全 文 ：中药新药与临床药理 2012年 7月第 23卷第 4期
黄皮（Clausena lansium（Lour.） Skeels）属芸香科 Rutaceae黄皮属 Clausena植物，主要产于我国南部，
收稿日期：2012-01-03
作者简介：李晓波，女，硕士研究生，研究方向：中药有效性与安全性评价。Email：zhongyao-02@163.com。通讯作者：张荣，副研究员，硕士
生导师。Email：zhangrong@gzucm.edu.cn。
基金项目：国家自然科学基金广东联合基金重点项目：采用分子药理学新技术对岭南道地中草药活性成分的基础研究（U0832008）。
黄皮叶提取物对非酒精性脂肪肝大鼠的降脂保肝作用研究
李晓波，张 荣，王宁生，宓穗卿（广州中医药大学临床药理研究所，广州 510405）
摘要：目的 比较研究黄皮叶不同提取物的降脂效果，并探讨其对非酒精性脂肪肝（NAFLD）大鼠降脂保肝作用
及机制。方法 制备黄皮叶水提物和醇提物，建立小鼠高脂模型，测定高脂模型小鼠血清中的血脂成分。选择
作用较强的黄皮叶醇提物，采用灌饲高脂肪乳剂方法制备高脂性脂肪肝大鼠模型，观察其对血清中血脂、肝酶
活性及肝脏组织病理学改变的影响。结果 黄皮叶水提物及醇提物均能降低高血脂小鼠血清胆固醇（TC）、甘
油三酯（TG）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量，升高高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量，醇提物比水提物
作用强。黄皮叶醇提物能明显降低高脂性脂肪肝大鼠血清中 TC、TG、LDL-C及丙氨酸氨基转移酶（ALT），天
冬氨酸氨基转移酶（AST）的含量，减轻肝脏的病理损害。结论 黄皮叶醇提取物降脂效果优于水提物，且具有
良好的降脂保肝作用。
关键词：黄皮叶醇提物；非酒精性脂肪肝；降脂保肝
中图分类号：R285.5文献标志码：A 文章编号：1003-9783（2012）04-0405-04
doi：10.3969/j.issn.1003-9783.2012.04.009
Lipid-lowering and Hepatoprotective Effect of Extractives from Folium Clausenae Lansii on Nonalcoholic
Fatty Liver Rats
LI Xiaobo，ZHANG Rong，WANG Ningsheng，MI Suiqing（Institute of Clinical Pharmacology，Guangzhou Univer－
sity of Chinese Medicine，Guangzhou 510405，China）
Abstract：Objective To investigate the lipid-lowering and hepatoprotective effect and mechanism of different extrac－
tives from Folium Clausenae Lansii on nonalcoholic fatty liver rats. Methods Preparing water extracts and alcohol ex－
tracts from Folium Clausenae Lansii were prepared and mice models of hyperlipidemia were established for the analy－
sis of blood fat components. In addition，the nonalcoholic fatty liver rat models were induced by feeding fatty milk，
and then were given alcohol extracts from Folium Clausenae Lansii，which were used for the observation of blood lipid
levels，serum hepatic enzymatic activity in and hepatic histopathological changes. Results The water extracts and al－
cohol extracts from Folium Clausenae Lansii remarkably decreased serum levels of TC，TG and LDL-C，and in－
creased HDL-C level of mice models.The effects of alcohol extracts were stronger than those of water extracts. The al－
cohol extractives decreased distinctly the levels of TC，TG，LDL-C，as well as ALT and AST in serum，and re－
lieved the pathological damage of liver. Conclusion The alcohol extractives from Folium Clausenae Lansii have favor－
able lipid-lowering and hepatoprotective effect，and the effect is stronger than that of water extractives.
Keywords：Alcohol extracts from Folium Clausenae Lansii；Nonalcoholic fatty liver；Lipid-lowering and hepatopro－
tective effect
405· ·
Traditional Chinese Drug Research ＆ Clinical Pharmacology，2012 July，Vol． 23 No． 4
如福建、广东、台湾、广西、云南等地，已有1500
多年的栽培历史[1]。黄皮性味辛凉，《本草求原》中记
载其有“解秽除垢，退黄肿”之功用。民间常用其
叶煮水洗浴治疗疥癞，消风肿等[2]。近年来有报道称
黄皮叶具有保肝、促智等生物活性，尤其调脂保肝
作用正日益受到研究者关注[3-5]。本研究通过观察黄
皮叶水提物和醇提物对高脂血症小鼠模型的降脂作
用，筛选出有效提取物，研究其对非酒精性脂肪肝
大鼠的防治作用及可能的机制，为进一步开发降脂
保肝新药提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 动物 昆明种小鼠 70 只，雌雄各半，体质量
（20±2）g，合格证号：SCXK（粤）2008-0002；SD大鼠
70只，雄性，体质量（200±20）g，合格证号：SCXK
（粤）2008-0002，均由广东省实验动物中心提供。室
温为 26 ℃，湿度为 60 %。
1.2 药物与试剂 黄皮叶为广东省清远市清新县龙颈
镇龙北村采集，其水提取物（粉状）及黄皮叶醇提取
物（浸膏状），由广东省清远容大生物工程有限公司
提供，批号分别为 1010001，1009001。试验前均用
0.5 %羧甲基纤维素钠（CMC-Na）混悬。辛伐他汀（舒
降之），杭州默沙东制药有限公司，批号：100548；
CMC-Na，国药集团化学试剂有限公司，批号：
100548；甘油三酯（TG）试剂盒（批号：20110302）、
胆固醇（TC）试剂盒（批号：20110620）、高密度脂蛋
白胆固醇（HDL-C）试剂盒（批号：20110620）、低密
度脂蛋白胆固醇（LDL-C）试剂盒（批号：20110620），
均为北京北化康泰临床试剂有限公司产品。考马斯
亮兰蛋白试剂盒（批号：20110901）、丙氨酸氨基转
移酶（ALT）试剂盒（批号：20110822）、天冬氨酸氨基
转移酶（AST）试剂盒（批号：20110822），均为南京建
成生物工程研究所产品。
75 %蛋黄乳剂（45 mL蛋黄加 15 mL 生理盐水，
混匀成乳状，4 ℃贮藏备用[5]）；高脂肪乳剂（称取猪
油 400 g，电炉加热至液化，加入胆固醇 100 g、吐
温-80 36.4 g，制成油相。蒸馏水 300 mL，加入蔗糖
150 g、全脂奶粉 80 g、食盐 10 g、丙二醇 31.1 g，
加热至60 ℃，加入脱氧胆酸钠 10 g，搅拌均匀，制
成水相。水相倒入油相中，混匀，冷却后 4 ℃储藏，
使用时 50 ℃左右化开[7]）。
1.3 仪器 全自动生化分析仪，意大利 ECHO公司；
AEL-160 电子分析天平，日本岛津公司；KDC-
220HR高速冷冻离心机，科大创新股份有限公司中
佳分公司；U-2900 型可见-紫外分光光度计，日本
日立公司；Leica TP1020生物组织自动脱水机、Le－
ica EG1140 石蜡包埋机、Leica RM2235 全自动轮转
石蜡切片机、Leica TP 1020型全自动脱水机、Leica
ST501 自动染色机，均为德国莱卡公司产品；雅博
200型摊烘烤片机，常州市雅博电子设备有限公司；
DHG-9203型电热恒温鼓风干燥箱，上海精密实验设
备厂；Olympus BX-50型病理图像采集系统，日本奥
林巴斯公司。
1.4 高脂血症模型动物的分组、给药及检测指标 小
鼠按体质量随机分成 7组，即正常对照组、模型组、
辛伐他汀组（3 mg·kg-1）、黄皮叶水提物高、低剂量组
（2，0.5 g·kg-1）；黄皮叶醇提物高、低剂量组（2，
0.5 g·kg-1），每组 10只，雌雄各半。
小鼠适应饲养 3 d后，给药组每天灌胃 1次相应
药物，给药容积 20 mL·kg-1，模型组及正常组给予
等体积 0.5 %CMC-Na，连续 6 d。第 5 天药后禁食
16 h，除正常组外，其余各组均腹腔注射 75 %蛋黄
乳剂 20 mL·kg-1，于注射乳剂后 20 h将小鼠摘除眼
球取血，静置半小时，4 ℃ 3000 r/min 离心 15 min，
分离血清，按照试剂盒说明测定 TC、TG 、HDL-C、
LDL-C含量。
1.5 非酒精性脂肪肝模型动物的分组、给药及检测指
标 70只 SD雄性大鼠适应饲养 1周后，随机分为正
常组 10只，造模组 60只，造模组灌饲高脂肪乳剂
10 mL·kg-1，每日 1次，正常组给予等容积蒸馏水。
连续喂养 6周后，从造模组中随机抽取 5只，10 %
水合氯醛 3 mL·kg-1 腹腔麻醉，取肝组织做病理
切片，镜下可见轻度脂肪变性，证明造模成功。随
机将剩余动物分为模型组、阳性组、黄皮叶醇提物
低、中、高剂量组，每天上午继续灌饲高脂肪乳剂
10 mL·kg -1，下午则分别给予蒸馏水、辛伐他汀
（2 mg·kg-1），黄皮叶醇提物（0.25，0.5，1 g·kg-1），
灌胃容积均为 10 mL·kg-1，正常组给予等容积 0.5 %
CMC-Na，持续给药 4周。
于末次给药后，大鼠禁食 16 h，10 %水合氯醛
3 mL·kg-1腹腔麻醉，腹主动脉采血，静置 1 h，4 ℃
3000 r/min离心 15 min，分离血清，按照试剂盒说明
进行血清脂质（TC、TG、LDL-C、HDL-C）及肝功能
（ALT、AST）检测。另外，迅速摘取肝脏，4 ℃生理
盐水冲洗，取肝左叶置于 10 %中性甲醛液中固定，
石蜡包埋，切片，脱蜡，苏木精-伊红（HE）染色，酒
精脱水，二甲苯透明封片，光镜下观察肝脏组织病
406· ·
中药新药与临床药理 2012年 7月第 23卷第 4期
理变化。
1.6 数据统计处理方法 采用 SPSS11.5 软件进行统
计学分析，所有数据以均数±标准差（x± s）表示，多
组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较方差
齐时用 LSD检验，方差不齐时用 Tamhane’s T2检验，
P < 0.05为具有统计学意义。
2 结果
2.1 黄皮叶提取物对高脂血症模型小鼠血脂的影响
与正常组相比，模型组小鼠血清 TC、TG、LDL-C明
显升高，HDL-C明显降低（P < 0.01），表明高脂血症
模型小鼠造模成功；与模型组相比，黄皮叶水提取
物及醇提取物均可显著降低高脂血症小鼠血清 TC、
TG、LDL-C水平，升高 HDL-C水平（P < 0.05或 P <
0.01），且醇提物高剂量组作用较明显，见表 1。
表 1 黄皮叶提取物对高脂小鼠血脂的影响（x± s，mmol/L，n=
10）
Table 1Effect of the extractives from Folium Clausenae Lansii of
serum lipid level on hyperlipidemia mice
注：与正常组比较， ##P < 0.01；与模型组比较， *P < 0.05， **P <
0.01。
2.2 黄皮叶醇提取物对非酒精性脂肪肝大鼠血脂的影
响 与正常组相比，模型组大鼠血清 TC、TG、LDL-
C、HDL-C明显升高（P < 0.05或 P < 0.01），表明非
酒精性脂肪肝大鼠存在着明显的血脂代谢紊乱。给
药后，低、中、高剂量组和阳性组均能降低模型大
鼠血清 TC、TG、LDL-C、HDL-C含量，与模型组比
较，除低剂量组的血清 LDL-C外，其余指标均具有
显著性差异（P < 0.05或 P < 0.01），表明低、中、高
剂量黄皮叶醇提物均有明显的降低脂肪肝大鼠血脂、
调节脂肪代谢的作用，见表 2。
2.3 黄皮叶醇提取物对非酒精性脂肪肝大鼠肝功能的
影响 模型组大鼠血清 ALT、AST均明显高于正常组
（P < 0. 01），表明非酒精性脂肪肝大鼠存在一定程度
的肝损伤。各治疗组 ALT、AST均低于模型组，除阳
性组的血清 ALT，其余指标均具有显著性差异（P <
0.05或 P < 0.01），见表3。
2.4 肝组织病理学检查 正常组肝组织结构完整，肝
细胞以中央静脉为中心向四周呈放射状整齐排列，
肝细胞边界清晰，核位于细胞中央，肝窦排列规则，
汇管区清晰，胞质丰富，见图 1a。模型组肝细胞排
列紊乱，肝细胞内见较多大的脂肪空泡，汇管区见
慢性炎细胞浸润，见图 1b。黄皮叶醇提物给药组和
阳性对照组光镜下肝组织病变有不同程度的改善，
随着醇提物剂量的增大，肝细胞排列逐渐整齐，脂
肪空泡减少，炎性细胞浸润减轻，高剂量组接近正
常，见图 1（c~f）。
3 讨论
近年来，随着生活水平的提高，非酒精性脂肪
肝（NAFLD）逐渐成为一种常见病、多发病，在亚太
地区的发病率高达 20 %~30 %，严重影响着人们的
生活质量。NAFLD发病机制复杂，涉及细胞内的生
化代谢，具体环节尚不完全清楚，一般认为与脂肪
组 别
正常组
模型组
辛伐他汀组
黄皮叶醇提物组
黄皮叶醇提物组
黄皮叶醇提物组
剂量/mg·kg-1·d-1
－
－
2
250
500
1000
AST
54.2±4.10
95.5±39.78##
60.2±7.65*
65.4±14.21*
68.5±6.56*
65.8±6.91*
ALT
31.0±9.42
57.8±11.76##
48.8±14.07
38.1±11.18**
39.9±8.59**
38.4±9.10**
组 别
正常组
模型组
辛伐他汀组
黄皮叶水提物组
黄皮叶水提物组
黄皮叶醇提物组
黄皮叶醇提物组
剂量/mg·kg-1·d-1
－
－
3
500
2000
500
2000
TC
2.77±0.53
11.66±2.5##
9.12±1.49*
7.99±1.28**
6.87±0.67**
7.09±1.70**
6.50±2.50**
TG
1.32±0.35
16.75±4.88##
13.43±3.57
10.38±2.24**
9.94±1.92**
10.18±4.42**
9.48±3.37**
HDL－C
2.08±0.58
1.38±0.35##
1.53±0.36
1.71±0.23**
1.76±0.26*
1.89±0.60*
1.91±0.61**
LDL－C
0.49±1.84
2.86±0.51##
1.89±0.52**
2.08±0.19**
1.91±0.14**
1.60±0.41**
1.61±0.27**
组 别
正常组
模型组
辛伐他汀组
黄皮叶醇提物组
黄皮叶醇提物组
黄皮叶醇提物组
剂量/mg·kg-1·d-1
－
－
2
250
500
1000
TC
1.10±0.41
2.86±0.27##
2.09±0.35**
1.96±0.38**
1.91±0.37**
1.75±0.40**
TG
0.64±0.15
0.85±0.21#
0.58±0.20*
0.54±0.13**
0.60±0.10*
0.61±0.10*
HDL－C
0.89±0.16
1.50±0.30##
1.07±0.19**
0.98±0.24**
1.02±0.18**
1.01±0.21**
LDL－C
0.33±0.13
1.04±0.18##
0.79±0.23*
0.82±0.41
0.73±0.29*
0.59±0.27**
表 2 黄皮叶醇提取物对非酒精性脂肪肝大鼠血脂的影响（x±s，
mmol/L，n=10）
Table 2 Effect ofalcohol eatractives fromFroliumClausenae Lan-
sii ofserumlipid level on nonalcoholic fattyliver in rats
注：与正常组比较， #P < 0.05， ##P < 0.01；与模型组比较， *P <
0.05， **P < 0.01。
表 3 黄皮叶醇提取物对非酒精性脂肪肝大鼠肝功能的影响
（x± s，U/L，n=10）
Table 3 Effects of the alcohol extractives from Frolium Clause-
nae Lansii of liver function on nonalcoholic fatty liver in rats
注：与正常组比较， ##P < 0.01；与模型组比较， *P < 0.05， **P <
0.01。
407· ·
Traditional Chinese Drug Research ＆ Clinical Pharmacology，2012 July，Vol． 23 No． 4
代谢异常、激素影响、环境因素、遗传因素、应激
及脂质过氧化损伤等有关。许多调脂药虽然调脂效
果确切，但具有潜在的肝毒性，对肝内脂肪沉积无
改善甚至反而加重肝损伤，因此兼有调脂和保肝双
重作用的药物会更有利于脂肪肝的防治[8-9]。
本实验研究显示，黄皮叶水提物和醇提物对实
验性高脂血症小鼠有明显的降脂作用，能显著降低
小鼠血清中 TC、TG和 LDL-C水平，提高 HDL-C水
平。通过提高血清中 HDL-C的浓度，增加胆固醇的
排泄，降低 LDL-C，从而减少胆固醇在动脉壁中的
沉积。在相同剂量下，醇提物降脂效果优于水提物，
因此选取醇提物作进一步研究。
本研究模仿人类非酒精性脂肪肝形成的主要病
理机制，用高脂乳剂灌饲大鼠导致肝损伤，影响其
脂肪代谢，形成脂肪肝，是目前公认的降脂保肝药
效研究模型。本实验用黄皮叶醇提物干预治疗非酒
精性脂肪肝模型大鼠，结果显示其能明显的降低大
鼠血清 TG、TC、LDL-C 及 AST、ALT 含量，恢复
HDL-C至正常水平，减轻肝组织病理损害，表明黄
皮叶醇提物的降脂保肝作用确切，可作为降脂保肝
候选药物进一步研究开发。值得注意的是，本实
验中非酒精性脂肪肝模型组大鼠与正常组相比，血
清HDL-C水平呈现升高趋势，结合相关类似文献研
究[10-11]，初步认为其可能原因是模型大鼠长期高 TC，
造成 HDL-C代偿性升高，机体合成更多的 HDL-C，
以促进胆固醇的逆向转运，使细胞内更多的胆固醇
转运到肝组织代谢，以降低细胞内外胆固醇水平。
其机制很可能为高胆固醇血症时，由于“原发性”
载脂蛋白 B（apoB）增加，LDL-C 增加，诱发基因控
制的载脂蛋白 A1（apoA1）合成增加，apoA1增加继而
引起 HDL-C的增加。
参考文献：
[1] 潘建平，袁沛元，曾杨，等. 华南地区黄皮良种、生产现状与发
展对策[J]. 广东农业科学，2007，（1）：103-105.
[2] 赵青，李创军，杨敬芝，等. 黄皮叶的化学成分研究[J]. 中国中药
杂志，2010，35（8）：997-1000.
[3] 覃国忠，廖曼云. 黄皮叶降血脂作用的实验研究[J]. 广西植物，
1987，7（2）：185-188.
[4] Prasad KN，Hao J，Yi C，et al. Antioxidant and Anticancer Activi－
ties of Wampee（Clausena lansium（Lour.）Skeels）Peel[J]. Journal of
Biomedicine and Biotechnology，2009，2009：612805.
[5] Adebaj AC，Iwalewa EO，Obuotor EM，et al. Pharmacological prop－
erties of the extract and some isolated compounds of Clausena lansium
stem bark：Anti-trichomonal，antidiabetic，anti-inflammatory hep－
atoprotective and antioxidant effects[J]. Journal of Ethnopharmacology，
2009，122：10-19.
[6] 施秀. 桑叶提取物对腹腔蛋黄致高血脂小鼠模型的影响研究[J]. 海
峡药学，2011，23（1）：27-29.
[7] Zou YH，Li J，Lu C，et al. High-fat emulsion-induced rat model of
nonalcoholic steatohepatitis [ J ] . Life Sciences， 2006， 79： 1100-
1107.
[8] 王乐，张霞. 非酒精性脂肪肝分子机制的研究进展[J]. 现代预防医
学，2011，37（11）：2027-2030.
[9] 汪春燕，郭传勇. 非酒精性脂肪肝的研究新进展[J]. 保健医学研究
与实践，2011，8（1）：68-73.
[10] 高传玉，沈玉祥，徐豫，等. 高胆固醇血症载脂蛋白变化的探讨
[J]. 河南诊断与治疗杂志，1997，11（1）：8-10.
[11] 陈育尧，陈业豪，石彩霞. 大鼠高血脂及脂肪肝模型的建立[J].
中药药理与临床，2007，23（4）：64-65.
（编辑：梁进权）
a. 正常组 b. 模型组 c. 阳性对照组 d. 醇提物低剂量组 e. 醇提物中剂量组 f. 醇提物高剂量组
图 1 肝组织病理学检查结果（×200倍）
Figure 1 Hepatic histopathological changes（×200）
408· ·