全 文 ：202 2016 年第 57 卷第 2 期
收稿日期:2015-10-26
作者简介:韩省华 (1956—) ，陕西城固人，高级农艺师，长期从事真菌应用研究工作，E-mail:403564228@ qq. com。
通信作者:夏湛恩，E-mail:491090691@ qq. com。
文献著录格式:韩省华，夏湛恩，吴文娟，等． 美味石耳发酵技术初探 ［J］． 浙江农业科学，2016，57 (2) :202-204．
DOI:10. 16178 / j. issn. 0528-9017. 20160219
美味石耳发酵技术初探
韩省华1，夏湛恩1* ，吴文娟1，韩鸿翼2
(1. 杭州华丹农产品有限公司 院士工作站，浙江 杭州 310021;2. 浙江省华丹农业微生物资源应用研究院，浙江 杭州 310021)
摘 要:对美味石耳的菌种进行分离、鉴定，并通过对其培养基配方、pH 值、温度等的筛选，对其发酵培
养方法进行研究。结果显示，从野外分离得到的美味石耳菌种与 Umbilicaria esculenta属同一类菌。在设计的 5 种
配方中，以 2 号配方对其发酵最为有利，只需 10 d时间，100 mL培养液中菌丝体产量即可达 1. 07 g，基本可满
足工厂化生产的需求。在此配方条件下，其最适 pH值和温度分别为 6. 5 和 23 ℃。
关键词:美味石耳;共生菌;发酵
中图分类号:Q949. 34 文献标志码:B 文章编号:0528-9017(2016)02-0202-02
美味石耳 (Umbilicaria esculenta)是一种珍贵
的野生地衣，产于我国吉林、辽宁、江西、浙江、
安徽、湖南、广西以及韩国、日本等地，在民间是
贵重的煲汤养生、止血疗伤的珍贵食材及药材。研
究发现，其主要活性成分是地衣酸以及地衣多糖，
从石耳中提取的乙酰化的 β-葡聚糖抗癌活性更高，
同时具有抗病毒、抗辐射、抗菌、抗氧化等生物特
性。然而，野生石耳生长十分缓慢，且难以人工分
离和培养，因此，分离培养美味石耳，进行工厂化
生产发酵，对保护、开发其种质资源具有现实意
义。本研究基于自采野生石耳分离菌株与中国科学
院微生物研究所提供的菌种，对其发酵培养方法进
行研究。
1 材料与方法
1. 1 菌种
供试菌一部分由中国科学院微生物研究所提
供，一部分取自野生石耳分离菌株，通过分离纯
化，得到 F1 代菌种。
1. 2 菌种分离、鉴定
按照 CB 4789—2010 规定的方法进行菌种分
离、筛选与纯化。通过形态观察与序列比对，鉴定
受试菌。
1. 3 培养条件优化
分别利用便宜易得的葡萄糖、果糖、麦芽糖、
纤维二糖、玉米淀粉、黄豆饼粉、鱼粉、蛋白胨
等，设计不同碳氮比的发酵配方，通过对比菌丝体
产量，筛选出最适合的配方。然后，在该配方的基
础上，分别设置 pH 值为 3. 5，5. 0，6. 5，7. 5 和
9. 5，探索 pH 值对发酵的影响;另分别设置温度
为 18，23，27. 5，29 和 32 ℃，探讨温度对发酵的
影响。
2 结果与分析
2. 1 受试菌鉴别
中国科学院微生物研究所提供的美味石耳分离
菌株，菌落形态表面较粗糙，质地较硬，呈颗粒集
散状，表面无绒毛，呈深紫黑色，与本研究分离的
地衣相似。但发酵后分离的菌种，在斜面培养基上
观察，相对比较平滑，呈深紫褐色 (图 1)。
扩增供试菌的 ITS 区域序列，并在 GenBank
中进行比对。结果显示，由中国科学院微生物研
究所提供的菌株和从野外分离得到的菌种类似，
相似性 97% ～ 99%，与 Umbilicaria esculenta 属同
一类菌。
2. 2 美味石耳的发酵配方筛选
根据中国科学院微生物研究所的研究结果，美
味石耳的发酵过程非常缓慢，通常培养一二个月都
难以形成菌丝的块状或球形物，经过 3 个月的培
养，250 mL培养液过滤菌丝体仅含 0. 01 g 的干燥
菌丝体。为此，本研究特别设定不同的发酵配方，
同时加入有机的生物诱导物，结果如图 2 所示。在
韩省华，等:美味石耳发酵技术初探 203
图 1 美味石耳的斜面形态与摇瓶发酵形态
所设计的 5 种配方中，以 2 号发酵配方效果最好，
可将发酵周期从 90 d 缩短到 10 d 左右，每100 mL
菌液中菌丝体的产量可增加到 1. 07 g，达到目前各
冬虫夏草菌剂的水平，基本具备在发酵罐上进行工
业化生产的条件。
图 2 不同配方对美味石耳发酵产量的影响
2. 3 pH值对美味石耳发酵的影响
以 2. 2 节中确定的 2 号配方为基础，分别设置
培养基 pH 为 3. 5，5. 0，6. 5，7. 5 和 9. 5，结果
(图 3)显示，当 pH 值接近中性时美味石耳的发
酵效果较好;偏酸或碱时，菌丝体产量大幅下降。
2. 4 不同温度对美味石耳发酵的影响
美味石耳通常生长在远离城镇的山区，尤其是
一些深山区的悬崖、山壁之上，生境温度偏低。据
此，设置培养温度分别为 18，23，27. 5，29 和
32 ℃。结果 (图 4)显示，当温度为 23 ℃时，美
味石耳的发酵效果最好，菌丝体产量最高;当温度
过低或过高时，其发酵均受到明显影响;当温度达
到 32 ℃时，其发酵过程基本停滞。
图 3 不同 pH条件对美味石耳发酵的影响
图 4 不同温度对美味石耳发酵的影响
3 小结
美味石耳在我国从南到北均有分布，但尚未得
到充分的研究、开发。本研究对其发酵配方及培养
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条件进行研究，结果显示，选用自行设计的 2 号配
方，可将其发酵时间从 30 d 缩短到 10 d，其最适
发酵温度和 pH分别为 23 ℃和 6. 5，在上述培养条
件下，基本可满足工厂化生产的要求。
参考文献:
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［2］ 靳菊情，丁东宁，王晓美，等． 黑石耳多糖组分测定 ［J］．
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［3］ SHIBATA S， NISHIKAWA Y， TAKEDA T， et al．
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Bulletin，1968，16 (12) :2362-2369.
［4］ 赵子高，杨焱，刘艳芳，等． 药用真菌桑黄液体深层发酵条
件的优化 ［J］． 微生物学通报，2007，34 (3) :459-463．
(责任编辑:高 峻)
收稿日期:2015-12-10
基金项目:贵州省中药现代化重大专项课题 (黔科合重大专项字 ［2012］ 6010 号-3-1) ;贵州省科技创新人才团队建设计划项目 (黔
科合人才团队 ［2013］ 4020) ;本科教学工程项目
作者简介:刘 晗 (1991—) ，女，河南驻马店人，在读硕士，研究方向为环境污染与防治，E-mail:1510871608@ qq. com。
通信作者:何腾兵 (1963—) ，男，土家族，贵州松桃人，教授，从事土壤学、环境污染与防治等方面的教学科研工作，E-mail:
hetengbing@ 163. com。
文献著录格式:刘晗，何腾兵，樊博，等． 贵州地产何首乌丰产提质增效耕种技术措施 ［J］． 浙江农业科学，2016，57 (2) :204-207．
DOI:10. 16178 / j. issn. 0528-9017. 20160220
贵州地产何首乌丰产提质增效耕种技术措施
刘 晗1a，何腾兵1bc* ，樊 博2，赵璐玥1b，魏德生3，林昌虎4
(1. 贵州大学 a生命科学学院，b农学院，c 新农村发展研究院 西部发展能力研究中心，贵州 贵阳 550025;2. 云南省农业科学院
热区生态农业研究所，云南 元谋 651300;3. 贵州省植物园，贵州 贵阳 550002;4. 贵州医科大学，贵州 贵阳 550001)
摘 要:为了提高贵州何首乌的产量、质量和效益，通过对耕作技术、种植方式、栽培密度、水肥管理和
采收加工等方面的调查研究和试验示范，探讨了何首乌对土壤水分、养分、有机肥料、微生物及酶活性等方面
的适应性，提出何首乌丰产提质增效的耕种技术措施，包括选地整地、种苗选择、合理密植、科学施肥、田间
管理、病虫害防治、采收加工等关键技术的集成应用，对贵州何首乌的丰产优质高效栽培管理具有指导作用。
关键词:何首乌;丰产;提质;增效;耕种技术
中图分类号:S567 文献标志码:B 文章编号:0528-9017(2016)02-0204-04
何首乌 (Polygonum Multflorum Thunb) ，又名
多花蓼、紫乌藤、夜交藤等，蓼科蓼族何首乌属多
年生缠绕草本植物，其块根、藤、茎、叶均能入
药。块根肥厚，长椭圆形，黑褐色，其性微温，气
微温，味微苦，甘涩，可安神、养血、活络、延年
益寿，是我国重要的中草药。
近年由于需求量的日益增加，野生何首乌资源
过度采挖，加之中药业的快速发展，市场质量参差
不齐。优质何首乌资源严重短缺，因此如何人工培
育优质丰产何首乌来缓解市场压力成为关注的焦
点。目前人们对何首乌药理、药效等技术研究较
多，而在耕种措施方面少有研究。本文以贵州地产
何首乌为研究对象，在贵州适宜种植何首乌的区
域，运用土壤学、植物营养学、药用植物栽培学等
理论和方法，分析不同耕种方式下何首乌土壤理化
性质、何首乌产量及品质，通过耕种技术措施优化
来提高何首乌产量和品质，为贵州中药材产业化的
原料生产提供技术支撑。
1 何首乌的生物学特性、主要成分和药用价值
何首乌能适应不同气候与环境，几乎在全国各
地均有分布，喜欢温暖湿润的气候环境，耐寒，但
对干旱较敏感;对生长所需土壤要求不严，但在肥
沃深厚的土壤上生长良好。
何首乌是多年生草本，茎缠绕，长 2 ～ 4 m，
多分枝，具纵棱，无毛，微粗糙，下部木质化，何