全 文 :收稿日期:2006-01-05; 修订日期:2006-06-19
作者简介:应惠芳(1954-),女(汉族),湖北武汉人 ,现任湖北咸宁学院医
学院微生物学副教授 ,主要从事医学微生物学教学及微生物学研究工作.
鱼腥草等 5种中草药对 10种常见
细菌体外抑菌实验研究
应惠芳
(咸宁学院医学院医学微生物学教研室 , 湖北 咸宁 437100)
摘要:目的 探讨鱼腥草等 5种中草药对 10种常见细菌体外抑菌效果。方法 采用葡萄糖酚红肉汤递倍稀释法 , 分别测
定 5种中草药对 10种常见细菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果 艾叶 、白芷 、鱼腥草 、姜 、芦荟对 10种常见细菌表现出不同
程度抑菌作用 , 其中艾叶 、鱼腥草的抑菌效果较好 ,对金葡球菌 、白葡球菌及大肠杆菌有较强的抗菌作用;其余抑菌作用
依次为白芷 、芦荟 、生姜。结论 艾叶与鱼腥草有较好的抑菌效果。
关键词:鱼腥草; 中草药; 最低抑菌浓度
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2006)11-2202-01
AntimicrobialTestResearchinvitroof5 KindsofChineseHerbalMedicinesIncluding
HerbaHouttuyniaeon10KindsofOrdinaryGerms
YINGHui-fang
(MicrobiologySectionofMedicalSchoolofXianningColege, Xianning, Hubei437100, China)
Abstract:ObjectiveToresearchtheantimicrobialeffectinvitroof5 kindsofChineseherbalmedicinesincludingHerbaHout-
tuyniaeon10 kindsofordinarygerms.MethodsWiththemethodofserialdilutiontestwithglucosephenolredbasedmedium,
mensuratetheminimalinhibitoryconcentration(MIC)of5 kindsofChineseherbalmedicineson10 kindsofordinarygermsre-
spectively.ResultsTheantimicrobialefectsofFoliumArtemisiaeArgyi, Agelicadhurica, HerbaHoutuyniae, GingerandAloeon
10 kindsofordinarygermswerediferent.FoliumArtemisiaeArgyiandHerbaHoutuyniaehadbetterantimicrobialeffects, espe-
ciallyonStaphylococcusaureus, StaphylococcusalbicansandEscherichiacoli.TheotherantimicrobialefectsareAngelicadahuri-
ca, GingerandAloeinturn.ConclusionFoliumArtemisiaeArgyiandHerbaHouttuyniaehavebeterantimicrobialeffects.
Keywords:HerbaHoutuyniae; Chineseherbalmedicine; Minimalinhibitoryconcentration(MIC)
具有抗菌或抑菌作用的中草药材有毒副作用小 、取材方便 、
经济实惠等优势 , 倍受国内外学者的关注。本实验以鱼腥草等 5
种中草药作为研究对象 ,探讨其对 10种常见细菌的抑菌效果 ,为
中草药治疗疾病以及食品防腐提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 中药材料 白芷 、艾叶购自湖北咸宁中药材公司。生姜购
自超市;芦荟为新鲜的盆栽中国芦荟;新鲜鱼腥草由老中医提供。
1.1.2 供试菌株 菌种来源于本医学院微生物学实验室保存的
菌种 , 用前经过鉴定 ,为典型菌株 ,有伤寒杆菌 、甲型副伤寒杆菌 、
枯草杆菌 、福氏痢疾杆菌 、绿脓杆菌 、大肠杆菌 、变形杆菌 、肺炎球
菌 、金黄色葡萄球菌 、白色葡萄球菌共 10种。
1.1.3 葡萄糖酚红肉汤(普通液体培养基含葡萄糖 1%、酚红
0.002%)。
1.2 方法
1.2.1 菌液制备 先将各菌种接种在适宜的培养基中 ,活化后 ,
再接种在肉汤培养基中 ,置 37℃温箱培养 6 ~ 8 h,取出用肉汤稀
释至 10-3 ~ 10-4备用。
1.2.2 新鲜生姜 、芦荟及鱼腥草汁制备 实验前 1 d, 取新鲜生
姜 、无黑斑的芦荟鲜叶 、新鲜鱼腥草 ,洗净 , 双蒸水多次冲洗 ,置超
净工作台内晾干水 , 稍剪细 ,分别在多功能榨汁搅拌机内榨出汁 ,
用无菌纱布与棉花过滤并挤出汁 ,再用细菌滤器除菌后 , 放冰箱
备用。
1.2.3 白芷 、艾叶药液的制备 分别将白芷 、艾叶各 50g置药钵
内 , 加 10倍于药物量的水 , 浸泡 30 min后 , 加热煮沸 10 min, 放
冷 , 用纱布滤出药液 , 再加 5倍于药物量的水 , 按前法煮沸并过
滤 , 合并两次煎液 , 加热浓缩到 50 ml(100%浓度)制成含量为 1
g/ml的溶液 , 离心取上清液过滤 , 8磅 , 10 min高压蒸气灭菌 , 放
冰箱备用。
1.2.4 最低抑菌浓度(MIC)测定 [ 1] 在无菌条件下 , 将每一种药
液的灭菌小试管分成 3组 , 每组 100支 ,分成 10排。将上述各药
液分别用葡萄糖酚红肉汤作管外递倍稀释 ,每排的 1 ~ 9号管 , 药
物的稀释浓度分别为 1∶5, 1∶10, 1∶20, 1∶40, 1∶80, 1∶160, 1
∶320, 1∶640, 1∶1280, 第 10号管不加药物作为对照 ,每管均为
1 m1。每排试管加一种菌液 , 每管菌量均为 0.1 m1, 混合均匀 ,
37℃培养 24 h,取出观察细菌生长 , 对照管液体为红色 , 细菌生
长管为黄色。无细菌生长的最低药物浓度即为对该菌株的最低
抑菌浓度(MIC)。
2 结果
艾叶 、白芷 、鱼腥草 、姜 、芦荟抑菌作用比较如表 1所示。
3 讨论
3.1 艾叶与鲜鱼腥草的抑菌效果较好。从表 1中可以看出 , 艾
叶和鱼腥草的最低抑菌浓度大大低于白芷 、生姜和芦荟 , 对上述
数种常见菌有抑菌作用;白芷虽也有一定抑制作用 ,但最低抑菌
浓度远远大于艾叶和鱼腥草;芦荟汁对金葡球菌 、白葡球菌 、大肠
杆菌 、痢疾杆菌和绿脓杆菌表现出抑菌现象。 生姜仅对金葡球
菌 、白葡球菌 、绿脓杆菌有一定的抑制作用。而生姜 、芦荟汁对于
被试菌的 MIC都较高 , 其抑菌的有效成分含量低 , 或抑菌能力较
弱 , 如用于食品防腐需要提取有效抑菌成分。本实验验证了艾叶
2202
时珍国医国药 2006年第 17卷第 11期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2006VOL.17NO.11
与鲜鱼腥草对金葡球菌 、白葡球菌及伤寒杆菌有较强的抗菌
作用。
表 1 5种中草药对 10种常见细菌的 MIC(1∶n)
菌种 艾叶 白芷 鱼腥草 生姜 芦荟
金葡球菌 1∶640 1∶10 1∶640 1∶5 1∶5
白葡球菌 1∶640 1∶20 1∶320 1∶5 1∶5
大肠杆菌 1∶80 1∶10 1∶80 + 1∶5
痢疾杆菌 1∶80 1∶20 1∶160 + 1∶5
伤寒杆菌 1∶160 1∶20 1∶160 + +
枯草杆菌 1∶10 1∶5 1∶20 + +
甲付伤寒菌 1∶40 1∶10 1∶80 + +
肺炎球菌 1∶40 1∶5 1∶40 + +
绿脓杆菌 1∶160 1∶10 1∶80 1∶5 1∶5
变形杆菌 1∶ 80 1∶10 1∶40 + +
表中 “ +”号表示其 MIC>1∶5倍稀释 ,有菌生长
3.2 用艾叶或鱼腥草作抗菌药物使用安全可靠 , 但两者各有千
秋。实验反映艾叶对白葡球菌 、变形杆菌的抑菌效果比鱼腥草
强 , 而鱼腥草对痢疾杆菌 、甲付伤寒菌 、枯草杆菌的抑菌效果又比
艾叶强 。另有资料显示 ,将艾叶液置 54℃下 21 d, 其杀灭金黄色
葡萄球菌的效果无明显下降;小白鼠急性口服艾叶原液 LD50大
于 11 000mg/kg,皮肤刺激实验显示无刺激作用 [ 2] 。鱼腥草具有
热稳定性 ,其提取物经高压湿热作用后对鱼腥草的抑菌能力没有
影响 [ 3] 。故艾叶和鱼腥草性能稳定 , 受有机物影响较小 , 使用是
安全可靠的 ,但应注意各自抑菌特点。
参考文献:
[ 1 ] 周邦靖.常用中药的抗菌作用及其测定方法 [ M] .重庆:科学技术
文献出版社重庆分社 , 1987:289.
[ 2 ] 瞿 燕 ,曾 锐 ,刘 圆.艾叶研究概况 [ J] .西南民族大学学报 ·
自然科学版 , 2005, 31(2):254.
[ 3 ] 熊大胜 ,席在星 ,邓应咸.鱼腥草提取物抑菌作用研究 [ J] .常德师
范学院学报·自然科学版 , 2002, 14(4):59.
收稿日期:2006-03-23; 修订日期:2006-05-06
作者简介:王志强 (1978-),男(汉族),山东威海人 ,现任滨州医学院微生
物教研室教师 ,学士学位 ,主要从事医学微生物学的教学及科研工作.
土茯苓体外抑菌作用研究
王志强 ,邱世翠 ,宋海英 ,宓 伟 , 杜镇镇
(滨州医学院 ,山东 滨州 256603)
摘要:目的 探讨土茯苓的体外抑菌作用。方法 用 K-B纸片扩散法。 100%土茯苓浸出液滤纸片对金黄色葡萄球菌 、
白色葡萄球菌 、绿脓杆菌 、大肠杆菌 、伤寒杆菌 、甲型链球菌 、乙型链球菌抑菌作用进行了研究。结果 土茯苓对以上细菌
均有明显抑菌作用。结论 土茯苓在体外有明显的抑菌作用。
关键词:土茯苓; 体外抑菌
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2006)11-2203-01
TheinvitroGrowthInhibitionEffectofSmilaxglabraRoxb.(SGR)onBacteria
WANGZhi-qiang, QIUShi-cui,SONGHai-ying,MIWei, DUZhen-zhen
(BinzhouMedicalColege, Binzhou, ShandongProvince 256603, China)
Abstract:ObjectiveToresearchontheinvitrogrowthinhibitioneffectofSGRonbacteria.MethodsK-Bpaperdispersion
methodwasusedandthepaperwaspresoakedwith100% SGRwaterextract.Weobservedtheinhibitioneffectofcircularfilter
paperpiecesofSGRonStaphylococcusaureus, Staphylococcusepidermidis、E.coli、S.typhi、a-hemolyticstreptococcus、β -hemolyt-
icstreptococcus.ResultsTheherbhadobviouseffectofgrowthinhibitiononbacteria.ConclusionSGRhassignificantinvitro
effectofgrowthinhibitiononbacteria.
Keywords:SmilaxglabraRoxb.(SGR); Invitrogrowthinhibition
土茯苓为百合科多年生常绿藤本植物光叶菝葜 Smilaxgla-
braRoxb.的干燥根茎 [ 1] 。 主产于广东 、湖南 、湖北 、浙江 、安徽 、
四川等省。均为野生。夏 、秋二季采挖 ,除去须根 ,洗净 、晒干 ,或
趁鲜切成薄片 , 晒干。 土茯苓性甘 、淡 、平 , 归肝 、胃经。主要功
效:解毒除湿 ,通利关节。 《本草纲目》又曰其:“健胃脾 ,强筋骨 ,
祛风湿 , 利关节 ,止泄泻。治拘挛骨痛 , 恶疮痈肿。解汞粉 、银朱
毒。”我们为观察中药土茯苓在体外抑菌作用 , 对其进行了相关
的抑菌实验研究 , 旨在为临床应用土茯苓提供理论依据。
1 材料
金黄色葡萄球菌 、白色葡萄球菌 、绿脓杆菌 、大肠杆菌 、伤寒
杆菌 、甲型链球菌 、乙型链球菌 , 均购于中国药品生物制品检定
所。营养琼脂培养基 , 购于北京海淀区微生物培养基制品厂。游
标卡尺 、规格(0 ~ 150)mm×0.02mm, 安徽桐城量具厂生产。
2 方法
2.1 药液的制备 土茯苓购于滨州医学院附属医院中药房。
取土茯苓 100 g加水 1 000 ml文火煎煮 1 h, 去渣浓缩为 100 ml
(浓度 100%)备用。
2.2 操作方法
2.2.1 普通培养基的制备 [ 2 , 3] 将金黄色葡萄球菌 、白色葡萄球
菌。绿脓杆菌 、大肠杆菌 、伤寒杆菌分别用取菌环致密接种到普
通营养培养基表面 , 以无菌操作将含土茯苓浸出液的直径 0.4
cm的滤纸片贴到培养基上 , 37℃培养 24 h观察测量抑菌环
直径。
2.2.2 血平板培养基的制备 [ 2] 在普通营养琼脂培养基础上高
压消毒后 ,冷却至 56℃时加上 5% ~ 10%无菌脱纤维绵羊血混
匀 , 倒入培养皿中制备。
2.2.3 抑菌实验 将甲型链球菌 、乙型链球菌用取菌环分别致
密接种到血平板营养基上后 ,以无菌操作将含土茯苓浸出液的直
径 0.4 cm的滤纸片贴到培养基上后 , 37℃培养 24 h观察测量抑
菌环直径。
3 结果
土茯苓对金黄色葡萄球菌 、白色葡萄球菌 、绿脓杆菌 、大肠杆
菌 、伤寒杆菌 、甲型链球菌 、乙型链球菌均有明显的抑菌作用 。见
表 1。
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2006VOL.17NO.11 时珍国医国药 2006年第 17卷第 11期