全 文 ：第 26卷 第 6期 贵州大学学报(自然科学版) Vol.26 No.6
2009年　12月 JournalofGuizhouUniversity(NaturalSciences) Dec.2009
文章编号　1000-5269(2009)06-0067-03
苗药冷水花提取物抗炎镇痛活性的研究＊
孙春龙 1 ,郑庆霞 1 ,李洪庆 1＊ ,杜　文 2 ,夏　虎 1 ,张红涛3
(1.贵州大学贵州省生化工程中心 ,贵州 贵阳 550025;2.贵州大学真菌资源研究所 ,贵州贵阳 550025;3.青岛市市立医院 ,山东青岛 266011)
摘　要:用石油醚 、乙酸乙酯对冷水花全草 95%乙醇提取物进行分段萃取 ,采用小鼠急性耳廓肿
法 、棉球肉芽肿法研究抗炎活性 ,采用小鼠热板法 、醋酸扭体法研究镇痛活性。结果表明 ,乙酸乙
酯提取部位具有较强的抗炎和镇痛活性 ,能明显抑制二甲苯所致小鼠急性耳廓肿 、小鼠棉球肉芽
肿及热板 、冰醋酸所致小鼠疼痛。
关键词:冷水花;抗炎作用;镇痛作用;小鼠;活性部位
中图分类号:R965.2　　文献标识码:A
　　冷水花(PileanotataC.H.Wright)为荨麻科
(Urticaceae)冷水花属(Pilea)植物 [ 1] 。别名:水麻
叶 、山羊草 、土甘草 、白山羊 、甜草等。苗文名 , Reib
ndadwab,贵州苗语 “税务达 ” [ 2] 。冷水花具有治
疗湿热黄疸 ,赤白带下 ,淋浊 ,尿血 ,小儿夏季热 ,疟
母 ,消化不良 , 跌打损伤 , 外伤感染等疾病的功
效[ 1] 。分布自广西 、广东 ,经长江流域中 、下游诸
省 ,北达陕西南部和河南南部;越南也有。生于林
下或沟边阴湿处 [ 3] 。夏 、秋季采收 ,鲜用或晒干 。
目前关于冷水花的研究较少且未见关于冷水花抗
炎镇痛活性方面的报道。本实验首次对冷水花提
取物的抗炎镇痛活性进行研究 ,以期为进一步开发
冷水花提供依据。
1　器材
1.1　材料
冷水花购自贵州安顺药材公司。经贵州大学
生命科学学院熊源新教授鉴定为荨麻科冷水花属
冷水花。
1.2　动物
昆明种小鼠(清洁级),体重(20±2)g.由贵阳
医学院实验动物中心提供。
1.3　仪器与试剂
旋转蒸发仪 (广东仪科实验室技术有限公
司)、电子天平(莆田市亚太计量仪器有限责任公
司)、ARTT407C电子分析天平(上海奥豪斯公司)、
电热鼓风干燥箱(上海博讯实业有限公司医疗设
备厂);石油醚 、乙酸乙酯 、二甲苯 、乙醚 、冰醋酸均
为分析纯 ,乙醇为化学纯。
2　方法
2.1　数据统计分析
所有实验结果的数据以均数 ±标准差(x±s)
表示 ,所有数据分析在 SPSS13.0软件上进行 。
2.2　供试样品的制备
取干燥冷水花全草 1 kg粉碎 ,用 95%乙醇浸
泡提取 3次 ,每次 3天 。回收乙醇 ,提取浸膏溶于
适量水中 ,依次用石油醚 、乙酸乙酯萃取 ,分别得到
乙醇总提取物及石油醚萃取物 、乙酸乙酯萃取物 、
水溶性部分 ,减压浓缩得石油醚浸膏(A)5.23 g、
乙酸乙酯浸膏 (B)4.12 g和水溶性浸膏 (C)
6.83g.各组分均用 0.5%羧甲基纤维素(CMC)溶
液超声溶解 ,分别配成 50 mg· mL-1的溶液备用。
2.3　抗炎作用
2.3.1　小鼠急性耳廓肿
取雄性小鼠 40只 ,随机分 4组 ,每组 10只。
腹腔注射给药 ,按 0.5 mg/kg剂量给药 30 min后 ,
用二甲苯 0.1 mL均匀涂布于各鼠右耳的正反面 ,
30 min后处死 ,用 6 mm打孔器在两耳同一部位扎
下左右耳片 ,精密称重 ,以右耳的重量减去左耳的
重量作为耳廓炎性肿胀度 ,计算右耳肿胀度及抑制
率 [ 4] 。
2.3.2　棉球肉芽肿
取雄性小鼠 40只 ,随机分 4组 ,每组 10只。
＊ 收稿日期:2009-10-12
作者简介:孙春龙(1981-),男(汉族),山东青岛人 ,硕士研究生 ,研究方向:药物化学 , Email:chunlongsun@163.com.
＊通讯作者:李洪庆 , Email:li.hongqing@yahoo.com.
DOI :10.15958/j.cnki.gdxbzrb.2009.06.028
在乙醚浅麻醉下腹部切口 ,将已高压灭菌的 10 mg
棉球植入小鼠右侧腋窝皮下。按 0.5 mg/kg剂量
给药 ,连续 7 d.末次给药 1 h后处死小鼠 ,取出棉
球 ,在 70℃烘箱中干燥 2 h后称重 ,减去原棉球重
量即为肉芽肿重量 [ 5] 。
2.4　镇痛作用
2.4.1　醋酸扭体法
取 40只小鼠雌雄各半 ,随机分为 4组 ,每组
10只 ,称重并编号。按 0.5 mg/kg剂量给药 ,阴性
对照组腹腔注射 0.2 mL/20 g(体重)生理盐水 。
在给药 60min后腹腔注射 0.6 %醋酸溶液 0.2mL
/只 。观察并记录注射醋酸溶液 15 min内出现扭
体反应的次数 。计算药物镇痛百分率 [ 6] 。
2.4.2　热板法
选出对 55℃热板痛觉反应在 10-30s的 40只
雄性小鼠 ,随机分为 4组 ,每组 10只。阴性对照组腹
腔注射 0.2mL/20g(体重)生理盐水 ,按0.5mg/kg剂
量给药 ,每只小鼠给药前及给药后 30, 60, 90, 120min
测定痛反应潜伏期 ,计算痛阈提高率[ 6] 。
3　结果
3.1　二甲苯致小鼠耳廓肿胀作用的影响
从表 1可以看出 A、B、C组均能抑制二甲苯所
致的小鼠急性耳廓肿 ,其中 B组的抑制率为 42.9%
与蒸馏水组相比差异有强显著性(P<0.01).
表 1　冷水花提取物对二甲苯致小鼠耳廓
肿胀作用的影响(x±s)
组别
(单位)
剂量
C/mg· kg-1
耳廓炎症肿
胀率 /m· mg-1 抑制率 /%
蒸馏水组 / 3.5±1.8 /
A 0.5 3.2±2.0 8.6
B 0.5 2.0±2.4＊＊ 42.9
C 0.5 2.7±1.5＊ 22.9
注:与蒸馏水组比较 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01.n=10
3.2　对小鼠棉球肉芽肿的影响
从表 2可见 B、C组能明显抑制小鼠棉球肉芽
肿与对照组的差异性(P<0.01),其中 B组的抑制
作用最强抑制率为 44.6%.
表 2　冷水花提取物对小鼠棉球肉芽肿重量的影响(x±s)
组别
(单位)
剂量
C/mg· kg-1
肉芽肿干重
/m· mg-1 抑制率 /%
蒸馏水组 / 10.1±1.5 /
A 0.5 10.2±2.8 /
B 0.5 5.6±2.5＊＊ 44.6
C 0.5 7.2±1.5＊＊ 28.7
注:与蒸馏水组比较 , ＊＊P<0.01.n=10
3.3　对小鼠醋酸性扭体反应的抑制作用
从表 3可见 B、C组有镇痛作用 ,能延缓小鼠
扭体的出现 ,还能减少冰醋酸所致的小鼠扭体次
数 ,其中 B组出现扭体时间和 15 min内扭体的次
数与对照组的差异作用最明显(P<0.01),且镇痛
率最强为 31.9%.
表 3　冷水花提取物对小鼠醋酸性扭体
反应的抑制作用(x±s)
组别
(单位)
剂量
C/mg· kg-1
出现扭体
时间 t/min
15min内扭
体次数 m
镇痛
率 %
对照组 / 3.1±1.5 41.4±2.4 /
A 0.5 4.6±1.9＊ 41.6±2.8 /
B 0.5 6.1±1.3＊＊ 28.2±5.0＊＊ 31.9
C 0.5 5.9±2.3＊＊ 33.9±4.2＊＊ 18.1
注:与对照组比较 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01.n=10
3.4　对小鼠热板法的镇痛作用
从表 4可见 B组镇痛效果最显著;小鼠给药
后 60 min痛阈提高率为 34.3%,且痛阈值与给药
前(或对照组)相比差异极显著(P<0.01).
表 4　冷水花取提物对小鼠热板法的镇痛作用(x±s)
组别 剂量C/mg· kg-1
给药前痛
阈值 t/s
给药后痛阈值 t/s
30 min 60 min 90 min 120 min
痛阈提高百分率 /%
30 min 60 min 90min120 min
对照组 / 17.1±4.7 17.9±4.5 18.6±2.6 15.6±4.3 17.6±5.0 4.7 8.8 / 2.9
A 0.5 18.1±2.5 19.3±3.0＊■ 18.4±2.9 16.6±2.1 18.0±2.7 6.6 1.7 / /
B 0.5 16.6±3.1 19.3±3.1＊■ 22.3±3.0＊＊■■17.6±2.3■ 17.3±2.6 16.3 34.3 6.0 4.2
C 0.5 16.7±4.5 17.9±5.1 18.7±3.4 17.3±3.7■ 17.2±3.6 7.2 12.0 3.6 3.0
注:与给药前比较 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01;相同时间与对照组比较■P<0.05, ■■P<0.01.n=10
4　讨论
目前关于苗药冷水花的抗炎镇痛作用研究尚
未见报道 ,本实验首次采用小鼠急性耳廓肿法 、棉
球肉芽肿法 、小鼠热板法 、醋酸扭体法 ,评价和比较
了苗药冷水花不同溶剂提取物的抗炎镇痛效果。
其中乙酸乙酯提取部分具有明显的抗炎活性 ,能减
少二甲苯致小鼠急性耳廓肿以及小鼠棉球肉芽肿
的肿胀程度;该部位还具有明显的镇痛活性 ,能提
·68· 贵州大学学报(自然科学版) 第 26卷
高热板致痛小鼠的痛阈和延缓热板疼痛反应时间 ,
减少冰醋酸刺激致痛小鼠扭体的次数。实验证明
乙酸乙酯提取部位是冷水花抗炎镇痛的活性部位 。
在以后的工作中我们将对其进行活性指导下化学
成分的进一步分离和纯化 ,为冷水花的质量控制及
抗炎镇痛的作用机理研究提供科学依据 。
参考文献:
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技术出版社 , 1999:573.
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[ 5] 杨峰 ,崔祝梅 ,张继众 ,等.前列泰片对前列腺增生及抗炎镇痛
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[ 6] 徐叔云 ,卞如濂 , 陈修.药理实验方法学 [ M] .北京:人民卫生
出版社 , 2002:882.
StudyonEfectsoftheExtractsofMiaoEthnomedicine
PileanotataC.H.WrightonAnti-inflammationandAnalgesic
SUNChun-long1 , ZHENGQing-xia1 , LIHong-qing1＊ , DUWen2 , XIAHu1 , ZHANGHong-tao3
(1.CenterofBiochemicalEngineeringinGuizhouProvince, GuizhouUniversity, Guiyang550025, China;2.Institute
ofFungusResources, GuizhouUniversity, Guiyang550025, China;3.QingdaoMunicipalHospital, Qingdao266011, China)
Abstract:Theextractof95% ethanolfromPileanotataC.H.Wrighthadbeenextractedbypetroleumether,
ethylacetate.Thesefractionswerescreenedbyanti-inflammatoryandanalgesticefectsexperiments.Theinhibi-
tionofauricleedemainducedbyxyleneandgranulomainducedbycotonwereusedtotesttheanti-inflamma-
tion, paincausedbyhotboardandaceticinmicewasusedtotesttheanalgesicefects.Theresultsshowthatthe
threefractionswereisolatedfromPileanotataC.H.Wright, amongwhichethy1acetateparthadobviousanti-in-
flammatoryandanalgesicefects.Itcouldinhibittheearedemainducedbyxylene, granulomainducedbycoton
balandpaincausedbyhotborad, aceticacidinmice.
Keywords:PileanotataC.H.Wright;anti-inflammation;analgesticefects;mice;activefraction
·69·第 6期 孙春龙 等:苗药冷水花提取物抗炎镇痛活性的研究