全 文 ：基本肽类化合物[ 4] 。
东川芎在延边地区曾代川芎使用 ,具有活血化
淤 、疏肝解郁 、散风止痛的功效 ,用于风寒头痛 、风湿
痹痛 、月经不调 、瘀滞腹痛 、肝气郁结 、痈疽肿痛等
症[ 5] 。其化学成分主要有阿魏酸 、挥发油 、蒿本内
酯 、有机酸 、氨基酸 、维生素等多种物质[ 5] 。
文献报道川芎中生物碱类成分川芎嗪和酚性物
质阿魏酸可明显改善各种原因引起的记忆损伤动物
的学习记忆能力[ 6-7] 。本实验结果显示:中 、高剂量
东川芎乙醇提取物能够改善东莨菪碱诱导的小鼠学
习障碍 ,而且其疗效类似于石杉碱甲 ,结果表明东川
芎乙醇提取物对小鼠记忆障碍有良好的改善作用 ,
其作用机制很可能是东川芎的有效单体成分阿魏酸
的抗氧化 、抗自由基及抗炎等作用[ 8-9] 。
参考文献:
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[收稿日期] 2010-01-08
[ 作者简介] 国家自然科学基金资助项目(编号:30500053)　[ 通讯作者] 段雪云 ,女 ,博士 ,副主任药师 , 电话:027-88929176 , E-mail:xu eyund-
uan@sina.com 　[ 通讯作者] 方颖 ,女 ,博士 ,助理研究员 ,电话:027-68890066 , E-m ail:f angyingchina@yahoo.com.cn
高效液相色谱法测定缬草中活性成分青刺尖木酯醇苷的含量
段雪云1 , 2 ,范恒3 ,陈树和2 ,龚占峰1 ,方颖1 ,刘焱文1 　(1.湖北中医药大学 , 湖北省中药资源与中药复方省部共建教育
部重点实验室 ,湖北 武汉 430061;2.湖北省中医院 ,湖北 武汉 430061;3.华中科技大学同济医学院附属协和医院 , 湖北武汉
430022)
[ 摘要] 　目的:对不同产地缬草中活性成分青刺尖木酯醇苷进行含量分析。方法:采用高效液相色谱法 , Ag ilent HC-C18(4.6
mm×250 mm , 5 μm)柱;乙腈-水(16∶84)为流动相 , 流速为1.0 mL·min-1 , 检测波长 229 nm。结果:青刺尖木酯醇苷在0.304
～ 1.520 μg 范围内线性关系良好(r=0.999 9), 平均回收率为99.89%, RSD为1.08%。结论:该方法简单 、快速 、灵敏 、专属性
强 ,能准确测定缬草中活性成分青刺尖木酯醇苷的含量。
[ 关键词] 　缬草;青刺尖木酯醇苷;含量测定;高效液相色谱法
[中图分类号] R927.2　　[ 文献标识码] A　　[文章编号] 1001-5213(2010)18-1555-03
HPLC determination of prinsepiol-4-O-β-D-glucoside in Valeriana of f icinalis L.
DUAN Xue-yun1.3 , FAN Heng3 , CHEN Shu-he2 , Gong Zhan-feng3 , Fang ying3 , LIU Yan-wen3(1.Hubei
Pr onvinical Hospita l of T raditional Chinese medicine , Hubei Wuhan 430061 , China;2.Hubei co llege of t raditional Chinese
medicine , Hubei Wuhan 430061 , China;3.Union Hospital;Tong ji Medical Co llege;H uazhong Univer sity of Science and Tech-
nolog y;Hubei Wuhan 430022 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　To deve lop a method for the determina tion o f prinsepio l-4-O-β-D-g lucoside content in Valeriana o ffi-
cinalis L.METHODS　HPLC w as used.The chromato g raphic conditions w ere:Ag ilent HC-C18 Co lumn (4.6 ×250 mm , 5
μm), acetonitrile- w ater(16∶84)as mobile phase , flow ra te being 1.0 ml·min-1 and the detection waveleng th at 229 nm.RE-
SULTS　The calibr ation curve w as linear in the r ange of 0.304 ～ 1.520 μg(r =0.999 9).The average recovery w as 99.89%
(RSD=1.08%).CONCLUSION　The mo thod is simple , fast and accura te fo r analy sis of prinsepiol-4-O-β-D-gluco side in Va le-
riana officinalis L.
KEY WORDS:Valeriana of f icinalis L.;prinsepiol-4-O-β-D-g luco side;de te rmination o f content;HPLC
·1555·中国医院药学杂志 2010年第 30卷第 18期 Chin H osp Pharm J , 2010 Sep , Vol 30 , No.18
　　缬草(Valeriana o f f icinalis L.)系败酱科缬草
属植物。具有镇静安神 、解痉止痛之功效 ,主治心神
不安 、心悸失眠 、癫狂 、风湿痹痛 、痛经等 。缬草具有
较好的抗心律失常作用[ 1-3] ;从缬草中分离的青刺尖
木脂醇苷具有抗心律失常作用 ,可能是通过抑制钾
通道 ,延长动作电位和有效不应期而达到治疗目
的[ 4] 。目前关于缬草的质控标准多以镇静安神方面
的活性成分为主 ,如挥发油 、缬草烯酸 、缬草酯[ 5-8]
等;而缬草抗心律失常方面的活性成分质控标准未
见报道 ,在本实验室缬草抗心律失常活性成分研究
的基础上 ,对其中的主要活性成分青刺尖木脂醇苷
采用高效液相色谱法进行了含量分析。
1　材料
Waters 600 高效液相色谱仪 ,Waters 2996 二
极管阵列检测器 , Empow er 色谱工作站;色谱柱
Agilent HC-C18(4.6 mm ×250 mm , 5 μm);对照
品:青刺尖木脂醇苷(本实验室分离纯化得到 ,按面
积归一化法计算含量大于 98%,符合含量测定用对
照品的要求 ,使用前置五氧化二磷中减压干燥至恒
重);缬草样品经湖北中医学院中药鉴定教研室吴
和珍副教授鉴定为缬草属植物缬草(Valeriana
o f f einal is L.);乙腈为美国 Baker 公司色谱纯;水
为纯化水;其他试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2.1　色谱条件　流动相:乙腈-水(16∶84);流速:
1.0 mL·min-1 ;柱温:30 ℃;检测波长:229 nm ;进
样量:10 μL;色谱图见图 1。
图 1　高效液相色谱图
A.对照品;B.供试品;1-青刺尖木脂醇苷
Fig 1　HP LC ch rom atograms
A.reference substance;B.sam ple;1-prins epiol-4-O-β-D-glu coside
2.2 　供试品溶液的制备 　取缬草药材粉末约
1.0 g ,精密称定 ,置具塞锥形瓶中 ,用 70%乙醇 30
mL ,超声(250 W ,频率 40 kHz)提取 2 次 ,每次 30
min ,滤过 ,合并滤液 ,减压回收溶剂至近干 ,用适量
水溶解 ,以醋酸乙酯萃取 3次(30 , 20 ,20 mL),弃去
醋酸乙酯液;水液水浴挥尽醋酸乙酯上样于 D-101
大孔树脂(8 g ,内径2.5 cm)柱 ,用 50 mL 纯化水洗
脱 ,弃去水液 ,再用 90%乙醇 70 mL 洗脱 ,收集乙醇
洗脱液 ,挥干乙醇 , 残渣用流动相溶解 ,定容至 10
mL ,摇匀 , 0.45 μm 微孔滤膜滤过 ,即得供试品溶
液。
2.3　对照品溶液的制备　精密称取五氧化二磷中
减压干燥至恒重的青刺尖木脂醇苷对照品适量 ,置
25 mL 量瓶中 ,以流动相溶解并稀释成0.152 g·L-1
的溶液 ,作为对照品溶液。
2.4　标准曲线的制备　分别精密吸取上述对照品
溶液 2 ,4 , 6 ,8 mL 于 4 个 10 mL 量瓶中 ,加流动相
稀释至刻度 ,摇匀 ,分别精密吸取稀释后各浓度对照
品液及原对照品溶液 10 μL ,按上述色谱条件依次
进样 ,测定 ,以峰面积(Y)为纵坐标 ,进样量(X)为横
坐标绘制标准曲线 ,得回归方程 Y =9 207.5X -
41 665 , r=0.999 9 , 表明青刺尖木脂醇苷在0.304
～ 1.520 μg 的范围内线性关系良好 。
2.5 　精密度试验 　精密吸取上述对照品溶液
(0.152 g·L-1)10 μL ,重复进样 5次 ,测定峰面积 ,
计算 RSD为0.80%,结果表明仪器精密度良好。
2.6　稳定性试验　取同一批号供试品溶液 ,于制备
后 0 ,2 ,4 ,6 ,8 h ,分别精密吸取 10 μL ,进样 ,测定峰
面积 ,计算 RSD为1.13%,结果表明供试品溶液在
8 h内基本稳定。
2.7　重复性试验 　取同一批号样品 5 份 ,每份
1.0 g ,精密称定 ,按上述条件 ,制备成供试品溶液 ,
并测定含量 ,计算 RSD 为0.58%,结果表明方法重
复性良好 。
2.8　加样回收率试验　取已知含量的样品 5份 ,每
份0.5 g ,精密称定 ,置具塞锥形瓶中 ,分别精密加入
一定量的青刺尖木脂醇苷对照品(70%乙醇溶解),
照供试品溶液制备方法制备 ,并测定含量 ,计算加样
平均回收率为99.89%, RSD 为 1.08%。结果见表
1。
表 1　回收率试验结果
Tab 1　Results o f recovery
样品号 样品重/ g
含量
/m g
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/ %
均值
/ %
RSD
/ %
1 0.499 0.6995 0.6080 1.3025 99.18
2 0.502 0.7038 0.6080 1.3132 100.23
3 0.498 0.6982 0.6080 1.2981 98.67 99.89 1.08
4 0.503 0.7052 0.6080 1.3223 101.50
5 0.503 0.7052 0.6080 1.312 99.87
2.9　样品含量测定　精密称取本品 ,按供试品溶液
制备方法制成供试品溶液。分别精密吸取对照品溶
液和供试品溶液 10 μL ,注入高效液相色谱仪 ,按上
述条件测定 ,采用外标法计算含量 。结果表明 ,不同
产地缬草中青刺尖木脂醇苷的含量有明显差异性 ,
以湖北恩施和贵州剑河含量较高 ,还与采收季节和
贮存时间有一定的关系 ,以当年 9 ～ 10 月份采收含
量较高。不同产地和不同采收时间缬草中青刺尖木
脂醇苷的含量结果见表 2 。
·1556· 中国医院药学杂志 2010年第 30卷第 18期 Chin H osp Pharm J , 2010 Sep , Vol 30 , No.18
表 2　样品含量测定结果(n=6)
Tab 2　Result o f sample determina tion(n=6)
样品编号 产地 采收季节 含量/mg·g -1
1 湖北恩施 2007.10 1.350 6
2 湖北恩施 2007.09 1.343 9
3 湖北恩施 2007.08 1.376 0
4 湖北恩施 2006.01 1.215 4
5 湖南湘西吉首 2007.10 1.047 1
6 湖南湘西吉首 2007.08 0.885 6
7 贵州剑河 2007.10 1.364 1
8 湖北恩施 2007.03 0.846 2
9 湖北恩施 2005.08 0.792 2
3　讨论
实验过程中考察了不同的提取方法(超声 , 回
流)、不同的溶剂(氯仿 、甲醇)、以及不同的提取时间
(20 , 30 ,40 min)对青刺尖木脂醇苷含量的影响 ,最
终确定用 70%乙醇 30 mL 超声 2次 ,每次 30 min
的提取方法;还考察到用 D-101 大孔树脂除杂质的
方法分离效果较好 。考察了不同的流动相(乙腈-
水 ,甲醇-水 ,甲醇-0.1%磷酸溶液)对青刺尖木脂醇
苷的分离的影响 ,流动相为乙腈-水(16∶84)时分离
效果较佳 。本方法能实现青刺尖木脂醇苷与有关物
质的有效分离 ,保留时间适中 。
采用高效液相色谱法测定青刺尖木脂醇苷的含
量 ,方法学验证表明 ,其精密度 、稳定性 、加样回收率
和重复性均能满足定量要求 ,可用于缬草中青刺尖木
脂醇苷的含量测定 ,为缬草药材质量控制提供参考。
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[收稿日期] 2009-07-27
[ 作者简介] 罗勤辉 ,男 ,本科 ,主管药师 ,电话:13601868265
羧甲基壳聚糖包衣尼莫地平纳米脂质体的制备及其在小鼠体内的组织
分布
罗勤辉1 ,何文2 ,孙安琪2 　(1.上海闵行区中心医院药剂科 , 上海 201100;2.武汉大学人民医院药学部 , 湖北 武汉
430060)
[ 摘要] 　目的:制备羧甲基壳聚糖(CM C)包衣尼莫地平(NMD)纳米脂质体 , 并考察其在小鼠体内的组织分布。方法:采用薄
膜分散法制备 NMD 脂质体 , 用 CMC 包衣后经高压均质机乳匀 ,得到 CMC 包衣 NMD 纳米脂质体。测定其包封率 , Zeta电
位 ,粒径大小及分布。对小鼠尾静脉注射普通 NMD 脂质体 , CMC 包衣脂质体(未乳匀),纳米脂质体(未包衣), CMC 包衣纳
米脂质体 ,于预定时间测定血浆及心 , 肝 ,脾 , 肺 ,肾 , 脑组织中的血药浓度 , 计算相关靶向参数。结果:包衣纳米脂质体的包封
率为(71.2±4.8)%, Ze ta 电位为(-11.4±1.6)mV ,平均粒径为(95.4±7.2)nm(n=3), 与市售 NMD注射液相比 , 脑组织中
的 T I , RTE 分别为310.7%, 58.25%。结论:本实验制备的 CMC 包衣 NMD纳米脂质体包封率高 , 粒径达纳米级 ,并具有较好
的脑靶向性。
[ 关键词] 　尼莫地平;羧甲基壳聚糖;纳米脂质体;包衣;组织分布
[中图分类号] R944　　[ 文献标识码] A　　[ 文章编号] 1001-5213(2010)18-1557-05
Studies on the preparation of carboxymethyl chitosan-coated nimodipine nanoliposomes and their
tissue distribution in mice
LUO Qin-hui1 , HE Wen2 , SUN A n-qi2(1.Department o f pha rmacy of Shanghai M inhang District Hospita l , 170 Xin-
song Road M inhang Dist rict Shanghai , Shanghai 201100 , China;2.Depar tment of pharmacy o f Renmin Hospital , Wuhan Uni-
versity ,H ubei Wuhan 430060 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　To prepare carboxymethy l chito san (CMC)-coated nimodipine(NMD)nano lipo somes and study
their tissue distribution in mice.METHODS　NMD liposomes w ere prepa red by the film dispersion method.CMC w ere used to
·1557·中国医院药学杂志 2010年第 30卷第 18期 Chin H osp Pharm J , 2010 Sep , Vol 30 , No.18