全 文 ：西北林学院学报 ２０１３，２８（２）：１６０～１６３
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ　Ｆｏｒｅｓｔｒｙ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
　　ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－７４６１．２０１３．０２．３１
　收稿日期：２０１２－０８－２９　修回日期：２０１２－１０－２２
　基金项目：广东瀚森生物药业有限公司资助项目。
　作者简介：何带桂，女，硕士，主要研究方向：天然药物化学。Ｅ－ｍａｉｌ：ｄａｉｇｕｉｈｅ＠ｇｍａｉｌ．ｃｏｍ
＊通信作者：赵肃清，男，教授，硕士生导师，主要研究方向：天然药物化学及免疫学。Ｅ－ｍａｉｌ：ｓｕｑｉｎｇｚｈａｏ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
血桐叶提取物抑菌活性及抗氧化作用研究
何带桂，温俊林，周剑青，郑俊霞，王华倩，张　磊，赵肃清＊
（广东工业大学 轻工化工学院，广东 广州５１０００６）
摘　要：研究血桐叶提取物的抑菌及抗氧化活性，为血桐的开发利用提供科学依据。首先以７０％
乙醇回流提取血桐叶，依次用不同有机溶剂萃取，得到石油醚、乙酸乙酸、正丁醇萃取部位和水层部
位；然后采用滤纸片法与最低抑制浓度法，考察血桐醇提取物各萃取部位对５种实验菌的抑菌效
果；采用福林一酚法、ＤＰＰＨ法和邻苯三酚法分别测定血桐各萃取物的总多酚含量及其对自由基和
超氧阴离子（·Ｏ－２ ）的清除作用。结果表明：血桐石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取物对金色葡萄球
菌、白色葡萄球菌、藤黄微球菌均具有较强的抑菌效果，其最低抑制浓度（ＭＩＣ）为０．２～
０．６ｍｇ／ｍＬ，对大肠杆菌、枯草芽胞杆菌的抑制作用均较弱。石油醚、乙酸乙酯、正丁醇及水层萃
取物４个部位的酚性含量分别为１６．３５％、３０．３８％、５０．７３％、２４．６４％。ＤＰＰＨ法与邻苯三酚法测
定血桐醇提物不同萃取部位的抗氧化能力大小顺序为正丁醇萃取物＞乙酸乙酯萃取物＞水层部位
＞石油醚萃取物。血桐叶提取物具有较强的抑菌及抗氧化活性，为进一步研究其抑菌和抗氧化机
理提供了科学依据。
关键词：血桐；提取物；抑菌活性；抗氧化作用
中图分类号：Ｑ９４６．９１　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００１－７４６１（２０１３）０２－０１６０－０４
Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ａｎｄ　Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｏｆ　Ｍａｃａｒａｎｇａ　ｔａｎａｒｉｕｓ　Ｌｅａｖｅｓ
ＨＥ　Ｄａｉ－ｇｕｉ，ＷＥＮ　Ｊｕｎ－ｌｉｎ，ＺＨＯＵ　Ｊｉａｎ－ｑｉｎｇ，ＺＨＥＮＧ　Ｊｕｎ－ｘｉａ，ＷＡＮＧ　Ｈｕａ－ｑｉａｎ，
ＺＨＡＮＧ　Ｌｅｉ，ＺＨＡＯ　Ｓｕ－ｑｉｎｇ＊
（Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｌｉｇｈｔ　Ｉｎｄｕｓｔｒｙ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ５１０００６，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ａｎｄ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｏｆ　Ｍａｃａｒａｎｇａ　ｔａｎａｒｉｕｓ　ｌｅａｖｅｓ　ｗｅｒｅ　ｉｎｖｅｓ－
ｔｉｇａｔｅｄ．Ｔｈｅ　ｌｅａｖｅｓ　ｗｅｒｅ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｗｉｔｈ　７０％ （ｖ／ｖ）ＥｔＯＨ．Ａｆｔｅｒ　ｔｈｅ　ｓｏｌｖｅｎｔ　ｗａｓ　ｅｖａｐｏｒａｔｅｄ，ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔａｎｔ
ｅｘｔｒａｃｔ　ｗａｓ　ｔｈｅｎ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｉｎ　ｔｕｒｎ　ｗｉｔｈ　ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ　ｅｔｈｅｒ，ｅｔｈｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ，ｎ－ＢｕＯＨ，ａｎｄ　ｗａｔｅｒ．Ｔｈｅ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉ－
ａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｗｅｒｅ　ｍｅａｓｕｒｅｄ　ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　ｆｉｌｔｅｒ　ｐａｐｅｒ　ｍｅｔｈｏｄ　ａｎｄ　ｍｉｎｉｍｕｍ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａ－
ｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｐｈｅｎｏｌｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｗｅｒｅ　ｍｅａｓｕｒｅｄ　ｂｙ　Ｆｕｌｉｎ　ｍｅｔｈｏｄ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃａｐａｂｉｌｉｔｉｅｓ　ｏｆ
ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｆｒｅｅ　ｒａｄｉｃａｌ　ａｎｄ　ｓｕｐｅｒ　ｏｘｉｄｅ　ａｎｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｗｅｒｅ　ｅｖａｌｕａｔｅｄ　ｂｙ　ＤＰＰＨ　ｍｅｔｈｏｄ　ａｎｄ　１，１０－
ｐｈｅｎａｎｔｈｒｏｌｉｎｅ－Ｆｅ２＋ｏｘｉｄａｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｆｒｏｍ　ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ　ｅｔｈｅｒ，ｅｔｈｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ，ａｎｄ　ｎ－ＢｕＯＨ　ｅｘ－
ｈｉｂｉｔｅｄ　ｈｉｇｈｅｒ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｅｆｆｅｃｔ　ｔｏ　Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ，Ｓ．ａｌｂｕｓ，Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ　ｌｕｔｅｕｓ　ｔｈａｎ　ｏｔｈｅｒ　ｓｔｒａｉｎｓ，
ｗｉｔｈ　ａ　ＭＩＣ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　０．２ｔｏ　０．６ｍｇ／ｍＬ．Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｐｈｅｎｏｌｓ　ｗｅｒｅ　１６．３５％，３０．３８％，５０．７３％，ａｎｄ
２４．６４％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｆｒｏｍ　ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ　ｅｔｈｅｒ，ｅｔｈｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ，ｎ－ｂｕｔａｎｏｌ，ａｎｄ　ｗａｔｅｒ．Ｔｈｅ　ａｎｔｉｏｘｉ－
ｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｗｅｒｅ　ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｐｈｅｎｏｌｓ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄ
ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ａｌｃｏｈｏｌｉｃ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｆｒｏｍ　Ｍ．ｔａｎａｒｉｕｓｌｅａｆ　ｐｏｓｓｅｓｓｅｄ　ｇｏｏｄ　ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ　ａｎｄ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ，ｗｈｉｃｈ
ｐｒｏｖｉｄｅｄ　ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ　ｂａｓｉｓ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　ｉｔｓ　ｂｉｏａｃｔｉｖｅ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｍａｃａｒａｎｇａ　ｔａｎａｒｉｕｓ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ；ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ
　　 血桐（Ｍａｃａｒａｎｇａ　ｔａｎａｒｉｕｓ），别名橙栏、橙桐
等，大戟科血桐属植物［１］，为重要的药材树种，在我
国主要分布于海南、广东、香港特别行政区、澳门特
别行政区、中国台湾、福建等热带及亚热带地区［２］。
化学成分研究表明，其富含生物类黄酮、甾体、鞣质
类、酚类和萜类等［３－４］。根据《中华本草》记载，血桐
叶可作为药用，具有治疗恶性肿瘤、神经系统及心血
管系统等疾病的作用。据文献报道，从该属植物中
发现了有抗癌活性的先导物［５－６］，可以用于治疗刀伤
擦伤、溃疡肿痛、痢疾及止咳［７］，但对于血桐提取物
抗菌及抗氧化作用的研究报道较少。为了探讨血桐
叶提取物的抑菌活性及抗氧化作用，笔者制备血桐
提取物并研究其对金色葡萄球菌、白色葡萄球菌、藤
黄微球菌、大肠杆菌及枯草芽胞杆菌的抑制作用和
抗氧化作用，为合理开发血桐资源提供科学依据。
１　材料与方法
１．１　材料和仪器
１．１．１　原料　血桐叶采集于广东省广州市华南农
业大学，去杂洗净后，置阴凉处晾干至恒重后破碎，
过２０～４０目筛，备用。
１．１．２　仪器与试剂　仪器：ＫＱ－５０ＤＥ型数控超声
波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；Ｕ－１９０１紫外
分光光度计（北京普析通用仪器有限公司）；ＷＢ－
２０００旋转蒸发仪（郑州长城科工贸有限公司）；ＬＳ－
Ｂ５０Ｌ立式压力蒸汽灭菌器（江阴滨江医疗设备厂）；
ＡＵＹ２２０电子天平（日本岛津公司 ）；ＳＫＹ－１００Ｂ摇
床（上海苏坤实业有限公司）；ＳＰＸ－２５０Ｂ微机生化
培养箱（上海悦丰仪器仪表有限公司）；ＢＣＭ－１０００Ａ
生物洁净工作台（苏州安泰空气技术有限公司）；乙
醇、石油醚、乙酸乙酯，正丁醇，均为分析纯。
１．１．３　菌种　金黄色葡萄球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ
ａｕｒｅｕｓ）、白色葡萄球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｌｂｕｓ）、藤
黄微球菌（Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ　ｌｕｔｅｕｓ）、大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅ－
ｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ）及枯草芽胞杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ）均由
广东工业大学轻工化工学院制药工程实验室提供。
１．１．４　培养基　营养琼脂培养基：称取牛肉膏３ｇ、
蛋白胨１０ｇ、ＮａＣｌ　５ｇ、琼脂１７ｇ溶解后以蒸馏水定
容至１　０００ｍＬ，调ｐＨ值７．２～７．４；肉汤培养基：将
牛肉膏３ｇ，蛋白胨１０ｇ，ＮａＣｌ　５ｇ溶解后以蒸馏水
定容至１　０００ｍＬ，调ｐＨ值７．２～７．４。
１．２　方法
１．２．１　血桐叶醇提物及萃取物制备　称取血桐叶，
按１∶１０比例加入７０％的乙醇，于室温下浸泡２４
ｈ，水浴回流提取２ｈ，重复３次，过滤，合并所得滤
液并浓缩，真空干燥即得醇提取物。将醇提物以１
∶１０溶于蒸馏水中，依次用等体积石油醚、乙酸乙
酯和正丁醇萃取３次，得到石油醚层萃取物（Ａ１）、
乙酸乙酯层萃取物（Ａ２）、正丁醇层萃取物（Ａ３）与水
层剩余物（Ａ４）。准确称取上述５种不同部位样品，
用ＤＭＳＯ溶解，配制成０．１５ｇ／ｍＬ的溶液，保存备
用。
１．２．２　菌种活化　将金黄色葡萄球菌等５种供试
菌接种于培养皿，３７℃培养１８～２４ｈ，活化２次，用
接种环挑取少许活化的菌种以无菌水稀释至０．５麦
氏比浊液菌悬液，分别制成１．５×１０８　ｃｆｕ／ｍＬ的菌
悬液，再用肉汤培养基稀释１００倍，配制成１．５×
１０６　ｃｆｕ／ｍＬ的菌悬液，备用［８－９］。
１．２．３　抑菌圈测定　取直径为６ｍｍ的滤纸片经
灭菌后，分别放入不同样品液和无菌水中浸泡０．５
ｈ，晾干备用。在无菌操作下，吸取０．１ｍＬ各供试
菌悬液加入含营养琼脂培养基的平板中，涂布均匀
后，将浸有药物的滤纸片放入含菌平板上，３７℃培养
２４ｈ后用标尺测定抑菌圈直径大小，以浸有无菌水
的滤纸片作空白对照。重复３次，取其平均值［１０］。
１．２．４　最低抑菌浓度（ＭＩＣ）测定　将各提取物用
无菌水稀释至１２５～１ｍｇ／ｍＬ　４０个质量浓度梯度，
然后将稀释好的抗菌药物２ｍＬ加入灭菌的培养皿
中，并加入１８ｍＬ融化的营养琼脂培养基，充分混
匀，使各培养皿含药量为１２．５～０．１ｍｇ／ｍＬ。待培
养基冷却，用移液枪每皿加入１００μＬ供试菌液，涂
布均匀，２４ｈ后观察结果，以不长菌的最低浓度为
ＭＩＣ，试验重复３次［１１］。
１．２．５　总多酚含量测定　取２５０ｍｇ没食子酸，用
无水乙醇溶解并定容至５０ｍＬ，配制成５ｍｇ／ｍＬ溶
液，以此溶液分别配成质量浓度为５０、１００、１５０、
２５０、５００ｍｇ／Ｌ标准溶液 ，从中分别移取０．５ｍＬ加
入５０ｍＬ的容量瓶中，依次加入３０ｍＬ去离子水，
混合后加入２．５ｍＬ福林－酚试剂，混合后加入７．５
ｍＬ　２０％碳酸钠溶液，充分混匀后定容至刻度，２０℃
下反应２ｈ，７６５ｎｍ波长下测其吸光度。以浓度为
横坐标，吸光度为纵坐标，得回归方程：Ｙ＝１．２１８
８　Ｘ＋０．０３４　２（Ｒ２＝０．９９９　６）。分别取０．５ｍＬ血桐
醇提物和各萃取物加入３０ ｍＬ 去离子水、２．５
ｍＬＦＣ试剂、７．５ｍＬ　２０％碳酸钠溶液，定容至刻
度，２０℃下反应２ｈ，７６５ｎｍ波长下测其吸光度，以
超纯水作空白对照，此试验重复３次 ［１２］。
１．２．６　血桐各提取物对ＤＰＰＨ自由基清除作用　
称取１２．５ｍｇ　ＤＰＰＨ，用无水乙醇溶解配制成０．０５
ｍｇ／ｍＬ溶液。取２ｍＬ不同浓度的待测样加入２
ｍＬ　ＤＰＰＨ溶液，混合，避光放置３０ｍｉｎ后于波长
５１７ｎｍ处测其吸光度，重复３次，计算其抑制率。
抑制率＝［１－（Ａ－Ａ０）／Ａ１］×１００％［１３－１４］ （１）
式中：Ａ＝样品组与ＤＰＰＨ 溶液的吸光度；Ａ０＝样
１６１第２期 何带桂 等：血桐叶提取物抑菌活性及抗氧化作用研究
品与溶剂的吸光度；Ａ１＝溶剂与ＤＰＰＨ的吸光度。
１．２．７　超氧阴离子自由基清除　取０．１ｍｏｌ／Ｌ（三
羟甲基氨基甲烷）的 Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲溶液（ｐＨ　８．２）
４．５ｍＬ与４．２ｍＬ二次蒸馏水，置于２５℃恒温预热
２０ｍｉｎ后加入０．３ｍＬ的邻苯三酚（对照管用１０
ｍｍｏｌ／Ｌ盐酸代替），迅速混匀，３２０ｎｍ 下每０．５
ｍｉｎ测１次吸光度值Ａ０，共测４ｍｉｎ。样品测定：在
加入邻苯三酚前，先加入１ｍＬ样品液，并减少同体
积的二次蒸馏水，测定加样后自氧化速率Ａｉ，重复３
次［１５－１６］。
清除率：Ｐ＝［（Ａｏ－Ａｉ）／Ａｏ］×１００％ （２）
１．２．８　统计学分析　所得数据以平均值±标准差
（珚ｘ±ｓ）表示，采用ＳＰＳＳ１１．５软件进行统计分析。
２　结果与分析
２．１　血桐醇提物及各萃取部分抑菌效果
从表１可以看出，血桐醇提物不同溶剂萃取物
（Ａ１，Ａ２，Ａ３）对５种供试菌均有一定抑制作用，其
中乙酸乙酯萃取物对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球
菌、藤黄微球菌抑菌效果最佳，正丁醇萃取物对枯草
芽胞杆菌抑菌作用均最强，石油醚萃取物对大肠杆
菌的抑菌作用最明显，水层部位对５种试验菌抑制
作用较弱，通过各菌种抑制效果的比较可以看出，乙
酸乙酯层萃取物的抑菌效果明显优于其他３个部
位，表明血桐叶醇提物的主要抑菌活性成分主要集
中于乙酸乙酯萃取部位。
表１　不同萃取物对５种细菌的抑菌作用
Ｔａｂｌｅ　１　Ｂａｃｔｅｒｉｏｓｔａｓｉｓ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｆｏｒ　５ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ｂａｃｔｅｒｉａ
样品
抑菌圈／ｍｍ
金黄色葡萄球菌 白色葡萄球菌 藤黄微球菌 大肠杆菌 枯草芽胞杆菌
石油醚萃取物 １３．８１±０．０６　 １０．１３±０．００　 １１．６０±０．１０　 ８．６０±０．１１　 ９．００±０．００
乙酸乙酯萃取物 １５．１０±０．０８　 １４．８１±０．０７　 １４．００±０．１０　 ７．２０±０．０６　 ９．５０±０．１０
正丁醇萃取物 １２．７０±０．０８　 １３．００±０．０８　 １０．６２±０．１０　 ８．２０±０．０６　 １０．８　１±０．１０
水层部位 ９．３０±０．００　 １２．３０±０．０６　 ９．５０±０．０７　 ８．２０±０．１０　 ８．１０±０．０６
２．２　血桐提取物最低抑菌浓度（ＭＩＣ）
结果如表２所示，乙酸乙酯萃取部位对金色葡
萄球菌与白色葡萄球菌的最低抑制质量浓度均为
０．２ｍｇ／ｍＬ，对藤黄微球菌为０．３ｍｇ／ｍＬ，对大肠
杆菌为３．０ｍｇ／ｍＬ，对枯草芽胞杆菌为１．５ｍｇ／
ｍＬ。正丁醇萃取部位的最小抑菌浓度对金色葡萄
球菌、白色葡萄球菌与藤黄微球菌均为０．４ｍｇ／
ｍＬ，对大肠杆菌为３．０ｍｇ／ｍＬ，对枯草芽胞杆菌为
１．５ｍｇ／ｍＬ。石油醚萃取物对金色葡萄球菌、白色
葡萄球菌、藤黄微球菌、大肠杆菌与枯草芽胞杆菌的
最低抑制浓度分别为０．４、０．６、０．５、１．２５、１．０ｍｇ／
ｍＬ，水层部位对上述５种试验菌分别为３．０、１．０、
３．０、６．０、５．０ｍｇ／ｍＬ。
表２　血桐叶各萃取部位对５种细菌的最低抑制浓度
Ｔａｂｌｅ　２　Ｍｉｎｉｍａｌ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｍ．ｔａｎａｒｉｕｓ　ｌｅａｆ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｆｏｒ　５ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ｂａｃｔｅｒｉａ
样品
最低抑制浓度／（ｍｇ·ｍＬ－１）
金黄色葡萄球菌 白色葡萄球菌 藤黄微球菌 大肠杆菌 枯草芽胞杆菌
石油醚萃取物 ０．４±０．０　 ０．６±０．０　 ０．５±０．０　 １．２５±０．１　 １．０±０．１
乙酸乙酯萃取物 ０．２±０．０　 ０．２±０．０　 ０．３±０．０　 ３．０±０．２　 １．５±０．１
正丁醇萃取物 ０．４±０．０　 ０．４±０．０　 ０．４±０．０　 ３．０±０．３　 １．５±０．１
水层部位 ３．０±０．２　 １．０±０．１　 ３．０±０．３　 ６．０±０．５　 ５．０±０．４
２．３　血桐叶萃取物总多酚含量
采用福林－酚法测定血桐各萃取组分的多酚含
量结果显示（图１），不同萃取部位的多酚含量不同。
其中，正丁醇萃取部位的多酚含量最高，达５０．７３％，
其次为乙酸乙酯部位，为３０．３８％，石油醚萃取部位
含量最低，仅为１６．３５％，表明血桐醇提取物中多酚
主要集中于正丁醇萃取部位。
２．４　血桐叶萃取物抗氧化能力
对血桐醇提物各萃取部位的ＤＰＰＨ 自由基的
清除能力测定显示（图２），各萃取部位对ＤＰＰＨ均
有很好的清除效果，且随着浓度增大，其对 ＤＰＰＨ
的清除能力增加。不同萃取部位之间存在较显著差
异。石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水层
图１　血桐叶各萃取部位的多酚含量比较
Ｆｉｇ．１　Ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｅｘｔｒａｃｔｓ
ｆｒｏｍ　Ｍ．ｔａｎａｒｉｕｓ　ｌｅａｆ
部位及 Ｖｃ的ＩＣ５０ 分别为 １８．１６、９．９０、４．９８、
１５．１２、４．８７ｍｇ／ｍＬ，４种组分对 ＤＰＰＨ 自由基的
２６１ 西北林学院学报 ２８卷　
清除能力大小顺序为：正丁醇萃取物＞乙酸乙酯萃
取物＞水层部位＞石油醚萃取物，说明血桐醇提取
物的正丁醇萃取部位的抗氧化能力最强，可考虑进
一步研究。
图２　清除ＤＰＰＨ自由基的作用
Ｆｉｇ．２　Ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ＤＰＰＨ　ｆｒｅｅ　ｒａｄｉｃａｌ
由图３可以看出，血桐各萃取部位对超氧阴离
子自由基均有一定清除效果，且成量效关系，但各不
同样品的清除效果有差异。其活性由高至低分别
为：正丁醇萃取物＞乙酸乙酯萃取物＞水层部位＞
石油醚萃取物。正丁醇萃取物、乙酸乙酯萃取物、水
层部位、石油醚萃取物及Ｖｃ的ＩＣ５０分别为０．３８１、
０．５２１、０．７００、０．７１１、０．１３６ｍｇ／ｍＬ。
图３　清除·Ｏ－２ 的作用
Ｆｉｇ．３　Ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｓｕｐｅｒ　ｏｘｉｄｅ　ａｎｉｏｎ
３　结论与讨论
采用乙醇提取血桐叶中有效成分，研究醇提取
物不同萃取部位的抑菌作用及抗氧化活性。抑菌试
验结果表明石油醚、乙酸乙酯与正丁醇萃取物对金
黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌与藤黄微球菌的抑制
作用（ＭＩＣ为０．２～０．６ｍｇ／ｍＬ）强于对大肠杆菌和
枯草芽胞杆菌抑制作用（ＭＩＣ为１．０～３．０ｍｇ／
ｍＬ），而水层部位对５种试验菌均无明显抑制作用。
通过对各萃取物的抑菌活性比较，发现乙酸乙酯萃
取物的抑菌作用最强，可作为植物资源的抑菌剂并
进一步研究。
抗氧化试验结果显示，各萃取部位均具有一定
的抗氧化能力，血桐叶的正丁醇萃取部位对２种自
由基的清除效果最佳，其抗氧化活性与多酚含量存
在相关性。血桐各萃取部位对ＤＰＰＨ 的清除能力
与Ｖｃ相比，石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物及水层
部位较弱于对照品Ｖｃ，正丁醇萃取物部位接近Ｖｃ，
而Ｖｃ对超氧阴离子的清涂作用稍大于血桐各萃取
部位。因此，血桐叶提取物可作为防腐剂及天然抗
氧化剂的资源。综上，对血桐叶醇提物乙酸乙酯部
位和正丁醇萃取部位的化学成分做深入研究，有望
寻找到高效新型的防腐剂和抗氧化剂。
参考文献：
［１］　中国科学院华南植物研究所．广东植物志（第五卷）［Ｍ］．广州：
广东科技出版社，２００３：８３－８４．
［２］　中国科学院中国植物志编辑委员会．中国植物志（第４４卷，第
一分册）［Ｍ］．北京：科学出版社，１９９６：５０．
［３］　王天山，刘冰晶，华淑艳，等．海南血桐茎皮脂溶性甾体和三萜
类化学成分研究［Ｊ］．中药材，２００８，３１（３）：３７２－３７４．
ＷＡＮＧ　Ｔ　Ｓ，ＬＩＵ　Ｂ　Ｊ，ＨＵＡ　Ｓ　Ｙ，ｅｔ　ａｌ．Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｃｈｅｍｉｃａｌ
ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｏｆ　ｌｉｐｏｓｏｌｕｂｌｅ　ｓｔｅｒｏｉｄａｌ　ａｎｄ　ｔｒｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄ　ｃｏｍ－
ｐｏｕｎｄｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｓｔｅｍ　ａｎｄ　ｂａｒｋ　ｏｆ　Ｍａｃａｒａｎｇａ　ｈｅｍｓｌｅｙａｎａ［Ｊ］．
Ｊｏｕｍａｌ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　Ｍａｔｅｒｉａｌｓ，２００８，３１（３）：３７２－
３７４．（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）
［４］　王天山，刘冰晶，纪明慧，等．海南血桐叶子化学成分研究［Ｊ］．
海南师范大学学报，２００９，２２（１）：４９－５１．
ＷＡＮＧ　Ｔ　Ｓ，ＬＩＵ　Ｂ　Ｊ，ＪＩ　Ｍ　Ｈ，ｅｔ　ａｌ．Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｃｈｅｍｉｃａｌ
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３６１第２期 何带桂 等：血桐叶提取物抑菌活性及抗氧化作用研究
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２１２ 西北林学院学报 ２８卷