全 文 ：降 ,细胞内游离 Ca2+增多 , 导致细胞内钙超载 。
HD02对缺血再灌注损伤时脑组织内 Na+ /K+-ATP
酶和 Ca2+-ATP酶活性降低有明显的抑制作用 ,可
以显著提高缺血再灌注脑组织内 Na+ /K+-ATP酶
和 Ca2+-ATP酶活性 ,从而改善神经细胞内外离子
分布 ,恢复细胞的结构与功能 ,减少细胞内 Ca2+的
聚集 ,减轻缺血再灌注引起的脑水肿和组织损伤。
参 考 文 献
1　TaylorTN, etal.LifetimecostofstrokeintheUniteStates.
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2　吴俊芳 , 等 .总丹酚酸对小鼠和大鼠脑缺血再灌注损伤
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(2005-04-22收稿)
StudyontheAnti-CerebralIschemia/ReperfusionInjuryEfectandIt sMechanismsofHD02
ZhaoDanyang1 , ZhaoMingqi1 , 2 , WuWeikang2 , ZengQiyi1
(1.GuangzhouChildrensHospital, Guangzhou510120;2.Sunyat-senUniversity, InteratedTraditionalChineseandWesternMedicine,
Guangzhou510080)
Abstract　Objective:TostudytheefectofHD02 onAnti-CerebralIschemia/ReperfusionInjury.Methods:ThemicecerebralIs-
chemia/Reperfusionmodelswererandomlydividedintothreegroup:controlgroup, I/Rgroupandtreatinggroups(diferentdosagesof
HD02).Attheendoftheexperiment, braintissueswereharvestedtomeasurethebrainwatercontent, SODactivity, MDAcontentand
theactivityofNa+/K+-ATPandCa2+-ATPenzyme.Results:HD02 couldobviouslydecreasethebrainwatercontent(P<0.01)and
theMDAcontent(P<0.01).while, itcouldalso, increasetheactivityofSOD(P<0.01)andtheactivityofATPenzyme(P<0.
05).ThesedatashowedthattherewasseveroxidativedamageinbraintissueandHD02couldpreventI/Rinjuryinbrain.
Keywords　HD02;BrainIschemia/Reperfusioninjury;Cerebraledema;Oxidativestress
陆英颗粒对急性实验性肝损伤的保护作用研究
杨　威 1　王茜莎 1　王敏伟1＊　许　焱1　路　丁 1　刘长生 2
(1.沈阳药科大学药学院 ,辽宁沈阳 110016;2.锦州医学院药学院 ,辽宁锦州 121001)
　　摘要　目的:研究陆英颗粒灌胃给药对急性实验性肝损伤的保护作用。方法:采用急性 CCl
4
肝损伤模型 、D-
半乳糖胺盐酸盐大鼠急性肝损伤模型 、ConA致小鼠急性肝损伤模型研究陆英颗粒灌胃给药对急性实验性肝损伤
的保护作用。结果:陆英颗粒对 CCl
4
致小鼠急性肝损伤有明显的保护作用 , 其保肝作用可能与对抗脂质过氧化以
及提高肝细胞膜和微粒体膜钙泵的活性有关;对 D-半乳糖胺盐酸盐致大鼠急性肝损伤和 ConA所致小鼠急性肝损
伤亦有明显的保护作用 。结论:陆英颗粒对多种急性实验性肝损伤有较明显的保护作用。
关键词　陆英颗粒;急性肝损伤;CCl4;D-氨基半乳糖胺盐酸盐;ConA
　　中药陆英为忍冬科 (Caprofoliaceae)接骨木属
(SambucusL.)植物陆英(SambucuschinensisLindl.)
的干燥全草 ,又称接骨草 、臭草 ,味甘 、微苦 ,性平 。
该药是我国民间常用草药 ,产于全国各地 ,资源丰
富 ,有疏肝健脾 ,祛风利湿 ,活血散瘀 ,消炎止痛 ,镇
痉消肿之功效 ,主要用于急性病毒性肝炎 ,肾性水
肿 ,风湿 ,跌打损伤 、骨折等症 〔1、2〕。陆英颗粒为陆
英提取物制成的颗粒剂 ,临床多用于急性病毒性肝
炎的治疗 ,但目前有关该药的基础实验研究甚少。
本文研究了陆英颗粒对急性实验性肝损伤的保护作
用 ,为其在肝病方面临床应用提供研究依据 。
1　材料
1.1　药品和试剂　陆英颗粒:批号 , 041101, 1g陆
英颗粒相当于陆英生药 1.5g,由江西汇仁药业有限
·1085·中药材第 28卷第 12期 2005年 12月
公司提供;联苯双酯滴丸:锦州九天药业有限公司 ,
批号:041002;利肝隆片:黑龙江中医药大学制药厂 ,
批号:200300904;四氯化碳:天津四友生物医学科技
有限公司 ,批号:605315043,临用前以花生油配制成
0.1%的溶液;D-氨基半乳糖胺盐酸盐:Sigma产品;
conA:sigma, lot:c-2010。 ALT、AST、MDA、Ca2 +-AT-
Pase、总蛋白(考马斯亮蓝法)、Glu试剂盒均购自南
京建成生物工程研究所;日立 7020型全自动生化分
析仪用 ALT、AST试剂为英国朗道试剂公司产品 。
1.2 　实验仪器　日立 7020型全自动生化分析仪;
Olympus生物显微镜;Y89-I型电动玻璃匀浆机:宁
波新艺科器研究所;UV-9100型紫外 -可见分光光度
计:北京瑞利分析仪器厂;BZKW-C型电子恒温水浴
锅:北京光明医药仪器厂;DL-4000B冷冻离心机:上
海安亭科学仪器厂;精密分析天平:上海精科天平。
1.3 　实验动物　昆明种雄性小鼠:体重 20 ～ 22g,
Wistar大鼠 , 200 ～ 240g,均由沈阳药科大学实验动
物中心提供 ,合格证号:SCXK(辽)2003-008。
2 　方法
2.1 　陆英颗粒抗 CCl4致小鼠急性肝损伤　昆明
种小鼠 72只 ,雄性 ,体重 20 ～ 22 g,随机均衡分组 ,
分 6组 ,每组 12只 。分别灌胃不同剂量的陆英颗粒
12 g/kg、24 g/kg、48 g/kg(生药量),给药容积 0.2
ml/10g, 空白组与模型对照组给予等量的溶媒
(0.5%CMC-Na)。每日一次 ,连续给药 7天 ,末次
给药 1.5h后 , i.p给予 0.1%的 CCl4 花生油溶液
(给药容积 10 ml/kg),空白组 i.p给予等量的溶媒
(花生油),禁食 16 h后 ,眼眶取血 , 3000r/min离心
10 min,取血清 ,测定血清 AST、ALT;立即取肝做匀
浆测 MDA, Ca2 +-ATPase活力 , 并取肝右叶放于
10%福尔马林溶液中固定 ,做病理检查。
2.2 　陆英颗粒抗 D-半乳糖胺盐酸盐大鼠急性肝
损伤　Wistar雄性大鼠 60只 , 200 ～ 240克 ,随机均
衡分组 ,分 6组 ,每组 10只 。即空白对照组 、D-GalN
模型组 、联苯双酯组(100 mg/kg)、陆英颗粒低剂量
组(8 g/kg)、中剂量组(16 g/kg)、高剂量组(32 g/
kg,生药量),给药容积 10ml/kg,空白组与模型对照
组给予等量的溶媒(0.5%CMC-Na)。每日一次 ,连
续给药 7天 ,末次给药 1 h后 ,除空白对照组外各组
动物于腹腔注射 D-GalN生理盐水溶液(剂量 500
mg/kg,给药容积 7.5ml/kg,用 1mol/L的 NaOH将
pH调至 7.0), 空白对照组腹腔注射等量的用 1
mol/L的 NaOH将 pH调至 7.0无菌生理盐水 ,禁食
后 24小时 ,动物腹主动脉取血 , 3000 r/min离心 10
min,取血清 ,测定 ALT、AST、Glu含量;立即取肝做
匀浆 , 1000r/min离心 10 min,取上清液测 Na+K+-
ATP酶 、Mg2+-ATP酶 、Ca2+-ATP酶 、Ca2 +Mg2+-ATP
酶。
2.3　陆英颗粒抗 ConA致小鼠急性肝损伤　昆明
种小鼠 72只 ,雄性 ,随机分为 6组即空白对照组 、
ConA模型组 、利肝隆(210 mg/kg,阳性对照组)、陆
英颗粒低 、中 、高剂量组(12、24、48g/kg均以生药量
计),药物均用 0.5%CMC-Na配制。给药组每天按
设定计量 ig给药一次 ,给药容积 20 ml/kg,空白对
照组 ,模型组均给等量的 0.5%CMC-Na,连续 7天。
末次给药后 1h按 20 mg/kg尾静脉注射 ConA溶液
(用 PBS配制),空白组则给等量 PBS溶液 ,禁食不
禁水 , 8 h后眼球后静脉丛采血 ,静置 30 min, 3000
r/min离心 15min,分离血清 ,测 ALT和 AST。
2.4　统计方法 　实验数据均采用均值 ±标准差
( X±SD)表示 ,两组均数间的比较采用 t检验 ,由
SPSS软件统计处理 。
3　结果
3.1　陆英颗粒对 CCl4致小鼠急性肝损伤的影响
3.1.1 　对血清中 ALT、AST的影响:结果(见表 1)
表明 ,模型组血清中 ALT、AST远远高于空白组 ,与
空白组比较有非常显著的意义(P<0.001)。陆英
颗粒中 、高剂量组均能显著对抗 CCl4致小鼠急性肝
损伤导致的血清中 ALT、AST升高(与模型组比较 P
<0.05或 0.01或 0.001),低剂量组也有降低趋势 ,
各剂量组呈现较好的剂量相关性 。阳性药联苯双酯
亦能显著对抗 CCl4致小鼠急性肝损伤导致的血清
中 ALT、AST升高(与模型组比较 P<0.001)。
　表 1　　　　　陆英颗粒对小鼠血清中 ALT、
AST的影响( X±SD)
药物 剂量(g/kg) 动物数 ALT(U/L) AST(U/L)
空白组 - 12 87.5±28.1 105.3±31.5
模型组 - 12 839.4±211.5### 897.5±247.5###
联苯双酯 0.15 12 254.6±79.7＊＊＊ 398.6±188.7＊＊
陆英颗粒低 12 12 593.2±207.8 625.2±220.6
陆英颗粒中 24 12 506.8±156.8＊ 496.3±171.6＊＊
陆英颗粒高 48 12 377.6±97.4＊＊＊ 428.3±103.5＊＊＊
　　与空白组比较:###P<0.001;与模型组比较:＊P<0.05, ＊＊P<
0.01, ＊＊＊P<0.001
3.1.2 　对肝匀浆 TP、MDA、Ca2+-ATPase活力的影
响:结果(见表 2)表明 ,与空白组比较 ,其他各试验
组肝组织 TP含量的数据与模型组接近 ,均无统计
学意义(P>0.05)。但模型组 MDA显著高于空白
组(P<0.001),而 Ca2+-ATPase活力显著低于空白
组(P<0.001),陆英颗粒中 、高剂量组均能显著降
低 CCl4致小鼠急性肝损伤时所导致的肝脏 MDA含
·1086· 中药材第 28卷第 12期 2005年 12月
　　表 2　 陆英颗粒对小鼠肝匀浆 TP、MDA及 Ca2+-ATPase活力的影响( X±SD)
药物 剂量(g/kg) 动物数 TP(mg/g) MDA　　　(nmol/mgprot) Ca
2+-ATPase(μmolPi/mgprot/hour)
空白组 - 12 52.9±5.2 4.5±1.3 0.51±0.05
模型组 - 12 54.6±5.1 11.8±3.2### 0.21±0.06###
联苯双酯 0.15 12 53.3±5.6 6.4±2.3＊ 0.34±0.10
陆英颗粒低 12 12 54.4±5.9 8.9±2.9 0.29±0.07
陆英颗粒中 24 12 55.0±5.7 6.8±1.7＊ 0.37±0.10＊
陆英颗粒高 48 12 55.7±5.3 5.6±1.5＊＊＊ 0.43±0.11＊＊
　　与空白组比较:##P<0.01, ###P<0.001;与模型组比较:＊P<0.05, ＊＊P<0.01, ＊＊＊P<0.001
量升高(与模型组比较 P<0.05或 0.001),亦能显
著对抗 CCl4致小鼠急性肝损伤时所导致的肝组织
Ca2+-ATPase活力降低(与模型组比较 P<0.05或 P
<0.001)并体现一定的剂量相关性。
3.1.3　对肝组织病理变化的影响:与正常组比较 ,
模型组小鼠肝细胞损伤主要表现为弥漫性肝小叶中
心中间带肝细胞气球样变伴小叶中心管肝细胞胞浆
凝聚 ,可见嗜酸性变和嗜酸性小体 , 肝细胞点状坏
死 ,严重的炎症细胞浸润 ,肝中央静脉扩张 。陆英颗
粒各剂量组上述表现均明显减轻 ,其中高剂量组仅
可见个别肝小叶中心散在单个细胞气球样变及小点
状炎症细胞浸润 。上述病变以 “ +”表示轻度损伤 ,
以 “ ++”表示中度损伤 ,以 “ +++”表示重度损
伤 ,以 “ ±”表示正常;炎症修复以 “ +”表示阳性;以
“ -”表示阴性 ,则结果见表 3。
3.2 　陆英颗粒对 D-半乳糖胺盐酸盐大鼠急性肝
损伤影响　表 4结果表明 ,陆英颗粒各剂量组均能
显著对抗 D-半乳糖胺盐酸盐致大鼠急性肝损伤导
致的血清中 ALT、AST升高以及 Glu含量急剧降低 ,
(与模型组比较 P<0.05或 0.01或 0.001);阳性药
联苯双酯也有非常好的效果(与模型组比较 P<
0.01或 0.001)。表 5结果表明 ,陆英颗粒能较显著
对抗 D-半乳糖胺盐酸盐致大鼠急性肝损伤肝组织
Na+K+-ATP酶 、 Mg2+-ATP酶 、Ca2+-ATP酶 、Ca2+
Mg2+-ATP酶活性降低(与模型组比较 P<0.05或
0.01)。
　表 3　　　陆英颗粒对小鼠肝组织病理变化的影响
组别 肝细胞变性 中央静脉扩张 肝细胞坏死 炎症修复
空白组 ± ± ± -
模型组 ++～ +++ ++～ +++ +++ -
联苯双酯 +～ ++ + ±～ + +
陆英颗粒低 ++ ++ ++ +
陆英颗粒中 + + +～ ++ +
陆英颗粒高 + ±～ + + +
　　表 4 　陆英颗粒对 D-半乳糖胺盐酸盐大鼠急性肝损伤肝功的影响( X±SD)
药物 剂量(g/kg) 动物数 ATP(U/L) AST(U/L) Glu(mg/dl)
空白组 - 10 68.9±20.1### 102.3±28.5### 175.3±33.5###
模型组 - 10 681.5±256.1 1048.5±398.7 81.1±13.8
联苯双酯 0.1 10 218.3±68.4＊＊＊ 319.1±100.8＊＊＊ 141.3±28.7＊＊
陆英颗粒低 8 10 494.6±194.5＊ 650.2±378.5＊ 109.4±24.6＊
陆英颗粒中 16 10 349.7±118.3＊＊＊ 528.9±269.3＊＊ 122.4±36.9＊
陆英颗粒高 32 10 251.3±94.6＊＊＊ 346.5±99.7＊＊＊ 138.9±29.8＊＊
　　与空白组比较:###P<0.001;与模型组比较:＊P<0.05, ＊＊P<0.01, ＊＊＊P<0.001
　　表 5　陆英颗粒对 D-半乳糖胺盐酸盐大鼠急性肝损伤肝组织 ATP酶活力(单位:umolPi/mgprot/hour)的影响( X±SD)
药物 剂量(g/kg 动物数 K+Na+-ATP酶 Mg2+-ATP酶　 Ca2+-ATP酶　 Ca2+-Mg2+-ATP酶
空白组 - 10 0.86±0.14 0.93±0.13 0.85±0.09 1.12±0.21
模型组 - 10 0.39±0.13### 0.68±0.10## 0.58±0.08### 0.70±0.15###
联苯双酯 0.1 10 0.46±0.09 0.75±0.10 0.69±0.11 0.90±0.21
陆英颗粒低 8 10 0.48±0.08 0.73±0.13 0.71±0.09＊ 0.89±0.13＊
陆英颗粒中 16 10 0.56±0.15＊ 0.82±0.09＊ 0.75±0.13＊ 0.94±0.10＊
陆英颗粒高 32 10 0.69±0.14＊＊ 0.83±0.12＊ 0.76±0.11＊ 1.01±0.11＊＊
　　与空白组比较:##P<0.01, ###P<0.001;与模型组比较:＊P<0.05, ＊＊P<0.01, ＊＊＊P<0.001
·1087·中药材第 28卷第 12期 2005年 12月
3.3 　陆英颗粒对 ConA致小鼠急性肝损伤的影响
　结果(表 6)表明:与模型组比较 ,陆英颗粒组小鼠
血清 ALT、AST含量显著降低 (P<0.001或 P<
0.05);提示其对 ConA所致急性肝损伤小鼠有良好
的保护作用 。
　表 6　　　　　陆英颗粒对 ConA致肝损伤小鼠
血清 ALT、AST含量的影响
组别 剂量 动物数(n) ALT(μl) AST(μl)
空白组 - 12 54.1±18.5 93.6±23.6
模型组 - 12 500.1±126.5### 410.5±94.8###
利肝隆 210mg/kg 12 341.4±138.2＊ 366.8±63.2
陆英颗粒低剂量 12g/kg 12 346.3±143.2＊ 358.6±65.3
陆英颗粒中剂量 24g/kg 12 286.4±98.6＊＊＊ 313.2±55.3＊
陆英颗粒高剂量 48g/kg 12 274.6±87.3＊＊＊ 308.6±48.1＊
　　与空白组比较:###P< 0.001;与模型组比较:＊ P< 0.05,
＊＊＊P<0.001
4 　讨论与结论
四氯化碳对肝细胞的损伤作用使肝细胞内
GPT, GOT释出 ,引起血清中该酶的活性大大提高 。
测定血清中 GPT、GOT的数值 ,能有效表明肝损程
度及药物对治疗肝损伤的疗效。研究表明:在小鼠
CCl4急性肝损伤模型中 ,脂质过氧化是其主要的肝
损伤形成机制。 CCl4进入肝细胞后 ,在肝微粒体酶
和细胞色素 P450激活下生成自由基 · CCl3及 ·
Cl,通过氢吸附而攻击内质网膜上的磷脂分子 ,引发
膜的脂质过氧化作用增强 , · CCl3继而与膜脂质和
蛋白质大分子进行共价结合引起膜结构和功能完整
性的破坏 ,使肝细胞损伤 ,细胞质内 ALT、AST渗入
血液 ,导致血清 ALT、AST活性迅速升高 〔3、4〕;MDA
是脂质过氧化作用的代谢产物 ,其含量与脂质过氧
化成正比〔5〕。也有人研究认为 · CCl3还可抑制细
胞膜和微粒体膜上钙泵的活性 ,使 Ca2 +离子内流增
加 ,从而引起细胞中毒死亡〔6〕。本文研究结果表
明:陆英颗粒能显著对抗 CCl4致小鼠急性肝损伤导
致的血清中 ALT、AST升高 ,能显著降低 CCl4致小
鼠急性肝损伤时所导致的肝脏 MDA含量升高 ,明
显对抗 CCl4致肝线粒体脂质过氧化;亦能提高 CCl4
中毒小鼠肝细胞膜和微粒体膜的 Ca2 +-ATPase的活
性;病理结果也表明陆英颗粒对肝细胞损伤具有明
显的保护作用 ,并且在不同剂量的陆英颗粒之间存
在较明显的量效关系 。这些结果均提示陆英颗粒对
CCl4致小鼠急性肝损伤有明显的保护作用 ,其保肝
作用可能与对抗脂质过氧化以及提高肝细胞膜和微
粒体膜钙泵的活性有关。
D-半乳糖胺(D-GalN)是肝细胞的磷酸尿嘧啶
核苷的干扰剂 ,可造成肝弥漫性坏死和炎症 ,有人认
为 D-GalN其本身并无毒性 ,中毒机制是半乳糖胺进
入体内后与磷酸尿苷结合以形成磷酸尿苷半乳糖
胺 ,致使磷酸尿苷耗竭 ,从而使依赖其生物合成的核
酸 、糖蛋白 、脂糖等物质合成受抑制 ,限制了细胞器
及酶的生成和补充 ,细胞器受损 、膜损害 、钙离子内
流入细胞 ,从而造成肝细胞损伤 。近年来深入研究
指出 D-GalN引起细胞膜的损伤可能与细胞膜中糖
分的改变有关 ,即己糖代替了中性糖介入细胞膜 ,导
致膜分子结构发生变化 〔6〕。陆英颗粒抗 D-半乳糖
胺盐酸盐大鼠急性肝损伤试验结果表明:陆英颗粒
能显著对抗 D-半乳糖胺盐酸盐致大鼠急性肝损伤
导致的血清中 ALT、AST升高以 Glu含量急剧降低 ,
亦能显著对抗 D-半乳糖胺盐酸盐致大鼠急性肝损
伤肝组织酶 、Na+- K+- ATP酶 、 Mg2+-ATP酶 、 Ca2+-
ATP酶 、Ca2+-Mg2 +-ATP酶活性降低。这些结果提
示:陆英颗粒对 D-半乳糖胺盐酸盐致大鼠急性肝损
伤有明显的保护作用。
刀豆蛋白(ConA)诱导小鼠肝损伤是由 T细胞
介导的免疫性肝损伤 〔7〕 ,本文研究结果表明陆英颗
粒能显著对抗 ConA导致的小鼠血清 ALT、AST升
高 ,提示陆英颗粒对 ConA所致急性肝损伤小鼠有
良好的保护作用。
综上所述 ,本论文试验结果表明陆英颗粒对急
性实验性肝损伤具有良好的保护作用 ,其作用机制
尚需进一步深入研究探讨。
＊通讯作者
参 考 文 献
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(2005-07-16收稿)
·1088· 中药材第 28卷第 12期 2005年 12月
ProtectiveEffectsoftheGranuleofSambucuschinensisLindlonAcuteHepaticInjury
YangWei1 , WangXisha1 , WangMinwei1 , XuYan1 , LuDing1 , LiuChangsheng2
(1.SchoolofPharmacology, ShenyangPharmaceuticalUniversity, Shenyang110016;2.SchoolofPharmacology, JinzhouMedicalUni-
versity, Jinzhou121001)
Abstract　Objective:ToinvestigatetheprotectiveeffectsofthegranuleofSambucuschinensisLindlonacutehepaticinjury.Meth-
ods:Theacuteliver-injurymodelinducedbyCCl4 orD-GalNorConAwasestablishedinmiceorrats.Results:ThegranuleofSambucus
chinensisLindlshowedsignificantlyprotectiveeffectsonmiceacutehepaticinjuryinducedbyCCl4 , andtheeffectswereconcernofan-
tagonizinglipoperoxidationandimprovingenergyofCa2+-ATPaseofthecamitochondriaandmicrosome.Itshowedsignificantlyprotec-
tiveefectsonmiceorratsacutehepaticinjuryinducedbyD-GalNorConA, too.Conclusion:ThegranuleofSambucuschinensisLindl
showedsignificantlyprotectiveeffectsagainstmanykindsofchemicalandimmunologicalliverinjuries.
Keywords　GranuleofSambucuschinensisLindl;Acutehepaticinjury;CCl4;D-GalN;ConA
牛磺酸鹅去氧胆酸对小鼠免疫功能的影响
何秀玲　李培锋　关　红　哈斯苏荣　金少琳
(内蒙古农业大学 ,呼和浩特 010018)
　　摘要　目的:研究牛磺酸鹅去氧胆酸(TCDCA)对小鼠免疫功能的影响。方法:分别采用流式细胞术双抗标记
法 、血清溶血素分光光度法 、变态反应法 、碳廓清法和比浊测定法分别测定 TCDCA对 T细胞亚群 、对血清中抗体含
量 、单核-巨噬细胞吞噬功能及溶菌酶含量的影响。结果:TCDCA明显提高小鼠外周血中 CD4 +和 CD19+细胞百分
率及 CD4 +/CD8+比值;高 、低剂量的 TCDCA均能提高小鼠血清平均溶血素含量和血清中溶菌酶的含量 , 同时也可
能增强单核-巨噬细胞吞噬功能及抑制小鼠迟发型变态反应。结论:TCDCA能明显提高小鼠机体的免疫功能。
关键词　牛磺酸鹅去氧胆酸;流式细胞术;免疫功能
　　牛磺酸鹅去氧胆酸 (Taurochenodeoxycholic
acid, TCDCA)是由鸡胆汁中提取纯化的结合型胆汁
酸 ,化学名称为 3a, 7a-二羟基-5β -24-胆烷酰 -N-牛磺
酸 ,具有镇咳 、祛痰 、抗炎 、解毒 、抑菌等多种药理作
用 〔1、 2〕。然而 , 有关 TCDCA对免疫功能方面的研
究 ,目前尚未见有报导 ,为此 ,本文研究 TCDCA对
小鼠外周血中 T淋巴细胞亚群和 B细胞及特异性
免疫 、非特异性免疫功能的影响 ,以为进一步将 TC-
DCA转化为医药产品提供理论依据。
1 　实验材料
1.1 　药品与试剂　TCDCA由本课题组从鸡胆汁
中提取 ,纯度为 98%;5%盐酸左旋咪唑(兽用),批
号 为 030105;单 抗:FITC anti-mouse CD3+
(0000045308)、PEanti-mouseCD4+(0000038683)、
PEanti-mouseCD8+(0000054939)、PEanti-mouse
CD19+(0000047037)均购自美国 BectonDickinson
(BD)公司;淋巴细胞分离液 , TBD生物技术发展中
心;印度墨汁 ,批号为 020809,北京市西中化工厂;
2, 4-二硝基氯苯(DNCB),批号为 810101,中国上海
试剂一厂;LysozymeEggWhite,北京厦斯生物技术
有限公司腾黄微壁链球菌 ,中国医学科学院微生物
研究所提供 ,菌种编号 1.634。
1.2　实验动物　清洁级纯昆明种小鼠 ,体重 20 ±
2g,雌雄各半 ,由内蒙古大学实验动物研究中心提
供;豚鼠 ,体重 400 ±20g,雄性 ,由内蒙古生物制药
厂提供。
1.3　仪器设备　TU-1901型双光束紫外可见分光
光度计 ,北京普析通用仪器有限责任公司;Immuno-
cytometrysystems,美国 BectonDickinson(BD)公司;
SCR-20BC高速冷冻离心机 ,上海安亭科学仪器厂
生产;1712型电子天平 , W-GERMANY,德国制造。
2　数据处理
实验结果用 x±s表示 ,两个样本均数比较用 t
检验 ,多个样本均数分析用 F检验。
3　方法与结果
3.1　TCDCA对 T细胞亚群的影响　采用流式细
胞术双抗标记法 〔4〕。取小鼠 30只 ,随机分成 3组 ,
每组 10只 。蒸馏水组灌胃给予 10ml/kg蒸馏水;其
余各组按表 1剂量灌胃给予相应药液。每日 1次 ,
连续 7d, 于末次给药后 1h, 眼球采集抗凝血 1 ～
1.5ml,加等量 PBS(pH7.4),将稀释的全血沿试管
壁缓缓加到等体积的淋巴细胞分离液中 , 2000r/
·1089·中药材第 28卷第 12期 2005年 12月