全 文 ：Science of Sericulture 蚕业科学
收稿日期:2015－05－09 接受日期:2015－06－18
资助项目:四川省农业高新技术及新产品产业化项目(No．2015scny-
zx0011) ，南充市科技支撑项目(No．13A0015) ，南充市科
技型中小企业技术创新资金项目(No．14C0013) ，四川省
财政创新能力提升工程项目(No．2015XXXK-016)。
第一作者信息:殷浩(1980－) ，男，助理研究员。
Tel:0817-2235026，E-mail:s20060428@ 163．com
通信作者信息:刘刚，博士，研究员。
Tel:0817-2229001，E-mail:liugang200480@ sina．com
* Corresponding author． E-mail:liugang200480@ sina．com
2015，41(5) :0963－0967
ISSN 0257－4799;CN 32－1115 /S
DOI:10．13441 / j．cnki．cykx．2015．05．027
2种形状桑芽绿茶中的 1-脱氧野尻霉素浸出量及降血糖功效
殷 浩1，3 刘 刚1 孙 波2 安 慧4 辛 磊5 魏祥圣5 黄盖群1 危 玲1 吴劲轩1，3
(1四川省农业科学院蚕业研究所，四川南充 637000; 2湖北省农业科学院经济作物研究所，武汉 430064; 3四川省蚕业科技开发总公司，
四川南充 637000; 4河池学院化学与生物工程学院，广西河池 546300; 5山东爱福地生物科技有限公司，山东济宁 272000)
摘 要 将富含 1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin，DNJ)的桑树嫩芽加工成卷曲形和扁平形桑芽绿茶，检测 2种形状桑芽绿
茶在不同浸泡温度和浸泡时间下的 DNJ浸出量，并通过动物试验评价 2种茶汤的降血糖功效，探讨桑叶茶的加工形状和浸泡
方法对其保健功效的影响。卷曲形与扁平形桑芽绿茶中的 DNJ质量分数分别为 0. 113 2%和 0. 152 3%;浸泡温度对卷曲形桑
芽绿茶中的 DNJ浸出量没有显著影响，但扁平形桑芽绿茶以 100 ℃水温浸泡时的 DNJ浸出量最大;卷曲形桑芽绿茶的 DNJ浸
出量显著高于扁平形桑芽绿茶，浸泡 9 min即可达到 0. 39 mg /g，且茶汤中的黄酮类、多酚类、游离氨基酸和可溶性糖等活性物
质的浸出量也较高。2种形状桑芽绿茶的茶汤均能显著降低糖尿病模型小鼠的空腹血糖、餐后血糖和糖化血红蛋白浓度，且
卷曲形桑芽绿茶的作用更为显著。试验结果表明，虽然卷曲形桑芽绿茶中的 DNJ含量低于扁平形桑芽绿茶，但由于加工工艺
的原因使茶叶中的 DNJ浸出速率较快，DNJ等活性物质的浸出量也较高，能更有效地降低糖尿病模型小鼠的血糖指标，所以
卷曲形桑芽绿茶更适宜作为降血糖保健食品。
关键词 桑芽绿茶;形状;浸泡方法;1-脱氧野尻霉素;降血糖;小鼠
中图分类号 TS272. 5+ 1;O629. 3 文献标识码 A 文章编号 0257－4799(2015)05－0963－05
1-Deoxynojirimycin Leaching and Hypoglycemic Effects of Two
Forms of Green Tea Prepared w ith Mulberry Buds
Yin Hao1，3 Liu Gang1* Sun Bo2 An Hui4 Xin Lei5 Wei Xiangsheng5 Huang Gaiqun1 Wei Ling1
Wu Jinxuan1，3
(1The Sericultural Ｒesearch Institute，Sichuan Academy of Agricultural Sciences，Nanchong Sichuan 637000，China;
2 Institute of Economic Crop，Hubei Academy of Agricultural Science，Wuhan 430064，China;3Sericulture Technology
Development Corporation of Sichuan Province，Nanchong Sichuan 637000，China;4College of Chemical and Biological
Engineering，Hechi University，Hechi Guangxi 546300，China;5Shandong Aifudi Biological Technology Company Limit-
ed，Jining Shandong 272000，China)
Abstract In this study，mulberry buds rich in 1-deoxynojirimycin(DNJ)were processed into curly-shaped and flat-shaped
green teas． DNJ leaching amounts of these two forms of green tea at different soaking temperatures for different soaking
time were determined，and the hypoglycemic effects of two tea infusions were evaluated through animal experiment to ana-
lyze the effects of tea leaf shape and soaking method of
mulberry leaf tea on healthcare function． The results
indicated that the mass fraction of DNJ in curly-shaped tea
and flat-shaped tea was 0. 113 2% and 0. 152 3%，re-
spectively． The soaking temperature had no significant
effect on DNJ leaching amount of curly-shaped tea，while
the DNJ leaching amount of flat-shaped tea was the
highest at 100 ℃． The leaching amount of DNJ in curly-
shaped tea was significantly higher than that in flat-shaped
964 蚕 业 科 学 2015;41 (5)
tea，and reached a high level (0. 39 mg /g)at 9 min． In addition，the leaching amounts of flavonoid，polyphenol，free ami-
no acid and soluble sugar in tea infusion of curly-shaped tea were high as well． These two forms of mulberry bud green tea
could significantly reduce the concentrations of fasting and postprandial blood glucose and glycated hemoglobin in diabetic
model mice，and the effect of curly-shaped tea was more obvious． The above results indicated that although DNJ content in
curly-shaped mulberry bud green tea was lower than that in flat-shaped mulberry bud green tea，curly-shaped mulberry
bud green tea had the higher DNJ leaching speed and leaching content of active substances including DNJ，and could ef-
fectively reduce the level of blood sugar in diabetic model mice． It was suggested that curly-shaped mulberry bud green
tea is a better hypoglycemic healthcare food．
Keywords Green tea prepared with mulberry buds;Shape;Soaking method;1-Deoxynojirimycin;Hypoglycemic;Mouse
现代药理学研究证明，桑叶中富含的 1-脱氧野尻
霉素(1-deoxynojirimycin，DNJ)具有显著的降
血糖功效，且 DNJ 的含量在一定范围内与降血糖
功效呈现明显的正相关关系［1－2］。研究表明，采收
季节［3－4］、种植区域［5］、桑品种［6］、叶位［7］以及栽
植环境的光照［8］和桑园肥培管理［9］等因素均对桑
叶中的 DNJ 含量有较大影响，尤其桑叶中的 DNJ
含量随着叶位的降低而逐渐减少［10］，所以桑树嫩
芽是生产具有降血糖保健功效的桑叶绿茶的优质
原料。近年来陆续报道了加工工艺对桑叶茶营养
与感官品质影响的研究结果［11－13］，但关于桑叶绿
茶的加工形状和浸泡方法对桑叶绿茶中重要活性
物质 DNJ的浸出效果以及茶汤的降血糖功效的影
响，迄今尚未见报道。为了开发具有较好降血糖
保健功效的桑叶绿茶，我们将富含 DNJ 的桑树嫩
芽加工成卷曲形和扁平形 2 种桑芽绿茶，并检测
分析不同浸泡温度和浸泡时间对 2 种形状桑芽绿
茶中 DNJ浸出量的影响以及不同形状桑芽绿茶茶
汤的降血糖功效。
1 材料与方法
1. 1 材料及主要试剂和仪器
供试桑品种为川-826，6 年生植株。2014 年 4 月
2日，在四川省农业科学院蚕业研究所科研基地桑园
采摘桑树枝条上的侧芽，芽型为一芽一叶。SPF 级
KM系雄性小鼠，购自泰邦生物制品有限公司。
1-deoxynojirimycin-HCl(DNJ-HCl)和四氧嘧啶
均为美国 Sigma 公司产品，9-fluorenylmethyl chloro-
formate(FMOC-Cl)为美国 Fluca公司产品。
高效液相色谱系统(美国 Waters 公司) ，包括
Waters 600控制器和压力泵、Waters 2489 紫外检测
器和 Waters 在线脱气机;分析柱为 Phenomenex
Luna C18(2)柱(250 mm×4. 6 mm，5 μm) ，保护柱为
C18保护柱(4 mm×3. 0 mm) ，均为美国 Phenomenex
公司产品。
1. 2 桑芽绿茶制作的基本工艺流程
1. 2. 1 扁平形桑芽绿茶制作流程 将采摘的新鲜
桑芽摊晾(5 h)→蒸青(100 ℃，35 ～ 40 s)→理条
(100 ℃，9～11 min)→辉锅(80 ℃，25～30 min)。
1. 2. 2 卷曲形桑芽绿茶制作流程 将采摘的新鲜
桑芽摊晾(5 h)→炒青(240～260 ℃，4～5 min)→揉
捻(冷揉，轻→重→轻，30 ～ 35 min)→整形(100 ℃，
20～25 min)→烘焙(70 ℃，25～30 min)。
1. 3 桑芽绿茶的浸泡方法
1. 3. 1 浸泡温度 分别采用 80、90、100 ℃的纯净
水浸泡 2种形状的桑芽绿茶，每组试验用 200 mL纯
净水浸泡 4 g桑芽绿茶，恒温水浴锅稳定杯中水温，
浸泡 10 min 后用 200 目筛过滤，测定各组茶汤中
DNJ的浸出量(质量比)。DNJ浸出量(mg /g)= DNJ
浸出质量(mg)/桑芽绿茶质量(g)。
1. 3. 2 浸泡时间 分别取 2种形状的桑芽绿茶 4 g
浸泡于盛有 200 mL 100 ℃纯净水的水杯中，分别浸
泡 3、6、9、12、20 min 后用 200 目筛过滤，测定各组
茶汤中 DNJ的浸出量。
1. 4 桑芽和桑芽绿茶及茶汤中的活性成分测定
1. 4. 1 DNJ 测定 将新鲜桑芽 60 ℃烘干，粉碎后
过 200 目筛待测;将 2 种形状的桑芽绿茶粉碎后过
200目筛，留样待测。称取供试样品(桑芽或桑芽绿
茶的粉末)30 mg 置于 3 mL 离心管中，加入 0. 05
mol /L HCl 1 mL，涡旋振荡 1 min 后进行 40 min 超
声波处理，12 000 r /min 离心 30 min，收集上清液，
沉淀按上述步骤再次抽提，合并 2次上清液，定容至
2 mL，即得供试样品的 DNJ提取液。取 140 μL DNJ
提取液(或茶汤) ，依次加入 0. 4 mol /L 硼酸钾缓冲
液(pH= 8. 5)169 μL 和 5 mmol /L FMOC-Cl 250 μL
后，25 ℃条件下反应 20 min，最后加入 1 mol /L甘氨
第 5期 殷 浩等:2种形状桑芽绿茶中的 1-脱氧野尻霉素浸出量及降血糖功效 965
酸溶液 25 μL和 1%乙酸溶液 66 μL终止反应，蒸馏
水定容至 707 μL，用孔径 0. 2 μm的尼龙膜过滤，即
得 DNJ络合反应后的待测液(DNJ-FMOC)。色谱条
件为:流动相中乙腈与 0. 1%乙酸的体积比为 11 ∶
16，流速 1. 0 mL /min，DNJ待测液进样量 20 μL。分
析软件为 Dionex chromeleox 工作站，采用外标法［9］
定量。
1. 4. 2 其他活性成分的测定 游离氨基酸测定参
照 GB /T 5009. 124—2003《食品中氨基酸的测定》，
多酚类物质测定参照 GB /T 8313—2008《茶叶中茶
多酚和儿茶素类含量的检测方法》，可溶性糖测定
参照 GB /T 6194—1986《水果、蔬菜可溶性糖测定
法》，黄酮类物质测定参照文献［14］的方法。
1. 5 茶汤降血糖作用的动物试验
1. 5. 1 糖尿病模型小鼠的诱导 参照文献［15］中
的方法。小鼠禁食 16 h 后，以 60 mg /kg 的剂量从
尾部静脉注射四氧嘧啶溶液，1 周后尾部取血测定
空腹血糖值(fast blood glucose，FBG) ，FBG达到16～
19 mmol /L的即为糖尿病模型小鼠［14］。
1. 5. 2 试验设置及取样方法 共设 4个试验组，每组
9只小鼠，自由取食与饮水。每组试验 3个重复。正常
组:正常小鼠，以纯净水为水源。模型组:糖尿病模型
小鼠，以纯净水为水源。卷曲形桑茶茶汤添食组:糖尿
病模型小鼠，以 4 g 桑芽绿茶用 100 ℃纯净水 200 mL
浸泡 20 min后 200目过滤的茶汤为水源。扁平形桑茶
茶汤添食组:糖尿病模型小鼠，以 4 g 桑芽绿茶用 100
℃纯净水 200 mL浸泡 20 min后 200目过滤的茶汤为
水源。试验 4周，将小鼠禁食 16 h后尾部静脉取血，测
定其 FBG 值和糖化血红蛋白(glycated hemoglobin
A1c，HbA1c);继续饲养小鼠 1周，在进食 2 h后将小鼠
断头取血，测定其餐后血糖(postprandial blood glucos，
PBG)值。每次取样为每组 3只小鼠的混合血样。
1. 5. 3 小鼠血糖指标测定 采用血糖葡萄糖氧化
酶法［16］测定 FBG和 PBG，用亲和微柱层析法［16］测
定 HbA1c。
1. 6 数据处理
采用 EXCEL2003和 SAS 9. 0软件分析试验数据。
2 结果与分析
2. 1 2种形状桑芽绿茶中的 DNJ含量
供试桑品种桑芽中的DNJ含量较高，干物中DNJ
的质量分数为 0. 164 8%±0. 003 7%，是制作具有降血
糖功效的桑芽绿茶的优质原料。加工的扁平形桑芽
绿茶中的 DNJ含量(干物中的质量分数为 0. 152 3%±
0. 003 0%)显著低于桑芽，而显著高于卷曲形桑芽绿
茶(干物中的质量分数为 0. 113 2%±0. 004 8%)。由
此可见，加工形状对桑芽绿茶中的 DNJ 含量影响较
大。扁平形桑芽绿茶与卷曲形桑芽绿茶中的 DNJ 含
量分别比桑芽降低了 7. 58%和 31. 31%。分析原因可
能是:绿茶制作过程中的高温，尤其是卷曲形茶的杀
青温度高达 260 ℃，对 DNJ 的破坏较大，导致其 DNJ
含量明显下降;在制茶过程中需要不断对桑芽加热和
摊晾，也在一定程度上损失了桑芽中的 DNJ［17］;卷曲
形茶经过揉捻后，部分内容物被释放出来，使 DNJ 暴
露于空气中，也会使其受到破坏［18］。
2. 2 浸泡方法对 2种形状桑芽绿茶中 DNJ 浸出量
的影响
2. 2. 1 浸泡温度的影响 在本试验设置的茶叶浸
泡温度范围内，卷曲形桑芽绿茶的 DNJ 浸出量显著
高于扁平形桑芽绿茶，2种形状桑芽绿茶中的 DNJ最
大浸出量分别为 0. 41 mg /g和 0. 20 mg /g(图 1)。卷
曲形桑芽绿茶的 DNJ浸出量在 3种浸泡温度下没有
显著差异;扁平形桑芽绿茶的 DNJ浸出量在 80 ℃和
90 ℃的条件下没有显著差异，但均显著低于 100 ℃
条件下的浸出量。分析认为，卷曲形桑芽绿茶经过揉
捻，破坏了桑芽的胞壁组织，使部分 DNJ 快速释放出
来，所以其浸出量较大;而扁平形桑芽绿茶仅经过了
加棒滚压成形，对桑芽胞壁组织的破坏较低，导致其
DNJ浸出量较少，100 ℃水温能更有效地浸提扁平形
桑芽绿茶中的 DNJ。
2. 2. 2 浸泡时间的影响 在本试验设置的茶叶浸
泡时间范围内，卷曲形桑芽绿茶的 DNJ 浸出量高于
扁平形桑芽绿茶，2 种形状桑芽绿茶在 100 ℃水温
下浸泡 20 min 时，其 DNJ 浸出量分别为 0. 41 mg /g
和 0. 24 mg /g(图 2)。随着浸泡时间的延长，卷曲形
桑芽绿茶的 DNJ浸出量显著增加，在浸泡 9 min 时
即达到 0. 39 mg /g，之后 DNJ 的浸出量没有显著差
异;而扁平形桑芽绿茶的 DNJ 浸出量也随浸泡时间
显著增加，在浸泡 20 min时达到最大。这也可能与
卷曲形桑芽绿茶生产中的揉捻工艺有关，使其在浸
泡前期 DNJ即快速浸出;而扁平形桑芽绿茶成形处
理时桑芽的损伤较小，且沸水对桑叶中 DNJ 的浸提
速度较慢，所以 DNJ浸出量随着浸泡时间的延长而
增加。
966 蚕 业 科 学 2015;41 (5)
1 g桑芽绿茶用 50 mL水浸泡，浸泡时间 10 min。
不同小写字母表示同一种桑芽绿茶不同浸泡
处理组间的差异显著(P＜0. 05) ，图 2同。
1 g green tea prepared with mulberry buds was
soaked in 50 mL water for 10 min．
Different lowercase letters indicate significant differences
between different treatment groups of the same green tea
prepared with mulberry buds (P＜0. 05)． The same in Fig． 2．
图 1 浸泡水温对不同形状桑芽绿茶中DNJ浸出量的影响
Fig. 1 Effect of soaking temperature on DNJ leaching
amount of different forms of green tea prepared
with mulberry buds
1 g桑芽绿茶用 50 mL水浸泡，浸泡温度 100 ℃。
1 g green tea prepared with mulberry buds
was soaked in 50 mL water at 100 ℃ ．
图 2 浸泡时间对不同形状桑芽绿茶中DNJ浸出量的影响
Fig. 2 Effect of soaking time on DNJ leaching
amount of different forms of green tea
prepared with mulberry buds
2. 3 2种形状桑芽绿茶茶汤中的主要活性成分含量
从表 1可见，用卷曲形桑芽绿茶浸泡的茶汤中，
DNJ、游离氨基酸、黄酮类化合物、总多酚和可溶性
糖的含量均显著高于扁平形桑芽绿茶浸泡的茶汤。
由此可见，将桑芽制作成卷曲形绿茶更能有效地释
放出桑芽中的主要功能活性成分。
表 1 2种形状桑芽绿茶茶汤中的主要活性成分含量比较
(x±s，n= 3)
Table 1 Comparison of main active ingredient contents in tea in-
fusion of different forms of green tea prepared with mulberry buds
(x±s，n=3)
［质量浓度 / (mg·L－1) Mass concentration］
组分
Ingredient
卷曲形桑芽绿茶
Curly-shaped green tea
扁平形桑芽绿茶
Flat-shaped green tea
1-脱氧野尻霉素
1-Deoxynojirimycin 8. 13±0. 11
a 4. 65±0. 07 b
游离氨基酸
Free amino acid 334. 80±11. 88
a 150. 65±5. 30 b
总多酚
Total polyphenols 302. 68±16. 96
a 180. 55±10. 11 b
可溶性糖
Soluble sugar 755. 68±6. 54
a 435. 10±3. 75 b
黄酮类化合物
Flavanoids 211. 43±6. 12
a 105. 70±3. 04 b
1 g桑芽绿茶用 50 mL水浸泡，浸泡温度 100 ℃，浸泡时间 20 min。
不同小写字母表示组间差异显著(P＜0. 05)。
1 g green tea prepared with mulberry buds was soaked in 50 mL water
for 20 min at 100 ℃ ． Different lowercase letters indicate significant
difference between different treatment groups (P＜0. 05)．
2. 4 2种形状桑芽绿茶茶汤对糖尿病模型小鼠血
糖浓度的影响
不同试验组小鼠的空腹血糖(FBG)、餐后血糖
(PBG)和糖化血红蛋白(HbA1c)浓度均呈现一致
的变化趋势，3 项指标的检测结果在不同试验组间
均存在显著差异(图 3) ，3 项指标数据由高到低依
次为模型组、扁平形桑茶茶汤添食组、卷曲形桑茶
茶汤添食组、正常组。卷曲形桑茶茶汤添食组与扁
平形桑茶茶汤添食组的小鼠的 FBG、PBG、HbA1c分
别比模型组下降了 43. 11%和 18. 74%、37. 14%和
24. 45%、35. 01%和 13. 81%。由此可见，饮用卷曲
形桑芽绿茶茶汤有较显著的降血糖功效，分析可能
是由于卷曲形桑芽绿茶茶汤中 DNJ 和其他活性成
分的含量较高，所以降血糖功效显著高于扁平形桑
芽绿茶茶汤。
第 5期 殷 浩等:2种形状桑芽绿茶中的 1-脱氧野尻霉素浸出量及降血糖功效 967
1—正常组，2—模型组，3—卷曲形桑茶茶汤添食组，4—扁平形
桑茶茶汤添食组。不同小写字母表示组间差异显著(P＜0. 05)。
1—Normal group，2—Model group，
3—Treatment group with tea infusion of curly-shaped tea，
4—Treatment group with tea infusion of flat-shaped tea group．
Different lowercase letters indicate significant different between
different treatment groups (P＜0. 05)．
图 3 糖尿病模型小鼠添食 2种形状桑芽绿茶茶汤后血液
中的 FBG、PBG和 HbA1c含量变化
Fig. 3 Content changes of FBG，PBG and HbA1c in
blood of diabetic mice after being fed with
tea infusion of different forms of green
tea prepared with mulberry buds
3 结论
采摘春季桑芽加工成扁平形桑芽绿茶和卷曲
形桑芽绿茶，测定扁平形桑芽绿茶中的 DNJ 含量显
著高于卷曲形桑芽绿茶。浸泡温度对卷曲形桑芽
绿茶中的 DNJ浸出量没有显著影响，但扁平形桑芽
绿茶以 100 ℃水温浸泡时的 DNJ 浸出量最大;卷曲
形桑芽绿茶浸泡 9 min 后 DNJ 的浸出量即可达到
0. 39 mg /g，且显著高于扁平形桑芽绿茶;卷曲形桑
芽绿茶茶汤中的 DNJ、黄酮类、多酚类、游离氨基酸
和可溶性糖含量均显著高于扁平形桑芽绿茶。2 种
形状桑芽绿茶均具有显著降低糖尿病模型小鼠血
糖指标的作用。虽然卷曲形桑芽绿茶中的 DNJ 含
量低于扁平形桑芽绿茶，但由于加工工艺的原因，
卷曲形桑芽绿茶更能有效地释放出桑芽中的主要
功能活性成分，因而降血糖功效更为显著。
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