全 文 ：地肤子等 9种中草药提取物对马铃薯晚疫病菌的影响
曹　静 1 , 赵志军1 , 马艳芝 2
(1.聊城大学农学院 ,山东聊城 252059;2.唐山师范学院生命科学系 ,河北唐山 063000)
　　摘要:在室内测试了地肤子 、蒿本 、漏芦 、郁金 、菊花 、地丁 、白鲜皮 、车前 、五倍子等 9种中草药的乙醇提取物对马
铃薯晚疫病菌菌丝生长 、孢子囊萌发以及产孢量的影响。结果表明 , 9种中草药提取物对黑麦培养基上马铃薯晚疫病
菌菌丝的生长都有显著的抑制作用 , 对菌丝生长的抑制程度达 22.7% ～ 100%;车前 、郁金 、地丁 、白鲜皮 、漏芦 、地肤
子 、菊花和五倍子对孢子囊萌发具有显著的抑制作用 ,对孢子囊萌发的抑制程度达 10.64% ～ 98.11%;车前 、地丁 、蒿
本 、菊花和五倍子对孢子囊产生具有显著的抑制作用 ,抑制率达 61.9% ～ 100%。其中菊花和五倍子两种提取物抑制
效果与化学药剂甲霜灵 3 000倍稀释液相比差异不显著。
　　关键词:马铃薯晚疫病;中草药;植物提取物;植物源杀菌剂;抑制作用
　　中图分类号:S436.32　　文献标志码:A　　文章编号:1002-1302(2009)05-0149-02
收稿日期:2009-03-04
作者简介:曹　静(1975—),女 ,河北深泽人 ,硕士 ,讲师 ,主要从事植
保专业的教学与科研工作。 Tel:(0635)8538232;E-mail:
zhaozhijun73@163.com。
　　马铃薯晚疫病是危害马铃薯生产的主要病害之一 。目前
生产上对该病的防治主要依赖化学杀菌剂 ,但是大量使用化
学杀菌剂容易造成环境污染和病原物抗性小种的产生 。很多
植物能够产生具有杀虫或抑菌活性的次生代谢产物 [ 1 ] ,不但
对环境污染小 ,而且不易引起抗药性 。植物源杀菌剂的研究
正在蓬勃发展之中 [ 2] ,一些产品已逐渐投放市场 。本研究选
用 9种中草药作为试验材料 ,针对马铃薯晚疫病菌进行抑菌
活性测试 ,旨在筛选出一些对马铃薯晚疫病菌有较强抑菌活
性的提取物 ,为进一步开发植物源杀菌剂奠定基础 。
1　材料和方法
1.1　材料
植物材料包括地肤子 [ Kochiascoparia(L.)Schrad] 、蒿
本 (Ligusticum sinenseOliv.)、漏芦 [ Rhaponticum uniflorum
(L.)DC.] 、郁金(CurcumaweyujinY.H.chenetC.Ling)、菊
花 [ Dendronthemaorifolium(Ramat.)Tzvel] 、地丁 (Violaye-
doensisMakino.)、白鲜皮 (DictamnusdasycarpusTurcz.)、车前
(PlantagoasiaticaL.)、五倍子(RhuschinensisMil.)9种中草
药(购自江西省安国县)。
供试菌种为马铃薯晚疫病菌 (Phytophthorainfestans),由
河北农业大学植病流行研究室提供 。
供试化学药剂甲霜灵(江苏宝灵化工股份有限公司生
产)。
1.2　试验方法
1.2.1　植物提取物母液的制备　取经粉碎的植物材料 50 g,
加 80%乙醇 200 ml, 30 ℃ 160 r/min恒温振荡 24 h, 然后
4 000r/min离心 20min,取上清液在 50℃下旋转蒸发浓缩至
30 ml以下 ,用 80%乙醇定容至 50 ml,保存备用 。
1.2.2　中草药对马铃薯晚疫病菌菌丝生长以及孢子囊产生
的影响　将黑麦培养基(每 1 kg培养基需黑麦 60 g、琼脂粉
5 g、葡萄糖 20 g)冷却至 50 ℃左右 ,每 100 ml培养基中加
0.5ml待测提取物母液 ,摇匀 。制成稀释 200倍的带药培养
基 ,倒入直径为 9 cm的培养皿中 ,冷却后在皿中央接种直径
为 0.6 cm的马铃薯晚疫病菌菌盘 。每个处理重复 4次 。以
80%乙醇稀释 200倍为空白对照 ,以甲霜灵 3 000倍液为对
化学药剂对照 , 17 ℃恒温黑暗培养 。 15 d后用十字交叉法测
量菌落直径 [ 3]并计算抑菌率:抑菌率(%)=(CK净生长量 -
处理净生长量)/CK净生长量 ×100(净生长量 =菌落直径 -
菌盘直径)[4 ] 。然后每个培养皿中加水 10 ml,充分刷洗配制
孢子囊悬浮液 ,每个处理取 10 μl镜检孢子囊个数 ,计算单位
面积产孢量 。计算公式为:
N=1 000· n/[ π(d/2)2 ] 。其中 N为单位面积产孢量
(个 /cm2 ), n为 10 μl孢子囊悬浮液中孢子囊个数的平均
数 [ 5 ] 。
1.2.3　中草药提取物对晚疫病菌孢子囊萌发的影响　取用
蒸馏水稀释 500倍的中草药提取液和 2×104个 /ml孢子囊悬
浮液各 10 μl滴于载玻片上混合均匀 ,悬滴法保湿并放在
10 ℃恒温培养箱内培养 , 3 h后观察并记录孢子囊的萌发百
分率 [ 6 ] 。每个处理重复 4次 ,以稀释 500倍的 80%乙醇为空
白对照 ,以甲霜灵 3 000倍稀释液为化学药剂对照 。
2　结果与分析
2.1　中草药提取物对马铃薯晚疫病菌丝生长的影响
将中草药提取物用黑麦培养基稀释 200倍后测定其对菌
丝生长的影响 ,结果见表 1。
　　由表 1可以看出 ,菊花 、五倍子提取物在稀释 200倍时对
马铃薯晚疫病菌丝生长的抑制效果最为显著 ,与甲霜灵 3 000
倍液达到同一水平 ,抑菌效果达 100%,其余 7种中草药也有
一定抑菌效果 ,但抑菌率都在 50%以下 。
2.2　中草药提取物对晚疫病菌孢子囊萌发的抑制作用
将中草药提取物用蒸馏水稀释 500倍后测定其对孢子囊
萌发的抑制作用 ,结果见表 2。
　　通过表 2可以看出 ,蒿本提取物对孢子囊萌发没有抑制
作用 ,漏芦、地肤子 、菊花和五倍子的抑制率在 50%以上 ,其
中菊花和五倍子提取物抑制率分别达 90.02%和 98.11%。
—149—江苏农业科学　2009年第 5期
DOI :10.15889/j.issn.1002-1302.2009.05.032
表 1　9种中草药提取物对菌丝生长的抑制作用
提取物 菌落直径净增长值(cm)
抑菌率
(%)
CK 8.3a 1.1
地肤子 6.49b 22.7
蒿本 6.39b 23.9
漏芦 6.24b 25.7
郁金 5.94bc 29.3
车前 5.76c 31.4
地丁 5.73c 31.8
白鲜皮 5.54c 34.0
菊花 0d 100.0
五倍子 0d 100.0
甲霜灵 0d 100.0
　　注:表中同一列数字后具有不同字母的表示差异显著(P<
0.05),下同。
表 2　9种中草药提取物对孢子囊萌发的抑制作用
提取物 孢子囊萌发率(%)
抑制率
(%)
蒿本 91.98a -5.42
80%乙醇 86.5a 1.10
车前 77.46b 10.64
郁金 70.33bc 16.11
地丁 70.27c 21.60
白鲜皮 42.86d 48.84
漏芦 31.83e 64.01
地肤子 11.55f 82.07
菊花 11.4g 90.02
五倍子 1.65h 98.11
甲霜灵 0 h 100.00
五倍子提取物的抑制率和化学药剂甲霜灵锰锌 3 000倍稀释
液相比差异不显著 。
2.3　中草药提取物对马铃薯晚疫病菌产孢量的影响
将中草药提取物用黑麦培养基稀释 200倍后测定其对马
铃薯晚疫病病菌孢子囊产量的影响 ,结果见表 3。
表 3　9种中草药提取物对产孢量的抑制作用
提取物 产孢量(个 /cm2)
抑制率
(%)
白鲜皮 28 733a -23.3
CK 23 309ab 0.0
地肤子 20 814abc 10.7
郁金 19 902abcd 14.6
漏芦 15 521bcd 33.4
车前 8 872cde 61.9
地丁 5 747def 75.3
蒿本 4 889ef 79.0
菊花 0f 100.0
五倍子 0f 100.0
甲霜灵 0f 100.0
　　由表 3可以看出 ,白鲜皮提取物对病原菌有刺激产孢的
作用 ,车前、地丁 、蒿本的提取物有较强的抑制作用 ,抑制率
高于 50%。结合表 1可以看出 ,由于菊花和五倍子完全抑制
了马铃薯晚疫病菌菌丝的生长 ,因而未能测得孢子囊的产生 。
3　结论与讨论
蒋继志等报道 ,大蒜 、洋葱 、丁香等植物离体组织及其提
取物对马铃薯晚疫病菌静止孢萌发 、附着孢形成有强烈的抑
制作用 [ 7 ] 。 2001年曹克强等研究表明 ,大蒜 、木贼提取物 、生
物洁净剂和香茅油对马铃薯晚疫病菌的孢子萌发 、菌丝生长
以及叶片侵染的抑制作用明显 [ 8 ] 。 2001年王树桐等研究表
明 , TerminaliachebulaRetz等对马铃薯晚疫病菌也有较强的
抑制作用 [ 9] 。本研究表明 , 9种中草药提取液对菌丝生长抑
制效果都比较明显 ,菊花和五倍子的抑制率达到 50%以上 ,
其余都在 50%以下;对孢子囊萌发的抑制率在 50%以上的有
漏芦 、地肤子 、菊花和五倍子;对马铃薯晚疫病病原菌产孢量
抑制率在 50%以上的有车前 、地丁 、蒿本 、菊花和五倍子 ,其
中菊花和五倍子的抑制率达 100%,白鲜皮能够刺激孢子囊
的产生 。由此可知 ,菊花和五倍子提取液能够很好的抑制马
铃薯晚疫病菌的生长 ,因此应将菊花和五倍子提取液进一步
进行稀释以测试其抑菌效果 。自然界中很多植物的组成成分
和代谢产物都有很好的抑菌作用 ,而且它们源于植物 ,容易分
解 ,对环境不易造成污染 ,因此具有研究价值 [ 10-11 ] 。但它们
与化学杀菌剂相比防效较低 ,主要是由于本试验所采用的植
物提取物都是粗提物尚未形成剂型 ,因此如何改进提取工艺
以及进行剂型加工以提高其防治效果 ,尚有待进一步研究 。
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—150— 江苏农业科学　2009年第 5期