全 文 ：配合物中金属离子或配位剂释放出来的方法。
图 2　钛合金中钛 、铝 、锰的分析流程
参考文献:
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药理药化
收稿日期:2007-01-24;　修订日期:2007-03-28
作者简介:李　林 (1978-),男(汉族),江苏淮安人 ,现任南京中医药大学
药学院讲师 ,硕士学位 ,主要从事药材及饮片质量标准研究工作.
*通讯作者简介:陆兔林 (1963-),男(汉族),江苏泰州人 ,现任南京中医
药大学药学院副教授 ,博士学位 ,主要从事中药炮制机理研究工作.
不同产地岩黄连中总生物碱
和脱氢卡维丁的比较研究
李　林 , 王巧晗 , 毛春芹 , 陆兔林*
(南京中医药大学药学院 ,江苏 南京　210046)
摘要:目的 建立岩黄连中总生物碱和脱氢卡维丁的含量测定方法 , 并探讨不同产地岩黄连二者含量。 方法 以脱氢卡
维丁为对照 , 分光光度法测定总生物碱含量;RP-H PLC法测定脱氢卡维丁含量 , 以 L ichrosopher-C18柱为分析柱 , 0. 01
m o1 /LKH2PO4水溶液(用磷酸调 pH =3)-乙腈(75∶25)为流动相 , 检测波长 347 nm , 柱温 30℃, 流速 1. 0 m l /m in。结果
广西和贵州产的岩黄连药材总生物碱和脱氢卡维丁含量较高 ,且广西产的药材两者含量较稳定。结论 所建立的方法操
作简便快速 , 结果准确可靠。测定的不同产地样品中 , 以广西产的药材质量较好且稳定。
关键词:岩黄连;　生物碱;　脱氢卡维丁;　高效液相色谱
中图分类号:R284. 1　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2007)10-2436-02
Study of TotalA lkaloids and Dehydrocav id ine inCorydalis Saxicola Bunting from D iffer-
entAreas
L I L in , WANG Q iao-han , MAO C hun-qin, LU Tu-lin*
(Nanjing University of Traditiona lChineseMedicine, Nanjing 210046, China)
Abstract:Objective To estab lish a m ethod fo r the con tent de term ination of to tal a lka lo ids and dehydrocavidine in Corydalis
sax icola Bunting , and ana lyze the two conten ts from different areas. M ethods Dehydrocav id ine as the standard and using ultrav i-
o let spectropho tom e te r to de term ine the content of to ta l a lka lo ids. HPLC was perform ed on the L ich rospher - C18 co lum n;0. 01
m o1 /L KH2PO 4(pH =3) - CH3CN (75∶25) se rved as m ob ile pha se and the de tec tion wave leng th w as at 283 nm , the co lumn
tem pe ra ture at 30℃ and the flow ra te be ing 1. 0 m l /m in, to de te rm ine the conten t o f dehydrocavidine. Resu lts The contents of to-
tal a lka lo ids and dehydrocavidine from Guangx i and Gu izhou w ere highe r, and these tw o contents from Guangxi we rem o re stab le.
Conc lu sion Th is me thod is simp le, sensitive, specific and can be used for the qua lity contro l ofCorydalis saxicola Bunting, and
the qua lity from Guangx i is be tter and stab le.
Key words:Coryda lis sax icola Bunting;　A lka lo ids;　Dehydrocav idine;　HPLC
　　岩黄连为罂粟科植物石生黄堇 Corydalis saxicola Bunting的 全草 , 因其具有近似黄连的功效 , 且生长于岩缝中或岩石旁 ,故得
此名 , 是黔 、桂高寒山区珍贵的中草药材。本品味苦 、性凉 , 具有
清热解毒 、利湿 、止痛止血之功效 , 主治肝炎 、口舌糜烂 、火眼 、目
豁 、痢疾 、腹泻 、腹痛 、痔疮出血等 [ 1] 。岩黄连中主要有效成分是
以脱氢卡维丁为代表的生物碱类化合物。而这类化合物具有潜
在的抗 HBV活性和肝保护活性。
本研究首次采用分光光度法和 HPLC法对我国广西 、贵州 、
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时珍国医国药 2007年第 18卷第 10期 LISH IZHEN MEDIC INE AND MATERIA M EDICA RESEARCH 2007 VOL. 18NO. 10　
四川 3个主要产地的岩黄连中总生物碱和脱氢卡维丁的量进行
测定。结果证明 , 采用分光光度法和 HPLC法分析测定岩黄连药
材中总生物碱和脱氢卡维丁的量 ,方法可行 , 结果稳定 ,为岩黄连
药材的质量评价和控制及资源的综合利用提供了有效的方法和
依据。
1　仪器与材料
Ag ilem t1100系列高效液相色谱仪 , VWD检测器 , Chem sta tion
system工作站 , 752紫外 -可见分光光度计。
脱氢卡维丁对照品 (中国药品生物制品检定所 , 111667 -
200401)。
岩黄连购自药材市场 ,产地分别为广西 、贵州 、四川。经本院
中药鉴定教研室陈建伟教授鉴定 ,均为罂粟科植物石生黄堇 Co-
rydalis saxicola Bun ting的全草。
2　方法与结果
2. 1　总生物碱的测定
2. 1. 1　供试品溶液的制备 将岩黄连药材粉碎 , 过 20目筛 ,取粉
末约 0. 1 g,精密称定 , 置具塞锥形瓶中 ,精密加入 1%HC l的甲醇
溶液 25 m l, 称定 ,超声处理 40 m in, 冷却后补足重量 ,摇匀 , 过滤 ,
取续滤液 1 ～ 25 m l量瓶中 , 用 1%HC l的甲醇溶液定容 , 作为供
试品溶液。
2. 1. 2　测定波长的选择 对照品溶液及供试品溶液在 200 ～ 700
nm扫描 , 发现均在 347 nm处有最大吸收峰 ,以此作为检测波长。
2. 1. 3　线性范围考察 精密称取脱氢卡维丁对照品 13. 0 m g,置
25 m l量瓶中 ,用 1%HC l的甲醇溶液定容至 25 m l, 配成 0. 52 m g /
m l的贮备液。精密量取上述贮备液 1. 0 m l置 10 m l量瓶中 , 加
入 1%HC l的甲醇溶液至刻度 ,摇匀 ,配制成每毫升含有 52μg对
照品溶液。分别取对照品溶液 0. 50, 1. 00, 1. 50, 2. 00, 2. 50 m l于
10 m l量瓶 , 加入 1%HC l的甲醇溶液至刻度 ,摇匀后于 347 nm处
测吸光度。以浓度为纵坐标 , 以吸光度为横坐标进行线性回归 ,
得回归方程 Y =64. 62X - 0. 021, r=0. 999 2, 线性范围为 2. 6 ～
13. 0 μg /m l。
2. 1. 4　精密度实验 取浓度为 7. 8μg /m l对照品溶液 , 重复操作
5次 ,测得吸光度 , RSD为 0. 5%。
2. 1. 5　供试品溶液稳定性实验 取同一供试品溶液 , 分别于 0,
1, 2, 4, 6, 8, 12, 24 h进行显色测定 , 吸光度的 RSD 为 0. 9%,表明
供试品溶液在 24 h内基本稳定。
2. 1. 6　重复性实验 称取同一批样品(广西岩黄连 )粗粉 6份 ,
按上述方法制备样品并测定含量 , 测得总生物碱的 RSD
为 1. 1%。
2. 1. 7　加样回收率实验 精密称取已测知含量的岩黄连(广西
岩黄连)粗粉 9份 , 每 3份一组 , 按样品中总生物碱含量的
120%, 100%, 80%3个水平分别精密加入脱氢卡维丁对照品溶
液 , 然后按供试品溶液的制备项下制备 , 测定结果 ,平均加样回收
率为 99. 3%, RSD =2. 3%。
2. 2　脱氢卡维丁含量测定
2. 2. 1　色谱条件 L ichro sophe r C18色谱柱 (250 mm ×4. 6 mm , 5μm), 流动相:0. 01 mo1 /L KH2PO 4水溶液 (用磷酸调 pH =3)-乙
腈(75∶ 25), 流速 1. 0 m l /m in, 检测波长 347 nm , 柱温 30℃, 进
样量 10 μl, 理论板数按脱氢卡维丁计不低于 3 000。色谱图见
图 1。
a -对照品　 b -药材　1. 脱氢卡维丁
图 1　脱氢卡维丁对照品及岩黄连药材 HPLC图
2. 2. 2　供试品溶液的制备 将岩黄连药材粉碎 , 过 20目筛 ,取粉
末约 0. 1 g,精密称定 , 置 25 m l量瓶中 , 加入 1%HC l的甲醇溶液
约 20 m l, 超声处理 40 m in, 冷却后定容 , 摇匀 , 过微孔滤膜(0. 45
μm), 取续滤液作为供试品溶液。
2. 2. 3　线性范围考察 精密称取脱氢卡维丁对照品 13. 0 m g, 置
25 m l量瓶中 , 用 1%HC l的甲醇溶液定容至 25 m l, 配成 0. 52m g /
m l的贮备液。分别取贮备液 0. 50, 1. 00, 1. 50, 2. 00, 2. 50 m l于
10 m l量瓶 , 加入 1%HC l的甲醇溶液至刻度 ,分别吸取不同浓度
的对照品溶液进样 , 以浓度为横坐标 , 峰面积积分值为纵坐标 ,
进行线性回归 ,得回归方程 Y =33. 05X - 34. 12, r=0. 999 7。 可
见脱氢卡维丁在 26 ～ 130 μg /m l范围内呈良好的线性关系。
2. 2. 4　精密度实验 取浓度为 78 μg /m l对照品溶液 ,重复进样 5
次 , 测得峰面积 , RSD为 0. 72%。
2. 2. 5　供试品溶液稳定性实验 取同一供试品溶液 , 分别于 0,
1, 2, 4, 6, 8, 12, 24 h进样 , 测得峰面积 , RSD 为 1. 21%, 表明供试
品溶液在 24 h内基本稳定。
2. 2. 6　重复性实验 称取同一批样品(广西岩黄连 )粗粉 6份 ,
按上述方法制备样品并测定含量 , 测得脱氢卡维丁含量的 RSD
为 1. 73%。
2. 2. 7　加样回收率实验 精密称取已测知含量的岩黄连(广西
岩黄连 )粗粉 9份 , 每 3份一组 , 按样品中脱氢卡维丁含量的
120%, 100%, 80%3个水平分别精密加入脱氢卡维丁对照品溶
液 , 然后按供试品溶液制备方法制备 , 测定结果 ,平均加样回收率
为 100. 3%, RSD =2. 1%。
2. 3　样品测定 将不同产地岩黄连样品 , 分别按总生物碱及脱
氢卡维丁测定方法测定 ,计算含量。结果见表 1。
表 1　不同产地岩黄连的总生物碱及脱氢卡维丁含量 %
产地 总生物碱 脱氢卡维丁
广西 1 4. 87 1. 37
广西 2 4. 91 1. 34
广西 3 4. 93 1. 34
贵州 1 4. 75 1. 27
贵州 2 4. 98 1. 29
贵州 3 4. 98 1. 32
四川 1 4. 53 1. 14
四川 2 4. 49 1. 17
四川 3 4. 57 1. 07
　　n=3
3　讨论
3. 1　对照品的选择 岩黄连药材中含有脱氢卡维丁 、盐酸小檗
碱 、黄连碱 、脱氢阿卟卡维丁 、脱氢异阿卟卡维丁 、脱氢斯氏紫堇
碱 、巴马丁 、四氢巴马丁等多种生物碱 ,但脱氢卡维丁又名岩黄连
碱 , 为岩黄连中特有成分 , 且在药材中含量较高 , 又比较容易得
到 , 故选择测定药材中脱氢卡维丁的含量 , 并以脱氢卡维丁为对
照测定药材中总生物碱的含量。实验证明此方法可以有效的对
岩黄连药材的质量进行控制。
3. 2 　样品溶液制备方法的考察 根据岩黄连中所含生物碱类化
合物的性质 ,选择了盐酸 、醋酸 、磷酸的甲醇溶液为提取溶剂 , 其
中盐酸的甲醇提取效率较高 ,提取方法考察了热回流 、冷浸 、索氏
提取 、超声提取等 , 以冷浸法提取效率最低 , 其它三种基本一致 ,
考虑操作的简便易行 ,因此本实验采用了盐酸甲醇超声提取 。同
时又利用正交试验法对提取次数 、提取时间 、提取溶剂的用量 、盐
酸的浓度进行考察 ,确定了本文的提取方法。
3. 3　岩黄连总生物碱和脱氢卡维丁的含量 广西 、贵州 、四川是
岩黄连的主要产区 ,通过实验比较发现 , 四川产的岩黄连总生物
碱和脱氢卡维丁的含量都明显低于另外两个产地 ,而广西和贵州
产的相差不大 ,只是广西产的脱氢卡维丁含量略高于贵州产的 ,
另外广西产的质量较为稳定。
参考文献:
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LISH IZH EN MEDIC INE AND MATERIA MED ICA RESEARCH 2007 VOL. 18 NO. 10 时珍国医国药 2007年第 18卷第 10期