全 文 ：第16卷 第10期
Vol.16 No.10
2010年 10月
October.2010Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy
叶类中药显微鉴别通常需要测定若干显微常数（如气孔
指数、栅表比、脉岛数）和后含物、毛茸、纤维、导管等组织结
构的长度或直径。传统的显微测量是用目镜测微尺进行，需
先在选定的显微镜和适当的放大倍数下用载物台测微尺将
目镜测微尺标化，再用目镜测微尺测量目的物的大小[1]；对于
显微常数的测量，还需使用显微描绘器。整个过程需用肉眼
反复计数测微尺的小格数，容易引起视力疲劳和测量误差。
随着数码显微镜逐渐成为高等院校和科研单位的常规仪器，
数码显微测量使得中药显微常数和显微结构的测量变得简
易、准确。但在许多院校，该项技术还未广泛应用，究其原因*基金项目：广东药学院科研启动基金项目资助（2006ZYX02）
数码显微测量技术在扶桑叶显微鉴别中的应用*
张春荣
（广东药学院中药学院，广东 广州 510006）
[摘要] 目的：利用数码显微测量技术测量扶桑叶中显微结构的大小和显微常数。方法：采用Motic BA300数码显微镜，
Motic DigiClass 1.2图像观察与拍照软件及Motic Images Advanced 3.2图像处理软件对扶桑叶粉末制片、表面制片或整体透化装片
中的草酸钙簇晶的直径、栅表比、脉岛数、气孔数和气孔指数进行测量。结果：扶桑叶中草酸钙簇晶的直径为5-20 μm，栅表比为1:
(3.6±0.4)，脉岛数为（11.7±2.1）个/mm2，下表皮气孔数为（0.37±0.04）个/mm2，气孔指数为（16.19±2.61）%。结论：数码显微测量
技术具有操作简便、精度高、误差小、用时少的优点，可以在中药显微测量中进行推广。
[关键词] 数码显微测量；扶桑叶；朱槿；中药鉴定
[中图分类号] R282.5 [文献标识码] A [文章编号] 1672-951X（2010）10-0086-02
Digital Microscopy in hibiscus leaves microscopic identification
Zhang Chunrong
（College of Traditional Chinese Medicine, Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou，510006, China）
[Abstract] Objective: To use the digital microscope measurement technique to measure rhe hibiscus leaves size and mi－
croscopic constants. Methods: Use Motic BA300 digital microscope, Motic DigiClass 1.2 software and the image observed and
photographed and Motic Images Advanced 3.2 image processing software on hibiscus leaf powder to make glass slider, or as a
whole through the surface film of calcium oxalate crystal clusters disguise the diameter of palisade ratio, pulse a few islands,
the number of stomata and stomatal index were measured. Results: The hibiscus leaf clusters of calcium oxalate crystals in
the diameter of 5-20 μm, palisade ratio was 1: (3.6±0.4), vein islet number was (11.7±2.1) a/mm2, the next number of stoma－
ta (0.37±0.04) a/mm2, stomatal index (16.19±2.61)%. Conclusion: digital microscopic measurement techniques have advantages
of simple, high precision, less error, cost little of time, It can be measured in traditional Chinese medicine and can be spread
into more places.
[Key words] digital microscopic measurement; hibiscus leaves; hibiscus; Chinese identification
的压片，压片片重均匀，外观光洁美观、质量可控。
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（收稿日期：2010-05-06 编辑：李海洋）
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DOI:10.13862/j.cnki.cn43-1446/r.2010.10.047
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主要在于一些教师和科研人员不了解数码显微测量的原理
和方法，特别是测量软件的使用方法。笔者现将数码显微测
量技术介绍如下。
1 仪器与试药
Motic BA300数码显微镜（Motic公司生产），与计算机相
连，并安装有Motic DigiClass 1.2图像观察与拍照软件和Mot－
ic Images Advanced 3.2图像处理软件；扶桑叶，采自广州大
学城（广州市番禺区），经广东药学院中药学院刘基柱副教授
鉴定为锦葵科植物朱槿（Hibiscus rosa-sinensis L.）的叶；试
剂均为国产分析纯。
2 方法与结果
2.1 表面制片 撕取鲜扶桑叶下表皮，置载玻片上，用水合
氯醛试液加热透化至透明，滴加稀甘油，盖上盖玻片观察。
2.2 整体透化制片 剪取5 mm×5 mm的鲜扶桑叶，置试管
中，加适量水合氯醛试液和10％盐酸溶液（溶解草酸钙结晶），
于沸水浴加热透化至透明。取出，上表面向上（测定栅表比）
或下表面向上（测定气孔数）置载玻片上，滴加稀甘油后封片
观察。
2.3 粉末制片 取阴干的扶桑叶粉碎并过60目筛，取少许粉
末置载玻片上，加水合氯醛试液加热透化，滴加稀甘油后封
片观察。
2.4 数码摄影 将待测量的结构在适当的放大倍数下聚焦
清晰，利用Motic DigiClass 1.2软件的拍照功能捕捉图像，命
名、存档。
2.5 显微测量
2.5.1 数码标尺的标定 在各放大倍数下聚焦载物台测微
尺的标尺，分别对其水平和垂直方向拍照、命名、存档。用Mot－
ic Images Advanced 3.2软件打开文档，点击“设置”菜单中的
“校准向导”选项，选择“用刻度线校准”，按说明装入载物台
测微尺水平和垂直方向的图像，将图像中出现的线段的端点
拉放到刻度线已知实际长度的刻度上，选择采集图像所用物
镜倍数，在高、宽栏中输入线段的实际长度，按“校准”即可完
成对数码标尺的标定。
2.5.2 样品的测量 在合适的放大倍数下观察待测量的结构，
拍照、命名、存档。用Motic Images Advanced 3.2软件打开该文
档，选取相同放大倍数下标定的数码标尺，点击“测量”菜单中
的“线”（测量直径或平直结构的长度）或“折线”（测量弯曲结构
的长度）选项，用鼠标在图像中沿待测量结构的直径或长度划
线，该结构的实际大小即显示在线的旁边，记录该数据。
2.6 显微常数的测定
2.6.1 栅表比 取整体透化制片的样品，在高倍镜下观察表
皮细胞和栅栏细胞，拍照；可在样品的同一位置分别聚焦表
皮细胞和栅栏细胞，拍摄多张相片。计数若干个表皮细胞范
围内的所有栅栏细胞的数目（若大部分栅栏细胞在表皮细胞
之外则不计入），该数目除以表皮细胞数即为栅表比。在不同
样品和同一样品的不同部位，重复至少5次，取平均值即为最
终结果。
2.6.2 脉岛数 取整体透化制片的样品，在低倍镜下观察细
脉，拍照。在Motic Images Advanced 3.2软件中打开图像，点
击“测量”菜单中的“矩形”选项，用鼠标在图像中拉放出
4 mm×4 mm的框（其长、宽即时显示在框的旁边），计数该范
围内的脉岛数，该数目除以16即为单位面积（mm2）的脉岛数。
重复至少5次，取平均值即为最终结果。
2.6.3 气孔数和气孔指数 取表面制片的样品，在适当的放
大倍数下观察气孔和表皮细胞，拍照。在Motic Images Ad－
vanced 3.2软件中打开图像，点击“测量”菜单中的“矩形”，用
鼠标在图像中拉放出1 mm×1 mm的范围，计数该范围内的气
孔数和表皮细胞数。按下式计算气孔指数。重复10－30次，气
孔数的平均值即为扶桑叶单位面积（mm2）的气孔数；气孔指
数的平均值即为扶桑叶的气孔指数。
单位面积上的气孔数×100
单位面积上的气孔数+单位面积上的表皮细胞数
2.7 结果 通过数码显微测量，扶桑叶的栅表比为1:(3.6±
0.4)，脉岛数为（11.7±2.1）个/mm2，下表皮气孔数为（0.37±
0.04）个/mm2，气孔指数为（16.19±2.61）%。
扶桑叶的叶肉组织中散在了大量草酸钙簇晶，大小不
等，直径为5-20 μm。利用目镜测微尺测定扶桑叶中草酸钙簇
晶的直径，与数码显微测量的结果差异无统计学意义（P>
0.05），表明数码显微测量技术准确、可行。
3 讨 论
利用数码显微镜和计算机软件进行数码显微摄影是生
物学领域普遍采用的实验技术，在中药鉴定的科研和教学中
也得到广泛应用[2-3]。大多数码显微摄影系统配备有显微测量
软件，可用于测量特定放大倍数下物体的大小，该项数码显
微测量技术已经相当成熟，并且在多个领域广泛采用[4,5]，但在
中药鉴定方面鲜见报道。笔者采用Motic BA300型数码显微镜
及配套的Motic DigiClass 1.2图像观察与拍照软件、Motic
Images Advanced 3.2图像处理软件对中药扶桑叶的显微结
构和显微常数进行测量，结果表明，数码显微测量具有操作
简便、精度高、误差小、用时少等优点，值得在中药显微鉴定
中进行推广。
朱槿是热带、亚热带地区广泛栽培的常绿观赏植物，其
根、叶、花可入药，具有资源丰富、取材方便的优点[6]。叶具不
定式气孔轴式、草酸钙簇晶、星状毛、黏液细胞等结构，是极
好的中药鉴定教学的实验材料。笔者测定的扶桑叶显微结构
和显微常数可用于鉴别扶桑叶药材，也可用作叶类中药显微
鉴别教学的参考。
参考文献
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白毛夏枯草又称金疮小草、筋骨草、活血草、散血草、地
龙胆。为唇形科植物筋骨草属金疮小草（Ajuga decumbens
Thunb.）的全草，主要分布在秦岭以南各省区。白毛夏枯草性
味苦寒，功效止咳化痰、清热、凉血、消肿、解毒，主要用于治
疗腹泻、肝炎、疔毒疖肿、外伤出血等[1]。其主要成分有蜕皮激
素类物质[2]、黄酮类物质[3]和杯苋甾酮[4]等。现代药理研究证
明[5]，白毛夏枯草具有保肝利胆、镇咳、祛痰、平喘等活性，木
犀草素是其中含量较高且有明显保肝利胆和止咳平喘作用
的成分之一[6-8]，本研究以白毛夏枯草的主要成分木犀草素为
指标，采用RP-HPLC法，比较不同采收期中木犀草素的含量，
以期为确定白毛夏枯草最佳采收期提供科学依据。
1 仪器与试药
德国Dionex-U3000液相色谱仪（德国Dionex公司，Dionex
Chemeleon色谱工作站，U3000 Photodiode Array Detector检测
器），SK5200H超声波清洗机（上海科导超声仪器有限公司）；
AEU-210型电子天平（d=0.1mg，日本岛津）；木犀草素对照品
（供含量测定用，中国药品生物制品检定所，批号：111520-
200201），甲醇（天津大茂，色谱纯），水为双蒸水，其他试剂均
为分析纯。白毛夏枯草采自湖北襄樊，晒干后备用，经郧阳医
学院附属东风医院药剂部胡碧波主任中药师鉴定为唇形科
植物筋骨草属金疮小草（Ajuga decumbens Thunb.）的全草。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备 取经五氧化二磷减压干燥器中干
燥36 h的木犀草素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL
含0.05 mg的溶液（实配0.053 mg·mL-1），即得。
2.2 供试品溶液的制备 取本品粗粉2.0 g，精密称定，置具
塞锥形瓶中，精密加入0.9%盐酸甲醇溶液25 mL，精密称定，
超声处理（功率300 W，频率50 kHz）30 min，放冷，精密称定，
白毛夏枯草不同采收期中木犀草素的分析
李志浩，李 鹏，孙新建
（郧阳医学院附属东风医院，湖北 十堰 442008）
[摘要] 目的：研究不同采收期白毛夏枯草中木犀草素的含量变化，为确定白毛夏枯草药材最佳采收期提供依据。方法：
采用RP-HPLC法测定不同采收期白毛夏枯草中木犀草素的含量。色谱条件：Agilent HC-C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱，
流动相：甲醇-0.8%磷酸溶液（45∶55），流速为0.8 mL·min-1，柱温为30 ℃，检测波长为350 nm。结果：不同采收期白毛夏枯草药
材中木犀草素含量差异有统计学意义。结论：建议白毛夏枯草药材在第1年的10月和第2年的6月采收。
[关键词] 木犀草素；白毛夏枯草；高效液相色谱法；采收期
[中图分类号] R282.5 [文献标识码] A [文章编号] 1672-951X（2010）10-0088-03
White Prunella different harvest period of luteolin
Li Zhihao, Li Peng, Sun xinjian
（East of Yunyang Medical College Hospital, Shiyan Hubei, 442008，China）
[Abstract] Objective: To study the harvest of white Prunella vulgaris in the luteolin content in order to determine the
best harvest herbs Prunella vulgaris white to provide evidence. METHODS: RP-HPLC method for the determination of white
Prunella vulgaris in different collection of luteolin content. Chromatographic conditions: Agilent HC-C18(4.6 mm × 250 mm, 5 μm)
column, mobile phase: methanol -0.8% phosphoric acid (45 ∶55), flow rate 0.8 mL·min-1, the column temperature was 30 ℃ ,
The detection wavelength was 350 nm. Results: The harvest of medicinal herbs Prunella vulgaris white Luteolin content signifi－
cantly. Conclusions: recommend to harvest white Prunella medicine in October of the first year or the second year in June.
[Key words] luteolin; white Prunella vulgaris; high performance liquid chromatography; harvest
的应用[J].中医药导报,2007,13(10):120-122
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（收稿日期：2010-03-02 编辑：李海洋）
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