全 文 ：【实验研究】
野生鸭儿芹毒性及致突变性研究
高敏 , 刘佳 , 俞红 , 王雨 , 阮海星 , 向红 , 朱彩霖 , 吴克枫
[关键词] 　鸭儿芹;毒性;致突变性
[中图分类号] S567　R994.4　 [文献标识码] B　 [文章编号] 　1006-4028(2005)04-504-02
贵州省疾病预防控制中心　(贵州　贵阳　550004)
作者简介:高敏 , 女 , 食品毒理。
　　鸭儿芹(Cryptaenia japonica)又称三叶芹 、 野芹
菜 、大鸭脚板 , 为伞形科植物 , 生长在林阴潮湿处 ,
可全草入药 , 功用:消炎 、 解毒 、 活血 、 消肿;具
有抗感染 、 抗病毒等作用[ 1] ;近年来人们食用该野
生植物有较快增加趋势 , 但未见有关鸭儿芹毒理学
安全性评价报道 。为了探讨和分析野生鸭儿芹毒理
学安全性评价 , 进行本次研究 。
1　材料与方法
1.1　材料
1.1.1　样品的制备　将郊外采集野生鸭儿芹清理 、
去泥 、 冲洗 、阴干 , 匀浆后煮沸过滤 , 1∶4浓缩4 ℃
冰箱保存 。
1.1.2　动物来源　昆明种 2级小鼠由贵阳医学院实
验动物中心提供 , 合格证号:SCXY(黔)2002 -
0001 , 实验动物使用许可证号:SYXK(黔)2003-
0003 。
1.1.3　菌株及培养条件　菌株采用经鉴定生物学活
性符合鼠伤寒沙门菌突变型的菌株 TA97 、 TA98 、
TA100 、 TA102 , 于 37 ℃振荡培养 10 h后备用[ 2] 。
1.1.4　S9 制备　用经多氯联苯诱导的大鼠肝匀浆
(S9)并加相应的辅助因子 , 配制成体外代谢活化系
统[ 2] 。
1.1.5　试剂　环磷酰胺(CP)注射针剂由上海华联制
药有限公司提供。纯度为 98%甲基甲烷磺酸酯
(MMS)敌克松和 2-乙酰氨基芴(2-AAF)均由美国
Sigma公司生产。
1.2　方法
1.2.1　小鼠急性毒性试验　用昆明种 2级小鼠 20
只 , 体重 20±2 g , 雌雄各半 , 试验剂量为 80 g/kg 、
24 h 内经口 1次灌胃 , 连续观察 2 周 , 记录中毒表
现及死亡情况 。
1.2.2　小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验　用昆明种
2级小鼠 50只 , 体重 25 ～ 30 g , 雌雄各半 , 按体重
随机分为 5组 , 试验设阴性对照组 、 阳性对照组和 3
个剂量组 , 试验剂量分别为 40 、 20 、 10 g/kg , 阴性
对照组灌食蒸馏水 , 阳性对照组腹腔注射 40 mg/kg
CP , 试验组灌食不同剂量鸭儿芹 , 间隔 24 h 2 次灌
胃 , 各组在第 2次灌胃后 6 h颈椎脱臼处死动物 , 取
胸骨骨髓常规制片 , Giemsa染色在油镜下观察每组
5 000个嗜多染红细胞中微核数 , 用千分率表示 , 结
果用 SPSS10.0分析统计软件进行卡方检验 。
1.2.3　小鼠精子畸形试验　用雄性昆明种 2级小鼠
35只 , 体重 30±3 g , 按体重随机分为 5组 , 试验设
阴性对照组 、 阳性对照组和 3个剂量组 , 试验剂量
分别为 40 、 20 、 10 g/kg , 阴性对照组灌食蒸馏水 ,
阳性对照组腹腔注射 40 mg/kg CP , 试验组灌食不同
剂量鸭儿芹 , 每天 1次连续给受试物 5 d , 于首次给
受试物后第 35 d 处死动物 , 取出附睾常规制片 , 镜
下观察每组5 000小鼠精子中畸形数 , 计算畸变率 ,
用百分率表示 , 结果用 SPSS10.0分析统计软件进行
卡方检验 。
1.2.4　Ames试验　采用鼠伤寒沙门菌致突变的平
板渗入法 , 将鉴定符合试验要求的 4株细菌 TA97 、
TA98 、 TA100 、 TA102进行试验。鸭儿芹试验剂量为
8.0 、 40.0 、 200.0 、 1 000.0 、 5 000.0 μg/皿 , 以
MMS 和敌克松为非代谢活化(不加 S9)阳性对照 , 2
-AAF 为代谢活化(加 S9)阳性对照 , 同时做 3 个平
行样 。计算诱发回变菌落数/自发回变菌落数。
504 预防医学情报杂志 2005年第 21卷第 4期　JPrev MedInf ,Aug.2005 ,Vol.21 ,No.4
2　结果及讨论
2.1　急性毒性试验　在连续 2周的观察期内未见实
验动物出现中毒表现和死亡情况 , 最大耐受量>80
g/kg , 按急性毒性分级标准属无毒范围 。
2.1.2　小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验　结果见表
1 , 阳性对照组微核率与阴性对照组比较 , 差异有统
计学意义(χ2♂=247.361 、 χ2♀=210.150 , P<0.05);
鸭儿芹各剂量组微核率与阴性组比较差异无统计学
意义(χ2♂=1.113 、 χ2♀=0.283 , P >0.05), 本试验
结果为阴性 。该试验是反应真核细胞染色体受损情
况指示 , 其试验结果阴性表明鸭儿芹对细胞染色体
不会造成损伤。
2.1.3　小鼠精子畸形试验　结果见表 1 , 阳性对照
组精子畸形率与阴性对照组比较 , 差异有统计学意
义(χ2=404.901 , P <0.01);鸭儿芹各剂量组精子
畸形率与阴性对照组比较 , 差异无统计学意义(χ2 =
0.595 , P >0.05), 本试验结果为阴性。该试验可检
测受试物对雄性生殖细胞有无致突变作用 , 本试验
结果阴性 , 说明了鸭儿芹对雄性生殖细胞没有致突
变作用。
2.1.4　Ames试验 　结果见表 2 , 在加入与不加入
S9混合液的各剂量组测试菌株回变菌落数均未超过
各菌株自发回变菌落数的 2 倍 , 但阳性对照组回变
菌落数均超过各菌株自发回变菌落数的 2 倍以上 ,
其试验结果为阴性 。该试验是反应受试物对原核细
胞有无基因突变 , 本试验结果说明鸭儿芹不会造成
原核细胞基因突变 。
综合以上急性毒性试验结果和致突变性检测结
果 , 鸭儿芹为无毒范围 , 也未见致突变作用 , 符合
食用安全要求 。
表 1　鸭儿芹对小鼠骨髓细胞微核率和精子的影响
分组/ g·kg-1 雄性(n=5) 雌性(n=5)微核数 微核率/ ‰ 畸形精子数 畸形率 微核数 微核率/ ‰
10.0 11 2.0 109 2.18 9 1.8
20.0 8 1.6 101 2.02 9 1.8
40.0 10 2.0 111 2.22 10 2.0
蒸馏水 7 1.4 110 2.20 11 2.2
环磷酸胺 261 52.2 640 12.80 236 47.2
表 2　鸭儿芹对 TA 平均回变菌落数的影响(x±s)
组别
/μg·皿-1
TA97 TA98 TA100 TA102
+S 9 -S 9 +S9 -S9 +S9 -S9 +S 9 -S9
自发回变 142±25 160±19 34±6 35±5 127±24 142±27 268±13 289±12
8 148±29 128±15 32±5 34±10 146±12 153±14 264±33 278±18
40 162±15 153±16 36±6 34±5 150±11 143±22 270±21 284±7
200 140±20 159±16 37±6 36±5 128±15 139±21 299±21 295±14
1 000 142±19 139±14 35±8 28±7 135±17 144±13 279±14 283±20
5 000 157±25 153±21 32±5 33±10 151±22 124±21 295±14 278±14
阳性对照 4 236±270 1 697±179 1 999±191 3 247±202 4 176±433 3 118±199 6 578±455 950±70
3　参考文献
[ 1] 江苏新医学院编.中药大辞典[ M].上海:上海科学技术
出版社 , 1977:1842-1843.
[ 2] 中华人民共和国卫生部.保健食品检验与评价技术规范
[ S] .北京:中国卫生部卫生法制监督司 , 2003:177-
203.
(收稿日期:2005-02-04)
505预防医学情报杂志 2005年第 21卷第 4期　JPrev M edInf ,Aug.2005 ,Vol.21 ,No.4