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连钱草的抑菌活性研究



全 文 :[5] 邱才炜,徐晓玉,祝慧凤. 三棱丸抗炎镇痛作用研究[J].中药
药理与临床,2008,24(5) :7-10.
[收稿日期]2010-02-10
[基金项目]湖北省自然科学基金项目(编号:204130423) [作者简介]陶勇,男,硕士,电话:020-28854861,E-mail:taoy@ gdyzy. edu. cn
连钱草的抑菌活性研究
陶勇1,石米扬2 (1.广东食品药品职业学院,广东 广州 510520;2.武汉大学药学院,武汉 湖北 430072)
[摘要] 目的:探讨连钱草的抑菌活性。方法:用微量稀释法比较 4 种方法提取的连钱草提取物对供试菌的最低抑菌浓度
(MIC)。结果:连钱草挥发油和水提物对供试菌有一定程度的抑制作用。结论:连钱草挥发油和水提物具有明显的体外抑菌
作用。
[关键词] 连钱草;挥发油;抑菌活性
[中图分类号]R285. 5 [文献标识码]A [文章编号]1001-5213(2011)10-0824-02
Antimicrobial activity of the Glechoma longituba
TAO Yong1,SHI Mi-yang2(1. Guangdong Food and Drug Vocational College,Guangdong Guangzhou 510520,China;2. College of
Pharmacy,Wuhan University,Hubei Wuhan 430072,China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To investigate the microbial inhibitory effects of Glechoma longituba (Nakai)Kupr.METHODS Mini-
mum inhibitory concentrations (MIC)were examined by using micro dilution method. RESULTS The volatile oils and water extracts
of Glechoma longituba (Nakai)Kupr showed considerable antimicrobial activity to tested bacteria. CONCLUSION The volatile oils
and water extracts of Glechoma longituba (Nakai)Kupr have obvious inhibitory effect on bacterial growth in vitro.
KEY WORDS:Glechoma longituba;volatile oil;antimicrobial activity
连钱草的原植物是活血丹 Glechoma longituba
(Nakai)Kupr. 为唇形科植物,具有利湿通淋、清热
解毒、散淤消肿的功能[1],主治尿路感染、疳积、黄
疸、感冒、肺痈、咳嗽、小儿惊风、跌打扭伤、骨折、风
湿性关节炎,在湖北省民间常用于腹泻的治疗,具有
较好的疗效。为探讨连钱草治疗腹泻的作用特点,
笔者观察了连钱草 4 种提取物对大肠杆菌、金黄色
葡萄球菌、变形杆菌和绿脓杆菌的抑菌作用,旨在为
连钱草治疗腹泻提供实验依据,现报道如下。
1 材料
PYX—280 S—A生化培养箱,HW Y—100B 恒
温培养摇床;原料连钱草采购自湖北省医药公司,经
笔者鉴定为唇形科植物连钱草;大肠杆菌(北京生
物制品研究所) ,金黄色葡萄球菌(北京生物制品研
究所) ,变形杆菌、绿脓杆菌(R15)等所有菌种均由
湖北中医院微生物教研室提供。
2 方法与结果
2. 1 供试品的制备
2. 1. 1 连钱草水提物 取适量连钱草干品,加纯
化水浸泡 30 min 后加热煮沸,开始用强火,沸腾后
改用文火,30 min。搅拌,趁热过滤,药渣再加纯化
水同法煮沸后 30 min 过滤,合并滤液,水浴浓缩至
100%(含生药 1 g·mL-1)备用。
2. 1. 2 连钱草醇提物 取连钱草干品适量,加
95%乙醇于圆底烧瓶中,浸泡 6 h 后水浴加热回流 1
h,趁热过滤,药渣再用 75%乙醇加热回流 1 h,过
滤,合并滤液。减压回收乙醇浓缩至 100%[含生
药 100 g·(100 mL)-1]备用。
2. 1. 3 连钱草水提物血清 家兔连续 3 d给药(20
g·kg-1) ,末次给药后1. 5 h,取全血,室温静置 2 h,
2 000 r·min-1离心 10 min,取上清液即得。
2. 1. 4 连钱草醇提物血清 家兔连续 3 d 给药后
(20 g·kg-1) ,末次给药后1. 5 h,取全血,室温静置 2
h,2 000 r·min-1离心 10 min,取上清液即得。
2. 1. 5 连钱草挥发油 取连钱草干品,晒干粉碎
后,精密称取粉末100. 0 g于 2 000 mL 蒸馏瓶中,加
入 1 200 mL纯化水,按中国药典方法提取淡黄色油
状物[1];经无水硫酸钠干燥后得挥发油。
2. 1. 6 牛肉膏蛋白胨培养基 牛肉膏蛋白胨
10. 0 g、氯化钠5. 0 g,用 1 mol·L-1氢氧化钠调 pH
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7. 0,固体培养基再加入 1. 5% ~ 2% 的琼脂。
1. 103 Mpa高压下蒸汽灭菌 20 min,备用。
2. 2 最低抑菌浓度(MIC)的测定[2] 取 12 × 8 的
96 孔微量稀释板,每孔容量0. 25 ~ 0. 3 mL,U 型孔
底,从 1 号孔到 12 号孔(“+”“-”孔除外) ,用微量
加液器加入一系列 2 倍稀释的连钱草取液药液
0. 05 mL,“+”孔加培养基0. 05 mL,“-”孔加培养
基0. 1 mL。菌液(浓度3. 2 × 108个 /mL,1 ∶ 5 000 稀
释度)各孔均加入0. 05 mL。用微量搅拌器震荡混
匀后,置垫有湿纱布的有盖方盒内 37 ℃培养 18 h。
在黑色背景的光源下观察结果,有菌生长孔呈弥散
样浑浊,或底部呈扣子样沉淀。无菌生长孔所含最
低抗菌药物浓度即为 MIC,结果见表 1 ~ 5。
表 1 连钱草水提物抑菌作用
Tab 1 The antimicrobial activity of water extract of Glechoma
longituba
菌种
稀释倍数及药物浓度
1 2 4 8 16 32 64 128 256
空白对照
“ -”
大肠杆菌 - - - - - + + + + -
变形杆菌 - - - - - - - + + -
金葡萄菌 - - - - - - - + + -
绿脓杆菌 - - - + + + + + + -
表 1 显示,连钱草水提物对大肠杆菌、变形杆
菌、金葡萄菌和绿脓杆菌均具有一定的抑菌作用。
MIC分别是62. 5,15. 6,15. 6,250 g·L-1。
表 2 连钱草醇提物抑菌作用
Tab 2 The antimicrobial activity of ethanol extract of Glechoma
longituba
菌种
稀释倍数及药物浓度
1 2 4 8 16 32 64 128 256
空白对照
“ -”
大肠杆菌 - + + + + + + + + -
变形杆菌 - - - - - + + + + -
金葡萄菌 - - - - - + + + + -
绿脓杆菌 - + + + + + + + + -
表 2 显示,连钱草醇提物对大肠杆菌、变形杆
菌、金葡萄菌和绿脓杆菌均具有一定的抑菌作用。
MIC分别是 1,62. 5,62. 5,1 g·L-1。
表 3 连钱草挥发油提物抑菌作用
Tab 3 The antimicrobial activity of volatile oils extract of Gle-
choma longituba
菌种
稀释倍数及药物浓度
1 2 4 8 16 32 64 128 256
空白对照
“ -”
大肠杆菌 - - - - - - + + + -
变形杆菌 - - - - + + + + + -
金葡萄菌 - - - - - - - - + -
绿脓杆菌 - - + + + + + + + -
表 3 显示,连钱草水提物对大肠杆菌、变形杆
菌、金葡萄菌和绿脓杆菌均具有一定的抑菌作用。
MIC分别是0. 625,2. 5,0. 156,10 g·L-1。
表 4 连钱草水提物含药血清的抑菌作用
Tab 4 The antimicrobial activity of serum containing water ex-
tract of Glechoma longitub
菌种
稀释倍数及药物浓度
1 2 4 8 16 32 64 128 256
空白对照
“ -”
大肠杆菌 + + + + + + + + + -
变形杆菌 + + + + + + + + + -
金葡萄菌 - + + + + + + + + -
绿脓杆菌 + + + + + + + + + -
表 4 显示,连钱草水提物对大肠杆菌、变形杆
菌、金葡萄菌和绿脓杆菌没有抑菌作用。
表 5 连钱草醇提物含药血清的抑菌作用
Tab 5 The antimicrobial activity of serum containing ethanol
extract of Glechoma longitub
菌种
稀释倍数及药物浓度
1 2 4 8 16 32 64 128 256
空白对照
“ -”
大肠杆菌 + + + + + + + + + -
变形杆菌 + + + + + + + + + -
金葡萄菌 + + + + + + + + + -
绿脓杆菌 + + + + + + + + + -
表 5 显示,连钱草水提物对大肠杆菌、变形杆
菌、金葡萄菌和绿脓杆菌没有抑菌作用。
3 讨论
选择了 4 种常见的肠道致病菌来考察连钱草的
抑菌作用。连钱草提取物与连钱草挥发油都具有较
好的抑菌作用,连钱草挥发油对大肠杆菌、变形杆
菌、金葡萄菌和绿脓杆菌的 MIC 分别是0. 625,2. 5,
0. 156,10 g·L-1;水提物的 MIC 分别是62. 5,15. 6,
15. 6,250 g·L-1;醇提物的 MIC 分别是 1,62. 5,
62. 5,1 g·L-1。含药血清除水提物血清对金葡萄菌
有很小的作用外其他几乎没有抑菌作用。结果说
明,连钱草挥发油是其抑菌作用的主要部位,挥发油
中挥发性醇类具有抗腐败、抗滤过性病毒等特性,萜
类化合物一般具有提神、抗菌消炎和镇痛等作
用[3]。抑菌作用结果提示,连钱草治疗腹泻的作用
可能与连钱草挥发油与水提物的抑菌作用有关,连
钱草挥发油与水提物的抑菌作用是连钱草治疗腹泻
的一个重要原因。
参考文献:
[1] 中国药典. 一部[S]. 2010:158.
[2] 倪语星,王金良,徐英春. 抗微生物药物敏感性试验规范[M].
上海:上海科学技术出版社,2002:22.
[3] 田光辉,刘存芳,赖普辉. 抱茎蓼花的挥发油成分及其抗菌
活性的研究[J]. 时珍国医国药,2008,19 (7) :1643.
[收稿日期]2010-04-12
·528·中国医院药学杂志 2011 年第 31 卷第 10 期 Chin Hosp Pharm J,2011 May,Vol 31,No. 10