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大孔吸附树脂纯化绿茄叶黄酮的工艺研究



全 文 :天然产物研究与开发 Nat Prod Res Dev 2015,27:534-539
文章编号:1001-6880(2015)3-0534-06
收稿日期:2014-07-24 接受日期:2015-01-06
基金项目:国家自然科学基金(31260135);国家中医药管理局
2012 年中医药行业科研专项(201207002)
* 通讯作者 Tel:86-931-4938619;E-mail:xuelg@ mail. lzjtu. cn
大孔吸附树脂纯化绿茄叶黄酮的工艺研究
莫天录1,薛林贵1* ,高 慧2,李彩霞3,李旭东1,李文伟1,李国强1,杨蕊琪1
1兰州交通大学化学与生物工程学院,兰州 730070;
2兰州大学 生命科学学院,兰州 730020;3 河西学院农业与生物技术学院,张掖 734000
摘 要:研究大孔吸附树脂纯化绿茄叶黄酮粗提取物的最佳工艺。通过比较 10 种大孔吸附树脂纯化黄酮粗提
取物的吸附及解吸性能,筛选出纯化树脂 XDA-1,并考察 XDA-1 树脂对黄酮粗提取物的静态、动态吸附与解吸
的性能。结果表明,XDA-1 树脂对黄酮粗提取物纯化的最佳工艺参数:吸附平衡时间 8 h,吸附浓度 2. 00 mg /
mL,pH值 3. 0,温度 25 ℃,上样流速 2 BV /h;解吸平衡时间 2 h,解吸剂为 pH值为 3. 0 的体积分数 80%的乙醇
溶液,解吸流速 3 BV /h,纯化倍数 2. 37。该研究证实大孔吸附树脂纯化绿茄叶黄酮的方法简单可行,为绿茄叶
黄酮的分离纯化提供了实验依据。
关键词:大孔吸附树脂;绿茄叶;黄酮;纯化
中图分类号:Q283. 6 文献标识码:A DOI:10. 16333 / j. 1001-6880. 2015. 03. 033
Purification of Flavonoids from Green Eggplant Leaves Using Macroporous Resin
MO Tian-lu1,XUE Lin-gui1* ,GAO Hui2,LI Cai-xia3,LI Xu-dong1,LI Wen-wei1,LI Guo-qiang1,YANG Rui-qi1
1School of Chemical and Biological Engineering,Lanzhou Jiaotong University,Lanzhou,730070,China;
2School of Life Science,Lanzhou University,Lanzhou 730020,China;
3School of Agriculture and Biotechnology,Hexi University,Zhangye 734000,China
Abstract:The optimal conditions for purifying flavonoids from green eggplant leaves using macroporous resin were stud-
ied. The absorption and desorption properties of 10 different macroporous resins for purifying flavonoids from green egg-
plant leaves were compared. The results showed that XDA-1 had the best adsorption and desorption performance. Fur-
thermore,the static and dynamic absorption and desorption properties of XDA-1 on flavonoids were investigated. The op-
timal conditions for the separation and purification of flavonoids from green eggplant leaves were listed as follows:equi-
librium adsorption time,8 hrs;concentration,2. 00 mg /mL;pH,3;temperature,25 ℃;velocity of sample solution,3 BV /
hrs;equilibrium desorption time,2 hrs;elution velocity,3 BV /hrs;and mobile phase solvent,using 80% aqueous ethanol
(pH = 3). The flavonoid content in the purified product was 2. 37 times higher than that in the raw material. In conclu-
sion,our study provided a simple and feasible purification method for purifying flavonoids from the leaves of green egg-
plant.
Key words:macroporous resin;green eggplant leaves;flavonoids;purification
茄子(Solanum melongena L.)别名落苏、昆仑紫
瓜、矮瓜、草鳖甲、吊菜子等,是以浆果为产品的一年
生草本植物,广泛种植于地中海、亚洲、中欧和东南
欧地区[1]。而茄叶是茄子生产的下脚料,资源丰
富,且茄子采收后,其茎、叶、根腐烂在田埂上或者被
农户作为烧柴,使得资源附加值变低。因此,从茄叶
中分离并纯化黄酮具有一定的开发价值。
黄酮类化合物是植物重要的次级代谢产物,广
泛存在于植物的各个器官。研究发现黄酮类化合物
具有抗氧化、抗感染、抗癌、抗炎[2]、保肝[3]以及防
止心血管疾病[4]等多种生理功能,因而黄酮被称为
“第七类营养素”。目前,黄酮类化合物大多来源于
药用植物,也有来源于生物质和果实的报道[5,6]。
由于黄酮具有很好的医药保健等功能,因此从生物
质资源中提取并纯化黄酮,可以变废为宝,解决黄酮
提取材料不足等问题。
大孔吸附树脂具有容量大、选择性好、吸附率
高、重复性好、解吸容易、理化性质稳定等优点。近
年来,大孔吸附树脂分离技术已成为天然活性成分
分离纯化的有效方法之一。目前,大孔树脂已应用
在樱桃叶、香椿叶、桑叶、竹叶、侧柏叶等的黄酮类粗
提物的纯化,但有关纯化绿茄叶黄酮的工艺研究还
未见报道,本文研究了大孔吸附树脂对绿茄叶黄酮
粗提物的吸附与解吸附情况,并确立了其纯化工艺
参数,为茄叶活性成分的开发利用提供理论依据。
1 材料与方法
1. 1 材料与仪器
1. 1. 1 材料
绿茄叶采于河西学院农业与生物技术学院试验
园,叶子清洗后阴干,粉碎过筛(60 目),避光备用。
1. 1. 2 试剂
芦丁(Rutin)购自 Sigma 公司,其余试剂均为国
产分 析 纯;X-5、AB-8、NKA-9、NKA-Ⅱ、D4020、
D3520、D101 大孔吸附树脂,天津南开大学化工厂
产品;XDA-1、LX-38、ADS-17 大孔吸附树脂,西安蓝
晓科技有限公司。
1. 1. 3 仪器
SHZ-2000 型双配套循环水式多用真空泵,河南
省巩义市英峪予华仪器厂;DHG-9140A 型电热恒温
鼓风干燥箱,上海恒科有限公司;Spectrμmlab24 分
光光度计,上海棱光技术有限公司;HH-4 数显恒温
水浴锅,国华电器有限公司;AE200 电子分析天平,
瑞士 Mettler Toledo公司;层析柱 Φ15 × 30 mm 上海
亚荣生化仪器厂;RG-2000A 旋转蒸发器,巩义市京
华仪器有限责任公司;HZQ-X400 恒温振荡培养箱,
太仓市华美生化仪器厂;AP-9925 无油真空泵,天津
奥特赛恩斯仪器有限公司;HD-97-1 紫外检测仪,上
海康华生化仪器厂。
1. 2 黄酮的提取与测定
1. 2. 1 黄酮粗提取物的提取流程
绿茄叶粉末→75%乙醇回流提取→减压浓缩
(45 ℃,0. 08 Mpa)→真空干燥→黄酮粗提物→4 ℃
低温保存
1. 2. 2 黄酮的测定
1. 2. 2. 1 黄酮标准曲线绘制
标准曲线的制作方法参照文献[7],准确称取芦
丁标准品 20. 0 mg,用 70%乙醇溶解,转移至 100 mL
容量瓶中,并定容至刻度,即芦丁标准品的质量浓度
为 0. 20 mg /mL,冷藏备用。精确吸取芦丁标准溶液
1. 00、2. 00、3. 00、4. 00、5. 00、6. 00 mL,分别置于 10
mL容量瓶中,加入 5%亚硝酸钠溶液 0. 3 mL,摇匀,
静置 6 min;然后加入 10%硝酸铝溶液 0. 3 mL,摇
匀,静置 6 min;再加入 4%氢氧化钠 4. 00 mL,用
30%乙醇定容至刻度,摇匀,静置 15 min,以试剂空
白为参比,在波长 510 nm处测定吸光度。以吸光度
(y)为纵坐标,芦丁的质量(x,mg)为横坐标,制作标
准曲线。
1. 2. 2. 2 粗提物总黄酮含量的测定
准确移取 0. 2 mL 待测提取液于 10 mL 容量瓶
中,根据 1. 2. 2. 1 的方法测定波长 510 nm处的吸光
度,根据公式(1)计算绿茄叶中总黄酮的含量 C0。
黄酮含量(%)= C × V × NW × v × 1000 × 100 (1)
式中:C:提取液中黄酮含量(mg)V:总样品体
积(mL)W:样品重量(g)v:测定的样品体积(mL)
N:稀释倍数。
1. 3 最佳树脂类型的筛选
1. 3. 1 树脂的预处理
大孔吸附树脂用无水乙醇浸泡 24 h,充分溶胀,
用无水乙醇淋洗至析出液加适量水(1∶ 5)无白色浑
浊为宜,用去离子水洗至无醇,然后用 5% HCl浸泡
3 h,用去离子水洗至中性,再用 2% NaOH浸泡 3 h,
再用去离子水洗至中性,沥干树脂中水分备用。
1. 3. 2 10 种大孔吸附树脂吸附率和解吸率的测定
准确称取 10 种预处理树脂各 3 份,每份 2. 0 g,
置于 100 mL 三角瓶中,分别加入 15 mL 提取液,并
测定波长 510 nm 处吸光度 A0,封口,置于 25 ℃,
150 r /min的恒温振荡吸附 24 h,充分吸附后过滤,
测滤液吸光值 A1;再向滤出树脂中加入 70%乙醇溶
液,封口,继续振荡 24 h,充分解吸后过滤,测滤液的
吸光值 A2,得到黄酮含量 C1、C2,按公式(2)计算吸
附率 α、解吸率 β[8]。
α(%)=
C0 - C1
C0
× 100%
β(%)=
C2
C0 - C1
× 100% (2)
1. 3. 3 静态吸附-解吸试验
1. 3. 3. 1 静态吸附试验
称取 2. 0 g 预处理树脂 XDA-1,置于 50 mL 三
角瓶中,以吸附时间、pH、浓度、温度为单变量,加入
15 mL粗提液,各 3 份,封口,在 25 ℃,150 rpm恒温
振荡箱中振荡吸附,按 1. 2. 2. 1 方法测定黄酮含量,
并计算吸附率。分别以吸附率对时间、pH、浓度、温
度作图,绘制静态吸附曲线。
535Vol. 27 莫天录等:大孔吸附树脂纯化绿茄叶黄酮的工艺研究
1. 3. 3. 2 静态解吸试验
称取 2. 0 g 吸附饱和树脂 XDA-1,置于 50 mL
三角瓶中,以解吸时间、解吸剂体积分数、pH值为单
变量,加入 15 mL 乙醇洗脱液,同上条件解吸,按
1. 2. 2. 1 方法测定黄酮含量,并计算解吸率。分别
以解吸率对时间、解吸剂 pH、解吸剂体积分数作图,
绘制静态解吸曲线。
1. 3. 4 动态吸附-解吸试验
1. 3. 4. 1 动态吸附试验
预处理的树脂 XDA-1,湿法装柱(层析柱内径
1. 5 cm,树脂高 11 cm,柱床体积 20 mL),以 20 BV
去离子水除杂后,取质量浓度为 2. 02 mg /mL 黄酮
粗提取液上柱纯化,分别以 1、2、3 BV /h 的流速上
柱。每隔 10 管取一管,按 1. 2. 2. 1 方法测定黄酮含
量,测定流出液黄酮的含量,至流出液浓度接近上样
液浓度且维持恒定,停止上样。以流出液柱床体积
为横坐标,流速为变量,黄酮含量为纵坐标,绘制动
态吸附曲线。
1. 3. 4. 2 动态解吸试验
装柱、除杂同 1. 3. 4. 1 的方法。上样以 3 BV /h
流速至流出液为上样液质量浓度为 1 /5 时,停止上
柱。先以 20 BV 去离子水冲洗,再分别以 1、2、3
BV /h流速的 80%乙醇(pH = 3)洗脱,每隔 5 管取
一管,同上,绘制动态洗脱曲线。
1. 3. 5 纯化后黄酮的纯度
称取粗提取物和纯化物各 0. 25 g,用体积分数
为 70%乙醇溶解并定容,各取 0. 1 mL,按 1. 2. 2. 1
方法测定黄酮含量,并计算出纯化倍数。
1. 3. 6 树脂的重复次数
称取 2. 00 g XDA-1 预处理树脂,以吸附次数为
变量,步骤同 1. 3. 3. 1,吸附-解吸后,继续取解吸后
的树脂重复操作。
1. 3. 7 数据分析
采用 Excel 2003 数据处理,Origin 8. 0 作图,使
用 SPSS 16. 0 统计分析软件进行分析,各树脂间的
显著性差异采用新 Duncan复极差法比较,以上指标
测定均重复三次,图中数据均为三次重复的均值加
标准差。
2 实验结果
2. 1 最佳树脂类型的筛选
不同的树脂对吸附液中各组分的吸附强弱与解
吸难易存在差异[9]。影响因素很多,包括树脂的极
性、比表面积、粒径、孔径、被吸附物的极性、分子大
小。通常,被吸附物的极性与树脂的极性相同或相
近时,吸附效果较好;树脂孔径是被吸附分子大小的
多倍数时吸附性能最好。因此筛选树脂时要综合考
虑树脂的比表面积、极性、孔径等因素,多数黄酮类
化合物分子极性不太高,在弱极性或非极性树脂上
会有更好的吸附效果[10]。由标准曲线得到回归方
程:Y = 1. 0256X + 0. 0195,R2 = 0. 9989,据此选择最
佳吸附树脂结果见图 1。推测:树脂 NKAⅡ相比其
他极性树脂,其比表面积最小,吸附效果差;X-5 树
脂比表面积稍大于 D101 树脂,因此 X-5 树脂对黄
酮化合物的吸附量略大。而 X-5 树脂比表面积虽是
NKA-9 树脂的 2 倍,可能 NKA-9 树脂孔隙略大的原
因,使其吸附率大一些;X-5 树脂是非极性,相比
AB-8 树脂略强,可能 X-5 树脂与茄叶黄酮的极性相
近,故吸附率高;非极性树脂中,XDA-1 树脂比表面
积大于其余树脂,使其吸附、解吸效果明显。如图 1
所示,采用 Duncan 新复极差法进行比较,从吸附率
看,NKA-9 与其它树脂相比较差异显著(P < 0. 05);
从解吸率看,NKAⅡ与其它树脂间差异显著(P <
0. 05),虽然 NKA-9 吸附率最高,但解吸率低于
XDA-1,NKAⅡ解吸率最高,但吸附率也低于 XDA-
1。综合吸附率和解吸率两个参数,认为 XDA-1 类
型树脂是比较好的吸附树脂,故以下实验重点考察
XDA-1 大孔树脂对绿茄叶黄酮的纯化效果。
表 1 吸附树脂的物理性质
Table 1 Physical properties of the adsorption resin
树脂型号
Model resin
外观
Exterior
极性
Polarity
比表面积
The specific
surface area
(m2 /g)
平均孔径
The average
pore size
(nm)
孔隙率
Porosity
(%)
孔隙
Pore
(m2 /g)
粒径范围
Size range
(mm)
AB-8 乳白色球状颗粒 弱极性 480 ~ 520 130 ~ 140 42 ~ 48 0. 73 ~ 0. 77 0. 315 ~ 1. 25
NKA-9 乳白色至微黄色 极性 250 ~ 290 155 ~ 165 46 ~ 50 15. 5 ~ 16. 5 0. 315 ~ 1. 25
X-5 乳白色球状颗粒 非极性 500 ~ 600 290 ~ 300 50 ~ 60 1. 20 ~ 14 0. 315 ~ 1. 25
D4020 乳白色球状颗粒 非极性 540 ~ 580 100 ~ 105 74 ~ 78 2. 88 ~ 2. 92 0. 315 ~ 1. 25
635 天然产物研究与开发 Vol. 27
NKA-Ⅱ 红棕色球状颗粒 极性 160 ~ 200 145 ~ 155 - - 0. 315 ~ 1. 25
D101 乳白色球状颗粒 非极性 500 ~ 550 90-100 65-75 1. 18 ~ 1. 24 0. 3 ~ 1. 25
XDA-1 棕红色球状颗粒 非极性 1200 ~ 1300 85 ~ 95 70-80 - 0. 3 ~ 1. 25
D3520 乳白色球状颗粒 非极性 480 ~ 520 85 ~ 90 65 ~ 70 2. 10 ~ 2. 15 0. 3 ~ 1. 25
ADS-17 乳白色球状颗粒 非极性 90 ~ 150 5 ~ 30 64 ~ 68 0. 74 ~ 0. 78 0. 3 ~ 1. 25
LX-38 乳白色球状颗粒 弱极性 480 ~ 520 25-30 65-75 - 0. 3 ~ 1. 25
Adsorption%rate
Desorption%rate
100
80
60
40
20
0
Ad
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rp
tio
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%of
%
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)
X鄄
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S鄄1
7
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D4
02
0
LX
鄄38
Kinds%of%resin
图 1 10 种大孔吸附树脂对绿茄叶黄酮吸附率和解吸率
的影响
Fig. 1 Effect of 10 macroporous resins on absorption and de-
sorption rates of flavonoids from green eggplant leaves
注:不同字母表示差异显著(P < 0. 05);同一字母代表差异不显
著(P > 0. 05)。
Note:different letters indicated significance difference at P < 0. 05,
same letters indicated no significant difference at P > 0. 05.
2. 2 静态吸附试验
2. 2. 1 时间对 XDA-1 树脂吸附黄酮的影响
XDA-1 树脂纯化黄酮粗提物吸附时间的试验,
结果如图 2(A)所示。随着时间的延长,吸附逐渐
达到饱和。当吸附 7 h 时,XDA-1 树脂对绿茄叶黄
酮的吸附率高达 89. 91%,8 h 黄酮的吸附率达到平
衡。因此,后续吸附时间采用 8 h。
2. 2. 2 粗提液 pH值对 XDA-1树脂吸附黄酮的影响
分别将黄酮粗提取液的 pH 值调至 3. 0、4. 0、
5. 0、6. 0、7. 0,XDA-1 树脂对黄酮吸附的结果如图 2
(B)所示。当 pH值为 3. 0 时,吸附率最大,吸附效
果最好,随 pH 升高吸附率呈下降趋势。可能因为
黄酮类化合物含有酚羟基,呈现一定的酸性,在微酸
性条件下以分子形式存在容易被树脂吸附[11]。当
pH值再增大到中性至碱性,黄酮类化合物容易转变
为佯盐,而以盐的形式存在不易被树脂吸附,且黄酮
分子上的酚羟基容易被氧化而使溶液颜色变深[12]。
故上样液的 pH值应控制在 3. 0 左右。
2. 2. 3 温度对 XDA-1 树脂吸附黄酮的影响
研究温度对吸附的影响,对进一步阐明树脂的
吸附作用机理和热力学具有重要意义。将装入黄酮
粗提取液和树脂的锥形瓶分别置于温度为 25、30、
35、40、45 ℃的摇床中振荡吸附,结果如图 2(C)所
示。温度对黄酮的整体影响较大,在 25 ℃时吸附率
最高,可能因为温度较低时,黄酮类化合物相对比较
稳定。因此,上样液温度以 25 ℃效果最佳。
2. 2. 4 浓度对 XDA-1 树脂吸附黄酮的影响
固定其它因素,分别配制质量浓度为 0. 50、
1. 00、1. 50、2. 00、2. 50、3. 00 mg /mL 的黄酮提取液
(pH 3. 0),考察黄酮质量浓度对 XDA-1 树脂吸附性
能的影响,其结果如图 2(D)所示。绿茄叶黄酮的
吸附率随黄酮质量浓度的升高,呈先上升后平衡的
趋势。在 2. 00 mg /mL时最高,此后波动不大,可能
因为浓度过大,黄酮向树脂内的扩散速度减慢,容易
使过饱和而成糊状,对树脂的孔隙产生了影响[13];
其次浓度太大会使杂质竞争吸附,黄酮物质在树脂
内部的扩散能力会降低,而且随着质量浓度的增加,
将加重浓缩工艺负荷,造成质量浓度过高而引起上
样困难[11]。因此,质量浓度为 2. 00 mg /mL 吸附效
果最佳。
2. 3 静态解吸试验
2. 3. 1 洗脱液 pH 值对 XDA-1 树脂解吸黄酮的影

分别配制 pH值为 3. 0、4. 0、5. 0、6. 0、7. 0 的体
积分数为 70%乙醇溶液,考察洗脱液 pH值对 XDA-
1 树脂解吸黄酮的影响,其结果如图 3(A)所示。随
着洗脱液 pH 值的增加黄酮的解吸率先下降后升
高,可能乙醇减弱了黄酮与树脂之间的吸附力,同时
酸的电离作用将增加乙醇溶液的极性从而增大树脂
的解吸率,而碱的电离作用产生的 OH-极性效果低
于 H +的效果,故酸性溶液中的黄酮类化合物易被
解吸出来。因此,宜选用 pH = 3. 0 的乙醇溶液作为
洗脱剂。
2. 3. 2 时间对 XDA-1 树脂解吸黄酮的影响
时间对 XDA-1 树脂解吸黄酮的影响,结果如图
3(B)所示,2 h 时,绿茄叶黄酮的解吸率达到最高,
735Vol. 27 莫天录等:大孔吸附树脂纯化绿茄叶黄酮的工艺研究
随后解吸率维持恒定,从提高效率和经济性的原则 出发,因此解吸时间选择 2 h。
100
80
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20
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bs
or
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(%
)
0% 2% 4% 6% 8
Time(h)
3% 4% 5% 6% 7
pH
25% 30% 35% 40% 45% 50
Temperature(℃)
0.5% 1.0% 1.5% 2.0% 2.5% 3.0
Concentration(mg/mL)
A B C D
图 2 时间(A)、pH(B)、温度(C)及浓度(D)对绿茄叶黄酮吸附率的影响
Fig. 2 Effects of time (A),pH (B) ,temperature (C)and concentration (D)on absorption rate of flavonoids from green eggplant
leaves
2. 3. 3 乙醇体积分数对 XDA-1树脂解吸黄酮的影响
分别配制体积分数为 60%、70%、80%、90%、
100%(pH = 3)的乙醇溶液,考察乙醇体积分数对
XDA-1 树脂解吸黄酮的影响,其结果如图 3(C)所
示。随着乙醇体积分数的升高,解吸率呈先升高后
下降的趋势。当洗脱液为体积分数 80%乙醇溶液
时,解吸率最高。可能是黄酮类化合物与树脂间的
强烈氢键作用,导致吸附在树脂上的黄酮类成分不
容易被水和低浓度的乙醇洗脱下来[14],而无水乙醇
洗脱时解吸率明显下降,这可能是因为提取液含有
水溶性黄酮类化合物,故洗脱液宜选体积分数为
80%(pH =3)的乙醇溶液。
70
60
50
40De
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(%
) 90
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70
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50
403% 4% 5% 6% 7
pH
0.5% 1.0% 1.5% 2.0% 2.5% 3.0
Time(h)
60% 70% 80% 90% 100
Volume%fraction%of%ethanol(%)
-5% 0% 5% 10% 15% 20% 25% 30% 35
Bed%volume
A B C D7570
65
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55
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45
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35
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m
L)
图 3 pH(A)、时间(B)、洗脱剂体积分数(C)及上样流速(D)对绿茄叶黄酮解吸率的影响
Fig. 3 Effects of pH(A),time (B) ,ethanol volume fraction (C)and velocity of sample solution(D)on desorption rate of fla-
vonoids from green eggplant leaves
2. 4 XDA-1 树脂动态吸附曲线
XDA-1 树脂对绿茄叶黄酮的动态吸附曲线如
图 3(D)所示,均呈特殊的“S”型,流速 2 BV /h 时趋
势最好。当上柱体积为 10 BV 时,流出液的质量浓
度为 0. 42 mg /mL,接近上柱液质量浓度的 1 /5,达
到了泄漏点的质量浓度。因此,XDA-1 树脂对质量
浓度为 2. 02 mg /mL 粗提液的处理能力是 10 BV。
当吸附 27 BV时,流出液质量浓度趋于平衡吸附达
到饱和,此时即为上样的终点。
2. 5 XDA-1 树脂动态解吸曲线
结果如图 4 所示,用 80%乙醇洗脱,流速 3 BV /
h时峰值最高,黄酮含量的峰值出现在 1 ~ 10 BV,峰
尖而宽,峰左侧线性增加,表明急速洗脱,在 2. 3 BV
时,黄酮含量最高,洗出液颜色为金黄色。在 14 BV
后,黄色逐渐消失,表明绝大部分黄酮已被解吸,因
此 14 BV为合理的洗脱剂量。
0% 5
Bed%volume
1%BV/h
2%BV/h
3%BV/h
M
as
s%c
on
ce
nt
ra
tio
n%
of
fla
vo
no
id
s(m
g/
m
L)
5
4
3
2
1
0
10% 15% 20
图 4 XDA-1 树脂动态解吸曲线
Fig. 4 Dynamic desorption curve of XDA-1
0% 1% 2% 3% 4% 5% 6% 7% 8% 9
Times
90
80
70
60
50A
bs
or
pt
io
n%
ra
te
(%
)
图 5 XDA-1 树脂重复次数
Fig. 5 XDA-1 resin repetitions
835 天然产物研究与开发 Vol. 27
2. 6 大孔吸附树脂的重复次数
XDA-1 树脂重复使用次数如图 5 所示,树脂使
用次数在 1 ~ 6 次之间时,黄酮的吸附率变化幅度较
小,使用 6 次以后,吸附性能急剧下降,说明 XDA-1
树脂可重复使用 6 次。
3 结论
10 种供试大孔树脂中,XDA-1 树脂对绿茄叶黄
酮粗提物有较好的吸附和解吸性能,吸附量为
14. 50 mg /g,解吸率为 85. 29%,因此 XDA-1 树脂适
合绿茄叶黄酮粗提物的纯化。XDA-1 树脂纯化绿
茄叶黄酮粗提取的最佳工艺参数:吸附平衡时间 8
h,吸附浓度 2. 00 mg /mL,pH 值 3. 0,温度 25 ℃,上
样流速 2 BV /h;解吸平衡时间 2 h,解吸剂乙醇的体
积分数为 80%,pH值 3. 0,解吸流速 3 BV /h。此条
件下的纯化物浸膏中黄酮的质量浓度为 5. 68 mg /
mL,纯化倍数为 2. 37。目前生物活性物质的纯化是
我们亟待解决的问题,本课题主要研究了树脂法纯
化绿茄叶黄酮粗提物的工艺过程,后续将比较树脂
纯化前、后黄酮的抗氧化能力和抑菌能力以及其组
分。
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