全 文 ：不同透皮促进剂对祖师麻体外透皮吸收的影响
范 彬1， 石晓峰1* ， 李 爽2
(1. 甘肃省医学科学研究院，甘肃 兰州 730050;2. 甘肃中医学院，甘肃 兰州 730000)
收稿日期:2013-03-12
基金项目:甘肃省普通中医药科研课题 (GZK-2011-81) ;2013 年兰州市第三批 (社会发展类)科技计划 (2013-3-39)
作者简介:范 彬 (1979—) ，女，硕士，主管药师。研究方向:中药化学及中药质量标准。Tel: (0931)2614521-2110，E-mail:
fb1124@ sina. com
* 通信作者:石晓峰 (1964—) ，男，主任药师，教授，硕士生导师。研究方向:天然药物化学。Tel: (0931)2614521-6039，E-mail:
shixiaofeng2005@ sina. com
摘要:目的 研究不同促渗剂对祖师麻体外透皮促渗作用的影响。方法 采用 ZTY 智能透皮试验仪，以离体雄性大
鼠腹部皮肤为模型，通过高效液相色谱法测定接受液中祖师麻甲素和 7-羟基香豆素的量，计算不同时段药物的累积渗
透量和渗透速率。结果 4%冰片、4%油酸、5%氮酮、1% ～5%丙二醇、1 ∶ 1 ～ 1 ∶ 4 氮酮-丙二醇均能促进祖师麻有
效成分的吸收，其中氮酮和丙二醇促渗效果明显;采用 4%氮酮时促渗效果最佳。结论 可选择 4%氮酮作为祖师麻
经皮给药制剂的最佳透皮吸收促进剂。
关键词:祖师麻;透皮促进剂;祖师麻甲素;7-羟基香豆素;透皮吸收
中图分类号:Ｒ944 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2014)03-0631-04
doi:10. 3969 / j． issn． 1001-1528. 2014. 03. 043
祖师麻 Daphne Cortex 为瑞香科植物黄瑞香 Daphne gi-
raldii Nitsche、唐古特瑞香 Daphne tangutica Maxim 及凹叶
瑞香 Daphne retusa Hemsl 的干燥根皮与茎皮［1］。始载于
《陕西中草药》，辛、苦，温、有小毒;归肝经［2］。祖师麻
的主要化学成分为香豆素类、二萜类、木脂素类、黄酮类、
蒽醌类及甾醇类等［3］，其主要有效成分为瑞香素 (7，8-二
羟基香豆素、又称祖师麻甲素，daphnetin)、瑞香苷 (祖师
麻乙素，daphnin)、紫丁香苷 (syringin)、伞形花内酯 (7-
羟基香豆素、7-Hydrangine)等，以祖师麻甲素为代表的香
豆素类成分具有明显的镇痛、抗炎、抑菌、抗血栓、抗凝
血等药理作用［4］。本实验应用 ZTY智能透皮试验仪，以祖
师麻甲素和 7-羟基香豆素作为测量指标，考察不同促进剂
对祖师麻浸膏粉中香豆素类成分透皮吸收的影响，希冀为
祖师麻经皮给药制剂的研究提供参考。
1 仪器、材料与动物
1. 1 仪器 Agilent1120 型高效液相色谱仪 (美国安捷伦公
司);ZTY 智能透皮试验仪 TP2A (巩义市英峪予华仪器
厂) ;AE260 型万分之一电子天平 (瑞士 Mettle Toledo 公
司);SK3310HLC型超声波清洗器 (上海科导超声仪器有
限公司)。
1. 2 试药 祖师麻浸膏粉 (批号 20111118)由甘肃泰康
制药有限责任公司提供;氮酮 (化学纯，批号 20111010)
由上海山浦化工有限公司提供;油酸 (分析纯，批号
20100912)由烟台市双双化工有限公司提供;1，2 丙二醇
(分析纯，批号 20100619)由天津博迪化工股份有限公司
提供;聚乙二醇 400 (分析纯，批号 20110322)由天津市
凯信化学工业有限公司提供;甲醇 (色谱纯，批号
20110627012);乙腈 (色谱纯，批号 2010100102)均由西
陇化工股份公司提供;水为重蒸水;其他试剂均为分析纯。
1. 3 动物 SD大鼠，雄性，体质量 300 g ～ 350 g，兰州大
学实验动物中心提供，动物合格证号:SCXK (甘)
2009-0004
2 方法与结果
2. 1 大鼠离体皮肤的制备 取 SD 大鼠，腹部皮肤用脱毛
剂 8%Na2S溶液脱毛，清水洗净皮肤表面，饲养 24 h 后断
颈处死，剪下腹部皮肤，剥离皮下脂肪及黏液组织，用蒸
馏水反复洗净，再用生理盐水漂洗后，浸于生理盐水中，4
℃冰箱短期保存，备用［5］。
2. 2 体外透皮吸收试验测定 采用 ZTY 智能透皮试验仪，
取制备好的鼠皮，剪成适当大小的 3 片 (3. 4 cm2) ，分别
置于透皮试验仪的 3 个供给池与接受池之间，角质层面向
供给池，真皮层面向接受池，使皮肤结合紧密勿有气泡。
取0. 500 0 g祖师麻浸膏粉与不同浓度的透皮促进剂混合均
匀后，贴 在 鼠 皮 表 皮，接 受 室 内 为 15 mL 接 受 液
(PEG400 ∶ 95% EtOH ∶ 生理盐水 = 1 ∶ 3 ∶ 6)。开动恒温水浴
循环 (37 ± 1)℃和磁力加热搅拌器 (300 r /min) ，开始计
时，随时排除接受池中气泡，在设定时间点 2、4、6、8、
10、12、24 h分别从接受池取样 1 mL，并立即补充等体积
37 ℃接受液。取出样品用 0. 45 μm微孔滤膜过滤后，以高
效液相色谱 (HPLC)法测定各时间祖师麻甲素、7-羟基香
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豆素的质量浓度，计算单位面积内的累积渗透量 Qn (μg·
cm －2)。计算公式 (1)如下:
Qn =
CnV +∑
i = n－1
1
CiVi
A (1)
式中，A 为渗透面积 (3. 4 cm －2);V 为接受室容积 (15
mL);Vi 为每次取样体积 (1 mL) ;Cn 为第 n 次取样时接
收液中的药物质量浓度 (μg /mL) ;Ci 为第 i次取样时接收
液中的药物质量浓度 (μg /mL)。
然后以时间 t (h)为横坐标，累积渗透量 Qn
(μg·cm －2)为纵坐标，对曲线中的直线部分进行回归分
析，所得方程即为 Qn － t 方程，其斜率为透皮速率常数 J
(μg·cm －2·h －1)。再以如下公式 (2)计算促透剂的促透
倍数 (Enhancement Ｒatio，EＲ) ，其中 Jenhancers 为加入促
透剂后药物的稳态透皮速率，Jcontrol为未加促透剂时药物
的稳态透皮速率［6-8］。
EＲ = JenhancersJcontrol (2)
2. 3 样品测定
2. 3. 1 对照品溶液的制备 精密称取祖师麻甲素对照品
0. 008 3 g，置 10 mL量瓶中，加 40%乙醇溶解并定容至刻
度，即得祖师麻甲素对照品贮备液。精密吸取上述贮备液
2 mL于 5 mL量瓶中，加 40%乙醇定容至刻度，配制成每
1mL含祖师麻甲素 0. 332 mg的对照品溶液。
精密称取 7-羟基香豆素对照品0. 010 4 g，置 25 mL 量
瓶中，加 40%乙醇溶解并定容至刻度，即得 7-羟基香豆素
对照品贮备液。精密吸取上述贮备液 1 mL 于 10 mL 量瓶
中，加 40%乙醇定容至刻度，配制成每 1mL含 7-羟基香豆
素 41. 6 μg的对照品溶液。
2. 3. 2 供试品溶液的制备 按“2. 2”项下操作在设定时
间点取渗透接受液 1 mL，用 0. 45 μm微孔滤膜过滤，取续
滤液作为供试品溶液。
2. 3. 3 色谱条件与系统适用性试验［9-11］ Agilent Eclipse
Plus C18色谱柱 (4. 6 mm × 250 mm，5 μm) ;流动相为乙腈
-0. 1%磷酸水溶液 (15 ∶ 85) ;体积流量 1. 0 mL /min;检测
波长 327 nm;柱温 30 ℃;进样量 20 μL。依上述色谱条件
进样测定。结果样品中祖师麻甲素、7-羟基香豆素均得到
较好分离，与其相邻色谱峰分离度 ＞ 1. 5。理论塔板数以祖
师麻甲素峰面积计算不得低于3 000。结果见图 1。
1． 祖师麻甲素 2. 7-羟基香豆素
图 1 对照品和样品的高效液相色谱图
2. 3. 4 线性关系的考察 分别精密吸取祖师麻甲素对照品
溶液 10、100、200、400、600、800、1 000 μL至 1 mL量瓶
中，精密吸取 7-羟基香豆素对照品溶液 10、100、200、
400、600、800 μL至 1 mL 量瓶中，用 40%乙醇稀释至刻
度，摇匀。分别精密吸取上述各对照品溶液 20 μL，依次进
样测定峰面积。以峰面积 (Y)为纵坐标，质量浓度 (X，
μg /mL)为横坐标进行线性回归。得祖师麻甲素回归方程:
Y = 1. 260 41 × 106X － 2. 004 76 × 106 (r = 0. 999 9)，线性范
围 3. 32 ～ 265. 6 μg /mL。7-羟基香豆素回归方程:Y =
1. 392 06 × 106X + 416 583 (r = 0. 999 6)，线性范围0. 416 ～
33. 28 μg /mL。结果表明:祖师麻甲素和 7-羟基香豆素在其
质量浓度范围内与峰面积值呈良好线性关系。
2. 4 透皮吸收促进剂的优选
2. 4. 1 不同透皮吸收促进剂的考察 精密称取祖师麻浸膏
粉0. 500 0 g，分别加入 4%冰片 (borneol)、4%油酸 (Ole-
ic acid，OA)、5%氮酮 (azone)、1% ～ 5%丙二醇 (1，2-
propyleneglycol，PG)、1 ∶ 1 ～ 1 ∶ 4 氮酮-丙二醇 (azone-PG)
混合均匀，按“2. 3. 2”项下制备样品，比较不同透皮促进
剂对祖师麻甲素累计渗透量的影响。结果见表 1。由表 1 可
知，12 种透皮促进剂对祖师麻甲素均具有经皮促透效果，
以 4%油酸、5%氮酮、4% 丙二醇和氮酮-丙二醇 (1 ∶ 1)
对祖师麻甲素的促透效果显著;比较 24 h累积渗透量，5%
氮酮 和 4%丙二醇的明显大于其他促进剂;EＲ 显示 5%氮
酮大于 4%丙二醇，故选用氮酮作为促进剂。
2. 4. 2 氮酮的最佳质量分数考察 取祖师麻浸膏粉
0. 500 0 g，分别加入 1%、2%、3%、4%、5%氮酮混合均
匀，比较不同质量分数氮酮对祖师麻甲素和 7-羟基香豆素
的累计渗透量的影响。结果见表 2、图 2。当氮酮的质量分
数为 4%时，促渗效果最好，祖师麻甲素和 7-羟基香豆素
24 h累积渗透量分别为1 260. 433 μg /cm和 174. 500 μg /cm，
EＲ分别为 4. 880 和 4. 05，尤以 7-羟基香豆素的透皮效果显
著。故最终选用 4%氮酮作为祖师麻的透皮促进剂。
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表 1 不同透皮促进剂对祖师麻甲素的经皮渗透的影响
促进剂 Q24 (μg·cm －2) Q － t r J (μg·cm －2·h －1) EＲ
不含促进剂 230. 402 Y = 9. 587X － 1. 934 0. 998 4 9. 587
4%冰片 493. 169 Y = 20. 209X + 66. 539 0. 931 8 20. 209 2. 108
4%油酸 673. 305 Y = 32. 281X － 119. 86 0. 980 7 32. 281 3. 367
5%氮酮 928. 165 Y = 36. 042X + 99. 005 0. 989 6 36. 042 3. 759
1%丙二醇 253. 566 Y = 10. 198X + 7. 096 0. 996 0 10. 198 1. 064
2%丙二醇 630. 600 Y = 25. 597X + 38. 815 0. 992 7 25. 597 2. 670
3%丙二醇 336. 189 Y = 14. 303X － 10. 783 0. 994 3 14. 303 1. 492
4%丙二醇 935. 431 Y = 35. 921X + 153. 52 0. 955 2 35. 921 3. 747
5%丙二醇 768. 942 Y = 28. 061X + 148. 41 0. 958 4 28. 061 2. 927
氮酮-丙二醇 (1 ∶ 1) 778. 881 Y = 32. 053X + 14. 975 0. 997 6 32. 053 3. 343
氮酮-丙二醇 (1 ∶ 2) 386. 228 Y = 15. 109X + 64. 918 0. 942 2 15. 109 1. 576
氮酮-丙二醇 (1 ∶ 3) 456. 120 Y = 19. 879X + 19. 179 0. 964 3 19. 879 2. 073
氮酮-丙二醇 (1 ∶ 4) 410. 384 Y = 17. 276X + 33. 396 0. 961 1 17. 276 1. 802
表 2 不同质量分数氮酮对祖师麻甲素和 7-羟基香豆素的经皮渗透的影响 (n =3)
促进剂用量 Q24 (μg·cm －2) Q － t r J (μg·cm －2·h －1) EＲ
祖师麻甲素 不含促进剂 230. 402 Y = 9. 587X － 1. 934 0. 998 4 9. 587
1%氮酮 269. 692 Y = 11. 473X － 7. 868 8 0. 997 5 11. 473 1. 197
2%氮酮 615. 813 Y = 25. 191X + 26. 802 0. 996 3 25. 191 2. 628
3%氮酮 654. 058 Y = 27. 364X + 14. 428 0. 991 1 27. 364 2. 854
4%氮酮 1 260. 433 Y = 46. 787X + 120. 26 0. 992 9 46. 787 4. 880
5%氮酮 928. 165 Y = 36. 042X + 99. 005 0. 989 6 36. 042 3. 759
7-羟基香豆素 不含促进剂 36. 810 Y = 1. 6293X － 2. 7877 0. 995 7 1. 629 3
1%氮酮 39. 377 Y = 1. 719 9X － 2. 428 6 0. 998 2 1. 719 9 1. 056
2%氮酮 73. 074 Y = 3. 034 4X + 3. 489 6 0. 989 3 3. 034 4 1. 862
3%氮酮 52. 299 Y = 2. 253 6X － 2. 519 4 0. 957 9 2. 253 6 1. 383
4%氮酮 174. 500 Y = 6. 602X + 18. 596 0. 994 8 6. 602 4. 052
5%氮酮 108. 597 Y = 4. 247X + 12. 339 0. 982 8 4. 247 2. 607
图 2 不同质量分数氮酮对祖师麻甲素 (A)和 7-羟基香豆素 (B)的体外透
皮吸收曲线
3 讨论
3. 1 透皮给药剂型使用安全、方便、毒副作用小、疗效确
切，可有效避免肝脏首过效应。促进药物透皮吸收的方法
有药剂学方法、化学方法和物理方法［12］;添加适宜的透皮
吸收促进剂是迄今研究最多和最直接有效的经皮渗透促进
方法［13-14］，故寻找促进药物经皮渗透的方法是开发透皮吸
收制剂的关键。
3. 2 实验中制备不含透皮促进剂样品时，加入 4%的接受
液，即 PEG 400 ∶ 95% EtOH ∶ 生理盐水 = 1 ∶ 3 ∶ 6 与祖师麻
浸膏粉混合均匀后制备样品。此外，实验中，尽量选用离
体鼠皮腹部中间薄厚一致部位，以此减少实验误差;接受
液液面与离体鼠皮充分接触，以防气泡产生;接受液温度
保持 (37 ± 1)℃，以免影响透皮效果。通过考察不同转速
对祖师麻的透皮吸收的影响，其差异性不显著，故将搅拌
器转速固定为 300 r /min。
3. 3 本实验通过对常见的几种透皮促进剂的透皮效果的比
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较，发现 4%油酸作为透皮促进剂时，其 24 h 累计渗透量
为 673. 305 μg·cm －2，EＲ值为 3. 367，但 t1ag大于 0，表明
采用 4%油酸有时滞产生，不利于祖师麻浸膏粉的透皮吸
收;选用 4%丙二醇作为透皮促进剂时，其透皮速率常数 J
为 35. 921 μg·cm －2·h －1，EＲ 值为 3. 747，均小于 5%氮
酮的透皮速率常数和 EＲ值;而氮酮和丙二醇两种促渗剂合
用时，其透皮吸收效果略逊于单独使用氮酮的。
3. 4 氮酮是目前公认的优良促透剂，对皮肤的毒性、刺激
性都很低，其最佳促透质量分数为 0. 1% ～ 5%，再提高并
不能增强其效果，甚至产生降低作用［15］，故本实验选择的
氮酮分数范围在 1% ～ 5%。结果表明，在促渗剂 4%氮酮
的作用下，祖师麻浸膏粉中主要成分祖师麻甲素和 7-羟基
香豆素的透皮吸收速率和 24 h 累计渗透量最大，故确定
4%氮酮作为祖师麻经皮给药制剂的最佳透皮吸收促进剂。
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穿心莲总内酯骨架缓释片的制备及释放度测定
李小芳1，2，3， 舒 予1，2，3， 刘 玲1，2，3， 文怡静1，2，3， 吴 珊1，2，
3
， 尹帮龙1，2，3
(1. 成都中医药大学，四川 成都 611137;2. 中药材标准化教育部重点实验室，四川 成都 611137;3. 中药
资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地，四川 成都 611137)
收稿日期:2013-03-14
基金项目:成都中医药大学科技发展基金 (ZＲMS201240)
作者简介:李小芳 (1964—)，女，医学博士，教授，从事中药新剂型及中药新技术研究。Tel:13808195110，E-mail:lixiaofang918
@ 163. com
摘要:目的 制备穿心莲总内酯缓释片，并考察其体外释放度及机制。方法 采用亲水性高分子材料 HPMC为骨架材
料，制备穿心莲总内酯缓释片，采用正交试验设计，以药物体外释药百分率为指标优选制剂处方。结果 最终优化处
方为 20 % HPMC K15M作为骨架材料，乳糖和淀粉比例为 3 ∶ 1，3% PVP作为致孔剂。结论 所制备缓释片的工艺简
单合理，药物体外释放符合零级模型，制得的缓释骨架片具有较理想的缓释作用。
关键词:穿心莲总内酯;缓释片;释放度
中图分类号:Ｒ944 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2014)03-0634-04
doi:10. 3969 / j． issn． 1001-1528. 2014. 03. 044
穿心莲 Andrographis paniculata (Burm． f．)Ness为爵床 科穿心莲属植物穿心莲的干燥地上部分，又名一见喜、斩
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