全 文 ：金樱根提取物体外抑菌活性的实验研究
赖岳晓1，严寒静2，田素英2，余锦虹2
(1．中山市黄圃人民医院，广东 中山 528429;2．广东药学院，广东 广州 510006)
摘要:目的 比较金樱根不同极性溶剂的提取物的抑菌作用。方法 用 5 种不同极性的溶剂提取金樱根，用倍比稀释法和抑菌圈测定其
抑菌作用。结果 金樱根水提取物对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、变形杆菌、伤寒杆菌的最低抑菌浓度 MIC 值分别为:10、40、10、40
mg /ml，金樱根 75%乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌、变形杆菌、伤寒杆菌的最低抑菌浓度 MIC值分别为:10、10、10、20 mg /ml，
金樱根乙酸乙酯提取物对金黄色葡萄球菌的 MIC值为 20 mg /ml，对痢疾杆菌、变形杆菌、伤寒杆菌无明显抑制作用;石油醚提取物和
氯仿提取物无抑菌作用。结论 金樱根的水提取物和乙醇提取物有较好抑菌作用，其它溶剂提取物抑菌作用较差。
关键词:金樱根;提取物;体外抑菌;最低抑菌浓度
中图分类号:R285． 5 文献标志码:A 文章编号:1673 － 4610(2012)09 － 0531 － 03
基金项目:中山市健康基地专项基金(编号:2009H020)
作者简介:赖岳晓，副主任中药师，现主要从事中药制剂等工作，Tel:18948868665，E-mail:hpyylyx@ 126． com
通讯作者:田素英，副教授，主要从事中药鉴定等工作，Tel:15362965291，E-mail:zsxqtsy@ 126． com
Study on Antibacterial Effects of Radix Rosae Laevigatae Extract
LAI Yue-xiao1，YAN Han-jing2，TIAN Su-ying2，YU Jin-hong2
(1． The Hospital of Huangpu，Zhongshan，Guangdong 528429，China;
2． Guangdong Pharmaceutical University，Guangzhou，Guangdong 510006，China)
Abstract:Objective To compare the different antibacterial effect of the extractive of Radix Rosae Laevigatae (RRL)by
different polar solvents． Methods Five different polar solvents were used to extract RRL，and doubling dilution method
and inhibition zone were used to measure the inhibitory effect． Results The MIC values of water extract of RRL againsts
Staphylococcus aureus (S． aureus) ，Pseudomonas aeruginosa (P． aeruginosa) ，Proteus vulgaris (P． vulgaris ) ，
Salmonella (SA)typhi were 10，40，10，40 mg /ml，the MIC inhibitory concentration values of 75% alcohol extract of RRL
against S． aureus，Shigella Castellani and Chalmers (S． C) ，P． vulgaris，SA typhi were 10，10，10，20 mg /ml，the MIC
value of ethyl acetate extract of RRL against only S． aureus is 20 mg /ml． Petroleum ether extract and chloroform extract of
RRL haven t antibacterial effect． Conclusion The water extract and alcohol extract of RRL have good antibacterial
effects，the antibacterial effect of ethyl acetate extract is less，petroleum ether extract and chloroform extract of RRL have
inhibitory effect．
Key words:Radix Rosae laevigatae;extract;in vitro bacteriostasis;inhibitory concentration
金樱根是蔷薇科植物金樱子(Rosa laevigata
Michx．)的根、根皮，又名金樱蔃、脱骨丹［1］。其药用历
史悠久，据《本草纲目》记载，味酸、涩，性平，无毒，功能
杀虫、止泻［2］。金樱根的主要成分为黄酮类、鞣质、三
萜类化合物、微量元素等物质［3 － 5］。近年来由于抗生
素的滥用导致细菌耐药性的增强，中药抗菌药越来越
受到人们的关注。而金樱根作为妇科千金片、金鸡胶
囊等中成药的主药用于治疗妇科炎症作用显著，可能
有抗菌作用。因此有必要对金樱根抗菌活性进行研
究。本研究是采用超声波提取法，分别用水、75% 乙
醇、石油醚、氯仿、乙酸乙酯这 5 种不同的溶剂对金樱
根进行提取，用微量稀释法和测定抑菌圈法评价各提
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取物对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、痢疾杆
菌、变形杆菌、伤寒杆菌的抑菌效果，现加以报道。
1 仪器与材料
1． 1 仪器
HH-6 恒温水浴锅(江苏金坛市宏华仪器厂) ，DL-
180A超声波清洁器(上海之信仪器有限公司) ，YXQ-
LS-SII 立式压力蒸汽灭菌器，BSG-300 恒温恒湿箱，
KYC100B细菌培养箱，SW-CJ-1FD超净工作台(上海博
讯实业有限公司医疗设备厂)。
1． 2 材料
金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、痢疾杆菌、
变形杆菌、伤寒杆菌(广东药学院基础学院微生物教研
室提供)。营养琼脂(生化试剂，天津市福星化学试剂
厂)、肉汤培养液(生化试剂，天津市福星化学试剂厂) ;
金樱根药材饮片［广州致信中药材有限公司，湖南批
号:090910 经田素英副教授鉴定为蔷薇科植物金樱子
(Rosa laevigata Michx．)的根］。聚山梨酯 80(化学纯，
国药集团化学试剂有限公司) ，水为纯净水，其它所用
试剂均为分析纯。
2 实验方法与结果
2． 1 药物的制备
2． 1． 1 金樱根提取液 精密称取粉碎状金樱根各
20. 0 g 分别置于锥形瓶中，分别用蒸馏水、75%乙醇、
乙酸乙酯、石油醚、氯仿以饮片 －溶剂(1∶ 16)的比例进
行超声提取 30 min，过滤，收集滤液，浓缩，配成含生药
400 mg /ml的溶液，各自定容 50 ml，密封备用。
2． 1． 2 黄连提取液 精密称取黄连粉末 20． 0 g 置于
锥形瓶中，用 80%乙醇以饮片 －溶剂(1∶ 16)的比例进
行加热回流 1 h，收集滤液。再将药渣用 160 ml 的
80%乙醇重新进行加热回流 1 h，合并 2 次滤液浓缩，
定容 100 ml，配成含生药 200 mg /ml的溶液，密封备用。
2． 2 抑菌圈的测定
在无菌条件下，取金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、痢
疾杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、伤寒杆菌放入肉汤培养
基试管中。管口灭菌后塞上试管塞，于 37 ℃细菌培养
箱内培养 24 h后取出置于冰箱 4 ℃保存，其含菌量为
5 ～ 10 CFU /ml。将营养琼脂煮沸溶化灭菌，移至超净
工作台内将营养琼脂倒至培养皿中使其冷却，用无菌
微量加样器吸取 100 μl 菌液倾注在营养琼脂平板上，
涂布均匀，待菌液稍干后，取直径 6 mm 的无菌圆形纸
片，分别吸取 5 种不同溶剂提取的金樱根提取液和黄
连提取液，每片吸取 20 μl，均匀分布在营养琼脂平板
表面。在恒温恒湿培养箱中以 37 ℃培养 24 h 后观察
并测量抑菌圈直径，每个浓度的药物抑菌实验重复 3
次，抑菌结果为 3 次实验平均值(结果见表 1)。
表 1 金樱根不同提取物纸片扩散法抑菌结果(抑菌圈直径，mm)
菌种 水提取物 75%乙醇提取物 乙酸乙酯提取物 石油醚提取物 氯仿提取物 80%乙醇黄提取物
大肠杆菌 8． 21* 8． 58* 9． 49 8． 83* 0 11． 99
变形杆菌 11． 21* 8． 40 0 7． 16* 0 8． 92
绿脓杆菌 10． 35* 10． 91# 0 0 0 8． 15
伤寒杆菌 6． 16 0 0 0 0 8． 45
痢疾杆菌 12． 14* 12． 99* 0 0 0 9． 75
金葡球菌 10． 38* 9． 85# 3． 56 0 0 19． 82
注:与黄连提取物比较，* P ＜ 0． 05，#P ＜ 0． 01
由表 1可知金樱根的水提取物对大肠杆菌、变形杆
菌、绿脓杆菌、伤寒杆菌、金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌均有
抑菌效果，对变形杆菌、绿脓杆菌、痢疾杆菌的作用强于
黄连(P ＜0． 05) ，对其它菌种的作用与黄连比较差异不
显著。金樱根 75%乙醇提取物对大肠杆菌、变形杆菌、
绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌均有抑菌效果。金
樱根乙酸乙酯提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌有抑
菌作用，石油醚提取物可抑制大肠杆菌、变形杆菌。氯
仿提取物对实验所用品种均无抑制作用。
2． 3 最低抑菌浓度的测定(MIC)
在无菌操作条件下，取 10 支无菌小试管排于试管
架上，编号。1 号试管中加入 MH 肉汤 3． 6 ml、2 ～ 10
号管中各加 2 ml。1 号管加入提取液 0． 4 ml，混匀后取
2 ml加入 2 号管，依次稀释至 8 号管，吸出 2 ml 弃去，9
号管为肉汤无菌生长对照管，即为阴性对照;10 号管为
细菌生长对照管，即为阳性对照。除 9号试管外，用无菌
微量加样器在其余试管中各加入菌液 100 μl，置 35 ℃培
养 18 h。结果判定:凡清澈透明的试管判定为无菌生长，
以无细菌生长的最高药物稀释度为该药对试验菌的
MIC。金樱根的水提取物对金黄色葡萄球菌、绿脓杆
菌、变形杆菌、伤寒杆菌均有抑菌效果，MIC 分别为:
10、40、10、40 mg /ml。金樱根 75%乙醇提取物对金黄
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Pharmacy Today ·2012 09 Vol． 22 No． 9·
色葡萄球菌、痢疾杆菌、变形杆菌、伤寒杆菌均有抑菌
效果，MIC分别为:10、10、10、20 mg /ml。金樱根乙酸乙
酯提取物对金黄色葡萄球菌有抑菌效果，MIC 为:20
mg /ml。黄连 80%乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、大肠
杆菌、痢疾杆菌、变形杆菌、伤寒杆菌均有抑菌效果，
MIC分别为 2． 5、10、2． 5、10、1． 25 mg /ml(根据不同的
实验变换提取液跟菌种，一共进行 36 个小实验，结果
见表 2)。
2． 4 最低杀菌浓度的测定(MBC)
将营养琼脂煮沸溶化灭菌，移至超净工作台中将
营养琼脂倒至培养皿中使其冷却，从 MIC 的测定中取
无菌生长的试管(从MIC浓度的低一级稀释度开始)中
挑取培养液，划线接种营养肉汤琼脂平板，送恒温恒湿
箱中 37 ℃培养 24 h。平板上无菌落说明对应试管中
的细菌被提取液全部杀死，以无细菌生长的最高药物
稀释度为该药对试验菌的 MBC。金樱根的六种提取物
无最低杀菌浓度，黄连提取物对金黄色葡萄球菌、痢疾
杆菌、变形杆菌、伤寒杆菌的 MBC 分别为:20、20、20、
40 mg /ml(结果见表 2)。
表 2 金樱根不同提取物抑菌实验 MBC、MIC结果(mg/ml)
菌种
水提取物
MBC MIC
75%乙醇提物
MBC MIC
乙酸乙酯提物
MBC MIC
石油醚提物
MBC MIC
氯仿提物
MBC MIC
80%乙醇黄连提物
MBC MIC
大肠杆菌 10
变形杆菌 10 10 20 10
绿脓杆菌 40
伤寒杆菌 40 20 40 1． 25
痢疾杆菌 10 20 2． 5
金葡球菌 10 10 20 20 2． 5
3 讨论与总结
金樱根的主要成分为黄酮类、鞣质、三萜类化合
物、微量元素等物质，其中黄酮类、鞣质、三萜类化合物
均有较好的抗菌功效。黄酮类化合物有两种存在状
态，分别是游离黄酮类化合物和黄酮苷类。游离黄酮
类化合物一般难溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙
酸乙酯、氯仿、乙醚等有机溶剂和稀碱水溶液中;黄酮
苷类化合物一般易溶于水、甲醇、乙醇等强极性溶液
中，但难溶或不溶于苯、氯仿、乙醚等有机溶剂中。此
次实验中用了水、乙醇、乙酸乙酯、氯仿、石油醚五种极
性不同的溶剂，水、乙醇的提取物均为深黄色，乙酸乙
酯的提取物为微黄色，氯仿、石油醚的提取物接近无
色，可以初步确定金樱根的提取物中黄酮类物质在溶
液中存在形式为黄酮苷类。因此金樱根水提取物和乙
醇提取物中含有大量黄酮类化合物，乙酸乙酯提取物
含量较少，而氯仿和石油醚中几乎不含黄酮类化合物。
鞣质极性极强，溶于水、甲醇、乙醇、丙酮，可溶于
乙酸乙酯、丙酮和乙醇的混合液，难溶于或不溶于乙
醚、苯、氯仿、石油醚及二硫化碳。因此金樱根水提取
物和乙醇提取物中含有较大部分鞣质，乙酸乙酯提取
物含量较少，而氯仿和石油醚中几乎不含鞣质。
游离三萜类化合物能溶于石油醚、乙醚、氯仿、甲
醇、乙醇等有机溶剂，而不溶于水。三萜皂苷类极性较
大，可溶于水，易溶于热水、稀醇、热甲醇和热乙醇中，
几不溶或难溶于丙酮、乙醚以及石油醚等极性较小的有
机溶剂。皂苷水溶液经强烈振摇能产生持久性的泡沫，
且不因加热而消失。此次实验中，水，乙醇、乙酸乙酯 3
种提取物溶液经振摇后产生大量的持久性泡沫，氯仿和
石油醚的提取物溶液经振摇后仅产生少量泡沫。
综上所述，金樱根的水提取物、75%乙醇提取物中
含有较多的黄酮类化合物、鞣质和三萜类化合物，故有
较好的抑菌效果;金樱根的乙酸乙酯提取物中含有较
少的黄酮类化合物、鞣质和三萜类化合物，故抑菌效果
不明显;金樱根的氯仿提取物、石油醚提取物中几乎不
含黄酮类化合物、鞣质和三萜类化合物，故几乎没有抑
菌效果。
参考文献
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社，1999:1204 － 1205．
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(收稿日期:2012 － 06 － 26)
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