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田基黄对大鼠急性肝损伤的保护作用



全 文 :田基黄对大鼠急性肝损伤的保护作用
李沛波 ,唐 西 ,杨立伟 ,苏薇薇
(中山大学广州现代中药质量研究开发中心 ,广东广州 510275)
  摘要 目的:研究田基黄对大鼠急性肝损伤的保护作用。方法:采用 CCl4及 D-氨基半乳糖(D-Gal)致大鼠急
性肝损伤模型 , 观察田基黄提取液对肝损伤大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性的影响。结果:田
基黄对 CCl4及 D-Gal所致的大鼠血清 ALT、AST活性升高有明显的抑制作用。结论:田基黄对大鼠急性肝损伤具
有保护作用。
关键词 田基黄;CCl
4
;D-Gal;急性肝损伤
中图分类号:R285.5  文献标识码:A  文章编号:1001-4454(2006)01-0055-02
  田基黄始载于《生草药性备要 》,为藤黄科植物
地耳草(HypericumjaponicumThunb.)的干燥全草 ,
是两广地区常用草药 ,民间多用其治疗急慢性肝炎 。
笔者将田基黄水提醇沉液通过聚酰胺柱层析得到田
基黄提取液 ,考察其对 CCl4及 D-Gal所致大鼠急性
肝损伤的保护作用 ,现报道如下 。
1  材料与仪器
1.1  动物 SD大鼠 ,雌雄各半 ,体重 200±20g,由
广东省医学实验动物中心提供 , 动物合格证号:
2003A003。
1.2  药品和试剂 田基黄药材:购于广州市清平
药材市场;田基黄注射液:常州康普药业有限公司
(批号:051901);甘利欣注射液:江苏正大天晴药业
有限公司(批号:DG0540);CCl4:汕头市光华化学厂
(批号:20040108, AR级);D-Gal:江苏省无锡市长
丰工贸有限公司提供 (批号:20040615, 纯度 ≥
95%);柱层析聚酰胺 (30 ~ 60目):中国医药 (集
团)上海化学试剂公司 (批号:F20020709);ALT、
AST试剂盒:上海荣盛生物技术有限公司 (批号:
20040522)。
2  方法与结果
2.1  田基黄提取液的制备 田基黄水提醇沉液经
聚酰胺柱层析 ,以一定浓度的乙醇洗脱 ,收集洗脱
液 ,洗脱液经适当处理后即得田基黄提取液。
2.2  田基黄对 CCl4所致大鼠急性肝损伤的保护
作用 SD大鼠 56只 ,雌雄各半 ,实验条件下预养 2
天 ,按性别和体重随机分为 7组:正常对照组 、CCl4
造模组 、甘利欣注射液组 、田基黄注射液组 、田基黄
提取液低剂量组 、田基黄提取液中剂量组 、田基黄提
取液高剂量组。所有动物均按 5 ml/kg的剂量腹腔
注射给药。其中 , 正常对照组和 CCl4 造模组给
0.9%生理盐水;甘利欣注射液组给甘利欣注射液
(每 ml含甘草酸二铵 5 mg);田基黄注射液组给田
基黄注射液(每 ml含生药 0.075g);田基黄提取液
低 、中 、高剂量组分别给不同浓度的田基黄提取液
(每 ml所含生药分别为 0.0375g、0.075g、0.15g)。
每天一次 ,连续给药 7天 。末次给药后 1 h,正常组
按 0.6 ml/kg的剂量腹腔注射植物油 ,其余 6组均
按 0.6 ml/kg的剂量腹腔注射 30%的 CCl4植物油
溶液 ,造成大鼠急性肝损伤。 24 h后 ,眼眶取血 ,分
离血清 ,按试剂盒说明书用赖氏法测定血清 ALT、
AST,所有数据用 SPSS10.0统计软件进行处理 ,结
果见表 1。结果表明 ,田基黄提取液低 、中 、高三个
剂量均能明显抑制 CCl4引起的大鼠血清 ALT、AST
活性的升高。与田基黄注射液相比 ,相同剂量的田
基黄提取液(中剂量组)显示出更好的降酶效果;提
示本实验室制备的田基黄提取液对 CCl4所致肝损
伤有较好的保护作用。
 表 1    CCl4所致急性肝损伤大鼠血清
ALT、AST活性(n=8, x±s)
组别 ALT(IU/L) AST(IU/L)
正常对照组  24.31±2.96** 402.56±29.48**
CCl4造模组 2806.71±303.86 5055.53±461.11
甘利欣注射液组 1021.84±205.96** 2197.19±203.29**
田基黄注射液组 2150.88±357.77* 2535.16±255.94**
田基黄提取液低剂量组 1210.07±119.69**■ 2196.77±196.67**
田基黄提取液中剂量组 587.11±104.10**■■ 1693.90±124.87**■■
田基黄提取液高剂量组 547.72±134.93**■■ 1718.36±236.58**■
  注:与造模组比较 , *P<0.05, **P<0.01;与田基黄注射液组
比较 , ■P<0.05, ■■P<0.01
2.3 田基黄对 D-Gal所致大鼠急性肝损伤的保护
作用 动物分组方法和给药方法同 2.2。末次给药
后 1h,除正常组外 ,其余 6组动物按剂量 400mg/kg
于腹腔注射 D-Gal(预先配制成 pH7.0的 10%生理
盐水溶液);正常组于相同部位注射等容 0.9%生理
盐水 。取材方法 、检测方法及数据处理均与 2.2相
同 ,结果见表 2。结果表明 ,田基黄提取液低 、中 、高
三个不同剂量均能明显抑制 D-Gal所致的大鼠血清
·55·中药材第 29卷第 1期 2006年 1月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2006.01.024
ALT、AST活性的升高;在抑制 ALT活性方面 ,田基
黄提取液的效果优于田基黄注射液。表明田基黄提
取液对 D-Gal所致肝损伤同样具有良好的保肝降酶
效果。
 表 2    D-Gal所致急性肝损伤大鼠血清
ALT、AST活性(n=8, x±s)
组别 ALT(IU/L) AST(IU/L)
正常对照组  28.65±5.56** 259.38±57.46**
D-Gal造模组 635.58±148.19 1329.01±466.50
甘利欣注射液组 125.92±59.90** 792.30±219.35**
田基黄注射液组 539.77±366.22* 785.00±286.30**
田基黄提取液低剂量组 171.48±96.05**■■ 614.12±95.28**
田基黄提取液中剂量组 117.09±39.22**■■ 597.31±95.28**
田基黄提取液高剂量组 153.33±45.60**■■ 471.74±30.18**■
  注:与造模组比较 , *P<0.05, **P<0.01;与田基黄注射液组
比较 , ■P<0.05, ■■P<0.01
3  讨论
CCl4进入机体后主要在肝微粒体中发生脂质
过氧化反应 ,引起肝细胞膜结构和功能的损害 ,使细
胞内 ALT、AST溢出 ,导致血中 ALT、AST活性升高 。
肝损伤区域越大 , ALT、AST活性越高 。CCl4导致的
肝损伤模型是筛选具有保肝降酶作用药物的常用模
型之一 ,以血清转氨酶为观察指标来评价被筛选药
物的保肝降酶效果〔1〕。 D-Gal引起的实验性肝损伤
模型是目前公认较好的研究肝损伤发病机制及有效
治疗药物的实验动物模型 。肝细胞内许多物质代谢
过程与磷酸尿嘧啶核苷 (三磷酸尿苷 , UTP;二磷酸
尿苷 , UDP)密切相关 ,足量的磷酸尿嘧啶核苷是维
持肝细胞正常代谢及生物转化功能的必要物质 ,如
果发生耗竭 ,可以引起肝细胞损伤甚至坏死 。D-Gal
是一种肝细胞磷酸尿嘧啶核苷干扰剂 ,能竞争性捕
捉 UTP生成二磷酸尿苷半乳糖(UDP-Gal),使磷酸
尿苷耗竭 ,导致物质代谢严重障碍 ,引起肝细胞变
性 、坏死;解毒机制障碍更加剧了 D-Gal的毒性作
用。因此 ,用 D-Gal作为致毒物可制成特异性肝损
伤模型〔2、3〕。
本研究使用的田基黄提取液是田基黄药材经水
提醇沉后再通过聚酰胺柱层析而得到的 ,其制备工
艺先进。实验证明:田基黄提取液对 CCl4及 D-Gal
所致大鼠急性肝损伤具有明显的保护作用 ,效果优
于阳性药田基黄注射液;提示通过改进田基黄的提
取方法可提高田基黄保肝降酶的效果。这为今后田
基黄注射液的二次开发提供了理论依据 。
参 考 文 献
[ 1] 张孝卫 , 等 .四氯化碳致大鼠 、小鼠肝损伤的对比实
验 .基础医学与临床 , 2003, 23(3):351.
[ 2] 李永宇 , 等 .草苁蓉乙醇提取物对 D-氨基半乳糖中毒
大鼠急性肝损伤的保护作用 .延边大学医学学报 ,
2001, 24(2):91.
[ 3] 刘霞 , 等 .D-半乳糖胺致大鼠急性肝损伤模型制作的改
进 .中日友好医院学报 , 1996, 10(4):305.
(2004-11-02收稿)
·制剂与质量·
从天然植物中超临界流体萃取有效成分动力学模型研究
赵跃强 ,刘纬炜 ,吴争鸣 ,徐国想 ,许瑞波
(淮海工学院化工系 ,江苏连云港 222005)
  摘要 为开发超临界流体从天然植物中萃取有效成分的传质理论模型 , 本文对其过程的传质机理进行了分
析 , 由微分质量衡算方程经合理简化得到了动力学模型的解析解。采用此数学模型计算了完全萃取时间 te、萃取
收率 Y随时间 t的变化以及原料粒度 dp对萃取收率 Y的影响 , 计算结果与文献中的实验数据吻合良好。本模型
可用于从天然植物中超临界流体萃取有效成分过程的预测 、分析 、设计和优化。
关键词 超临界流体;萃取;动力学模型;传质
中图分类号:TQ028  文献标识码:A  文章编号:1001-4454(2006)01-0056-04
作者简介:赵跃强(1974-),男,讲师 ,主要研究方向为分离工程和有机合成。 Tel:(0518)2897926, E-mail:zyqlyg@hhit.edu.cn
  超临界流体萃取技术 (SupercriticalFluidEx-
traction, SFE)具有传质速度快 、溶解能力强 、低温操
作 、无污染的优点 ,在热敏性物质(如某些中草药的
活性组分)的提取分离方面具有显著的优势 ,因而
·56· 中药材第 29卷第 1期 2006年 1月