全 文 ：北 京
J O U R N A L O F B E I J IN G
大 学 学 报
M E D I C A L U N IV E R S I T Y V o l
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1 9 N o
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3 3 7
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山药醇提物抗血小板活化因子
作用的初步研究
北京医科大学药学院 李长龄 马 建 王银叶 韩桂秋
[提要〕 本文以 P A F 诱导的免血小板聚集和实验动物炎症模型为指标 , 观察了中药山药对 P A F活
性的影响 。 结果表明 , 山药醇提物不仅能明显抑制 P A F 诱导的兔血小板聚集 , 而且也能明显抑制 P A F
引起的炎症反应 。 山药醉提物对 P A F 性炎症的抑制作用不依赖肾上腺垂体系统的存在 。
血小板活化因子 ( p l a t e l e t 一 A e t i v a i n g F a -
。 ot r , P A F )是近年发现的一种强效 的血小板活
化剂 “ ’ , 它的生物学作用广泛而强烈 。 除了对
血小板的活化作用 (引起血小 板 变形 、 聚集和
释放 )以外 , P A F 还与炎症 、 过敏等病理改变
有关 , 可引起毛细血管通透性增加 ` 2 , , 支气管
痉挛 , 过敏性休克等 。 因此 , 寻找特异的 P A F
拮抗剂可能为以上疾病的治 疗 提 供 适宜的药
物 。 为此 , 我们测定了 3 0 余种植物提取物 ,
从中发现山药 ( P . h a n e e i m a x i m )醇 提 物具有
较强的抗 P A F 活性 。 随后 , 进一步 观 察了该
提取物对 P A F 诱发的动物炎症的作用 。
方法与结果
材 料
1
. 动物 : 健康成年家兔 , 性 别 不拘 。 昆
明种小鼠 , 2 8~ 2 2 9 , 雌雄各半 。 W i s t a r 大鼠 ,
80 ~ 14 0 9
, 雌雄各半 。 动物用前禁食过夜 。
2
. 药品及其配制 : 粉碎的 生 药山药分别
经二氯甲烷和乙醇迥流或冷浸 。 将提取液回收
溶剂 , 得浸膏 。 将浸膏溶于二甲基亚矾 , 供体
外实验用 ; 另以 0 . 5% 叛甲基纤 维素制成山药
浸膏悬液 , 供体内实验用 。
3
. 主要试剂 : P A F 系美 国 B ac h e m 公司
产品 , 溶 于 含 0 . 2 5% B A s 的 T r i s一 N a e l 缓冲
液 ( P H 7 . 6 ) , 备用 ; 消炎痛为白 色结晶粉末 ,
由张家口制药厂提供 ; 氢化可地松 , 白色粉末 ,
上海试剂二厂产品 。
1
. 山药提取物对 P A F 诱 导 的兔血小板
聚集的影响 :
经兔耳动 脉 取 血 , 抽入 1 / 1 0 量 3 . 8% 拘
椽酸钠液 , 1 0 0 0 r /m i n 离心 10 分 钟 , 分取 富
血小板血浆 ( P R P ) 。 于比浊管内加入 P R P 0 . 4
m l
, 样品或空白溶剂 1~ 2 川 , 然后以 亚最大
剂量的 P A F 诱导血小板聚集 。 反应在 37 O c ,
1 0 0 0 r /m i n 磁力搅拌下进行 。 以 P R P 调零点 ,
仪器自动调满度 ( D P 一 2 4 7一 E 血小板聚集仪 ) 。
血小板聚集程度以曲线改变最大值相当于满度
的百分数表示 , 即聚集% 。
, ` ~ ` 二 , , 。 , 、 对照管聚集%一样品管聚集%聚集抑制率 (% ) = 之要止井翼豁釜孟碳滞异泛二`监, , 、 。 , 、 o/ , 一 对照管聚集%
x 10 0%
结果 (表 1) 表明 , 山药的二氯甲烷提取物 、
乙醇热提和冷提物均可 明 显抑制 P A F 引起的
兔血小板聚集 。 为样品 制备程 序 的安全和简
便 , 我们选定乙醇冷提物 为 进一步 研 究的材
料 。
2
. 山药醇提物对 P A F 所致小鼠腹腔血管
透性改变的影响 :
小鼠 30 只 , 均分 3 组 , 灌胃给药后 40 分
钟静脉注射 E v a sn 蓝 。 . 1 八 0 9 , 10 分 钟后腹
腔注射 P A F 1 0一 ,。 M /只 。 20 分 钟 后 , 取静脉
血 , 分 离血清 10 川 加人 4 0 1盐水。 随之以
表 1 山药提取物对 P A F 诱导的
兔血小板聚集的影响
率制写抑样 品 移、 林浓g ]/
二氯甲烷部分
ǎ讨十冈卜犷à出件吹盒叫ù匕弓d月.工…
ó门八ōé.八 工日而O一bQJ有工
乙醇热提
乙醉冷提
2 0
10
10
10
盐水 4 m l 冲洗腹腔内 E v an s 蓝 。 测 定血 清盐
水和腹腔冲洗 液的光 密度 O . D ( 6 2 0 n m ) , 按
下式计算腹腔血浆渗出量 :
渗出勋 l卜 ~黑黯竖籍 \ `“ “
结果 (表 2) 表明 , 山药醇 提物能明显抑制
P A F 引起的小鼠腹腔血管透性改变 。
6 0 时间 (分 ) 一 丽
表 2 山药醇提物对 P A F所致小鼠腹腔
血管透性改变的影响
` — · 对照组 x — 火给药组图 1 灌胃给药 3 90 m g / k g 对 P A F 引起 的大鼠足
肿胀的影响
剂 量
(m g / k g )
血浆渗出量 (川 )
(又土 S* ) 抑制率( 写 )
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盆.`口几
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别一照高药一组一对山一
与对照组比较 。
3
. 山药醇提物对 P A F 性大鼠足肿胀的影
响 :
大鼠 2 4 只 , 分为 2 组 , 灌胃给药后 40 分
钟于左 、 右后肢足拓皮下分 别 注入 rT is 一 N ac l
及 10 一 6M P A F 各 1 0 川 。 致炎后 不 同时间测
量足体积 , 并与致炎前比较 。 T ir s一 N a cl 对足
体积无影响 (肿胀率 < 2 . 4% )故文 中 只列右足
肿胀率 (图 1 ) 。
可见 , P A F 致炎后 2 小 时 内 , 给 药组足
肿胀率明显低于对照组 ,按曲线下面积计算 `” ’ ,
抑制率为 4 5 . 1% ( p < 0 . 0 1 ) 。
同法观察了山药醇提物对去肾上腺大鼠足
肿胀的影响 。 所用动物于一周前摘除双侧肾上
腺 。 结果 (图 2) 表明 , 样品亦有明显 作用 , 抑
制率为 3 6 . 6% ( P < 0 . 0 2 ) 。
4
. 山药醇提物对 P A F 引起的大鼠和豚鼠
皮肤血管透性改变的影响 :
6 0
时间 (分 )
· — · 对照组 x — x 给药组图 2 灌胃给药 3 90 m g / k g 对 P A F 引 起 的去肾上
腺大鼠足肿胀的影响
大鼠 14 只 , 豚鼠 2 只 , 分别分为 2 组 ,
依文献方法 `” , , 以不同剂量 P A F 诱 发 皮肤炎
症 , 观察样品对 P A F 活性 的影 响 (表 3) 。 可
见 , 山药醇提物能明湿 抑制 P A F 引起的大鼠
和豚鼠皮肤血管透性增加 。
5
. 消炎痛和氢化可地松对 P A F 性炎症的
.3 39
表 3 山药醇提物对 P A F 所致大鼠和豚鼠皮肤血管透性改变的影响
f il’ ’ 量 ” } ” 血浆 ’ iF’ ,&’ 益 (。 l ) ’ (式药” ” ” ,of’ i’ 晕 } ” ” ” . ,7’ 一 ’组 别 } 卜— , , 一 , , 一一一一万 , 一一一「一一一一二一 .一 一 . } } P 值甲— }止些些匕}二兰军生 {一华弊一 }一缪竺干止兰一 }—一 蝙溯 } } “ ` · 0土 5 · , } 4 4 · 0 土 8 · 6 } 4 7 · 8土 6 · 7 } }大鼠 , 1`药 } “ 9 0 } “ · 5士 2 · o } ” o · 7士 3 · 6 } ” 2 · 8土 ` · 9 } ” 7 · 9 } < o · 0 ,豚鼠对照 } } “ ` · 5土 1 · 8 } “ 7 · 4 士 8 · 3 } “ 6 · 6土 2 · 9 } }豚鼠山药 } 遵0 0 } “ 0 · 3士 ” · 7 1 嫂1 · 7上 “ · 2 } “ 4 · 7土 1 2 · 1 } ” 5 · 7 } < o · 0 5
与对照组比较 。
影响 :
本文依实验 2和 3 的方法观察了消炎痛和
氢化可地松对 P A F 性炎症的 作 用 。 结果 , 两
药对小鼠腹腔血管透性增加 的 抑 制 率分别为
2
.
7% ( P > 0
.
0 5 )和一 2 . 5% ( P> 0 . 0 5 ) ; 对 大鼠
足肿胀的抑 制 率 分 别 为一 3 . 1% ( P > 0 . 05 )和
5
.
2% ( P > 0
.
0 5 )
。
6
· 山药醇提物的急性毒性 :
小鼠 30 只 , 分 3 组 , 腹腔 给 药后 , 动物
出现扭体反应 , 活动减少 , 步态瞒姗 , 呼吸深
而慢 , 20 ~ 30 分钟时发生 震 挛 性惊厥 , 呼 吸
停止 。 按简化机率法 `4 ’计算 , L D 。。 = 1 1 9 7土 1 5 9
m g / k g ( p 二 0
.
9 5 )
。 另取小鼠 1 0 只 , 灌胃给药
5 3 9 0 m g k/ g
, 未见不良反应 。 以上动物均观察
一周 。
赖肾一L腺垂体系 统 。 H w an g ` 3 ,等 报 道 , P A F
诱导的血小板聚集和毛细血管透性增加是受体
介导的过程 。 由此可以推测 , 山药醇提物也是
在受体的水平阻断了 P A F 的作用 。
I后床常用的抗炎药消炎痛和氢化可地松不
能抑制 P A F 引起的炎症反应 , 表明 P A F性炎
症与 P G 代谢无关 , 并不受肾上 腺一垂 体的影
响 。 可以想象 , 对消炎痛 、 氢化可地松等药物
不敏感的临床炎症患者中 , P A F 或 许 起一定
的介质作用 。 对于此类病人 , 能 否 用 山 药治
疗 , 尚待进一步探讨 。
参 考 文 献
讨 论
本实验首先发现 , 山药醇提物能明显抑制
P A F 诱导的兔血小板聚集 , 抑制率随药物浓度
的提高而增大 。 随后 , 在不同种动物证明该提取
物能明显阻断 P A F 引起的多种炎症反应 。这些
结果与民间用山药治疗关节炎 、 风湿痛的效果
相符 , 至少部分地说明了它的药理作用基础 。
在去肾上腺大鼠和正常大鼠 , 山药对 P A F
性炎症的抑制作用相似 , 表明该抑制作用不依
1
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D e m o P o u lo s C A
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P l a t e l e t
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C h e m 19了9 ; 2 5 4 : 9 3 5 5 .
2
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f e e t o r s u b s t a n e e o f th e v a s o P e r m e a b i li t y e h a n g e s
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Im m u n o P h a r m a e o l 1 9 8 3 , 6 : 7
。
3
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C h a r a e t e r i z a t i o n o f e u t a n e o u s
v a s e u la r P e r m e a b i l i t y i n d u e e d b y P l a t e l e t
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t i n g f a e t o r i n g u in e a P ig s a n d r a t s a n d i t s i n h i b i
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g o n i s t
.
L a b I n v e s t 1 9 8 5 ; 52 : 6 17
.
4
. 徐椒云等 (主编 ) . 药理实验方法学 . 第 1 版 , 北京 : 人
民卫生出版社 , 1 9 55 : 4 0 2一 4 0 3 .
5
. 江苏新医学院 . 中药大辞典 . 第 1 版 , 上海 : 上海人民
出版社 , 1 9 77 : 1 7 2一 1 73 .
(山药提取物由涂馥 、 李书明 同志提供 , 特此致谢 。 )
3 4 0
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P i t u i t a r y 一 a d r e n a l a x i s
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黑 质 升 压 效 应 的 机 制 分 析
北京医科大学生理教研室 张黎明 顽蕴辉
本实验室曾报道黑质除对躯体运动 、 疼痛机能有
调节作用外 , 还具有升压效应 , 其机制之一是通过抑
制下丘脑弓状核的降压效应实现的 。 本工作进一步显
示 : 黑质还可通过臂旁核内的 D A 一受体产 生加 压 作
用 , 将 D A 一受体阻断剂氟呱咤醇微量注 入臂旁核可阻
断此效应。 从而 , 为 “ D A 系统在自发性高血压大鼠的
高血压发展中起作用” 的现象 , 提供了又一. 个生理基
础 。 最后 , 还讨论了黑质一弓状核和黑质一臂旁核系统
之间的关系 。
A N A L Y S I S O F M E C H A N I S M U N D E R L Y I N G P R E S S O R
E F F E C T O F S U B S T A N T I A N I G R A I N T H E R A T
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, a n d e x e i t a t i o n o f D A 一 r e e e P t o r s i n h i b i t s t h e d e p r e s s o r a e t i o n o f A R
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