全 文 ：收稿日期:2006-12-20;　修订日期:2007-03-15
基金项目:科技部国家科技基础条件平台建设子项目(No. 2005DKA21006);
　　　　 湖南省教育厅科研基金重点项目(No. 04A042)
作者简介:张　俭(1967-),男(汉族),湖南洞口人 ,现任怀化学院副教授 ,
硕士学位 ,主要从事细胞生物学和药物学研究工作.
*通讯作者简介:伍贤进 (1964-), 男(汉族),湖南新宁人 , 现任怀化学院
教授 ,博士学位 ,主要从事药用植物持续利用研究工作.
鱼腥草制剂抗炎动物模型的建立及研究
张　俭1 , 伍贤进 1* , 卢红梅 2 , 全庆丽 1 , 钟　娜 1 , 谭永光1
(1.怀化学院 ,湖南 怀化　418008;　2.中南大学中药现代化研究中心 ,湖南 长沙　410083)
摘要:目的 建立鱼腥草制剂抗炎动物模型。方法 耳根皮下注射制剂 、小鼠耳二甲苯致炎 、耳圆片称重建立炎症模型 ,
检验鱼腥草制剂的抗炎效果。结果 二甲苯最佳致炎时间为 1 h;鱼腥草制剂在小鼠体内作用约 2 h时对致炎鼠疗效最
好;给药次数为第 6次时 ,小鼠耳肿胀度最小;以 80 μl /20 g的剂量给药组肿胀度抑制率最大 ,建立了鱼腥草制剂鼠耳肿
胀法抗炎动物模型。结论 鱼腥草制剂鼠耳肿胀法抗炎动物模型可用于鱼腥草制剂药效研究。 5种鱼腥草制剂均有明显
的抗炎效果 , 其中 8号制剂抗炎效果最好。
关键词:鱼腥草;　动物模型;　抗炎作用
中图分类号:R285. 5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2007)06-1290-02
The E stablishm ent of Anmi a lM odel and Stud ies on the E ffect of Anti - in flammation of
Houttuynia cordata Thunb
ZHANG Jian
1 , WU X ian-jin1* , LU H ong-me i2 , QUAN Q ing-li1 , ZHONG N a1 , TAN Yong-guang1
(1. Hua ihua College, Hua ihua , Hunan 418008, Ch ina;2. Research Center forModernization of ChineseHerbal
Med icine, Cen tral Sou th University, Changsha , Hunan 410083, Ch ina)
Abstract:Objective To establish the an im alm ode l o f the an ti - inflamm a to ry prope rties o fHouttuyn ia cordata Thunb. M ethods
To m ake the inflamm a tion model v ia injecting preparation in to hypoderm ic, inducing m ice ear edem a by xy lene, and ear wa fe r -
w eighting. Then test the effects of an ti - inflamm ation o fHouttuyn ia cordata Thunb. Resu lts The best inducing m ice ear edem a
tim e fo r xy lenew as 1h and the effe ct o f anti - in flamma tion o f the prepara tion reached the best after in je cted 2h. When them ouse
had been injec ted w ith prepa ra tion fo r 6 time s, the degree o f edem a was the low es.t When them ouse had been do sed w ith 80 μl /
20 g, the degree o f edem a inhibition was the h ighes.t The anim a lm ode l o f the an ti - inflamm a to ry propertie s of m ice ear turg id ity
o fHouttuynia cordata Thunb. p repa ra tion w as estab lished. Conclusion The anim a l model o f the anti - in flamma tion is an idea l
m ode l for study ingHouttuyn ia corda ta Thunb. The five kinds ofHou ttuynia cordata Thunb. preparations have obvious anti - in-
flamm atory effect on m ice in which the number e ight w as the bes.t
Key words:Houttuynia cordata Thunb. ;　An im a lM ode l;　Anti - inflamm ato ry effect
　　鱼腥草 Houttuynia cordata Thunb. ,别名为蕺菜 、侧耳根 、臭根
草 , 是三白草科蕺菜属多年生草本植物 , 全草因有鱼腥气味而得
名 [ 1, 2] 。鱼腥草含有多种营养及药用成分 , 具有清热解毒 、利尿
消肿 、强身健体 、抗辐射等功效 ,为药食两用的植物。现代药学研
究可知 , 鱼腥草的主要药用成分为鱼腥草素 (癸酰乙醛)、月桂
醛 、蒎浠 、芳樟醇 、蕺菜硷 、异槲皮苷 、钾盐 、黄酮类等。药理实验
表现为抗菌 、抗病毒和利尿作用 [ 3 , 4] 。
鱼腥草很早就被用于中药药方 ,现被制成抗炎制剂。目前有
从鱼腥草的根 、茎 、叶等部位提取的各种注射液 ,由于不同部位制
成的注射液有效成分含量不同 ,因而抗炎效果不同。而对于同一
部位提取的不同种鱼腥草制剂 , 它们的抗炎效果也不同 , 关于这
方面的研究尚未见报道。本实验通过建立抗炎症动物模型 ,对鱼
腥草不同制剂的抗炎作用进行分析 ,旨在探索鱼腥草制剂的抗炎
效果 , 为筛选优良抗炎药物提供依据。
1　器材
1. 1　动物 BALB /C纯系小鼠 , 清洁级 , 由中山大学实验动物中
心提供(动物质量合格证:粤检证字 2003A062号 )。
1. 2　仪器 微量进样器 (100, 25 μl, 上海安亭微量进样器厂 ),
AL104型电子天平(梅特勒 -托利仪器厂), 打孔器 (广州市新风
工业公司)。
1. 3　试剂 5种鱼腥草制剂(由湖南正清制药集团有限公司提
供),地塞米松磷酸钠注射液 (安阳九州药业有限责任公司 ,批号
H 41023673), 氯化钠注射液 (湖南科伦制药有限公司 ), 二甲苯
(分析纯 ,湖南师大化学试剂厂),乙醚 (分析纯 ,长沙市国营延风
化学试剂厂)。
2　方法
2. 1　二甲苯最佳致炎时间的确定 随机取 8只小鼠 , (20±2) g,
雌性 , 雌雄各半 ,用 100%乙醚麻醉后 ,以二甲苯 20 μl /只剂量快
速推注至右耳前后两面中心 , 每面 10 μl, 任其自行浸润扩散;左
耳不做任何处理。观察并计算耳肿胀程度随时间的变化情况。
2. 2　鱼腥草制剂最佳药效时间的确定 随机取 16只小鼠(20±
2)g, 分为 4组。第 1组作为空白对照 ,致炎 1h后断颈处死 ,其余
3组分别以 80μl /只剂量右耳根皮下注射给药(正大青春宝鱼腥
草注射液 ,批号 0405051), 第 2组末次给药 30 m in后用二甲苯 20
μl /只剂量致炎 , 1 h后处死;第 3组末次给药 1 h后致炎 , 1 h后
处死;第 4组末次给药 2 h后致炎 , 1 h后处死。剪下双耳 , 用 8
mm直径打孔器在以耳三根血管交汇点为圆心位置处打下圆耳
片 [ 5] , 电子天平称重 ,确定鱼腥草制剂最佳药效时间。
2. 3　鱼腥草制剂给药次数的确定 随机取 16只小鼠 (20 ±2)g,
分为 4组 、分别给药 1, 2, 4, 6次 ,以 80 m l /g剂量在右耳根皮下注
射给药 (正大青春宝鱼腥草注射液 , 批号 0405051),末次给药 2 h
后用二甲苯 20 μl /只剂量致炎 , 1 h后断颈处死 , 剪下双耳 , 用 8
mm直径打孔器在同一部位打下圆耳片 , 电子天平称重 , 确定鱼
腥草制剂的给药次数。
2. 4　鱼腥草制剂给药剂量的确定 随机取 25只小鼠 (20 ±2)g,
分成 5组 , 分别以 40, 80, 160, 320 μl /20 g不同剂量在右耳根皮
下注射给药(正大青春宝鱼腥草注射液 , 批号 0405051), 2次 /d,
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时珍国医国药 2007年第 18卷第 6期 LISH IZHEN MED IC INE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2007 VOL. 18 NO. 6　
共 6次 , 阴性对照组以 80 μl /20 g剂量注射氯化钠注射液 6次 ,
末次给药 1 h后分别用二甲苯 20 μl /只致炎 , 1 h后断颈处死 ,剪
下双耳 , 用 8 mm直径打孔器在同一部位打下圆耳片 ,电子天平
称重 , 观察不同剂量的药效 ,确定给药剂量 [ 6] 。
2. 5　鱼腥草制剂药效实验 取合格小鼠 95只 , 分成 7组 , 1到 5
组每组 15只 ,阴性对照组 、阳性对照组每组 10只 , 第 1到第 5组
小鼠右耳分别给以鱼腥草 5, 6, 7, 8, 9号制剂 ,阴性对照组为生理
盐水 , 阳性对照组为地塞米松注射液 , 给药 1次 /12 h, 连续 3d。
末次给药 1 h后二甲苯致炎 , 1 h后断颈处死 ,剪下双耳 , 用 8 mm
直径打孔器打下耳圆片 , 电子天平称重。以右耳重减去左耳重量
之差(△m g)为肿胀度评价药效。
3　结果
3. 1　确定二甲苯最佳致炎时间实验 二甲苯致炎 1 m in时小鼠
出现瘙痒 , 耳充血及红肿;10 ～ 20 m in时耳红肿严重;40 m in时耳
红肿充血;60 m in时耳充血。结果表明 ,致炎药物在小鼠体内作
用 40 ～ 60 m in左右时炎症症状最明显 ,致炎药物作用 1 h时肿胀
度最大。结果见图 1。
图 1　肿胀度与时间的关系
3. 2　确定鱼腥草制剂最佳药效时间实验 结果显示 , 鱼腥草制剂
有明显抗炎效果;在致炎时间相同条件下 , 末次给药 2 h后致炎 ,
小鼠耳肿胀度最小 , 说明鱼腥草制剂在小鼠体内作用约 2 h时对
致炎鼠耳的疗效最好 ,表明鱼腥草制剂在小鼠体内最佳药效时间
为 2 h。结合炎症在小鼠体内的时间的关系 , 确定末次给药 1 h
后致炎 , 致炎后 1 h后处死实验鼠 , 测定实验结果 ,这样既能让二
甲苯在小鼠体内充分作用 ,又能让鱼腥草制剂起到最大的抗炎效
果。结果见图 2。
图 2　鱼腥草制剂在小鼠体内作用时间的关系
3. 3　确定鱼腥草制剂给药次数的实验 结果见图 3。由图 3可
见 , 随着给药次数增多 ,抗炎效果在个体中的差异越小而且小鼠
耳肿胀度也随之减小;当给药次数为 6次时 ,小鼠耳肿胀度最小 ,
因此确定给药次数为 6次(2次 /d)。
图 3　不同给药次数肿胀度间的差异
3. 4　确定鱼腥草制剂给药剂量实验 不同剂量的鱼腥草制剂的
抗炎效果是不同的 , 其中剂量为 80 μl /20 g的给药组肿胀度最
小 , 说明此剂量应是最佳药效的给药剂量 , 确定给药剂量为 80
μl /20 g。结果见图 4。
3. 5　鼠耳肿胀法抗炎作用系列实验 确定二甲苯最佳致炎时
间为 1h;鱼腥草制剂在小鼠体内作用约 2h后对致炎鼠耳疗效最
好;给药次数为 6次时 ,小鼠耳肿胀度最小;以 80 μl /20 g的剂量
给药组肿胀度抑制率最大 ,建立了鱼腥草制剂鼠耳肿胀法抗炎动
物模型 。
图 4　不同剂量对小鼠耳的肿胀度
运用此动物模型对不同鱼腥草制剂进行实验 , 结果发现 , 不
同的鱼腥草制剂均有明显的抗炎效果 ,其中 8号制剂抗炎效果最
好 , 5, 9, 6, 7号制剂疗效依次减弱 , 这说明 8号鱼腥草的有效抗
炎成分含量最多 ,而其它的制剂因为含有不同量的有效成分 , 也
有一定的抗炎效果。 5种取自鱼腥草同一部位不同干燥时间段
的制剂抗炎效果是不同的 ,干燥时间的差异可能造成了它们抗炎
效果的差异 , 8号鱼腥草制剂是 5种待测制剂中药效最佳制剂。
结果见表 1。
表 1　不同制剂的抗炎效果
实验组 剂量 C /μl (20 g) - 1 肿胀度 /m g 肿胀度抑制率(%)
5号 80 4. 953 34. 22
6号 80 5. 54 26. 43
7号 80 6. 09 19. 08
8号 80 4. 743 37. 01
9号 80 5. 287 27. 79
生理盐水 80 10. 74 0. 00
地塞米松 6 3. 58 52. 46
4　讨论
通过对小鼠耳肿胀时间 、药效与时间的关系 、给药剂量 、给药
次数确定的探究 ,建立了鱼腥草制剂鼠耳肿胀法抗炎动物模型。
运用此抗炎动物模型 ,探讨鱼腥草制剂的抗炎效果 ,发现不同干
燥程度的鱼腥草制剂抗炎效果是不同的。 8号制剂即干燥 8d后
的制剂抗炎效果最佳 , 其余 4种 5, 9, 6, 7号的抗炎效果依次减
弱 , 这可能是由于提取前处理过程不同所致 , 干燥 8 d后再提取
制剂应是鱼腥草干燥处理的最佳方案。
鱼腥草制剂与传统阳性抗炎药物地塞米松比较 ,不同的鱼腥
草制剂均有明显的抗炎效果 , 且抗炎效果因小鼠个体差异而不
同。实验表明 , 雄性个体较雌性对鱼腥草制剂更为敏感。
鱼腥草及其制剂 ,具有广谱消炎 、抗菌 、抗病毒感染及增强动
物机体免疫功能 [ 7] , 是一种极有开发价值的药用植物 , 值得进一
步研究 。
参考文献:
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[ 6 ] 　刘昌孝 ,孙瑞元.药物评价实验设计与统计学基础 [M ] .北京:北京
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LISH IZHEN M EDIC INE AND MATER IA MED ICA RESEARCH 2007 VOL. 18 NO. 6 时珍国医国药 2007年第 18卷第 6期