全 文 :华西药学杂志W CJ· PS 2008, 23(5):546 ~ 547
基金项目:长白山生物功能因子省部共建教育部重点实验室开放课题 [ 2006071] ;延边大学教育基金会资助项目 [延大研科合字(2007)第 11号 ]
作者简介:姜丽君 ,女 ,正攻读天然药物专业的硕士学位。
*通讯作者(Correspondentauthor)
柞树皮水提浸膏对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用
姜丽君 1 ,姚大雷 1 ,徐 铁1 ,刘 宇 1 ,朴锦花1 ,李 镐 1, 2*
(1.延边大学药学院 , 吉林 延吉 133000;2.延边大学长白山天然资源和功能分子省部共建教育部重点实验室 , 吉林 延吉
133002)
摘要:目的 研究柞树皮水提浸膏对 CCl4所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法 用 CCl4造小鼠急性肝损伤模型 , 灌胃给
药 , 用比色法测定小鼠血清中天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性 、肝组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)
的活性和丙二醛(MDA)的含量。结果 柞树皮水提浸膏能显著降低 CCl4所致小鼠各组血清中 AST、ALT活性的升高(P<
0.05), 同时升高肝组织中 GSH-Px的活性 ,降低肝组织中 MDA的含量(P<0.05)。结论 柞树皮水提浸膏对 CCl4所致小鼠
急性肝损伤具有一定的保护作用。
关键词:柞树皮;急性肝损伤;保护作用
中图分类号:R96 文献标识码:A 文章编号:1006-0103(2008)05-0546-02
ProtectiveeffectofthestembarkofQuercusmongolicaagainstacuteliverinjuryinmice
JIANGLi-jun1 , YAODa-lei1 , XUTie1 , LIUYu1 , PIAOJin-hua1 , LIGao1, 2*
(1.ColegeofPharmacy, YanbianUniversity, Yanji133000, China;2.KeyLaboratoryofNaturalResourcesoftheChangbaiMountain
andFunctionalMolecules, YanbianUniversity, Yanji133002, China)
Abstract:OBJECTIVE ToinvestigatetheprotectiveefectofthestembarkofQuercusmongolicaFisch.againstcarbontetrachloride
inducedacuteliverinjuryinmice.METHODS Theacutehepaticinjurymodelswerepreparedbythesubcutaneousinjectionofcar-
bontetrachlorideinmice.TheactivitiesofALTandASTintheserum, thecontentofMDA, andtheactivityofGSH-Pxinthelivercell
wereinvestigatedbycolorimetricmethod.RESULTS AqueousextractofthestembarkQuercusmongolicasignificantlydescreasedthe
levelsofALTandASTintheserumandthecontentofMDA, butimprovedtheactivityofGSH-Pxintheliver.CONCLUSION Itis
revealedthatQ.mongolicaaqueousextractcouldpreventtheacuteliverinjuryinducedbyCCl
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inmicebyitsantioxidationactivity.
Keywords:BarkofQuercusmongolicaFisch.;Liverinjury;Protectiveefect
CLCnumber:R94 Documentcode:A ArticleID:1006-0103(2008)05-0546-02
柞树皮为壳斗科栎属植物蒙古栎 Quercusmon-
golicaFisch.的树皮 ,有清热利湿 、解毒的作用 ,用于
治疗细菌性痢疾 、急性胃肠炎 、小儿消化不良 、黄疸 、
支气管炎 、痔疮等[ 1] 。作者曾通过体外筛选证实柞
树皮水提浸膏清除二苯代苦味酞自由基(DPPH)的
能力强 (工作浓度 12.5 μg·ml-1时 , 清除率为
42.6%)。因此 ,特研究了柞树皮水提浸膏对 CCl4
所致小鼠急性肝损伤的保护作用 ,并对机理进行了
初步探讨 ,为进一步开发应用柞树皮提供一些实验
依据。
1 实验部分
1.1 药物 、动物 、试剂与仪器
柞树皮采自吉林省长白山一带 ,经延边大学药
学院吕慧子副教授鉴定为真品。昆明种小鼠(延边
大学医学部动物科)60只 , ♀♂兼用 ,体重 20±2 g。
水飞蓟宾(市售);丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬
氨酸转氨酶(AST)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-
Px)和丙二醛(MDA)试剂盒(南京建成生物工程研
究所);其他试剂为国产分析纯 。 722型分光光度计
(中国厦门分析仪器厂);旋转蒸发仪(上海荣亚生
化仪器厂)。
1.2 方法与结果
1.2.1 柞树皮浸膏的制备 0.5kg柞树皮切碎后 ,
加 8倍量蒸馏水加热回流提取(1 h×3),合并滤液 ,
减压浓缩 ,得 135 g柞树皮浸膏 。
1.2.2 分组 、给药和样品的制备 将小鼠按随机数
字表法分为正常对照组 、模型对照组 、阳性对照组及
柞树皮水提浸膏高﹑中﹑低剂量给药组 。柞树皮给
药组分别 ig2.0、1.0、0.5g·kg-1·d-1柞树皮水提浸
膏;阳性对照组 ig0.5 g·kg-1水飞蓟宾;正常对照组
和模型对照组 ig等体积生理盐水 ,连续 5 d。末次
DOI :10.13375/j.cnki.wcjps.2008.05.015
给药 1h后 ,除正常对照组外 ,其余各组均 ip0.15%
CCl4花生油溶液 5 ml·kg-1 ,禁食不禁水。 18 h后
摘眼球取血分离血清 。取血后脱颈椎处死小鼠 ,剖
腹 ,迅速取出肝脏 ,在肝右中叶相同部位取 0.1 g肝
脏放入置有生理盐水的匀浆器中 ,在冰浴中制成
100g·L-1的肝匀浆[ 2] 。
1.2.3 对血清 ALT和 AST的影响 按试剂盒说明
测定血清中 ALT、AST的活性。柞树皮水提浸膏对
CCl4引起的小鼠急性肝损伤血清 ALT和 AST活性
的影响结果见表 1。模型组的 ALT和 AST较正常
组明显升高 (P<0.01),表明 CCl4造模成功 。高 、
中 、低剂量组与模型组比较 ,柞树皮水提浸膏能显著
降低 CCl4引起的急性肝损伤小鼠血清中 ALT和
AST活性的升高 。
表 1 柞树皮水提浸膏对 CCl4 所致肝损伤小鼠血清中 ALT、AST及肝组织中 GSH-Px活性和 MDA含量的影响( x±s, n=10)
Table1 EfectofaqueousextractofthestembarkofQuercusmongoliaonthelevelsofALTandGSH-PxandcontentofMDAinliver
injurymiceincludedASTintheserumofacuteliverinjurymiceincludedbyCCl4( x±s, n=10)
Groups Dose/ g·kg-1 ALT/ U·L-1 AST/U·L-1 GSH-Px/U·mg-1 MDA/nmol·mg-1
Normal - 41.30 ±1.65** 86.50±4.77** 375.57±21.47** 1.33±0.47**
Model - 110.52±7.63Δ* 157.61±10.14Δ 195.57±11.47Δ 3.42±0.17Δ
Highdose 2.00 69.57±4.54* 99.45±7.48** 295.81±47.62** 2.55±0.28*
Middledose 1.00 71.27 ± 5.06* 109.13±1.89* 282.06±52.61* 2.89±0.34*
Lowdose 0.50 75.82 ± 4.43* 112.06± 9.03* 268.89±30.27* 2.97±0.16*
Negetivecontrol 0.50 53.36 ± 3.22** 93.44±4.28** 292.94±5.99** 2.34±0.29*
Comparedwithnormalgroup:ΔP<0.01;comparedwithmodelgroup:*P<0.05, **P<0.01
1.2.4 对肝组织中 GSH-Px活性和 MDA含量的
影响 按试剂盒说明测定肝组织中 GSH-Px的活
性和 MDA的含量 。柞树皮水提浸膏对 CCl4引起急
性肝损伤小鼠肝组织中 GSH-Px活性和 MDA含量
的影响结果见表 1。高 、中 、低剂量组与模型组比
较 ,说明柞树皮水提浸膏能升高 CCl4引起急性肝损
伤小鼠肝组织 GSH-Px活性 ,同时降低小鼠肝组织
中 MDA的含量。
2 讨论
肝损伤是由多种病因引起且有多种因素参与的
复杂过程。体内模型特别是化学性肝损伤模型 ,是
目前国际上常用的肝损伤模型 ,具有操作简便和模
型病理模拟性 、重复性好等优点 [ 3] 。CCl4引起肝损
伤的机制是 CCl4在肝微粒体细胞色素 P450激活下
生成自由基 CCI3·及 Cl· ,这些自由基可与肝细胞
内大分子发生共价结合 ,也可攻击膜下不饱和脂质 ,
引起脂质过氧化 , 使肝细胞损伤 ,细胞质内 ALT、
AST渗入血液 ,结果血清中 ALT、AST的活性升高 ,
给予柞树皮水提浸膏对 CCl4所致小鼠血清 ALT、
AST的升高可明显降低 。
自由基是人体正常生化过程的中间产物 ,在机
体正常及病理过程中都存在。同时 ,机体在进化过
程中获得了灭活氧自由基的一些酶 , 如 GSH-Px
等。因此 ,只有当自由基产生过多或者机体内的酶
系统过少时才导致疾病 。氧自由基可促使不饱和脂
肪自由基形成 ,脂质自由基可引起细胞膜的流动性 、
通透性和完整性的破坏 ,进而使其双层结构发生断
裂 ,引起膜镶嵌的一系列酶的排列紊乱 ,功能丧失 ,
细胞的能量产生系统瘫痪。 GSH-Px是重要的催
化过氧化氢分解的酶 ,特异地催化还原性 GSH对过
氧化氢的还原反应 ,从而起到保护细胞膜结构与功
能的完整作用。 MDA是脂质过氧化的最终产物 ,可
严重破坏细胞膜的结构 ,导致细胞肿胀 、坏死 ,其含
量反映了组织过氧化的损伤程度。实验中 ,柞树皮
水提浸膏高﹑中﹑低剂量组肝组织中 , GSH-Px较
模型组显著升高 ,而 MDA含量显著降低 ,说明柞树
皮水提浸膏可能通过保护细胞膜 、清除氧自由基抑
制脂质过氧化而对肝细胞起到保护作用 。
参考文献:
[ 1] 中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典中
药彩色图集 [ M] .广州:广东科技出版社 , 1995.
[ 2] 徐淑云 ,卞如濂 ,陈修.药理实验方法学 [ M].北京:人民卫生
出版社 , 2002.1346-1348.
[ 3] 刘燕 ,买尔旦·马合木提.新疆紫草水提浸膏对小鼠急性四
氯化碳性肝损伤的保护作用 [ J] .时珍国医国药 , 2006, 17
(9):535-537.
收稿日期:2007-10
547第 5期 姜丽君 , 等。柞树皮水提浸膏对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用