螺植物资源的合理使用及探索新的高
效生态灭螺方法提供参考依据 。
1 材料与方法
1
.
1 实验材料 实验用钉螺和乌柏叶
采 自湖北省武汉市黄破区梅店水库周
围水域 , 2 ℃恒温光照培养箱中以浮
萍饲养钉螺 , 选用生长一致活力强的
阴性成螺为实验材料 。 乌柏叶采回后
洗净 、 阴干 , 室温保存备用 。 紫红链
霉菌由湖北大学微生物研究室提供 。
实验用乙醇为工业纯 , 氯仿和乙酸乙
醋为分析纯 , 均购于武汉银河化工有
限公司 。
1
.
2 材料的处理和制备
:
.
2
.
: 乌柏干 叶的提取 乌柏鲜叶
采回后置于 60 ℃烘箱中烘 12 h 至干
燥 , 捣碎后磨成粉 , 用 80 目筛过筛得
到乌柏叶原粉 。 分别称取 刃 . 0 9 乌
柏叶原粉 , 各 自用乙醇 、 氯仿和乙酸
乙醋浸泡 48 h , 再采用超声波处理
30 m山 , 过滤 , 滤液采用真空旋转蒸
发仪蒸出残液 , 再用水浴锅在刃 ℃下
蒸发干燥至质量恒定 , 得浸膏 , 装瓶
密封保存备用 。 刃 . 0 9 乌柏叶原粉采
用无氯清水配制成水浸液 , 再浓缩得
浸膏的方法和前者相同 。
:
.
2
.
2 链霉菌菌液的制备 将采集的
菌种活化培养 3 次后 , 配制成浓度为
, x lo
“ 个 / m L 的母液 , 处理液采用蒸
馏水稀释 10 倍 。
1
.
3 实验方法 实验采 用浸 泡毒杀
法 l6] ,在室温 (20 士 , ℃ ) 条件下进行 。
试验前 , 分别将各样品浸膏加无氯清水
配成 10 m g / L 母液 , 分别取 刃 m L
不同的乌柏处理母液和 刃 m L 链霉菌
稀释液 , 配成不同的混合液 , 装于棕色
小玻璃瓶中 。 将每 20 只钉螺分为一组 ,
分别置人不同混合液小瓶中 , 以少量
浮萍作为食料 , 用直径比玻璃瓶略大
的圆形滤纸片覆盖在液面上 , 防止钉
螺上爬 。 以无氯清水作为对照 。 每处
理重复 3 次 。 分 别处理 6 、 12 、 24 h
和 48 h 后取出钉螺 , 做存活检查 , 计
算死亡率 l1] 。
2 结果与分析
2
.
1 乌柏干叶不同溶剂提取物的提
取效率比较 由表 1 可见 , 乌柏干叶
不同溶剂提取物的提取效率从高到低
表 1 乌柏干叶不同溶剂提取物的提取效率比较
提取溶剂 浓缩后浸膏质量 g/
无氯清水 3 . 42
乙醇 2 0」5
氯仿 13 . 67
乙酸乙酉旨 1 . 45
提取效率肠
6
.
84
4D 3 O
2又 34
2 2
.
90
基金项目 : 湖北省武汉市市属高校科研项目 ( 项目编号为武教高 2 0 91K 90 ) 。
匕京农业 20 15 年 12月 上旬干11 1 2 0 3
双 农业研究 农业论坛
表 2乌柏干叶不同溶剂提取物和链霉菌联合对钉螺的毒杀活性测定结果
实验材料
无氯清水
链霉菌稀释液
乌柏水提液
乌柏水提液 + 链霉菌
乌柏乙醇提取液
乌柏乙醇提液 + 链霉菌
乌柏氯仿提取液
乌柏氯仿提取液 + 链霉菌
乌柏乙酸乙酉旨提取液
乌柏乙酸乙醋提取液 + 链霉菌
钉螺死亡率 肠
6 h1 2 h4 2 h4 8 h
0刀 0 0刀 0 0. 01
.
3 3
0刀 01 . 3 3 33 31 0石7
53 3 9石7 1 53 3 6 2刀 0
1 0石7 1 5. 7 6 3 03 3 0 5石7
93 31 1
.
3 31 8
.
0 3 3 3 2
2 53 34 0
.
7 6印. 7 6 0 8刀 O
63 31 0
.
7 614 3 3 30刀 0
1 5
.
7 6a 3o 4 2
.
0a 6 67
1 3
.
7 61 6
.
0 2 8
.
04 0 3 3
2 8
.
4 0 2
.
0 6 23 3 8 5刀 O
素发现 , 乙醇毒性微弱 , 回收工艺成
熟且方便 , 价格较低 , 且乙醇提取物
的提取效率最高 。 因此 , 乙醇是一种
比较理想的提取乌柏叶杀螺活性成分
的有机溶剂 。
的次序依次为乙醇 (40 . 30 % ) > 氯仿
(2 7
.
3 4% ) > 乙酸 乙醋 ( 2 . 90 % ) >
无氯 清水 (6 . 84 % ) 。 说明 48 h 乙醇
提取物的提取效率最高 , 而氯仿和乙
酸乙醋的提取效率相差不大 , 无氯清
水提取物的提取效率最差 。
2
.
2 乌柏干叶不同溶剂提取物与链霉
菌组合灭螺活性 由表 2 可见 , 浸杀
48 h 后 , 乙酸乙醋提取液处理钉螺后
死亡率为 40 . 3 % , 而乙醇提取液和氯
仿提取液的钉螺死亡率分别为 犯 . 3 %
和 30 % 。 乌柏叶各溶剂提取液和链霉
菌稀释液混合灭螺 48 h 后 , 钉螺死亡
率在 刃 . 0 % 一 8 , . 0 % , 且均超过同等
组合处理 12 h 死亡率的 2 倍 。 乙酸乙
醋提取液和链霉菌稀释液组合处理的死
亡率最高 。 乙酸乙醋提取液和链霉菌稀
释液组合以及乙醇提取液和链霉菌稀释
液组合各自处理 24 h 后 , 钉螺死亡率
相差不大但都超过 60 . 0 % , 且都高于
氯仿提取液和链霉菌稀释液组合 。 由此
可见 , 乌柏叶乙酸乙醋提取液 , 或者乙
酸乙醋提取液和链霉菌稀释液组合在杀
灭钉螺上 , 优于其他溶剂提取液或者和
链霉菌稀释液的组合 。
3 种有机溶剂提取液和链霉菌稀
释液组合处理 48 h 后 , 相较于单 独
有机溶剂提取液处理 , 乙醇提取液和
链霉菌稀释液组合的钉螺死亡率增加
47
.
67 %
, 乙酸乙醋提取液和链霉菌稀
释液组合的钉螺死亡率增加 4 . 67 % ,
氯仿提取液和链霉菌稀释液组合的钉
螺死亡率增加 30 . 67 % 。 实验表明 , 乌
柏叶不 同溶剂提取液和链霉菌稀释液
组合灭螺具有一定的协同增效作用 ,
乙醇提取液和链霉菌稀释液组合协同
增效最明显 。
3 结论
发挥灭螺作用的物质是植物 中所
含有的多种黄酮类及皂普类化合物 。
黄酮类化合物易溶于乙酸乙醋等极性
强的有机溶剂中 , 一般难溶或不溶于
水 中 l7] 。 该试验结果表明 , 乌柏叶不
同溶剂提取物对钉螺均有很强的毒杀
作用 , 以乙酸乙醋的提取液毒杀作用
最强 , 说 明乌柏叶中的杀螺活性成分
应为多种化学有效成分的混合 l8] , 使
得不同溶剂提取物杀螺活性有一定的
差异 。 乌柏叶水提液也有一定的灭螺
效果 , 但是推广到田间试验时 , 达到
相 同灭螺效果需要很多数量乌柏叶 。
综合考虑不同有机溶剂提取物的提取
效率 、 杀螺活性 、 有机溶剂毒性强弱 、
回收难 易程度以及有机溶剂价格等因
参考文献
「1 ] 罗坤水 , 李闪金 , 徐林初 , 等 . 乌
柏 · 枫杨和柳杉乙醇提取液的灭螺活
J险比较 . 安徽农业科学 , 2 01 1 , 3 9( 1 2 ) :
7 0 6 0
.
「2 ] 张剑锋 , 朱明东 , 严晓岚 , 等 . 氯代
水杨胺对山丘钉螺实验室和现场杀螺
效果研究 . 中国媒介生物学及控制杂
志 , 2 0 14 , 2 5 ( 1 ) : 7 2一 7 5 .
「3 ] 蒲真清 , 黄继 山 , 刘俊 , 等 . 植物
灭螺机理研究进展 . 安徽农业科学 ,
2 0 0 8
,
3 6 ( 14 )
:
5 7 2 4一 5 7 2 6
.
「4 ] 杨建明 , 肖瑞芬 , 阳桂芬 . 紫红链霉
菌杀钉螺效果初报 . 湖北大学学报 :
自然 科 学 版 , 2 0 0 4 , 2 6 ( 4 ) : 3 4 1-
3 4 3
.
「别 陈琳 . 田间微生物灭钉螺的方法与机
制分析 . 科技创新与应用 , 2 0 14 ( 3 4 ) :
5 0
.
「6 ] 柯文山 , 陈世检 , 杨金莲 . 5 种天南
星植物水浸液的杀螺效果研究 . 中国
血吸虫病防治杂志 , 2 。。 7 ( 1引 : 6 9 -
7 0
.
「7 ] 罗坤水 , 贺义昌 , 徐林初 , 等 . 乌柏
活性成分及其抑螺研究进展 . 中 国
血吸虫病 防治 杂志 , 2 0 1 3 , 2 5 ( 5 ) :
5 3 8一 5 4 0
.
「8 ] 董道青 , 陈建明 , 俞晓平 , 等 . 夹竹
桃不同溶剂提取物对福寿螺的毒杀作
用评价 . 浙江农业学报 , 2 0 09 , 2 1 ( 2 ) :
15 4一 15 8
.
(作者单位 : 江汉大学文理学院生
物与环境工程学邵 4 3 0 0 5 6 )
2 0 4 1 北京农业 20 15年 12月 上旬干11