全 文 ：北方园艺 2011(12):161 ～ 162 ·中草药 ·
第一作者简介:胡彦武(1980-),男 ,吉林四平人, 硕士 ,讲师 ,现主
要从事生药有效成分的分离鉴定及生物活性研究工作。 E-mail:
hywcz@163.com.
基金项目:吉林省教育厅“十一五”科学技术研究资助项目(吉教
科合字[ 2009]第 465号)。
收稿日期:2011-03-25
东北刺人参茎中多糖的提取及含量测定
胡 彦武1 , 赵 国志2 , 曲 　迪1
(1.通化师范学院 制药与食品科学系,吉林通化 134002;2.通化市卫生学校 ,吉林通化 134001)
　　摘　要:采用超声波辅助技术提取东北刺人参茎中多糖 ,苯酚-硫酸法测定其多糖的含量。结
果表明:葡萄糖在0.01 ～ 0.07 mg/mL的范围内 ,其浓度与吸光度呈良好线性关系 ,回归方程为
Y =8.5357X+0.0074(r=0.9992),平均回收率为 99.78%(n=6 , RSD=0.37%),东北刺人参茎中
多糖含量为 9.23%。该方法简单可行 ,灵敏度高 ,测定结果可靠 ,可用于测定东北刺人参茎中多
糖含量。
关键词:东北刺人参;茎;苯酚-硫酸法;多糖
中图分类号:S 789.3;R 284.2　文献标识码:B　文章编号:1001-0009(2011)12-0161-02
　　东北刺人参(Oplopanax elatus Nakai)为五加科
人参属植物 ,主要分布于我国东北长白山区及朝鲜 、俄
罗斯远东山区 ,其根 、茎可入药 ,具有类似人参的功效 ,
可用于治疗神经衰弱 、低血压 、精神抑郁 、糖尿病等[ 1] 。
近年来 ,有关东北刺人参的成分研究多集中在对其黄
酮及皂苷类方面 ,对其所含多糖类成分的的含量测定
尚无报道。现以东北刺人参地上茎枝为试验材料 ,采
用分光光度法对其多糖的含量进行了测定 ,以期为进
一步开发利用东北刺人参地上可再生部位药用资源奠
定基础。
1　材料与方法
1.1　试验材料
东北刺人参茎药材采自长白山南麓 ,经通化师范
学院中药学教研室于俊林教授鉴定为五加科人参属植
物东北刺人参(Oplopanax elatus Nakai)的干燥茎枝;
TU-1901型双波束紫外-可见分光光度计(北京普析通
用仪器有限责任公司),KQ-200KDB超声波清洗器(昆
山市超声波仪器有限公司);乙醇 、丙酮 、氯仿 、正丁醇 、
葡萄糖 、苯酚 、浓硫酸等试剂均为分析纯 。
1.2　试验方法
1.2.1　东北刺人参茎多糖的提取与精制　称取东北
刺人参茎粉末100 g ,精密称定 。用90%乙醇浸泡洗涤
2次 ,每次 6 h ,于通风橱中将滤渣溶煤挥干后加水
1 000 mL ,45℃条件下超声提取 30 min ,过滤 ,滤渣再
加水 ,同法再提取 2次 ,合并 3次提取液 ,浓缩至 100
mL(1 mL 相当于 1 g 生药材),用 Sevage 试剂(氯仿∶
正丁醇=4∶1)除蛋白 ,离心 ,取上清液 ,加 95%乙醇 ,使
乙醇含量达到 80%,静置12 h ,抽滤 ,滤渣以无水乙醇 、
丙酮 、乙醚依次洗涤 3次 ,挥散溶剂 , 40℃条件下烘干
至恒重 ,即得东北刺人参茎精制多糖。
1.2.2　苯酚试剂的配制　取苯酚 100 g ,加铝片 0.1 g
和碳酸氢钠 0.05 g ,蒸馏 ,收集 182℃馏分 ,配制成 5%
的苯酚溶液 ,置棕色瓶内放 4℃冰箱备用。
1.2.3　葡萄糖标准溶液的配制　精密称取 105℃干燥
至恒重的葡萄糖标准品 25 mg ,置 250 mL 量瓶中 ,加
少量蒸馏水溶解 ,定容至刻度 、摇匀 ,即配成浓度为0.1
mg/mL的葡萄糖标准溶液。
1.2.4　东北刺人参茎多糖溶液的配制　精密称取
105℃干燥至恒重的东北刺人参茎多糖 10 mg ,置 100
mL容量瓶中 ,加少量蒸馏水溶解 ,定容至刻度 ,摇匀 ,
即配成浓度为 0.1 mg/mL的东北刺人参茎多糖溶液。
1.2.5　样品溶液的配制　精密称取东北刺人参茎粉
末 200 mg ,分别加 90%乙醇浸泡洗涤 2次 ,每次 6 h ,
于通风橱中将滤渣溶媒挥干后加水 20 mL ,45℃条件
下超声提取 30 min ,共 3次 ,合并滤液 ,定容于 250 mL
容量瓶中 ,即得供试样品溶液 。
2　结果与分析
2.1　测定波长的选择
分别精密吸取葡萄糖标准溶液和东北刺人参茎多
糖溶液各 1.0 mL 置试管中 ,加 5%苯酚溶液 1.5 mL ,
摇匀 ,快速沿管壁加浓硫酸 6.0 mL ,摇匀 ,室温静置
5 min ,置 40℃恒温水浴中放置 30 min ,另以蒸馏水同
法操作为空白对照 ,在 400～ 600 nm 波长下扫描 ,标准
溶液和样品溶液均在 490 nm 处有最大吸收 ,因而检测
波长确定为 490 nm。
2.2　标准曲线的绘制
精密吸取浓度为 0.1 mg/mL 的葡萄糖标准溶液
0.1 、0.2 、0.3 、0.4 、0.5 、0.6 、0.7 mL 置于干燥试管中 ,
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·中草药· 北方园艺 2011(12):161～ 162
分别精密加入蒸馏水使至 1.0 mL ,再分别加入 5%苯
酚溶液 1.5 mL ,摇匀 ,再加浓硫酸 6.0 mL ,摇匀 ,室温
静置 5 min ,40℃恒温水浴中放置 30 min ,另以蒸馏水
同法操作为空白对照 ,分别于 490 nm 处测定其吸光
度。以吸光度为纵坐标 ,葡萄糖浓度为横坐标 ,绘制标
准曲线 , 得回归方程:Y =8.5357X +0.0074 , r =
0.9992 ,说明葡萄糖在 0.01 ～ 0.07 mg/mL 范围内呈
良好的线性关系。
2.3　换算因子的测定
精密吸取东北刺人参多糖溶液 1.00 mL ,按 2.2
项方法测吸光度 ,代入回归方程 ,计算出多糖中葡萄糖
浓度 ,按 f=W/(DC)计算换算因子(W 为多糖重量
mg ,C为多糖中葡萄糖的浓度 mg/mL , D为多糖的稀
释因子),测得换算因子 f=1.48(n=3)。
2.4　稳定性试验
按1.2.4 项方法制备供试品溶液 ,显色后每隔
0.5 h测定吸光度 ,连续 3 h ,结果吸光度在 3 h内无明
显差异 , RSD为 1.18%(n=6),表明显色后的供试品
溶液在 3 h内稳定性良好。
2.5　精密度试验
精密称取东北刺人参茎粉末 200 mg ,按 1.2.4项
方法制备供试品溶液 ,按 2.2项方法测定吸光度 ,重复
测定 5次 ,结果 RSD为 1.16%,表明该方法精密度
良好。
2.6　重复性试验
精密称取东北刺人参茎粉末 200 mg , 6 份 ,按
1.2.4项方法制备供试品溶液 ,按 2.2项方法测定吸光
度 ,结果 RSD为 1.27%,表明该方法重现性良好。
2.7　加样回收率试验
精密称取已知含量的东北刺人参茎粉末 100 mg ,
6份 ,分别加入精制东北刺人参茎多糖 9 mg ,精密称
定 ,按 1.2.4项方法制备样品溶液 ,按2.2项方法测定
吸光度 ,计算平均回收率为 99.78%, RSD=0.37%(n
=6)。见表 1。
　　表 1 加样回收率试验(n=6)
称样量/mg 样品含量/mg 加入量/mg 测得量/mg 回收率/ % 平均/ % RSD/ %
100.02 9.23 9.20 18.44 100.11
100.03 9.23 9.21 18.41 99.67
100.01 9.23 9.20 18.46 100.33 99.78 0.37
100.03 9.23 9.19 18.39 99.67
99.98 9.23 9.20 18.37 99.35
100.00 9.23 9.21 18.40 99.57
2.8　东北刺人参茎多糖含量测定
精密吸取样品溶液 1.00 mL ,按 2.2项方法测定
吸光度 ,代入回归方程 ,计算出多糖中葡萄糖浓度 C ,
按下式计算多糖含量:多糖含量%=(CDf×100)/W。
式中:C为样品溶液的葡萄糖的浓度(mg/mL),D为样
品溶液的稀释因子 , f 为换算因子 ,W 为样品的重量
(mg)。经测定 ,东北刺人参茎中多糖的平均含量为
9.23%, RSD=1.07%(n=3)。
3　结论与讨论
该研究首次从东北刺人参茎中提取多糖 ,经测定 ,
东北刺人参茎中多糖含量约 9.23%。随着森林面积的
不断缩小 ,东北刺人参野生资源不断萎缩 ,东北刺人参
的地上茎枝为可再生植物资源 ,对其所含多糖类成分
进行深入研究 ,既保证其植物资源不被破坏 ,又可寻求
和扩大新药源 、开发和利用长白山区药用资源提供理
论依据。有关东北刺人参茎中多糖的生物活性及化学
结构分析尚需进一步的深入研究。
参考文献
[ 1] 　胡彦武.东北刺人参茎叶提取物对环磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫
功能的影响[ J] .中国实验方剂学杂志, 2011 , 17(7):175-177.
[ 2] 　胡彦武 ,王丽丽.长白山区野生菟丝子中多糖的提取及含量测定
[ J] .安徽农业科学 , 2010 , 38(9):4939-4940.
[ 3] 　班立桐 ,杨红澎 ,郑志广 ,等.六种灵芝子实体多糖含量的对比分
析[ J] .北方园艺, 2010, 24:195-197.
Extraction and Determination of Polysaccharide in the Stems of Oplopanax elatus
HU Yan-wu , ZHAO Guo-zhi , QU Di
(1.Department o f Pharmaceutics and Food Science , Tonghua Teachers Colleg e, Tonghua , Jilin 134002;2.Tonghua Medical Schoo l ,
Tonghua , Jilin 134001)
Abstract:Ultrasonic technology w as used to ext ract the poly saccharides in the stems of O.elatus , and the phenol-
sulfuric acid method was used to determine the content.The results indicated that the linear range of glucose w ere
0.01 ～ 0.07 mg/mL , and the equation of linear reg ression was Y =8.5357X +0.0074(r=0.9992).The average
recoveries was 99.78%,with RSD of 0.37%(n=6).The content of the polysaccharides in the stems of O.elatus was
9.23%.The method w as proved to be simple ,high sensitivity and can be used for polysaccharide determination of O.
elatus.
Key words:Oplopanax elatus;stems;phenol-sulfuric acid method;polysaccharide
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