全 文 ：HPLC法测定祖师麻片中祖师麻甲素的含量
王晓云　邸立杰　刘静洁 (河北省秦皇岛市药品检验所　066004)
摘要　HPLC法测定祖师麻片中祖师麻甲素的含量 。选用 Kromasil C18柱;流动相为甲醇-0.5%醋酸 (30∶
70);检测波长为 327nm 。祖师麻甲素进样量在 0.234 ～ 2.110μg 范围内其峰面积与进样量呈良好的线性关
系。回归方程:Y=761444.84X-81.75 , r=1.0000。平均回收率为98.09%(n=10), RSD =0.57%。方法
简便 、准确 、重现性好。
关键词　HPLC　祖师麻片　祖师麻甲素
中图分类号:R927.2　　文献标识码:A　　文章编号:1002-7777 (2003)04-0232-02
Content Determination of Daphnetin in Zushima Tablets by HPLC
Wang Xiaoyun , Di Lijie and Liu Jingjie(Institute for Drug Control of Qinhuangdao City , Hebei Province , 066004)
ABSTRACT　An HPLC method is developed for the determination of daphnetin in zushima tablets.The analysis was
carried out on a Kromasil C18 column.The mobile phase was methanol-0.5% acetic acid(30∶70)and the detection
wavelength was 327nm.The standard curves is linear between 0.234 ～ 2.110μg.The average recovery was 98.09%.
The method is simple , accurate and reproducible.
KEYWORDS　HPLC;zushima tablet;daphnetin
　　祖师麻片为治疗风湿性疾病的中成药 , 是由祖
师麻浸膏粉经加工制成的片剂 。卫生部药品标准[ 1]
采用 TLC 法展开后 , 刮取斑点 , 再测紫外吸收 ,
计算出祖师麻甲素的含量 , 该法引入误差大 , 操作
繁琐 、 费时 。本文采用 HPLC 法进行含量测定 , 结
果表明 , 该法准确 、 可靠 、简便快速。
1　仪器与试剂
SP-8810型泵 , SP100检测器 , TL9900色谱工
作站 。
祖师麻甲素对照品 (中国药品生物制品检定
所 , 批号:0900-200001)。甲醇为分析纯和色谱
纯 , 醋酸为分析纯。样品祖师麻片及阴性对照样品
(秦 皇岛 市山 海关 制药 厂 , 批号:20010511 ,
20010208 , 20010606)。
2　方法与结果
2.1　色谱条件
色谱柱:Kromasil C18 (5μ, 200mm ×4.6mm);
流动相:甲醇 -0.5%醋酸 (30∶70);检测波长
327nm;柱温:30℃;流速:1.0ml·min-1 。理论塔
板数按祖师麻甲素计不低于 4000。对照品 、 样品 、
阴性样品色谱图见图 。
图　祖师麻片HPLC 色谱图
a.对照品;b.样品;c.阴性样品;1.祖师麻甲素
2.2　标准曲线的绘制
精密称取五氧化二磷减压干燥 4小时的祖师麻
甲素对照品 23.44mg , 置 100ml容量瓶中 , 加 85%
甲醇[ 2] 溶解并稀释至刻度 , 摇匀 , 精密吸取 1 、 3 、
5 、 7 、 9ml , 分别置 10ml容量瓶中 , 加 85%甲醇稀
·232· 中国药事 2003年第 17卷第 4期
DOI :10.16153/j.1002-7777.2003.04.020
释至刻度 , 摇匀 , 进样 10μl , 测得峰面积 , 以点样
量 x (μg)对峰面积 Y 作图 , 回归方程为 Y =
761444.84X-81.75 (r=1.0000)。结果表明 , 祖师
麻甲素进样量在 0.234 ～ 2.110μg 范围内与其峰面
积呈良好的线形关系 。
2.3　对照品与供试品溶液的制备
对照品溶液:精密吸取祖师麻甲素的 85%甲
醇溶液 (234.4μg·ml-1)5ml , 置 10ml 容量瓶中 ,
加85%甲醇至刻度 , 摇匀即可。供试品溶液的制
备:取供试品 20片 , 除包衣 , 精密称定重量 , 研
匀 , 精密称取 0.6g , 置具塞的三角烧瓶中 , 精密
加入 85%甲醇 50ml , 称重 , 超声处理 20分钟 , 放
冷 , 用 85%甲醇补足减失的重量 , 摇匀 , 0.45μm
微孔滤膜滤过 , 即得 。
2.4　精密度试验
配制祖师麻甲素浓度为 112.7μg·ml-1的对照品
溶液 , 按上述色谱条件重复进样 5 次 , RSD 为
1.04%。
2.5　稳定性试验
取供试品 10μl进样 , 分别在 0 、 2 、 4 、 6 、 8小
时测定其含量 , RSD 为 0.75%, 溶液在 8小时内
祖师麻甲素含量基本不变 。
2.6　重复性试验
按供试品溶液制备方法制备同一批号样品 5
份 , 依上述色谱条件测其祖师麻甲素含量 , RSD
为0.68%。
2.7　回收率试验
精密称取已知含量 [ 本品含祖师麻甲素为
1.254%(g·g-1)] 的祖师麻片适量共 5份 , 分别
精密加入祖师麻甲素对照品一定量 , 按供试品溶液
制备方法及上述色谱条件测定 , 计算回收率 , 结果
见表1:
表 1　回收率试验结果 (n=2)
样品中
含量(mg)
对照品加
入量(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均值
(%)
RSD
(%)
3.880 3.381 7.173 97.40
3.447 3.381 6.777 98.49
3.452 3.381 6.790 98.73 98.09 0.57
3.314 3.381 6.633 98.17
3.387 3.381 6.689 97.66
2.8　样品测定
按上述供试品溶液制备方法制备样品溶液 , 依
法测定 , 计算 , 并与部标方法比较 , 结果见表 2。
表 2　样品中祖师麻甲素含量测定 (mg ·片-1)
批　号 HPLC法(n=3) TLC-UV法(n=2)
20010208 3.50 3.37
20010606 4.12 4.01
20010511 3.54 3.29
3　讨论
采用部标方法测含量 , TLC法展开后出现四个
明显的黄色条斑 , 祖师麻甲素处在两个斑点之间 ,
不易刮取 , 且标准中未规定用标准品作对照 , 易引
入误差使测得结果欠准确。
HPLC法提取方法简便 , 分离效果好 。
参考文献
1 卫生部新药转正药品标准.第八册.1996:7
2 管玉珠.祖师麻中瑞香素提取工艺比较.兰州医学院学报 ,
2000 , 26 (2):9
《中药品种保护条例》 有望于年内出台
　　国家药监局药品注册司司长曹文庄向记者透露 , 今年 , 国家药监局将着手开展 《中药品种保护条例》 的全面修订工作 ,
并争取年内出台。
《中药品种保护条例》 颁布于 1992 年 , 其实施将我国传统的医药管理模式纳入了知识产权保护的范畴 , 使各地中药企
业竞相办厂 、 低水平重复和情况得以遏制 , 保护和调动了生产企业开发新药的积极性 , 强化了药品质量意识和品牌意识。
自 《中药品种保护条例》 实施以来 , 年产值过亿元的中药保护品种逐年增多。但是 , 随着我国加入WTO 和 《药品管理法》
及其 《实施条例》 的颁布 , 《中药品种保护条例》 已不再适应新形势的要求 , 从推动中药产业健康发展的大局出发 , 对 《条
例》 进行系统的修订已是势在必然。国家药监局有关人士指出 , 今年国家药监局将与国务院法制办通力配合 , 明确 《条例》
的修订原则 , 上半年提出比较成熟的修订稿 , 争取年内出台。
·233·中国药事 2003年第 17卷第 4期