全 文 :沙漠嘎种子的 TLC鉴定及超临界 CO2 萃取物的 GC-MS测定
王延年 乔延江
(北京中医药大学中药学院 北京 100102)
摘要:目的 研究沙漠嘎种子化学成分及药材鉴定方法 。方法 采用气相色谱-质谱联用(GC-
MS)测定超临界 CO2 萃取物化学成分;药材鉴定采用薄层色谱(TLC)法 。结果 从哲里木盟产沙漠
嘎种子超临界 CO2 萃取物中 ,共检出 72个成分 ,鉴定了其中 60个 ,并测定了各化合物在挥发油中
的百分含量 。结论 超临界 CO2 萃取物中 ,9 ,12-十八碳二烯酸含量最高 ,达 28.52%,其次是 n-
十六酸;建立了沙漠嘎种子TLC鉴定方法。
关键词:沙漠嘎;种子;鉴定;气相色谱-质谱联用;化学成分;超临界 CO2 萃取
中图分类号:R284.1
沙漠嘎原植物为菊科蒿属植物差把嘎蒿 Arte-
misia halodendron Turcz.别名沙蒿[ 1] ,首载于(《中国
沙漠地区药用植物》):“治慢性气管炎 、哮喘……,治
风湿性关节炎” ,临床使用多以种子为药用部位 ,治
疗风湿 、炎症及外伤等。沙漠嘎生于沙丘上 ,也见于
荒漠草原和森林草原 ,分布于中国东北 、华北及西北
地区 ,原苏联远东和蒙古也有分布[ 2] 。我们对沙漠
嘎药材资源进行了实地考察 ,以陕北 、内蒙古赤峰 、
哲里木盟沙漠地区产量较大。目前对沙漠嘎药材的
研究很少 ,仅有对地上部分 4种化学成分及微量元
素的报道[ 3] ,尚缺乏确切的鉴定方法 。本文采用薄
层色谱(TLC)法对该药材进行了鉴定 ,并采用气相
色谱-质谱联用(GC-MS)方法对哲里木盟沙漠地区
的沙漠嘎种子超临界 CO2 萃取物的化学成分进行
了分析。
1 仪器与试药
美国 Thermo-Finnigan Trace GC-DSQ 型气相-质
谱联用仪。石油醚 、丙酮 、浓硫酸 、乙醇等试剂均为
分析纯。药材沙漠嘎种子分别采自陕北 、哲里木盟 、
赤峰等地 。经本院鉴定教研室阎玉凝教授鉴定为
Artemisia halodendron Turcz.的种子。圣草酚-7-甲
醚为自备 。
2 方法与结果
2.1 沙漠嘎种子的 TLC 鉴定
分别取采自陕北 、赤峰 、哲里木盟等产地的沙漠
嘎种子药材 2 g粉碎 ,加入 85%EtOH 10 mL ,提取 2
次 ,合并滤液 ,回收 EtOH 无醇味 ,以 CHCl3 萃取 ,回
收 CHCl3 ,加入 1 mL 丙酮 ,与圣草酚-7-甲醚的丙
酮溶液点于同一 TLC 板上 ,以环己烷∶丙酮=5∶3上
行展开 ,展距 9 cm 。喷以 AlCl3试剂 ,在 365 nm 下观
察 。3个产地的药材 ,在紫外灯 365 nm 下观察 ,在
Rf值 0.3处都有一黄绿色斑点 ,即圣草酚-7 -甲
醚 。TLC 鉴定结果见图 1。
图 1 不同产地沙漠嘎种子的 TLC结果
1陕北样品 2哲里木盟样品
3 赤峰样品 4 圣草酚-7-甲醚
2.2 药材超临界 CO2 萃取物的GC-MS测定
取产自哲里木盟地区的药材 50 g ,进行超临界
CO2 萃取 ,得油状物6.62 g ,取 0.1 mL , 加入到10 mL
容量瓶中 ,用环己烷定容至刻度。GC -MS 联用条
·68·
北京中医药大学学报
Journal of Beijing University of TCM
2004年 5 月第 27卷第 3 期
May 2004 , Vol.27 , No.3
王延年 ,男, 33岁 ,在读医学博士生
件:美国 Thermo-Finnigan Trace GC-DSQ 型气相-质
谱联用仪。色谱柱为 DB-5(25 mm×0.25 mm , 0.25
μm)弹性石英毛细管柱 ,气化室温度为 250 ℃。色
谱柱程序升温条件:初始温度 80 ℃,保持 5 min后 ,
以每分钟 4 ℃的速率升温至 250 ℃并保持 10 min;
分流进样 ,分流比为 20∶1。气相色谱条件:载气为
氦气 ,离子源温度 200 ℃,电子能量为 70 eV ,扫描质
量范围为 30 ~ 450 AMU ,发射电流 0.2 mA ,分辨率
1 000 ,进样量 1 μL。测定结果见表 1。
表 1 沙漠嘎种子超临界萃取物的化学成分
峰号 化合物 保留时间 min
分子
量
含量
% 峰号 化合物
保留时间
min
分子
量
含量
%
1 乙基环戊烷 4.23 98 0.64
2 三甲基庚烷 4.74 114 0.26
3 4-乙基辛烷 10.36 142 0.12
4 己酸 11.36 116 0.18
5
1-亚乙酰 , 八氢-7a-甲基-1H
-茚 20.75 164 0.15
6 2 , 4-癸二烯醛 23.02 152 0.08
7
3 , 7 , 7-三甲基 , -11-亚甲基-
螺[ 5.5]癸-2-烯 25.85 204 0.08
8 马兜铃烯 27.14 204 0.07
9 榄香烯 27.49 204 0.19
10 乙酰绵马精酸 27.88 196 0.66
11 喇叭烯氧化物 28.34 220 0.18
12 1 , 5-二甲基苯 29.12 202 0.17
13
1 , 3 , 5-三甲基 -2 , 6-二氧环
己基-3-丙醇 30.25 210 0.16
14
3 , 7 , 11-三甲基-1 , 6 , 10-十二
烯-3醇 31.54 222 3.90
15
十氢-1 , 1 , 7-三甲基-4-亚甲
基-1H-环丙[ e]奥-7-醇 31.98 220 0.15
16 2 , 6 , 10-三甲基十四烷 32.72 240 0.22
17 1-苯基-2 , 4-己二炔-1-酮 33.76 168 0.20
18
à , à , 5-三甲基-5-(4-甲基-
3-环己基-1-)-四氢-2-呋
喃甲醇
34.21 238 1.27
19 1 , 8-萜二烯-6-醇新戊酸酯 34.70 236 0.09
20 à-红没药醇 35.08 222 0.54
21 十七烷 35.53 240 0.16
22 异香橙烯环氧化物 35.80 220 0.07
23
5 , 9 , 9-三甲基螺[ 3.6] 癸-5 , 7
-二烯-1-酮 36.16 190 0.16
24
四氢2 , 2, 6-三甲基-6-(4-甲基
-3-环己-1-)-2H-吡喃-3-
醇
36.76 238 0.50
25 十四烷酸 37.06 228 0.11
26 5 , 9-二甲基-4 , 8-癸二烯醛 37.42 180 0.13
27 十八烷 38.21 254 0.27
28 7-十六烯 39.23 238 0.16
29 十五烷酸 39.64 242 0.13
30 2-十八烷基醇 39.85 314 0.08
31 二十一烷 40.76 296 0.16
32
1 , 7-二甲基-四异丙烯基-二
环[ 4 , 4 , 0] 癸-6-烯-9-醇 40.99 262 0.07
33 8-甲基-9-十四烯酸 41.65 240 0.10
34 邻苯二甲酸二丁酯 41.97 278 0.14
35 n-十六酸 42.41 256 5.11
36 十六酸乙酯 43.01 284 0.17
37 二十烷 43.21 282 0.19
38 十七烷酸 44.54 270 0.08
39
2-甲氧基-3-(1-丙烯基)-
1 , 4-萘二酮 44.95 214 0.08
40 9 , 12-十八碳二烯酸 46.62 280 28.52
41
Z-(13 , 14-环氧)十四碳-11-
烯-1-醇乙酸酯 50.70 268 0.10
42
1(22), 7(16)-二环氧-三环
[ 20.8.0.0(7 , 16)] 三十烷 51.71 444 0.08
43
6 , 7-二乙基-1 , 2 , 3 , 4-四羟基
-1 , 1 , 4 , 4-四甲基-萘 53.32 244 0.15
44
7-异丙基-1 , 1 , 4a -三甲基-
1 , 2 , 3 , 4 , 4a , 9 , 10 , 10a-八氢菲 53.79 270 0.10
45
1 , 2-苯二甲酸单(2-乙基己基)
酯 54.42 278 0.07
46 1-二十醇 55.71 298 0.63
47
2-(2-甲基-丙烯基)-环己酮
肟 58.83 167 0.31
48 2-羟基-9 , 12-十八碳二烯酸 59.11 354 0.18
49 二十五烷-1-醇 59.41 368 1.31
50
-2 , 6 , 10 , 15 , 19 , 23-六甲基 2 ,
6 , 10 , 14 , 18 , 22 六烯二十五烷 59.63 410 0.86
51 1-二十一碳甲酸 60.27 340 0.10
52
1-(3-氧-4-硫代丁基苯基)
-2 , 2 , 6-三甲基二环[ 4.1.0] 庚
烷
60.94 316 0.08
53 四十烷 61.21 618 0.47
54 芥酸 61.91 338 0.17
55 4H-1-苯并吡喃-4-酮 62.12 314 0.07
56 1-磺酰基十六烷 62.88 324 0.09
57 -维生素 E 63.51 416 0.07
58 胆固醇 64.61 386 0.20
59 二十七烷 64.79 380 0.13
60 菜油甾醇 66.98 400 0.41
·69·第 3期 王延年等 沙漠嘎种子的 TLC鉴定及超临界 CO2 萃取物的 GC-MS 测定
3 讨论
薄层色谱结果显示 ,产自哲里木盟 、赤峰的样品
所含化学成分比较接近 ,与陕北样品差别稍大 , 3个
产地药材都含有圣草酚-7 -甲醚。超临界 CO2 萃
取物中 ,以 9 ,12-十八碳二烯酸(Z , Z)含量为最大 ,
占总量的 28.52% ,此外含有多种有机酸 、酯 、醇类
及维生素 E等。本实验结果及其他文献资料表明 ,
对既有药用价值 ,又有防风固沙作用的沙漠嘎进行
深入研究 ,综合利用其种子 、茎叶 ,扩大其种植范围 ,
提高其经济价值 ,对改善沙漠地区生态环境 ,尤其对
近年来的沙尘暴治理 ,具有现实意义 。
参 考 文 献
1 江苏新医学院.中药大辞典.上海:科学技术出版社 ,
1986.1166
2 中国科学院北京植物研究所.中国高等植物图鉴(第四
册).北京:科学出版社 , 1975.528
3 孔令韶 , 高 平 ,任天祥.内蒙孟恩套力盖银 、铅 、锌矿区
植物群落和主要植物元素含量特征.植物学报 , 1991 , 33
(7):529
(收稿日期:2004-01-14)
Research on the Seed of Artemisia halodendron Turcz.:TLC Identification
and GC-MS Detection of the CO2 Supercritical Extract
Wang Yannian (王延年), Qiao Yanjiang (乔延江)
(College of Traditional Chinese Pharmacy , Beijing University of Traditional Chinese Medicine ,Beijing 100102)
ABSTRACT:Objective To establish the methods for detecting the chemical components and identifying the phar-
macognostic characteristics of the seed of Artemisia halodendron Turcz(SAHT).Methods GC-MS techniques were used
to detect the chemical components of SAHT extract by CO2 supercritical extraction , and TLC was used to identify the
pharmacognostic characteristics of SAHT.Results 72 Chemical components were found from the CO2 supercritical ex-
tract of SAHT collected from Zhelimu League of Inner Mongolia , and 60 of them were identified.In addition , the per-
centages of these compounds in the volatile oil containing them were detected.Conclusion In the CO2 supercritical ex-
tract of SAHT , it is found that the content of 9 ,12-octadecadienoic acid is the highest , reaching 28.52%, and the cont-
ent of n-hexadecanoic acid is the next.In addition , the TLC identification procedure for identifying the pharmacognostic
characteristics of SAHT is established.
KEYWORDS:Artemisia halodendron Turcz;Seed ;Identification ;GC-MS ;Chemical Component;CO2 Supercritical
Extraction
(上接 52 页)
Protective Effects of the Active Fraction of Huanglianjiedu Decoction Against
Glutacid-induced Injury to Rat Cortical Neurons in Culture
Wu Yan(吴 彦), Sun Jianning(孙建宁), Yu Shaokun(于绍坤), et al.
(College of Traditional Chinese Pharmacy , Beijing University of Traditional Chinese Medicine ,Beijing 100102)
ABSTRACT:Objective To observe the protective effects of the active fraction of Huanglianjiedu Decoction (AF-
HD)against glutacid-induced cytotoxicity to nerve cells in culture.Method New-born rat cortical neurons were cultivat-
ed in vitro , and glutacid and AFHD were added into the culture medium during the cultivation , in order to observe
glutacid-induced cytotoxicity to cortical neurons and the protective effects of AFHD against the cytotoxicity.Results It
was found that AFHD could markedly increase the activity of the model cells at the dose of 305mg·kg-1 ;markedly de-
crease the leakage rate of LDH and production of MDA at the doses of 610 mg·kg-1 , 305 mg·kg-1 and 153 mg·kg-1 ;
reduce the production of NO at the doses of 305 mg·kg-1 and 153 mg·kg-1 ;and increase the activity of SO , at the dose
of 610 mg·kg-1 .Conclusion AFHD has a remarkable protective effect against glutacid-induced cytotoxicity to cortical
neurons , the mechanism of which may be related with its decreasing the level of NO and resisting oxidation.
KEYWORDS:Active Fraction of Huanglianjiedu Decoction;Glutacid;Cortical Neurons;Cell Culture
·70· 北京中医药大学学报 2004 年第 27卷