全 文 ：［收稿日期］2016-01-25
［作者简介］蒋亚莲（1973—），女，高级实验师，主要从事花卉组培快繁技术研究工作。
农艺·园艺蒋亚莲，等：大丽菊花园奇迹茎尖组培再生体系的建立
大丽菊（Dahlia pinnata Cav.），别名大理花、天竺牡丹，菊科、
大丽花属植物，多年生球根花卉。 原产于墨西哥，墨西哥人把它
视为大方、富丽的象征，因此将它尊为国花。 我国引种栽培大丽
花历史并不长，现有品种 600 余种，主要在东北、西北、华北等
地栽培广泛。 在广东秋、冬两季栽培也比较多。 目前，世界多数
国家均有栽植，大丽花花色花形誉名繁多，丰富多彩，是世界名
花之一；另可活血散瘀，有一定的药用价值。 大丽菊花园奇迹花
色艳丽、硕大，株型 40～60cm，适合盆栽和绿篱，市场需求量较
大，但由于其分株繁殖较慢，扦插繁殖生根率较低，本研究旨在
探求适合大丽菊花园奇迹的组织培养无性繁殖方法，用于该花
卉品种的工厂化育苗。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 植物材料。 外植体材料采自云南省农科院花卉研究所。
采之后装入无菌袋送往组培室备用。
1.1.2 培养基。 ①基本培养基：MS 培养基。 ②所用植物生长调
节剂:BA、NAA、IAA。
1.2 试验方法
1.2.1 外植体消毒。 将采取的外植体材料置于烧杯中，用含有
洗涤剂的水清洗 3 次后，用纱布封住烧杯口在流水条件下冲洗
2～3h； 然后在无菌条件下用 1%8ml 升汞
和 2ml 次氯酸钠消毒 30s， 再用无菌水冲
洗 5 次，备用。
1.2.2 培 养 条 件 。 培 养 基 在 121℃ 、
0.105MPa 条件下灭菌 25min 后备用。接种
后在 20～25℃、光照 1600Lx、光照时间 10～
12h/d 条件下培养。
1.3 试验设计
1.3.1 茎尖诱导愈伤组织的培养基 。 以
MS 为基本培养基 ， 分别添加 0.5mg/L、
1.0mg/L、1.5mg/L、2.0mg/L、2.5mg/L 的 BA 植物生长调节剂组成
的培养基，接种处理好备用的茎尖外植体，每瓶接种 5 个茎尖
外植体，每个处理重复 5 次，共接种 25 瓶。 定期观察诱导大丽
菊花园奇迹茎尖产生愈伤组织的情况并做记录，筛选出诱导愈
伤组织的最佳植物生长调节剂配比。
1.3.2 分化产生再生芽的培养基。 将茎尖诱导出的愈伤组织接
种在以 MS 为基本培养基，分别添加 0.1mg/L、0.2mg/L、0.3mg/L、
0.4mg/L、0.5mg/L 的 BA 植物生长调节剂组成的分化培养基，共
5 个处理，每个处理重复 5 次，共接种 25 瓶。观察培养基中愈伤
组织分化产生再生芽的数量以及情况并做记录，筛选出可以在
分化培养基上分化大量再生芽的最佳植物生长调节剂配比。
1.3.3 再生芽生根的培养基。 将上一阶段培养获得的部分再生
芽， 除去基部愈伤组织单个切下后 ， 转入培养基 ：MS+NAA+
IAA， 其中固定 IAA 的浓度为 0.3mg/L，NAA 的浓度分别为
0.1mg/L、0.2mg/L、0.3mg/L、0.4mg/L，共 4 个处理，每个处理重复
5 次，共接种 20 瓶。 观察培养基中再生芽的生根情况并记录根
数，根长。 综合以上情况，筛选出再生芽生根最佳植物生长调节
剂配比。
2 结果与分析
2.1 不同植物生长调节剂配比对茎尖诱导、 分化产生再生芽、
大丽菊花园奇迹茎尖组培再生体系的建立
蒋亚莲 1，赵培飞 1，梁 华 2，王祥林 1，崔光芬 1， 杜文文 1
（1.云南省农业科学院，云南 昆明 650224；2.云南集创园艺科技有限公司，云南 昆明 650224）
［摘 要］以大丽菊花园奇迹茎尖为外植体进行组织培养，灭菌用 8ml1%升汞和 2ml 次氯酸钠，探讨培养基、生长
素、细胞分裂素等因素对其离体再生的影响，结果表明：茎尖诱导愈伤组织最佳培养基为 MS+BA1.0mg/L；增殖最好培
养基为 MS+BA 0.3mg/L， 诱导所得的愈伤组织在分化培养基上可以分化大量再生芽 ； 用 MS+NAA0.2mg/L+
IAA0.3mg/L 作为生根培养基培养 15d，生根率可以达到 96%；生根苗移栽后成活率为 92%。
［关键词］大丽菊；茎尖；组织培养
［中图分类号］S682.11 ［文献标识码］A
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农村经济与科技 2016 年 4 月(上)·第 27 卷第 07 期（总第 387 期）农艺·园艺
再生芽生根的影响
2.1.1 将处理好的大丽菊花园奇迹茎尖接种在不同浓度植物
生长调节剂的 MS 培养基上，7d 后基部开始膨大。 观察记录结
果（见表 1）。
由表 1 可知，不同 BA 浓度诱导愈伤组织分化的速度、颜色
深浅差异较大。随着 BA 浓度的升高，大丽菊花园奇迹茎尖愈伤
组织诱导的诱导率呈现先增加，当 BA 浓度达到 1.0mg/L 时，愈
伤组织的诱导率最高，为 88%，且愈伤组织分化最快 , 颜色深；
其后诱导率逐渐降低，愈伤组织分化也明显变慢。 由此可以看
出配方Ⅱ：MS+BA1.0 mg/L 是大丽菊花园奇迹茎尖愈伤组织诱
导最佳配方。
2.1.2 把诱导出来的大丽菊花园奇迹愈伤组织，用消毒的镊子
将其接种在不同浓度植物生长调节剂的 MS 培养基上，40d 后
观察记录结果（见表 2）。
由表 2 可知，在分化产生再生芽的培养基中，不同 BA 浓度
对大丽菊花园奇迹愈伤组织分化产生不定芽的数量影响不大，
对分化产生的再生芽的长势有一定的差异。 随着 BA 的浓度升
高， 分化产生再生芽数量呈现先增加后减少， 当 BA 浓度为
0.3mg/L 时，分化产生再生芽的数量最多，繁殖系数最大，分别
为 86 和 3.44，且芽的长势较为粗壮。 综合表 2 的数据和分化产
生再生芽的情况分析，配方Ⅲ：MS+BA0.3mg/L 是大丽菊花园奇
迹愈伤组织分化产生再生芽的最佳配方。
2.1.3 将上一阶段培养获得的部分再生芽，除去基部愈伤组织
单个切下后，接种到再生芽生根培养基中，经过 15d 的培养，观
察记录结果（见表 3）。
由表 3 可知，在再生芽生根培养基中，固定 IAA 的浓度为
0.3mg/L, 当 NAA 的浓度逐渐升高对大丽菊花园奇迹再生芽生
根有一定的影响。 随着 NAA 的浓度升高苗的平均根数、平均根
长和苗体长势都发生了变化，平均根数、平均根长和生根率呈
现了先增后减的趋势， 苗体长势由先变好再变坏。 当 NAA 为
0.2mg/L 时，平均根数、平均根长、生根率最佳，分别为 4.47 条、
2.83cm 和 96%； 苗体长势达到了最优。 所以配方
Ⅱ：MS+NAA0.2mg/L+IAA0.3mg/L 是大丽菊花园奇
迹再生芽生根的最佳配方。
2.2 炼苗与移栽
生根培养 30 d 后，置于室温下 2 d，揭开封口
膜， 将完整大丽菊花园奇迹小苗从培养瓶中取出
150 棵，洗去根部的培养基，放入 0.1%的多菌灵溶
液中浸根 1min。种植于以下配好的基质中,移栽后，
避免强光照射，注意水、肥、光、温的管理。 30d 后统
计结果（见表 4）。
由表 4 可知， 将培养基中生根的大丽菊花园奇迹小苗，移
栽到不同配比的基质中，基质配比的不同对移栽成活率的影响
不大。 其中，Ⅱ号基质配比（红土：腐殖土：珍珠岩=2:2:1）移栽成
活率最高，移栽 50 株，成活了 46 株，成活率达 92%。
3 讨论
外植体灭菌能否成功是组培诱导成败的关键，外植体带菌
与所种植的环境有关。 在选取大丽菊花园奇迹的茎尖外植体
时，应该选择种植环境优良、有代表性的植株，为外植体灭菌成
功提供有利条件。
在植物组培研究中，如何提高诱导
率和繁殖系数一直是各种植物组培快
繁的难点，获得一个愈伤组织或再生芽
诱导时间短、效率高 、无玻璃化的理想
激素配方是组培成功的关键, 本次试验
中，诱导培养基是：MS+BA1.0mg/L，分化
增殖培养基是：MS+BA0.3mg/L， 生根培
养基是 MS +NAA0.2mg/L +IAA0.3mg/L，
该配方相对于其它处理效果最好。
在整个移栽驯化过程中，基质配比的不同对移
栽成活率的影响不大，在Ⅱ号基质配比（红土：腐殖
土：珍珠岩=2:2:1）中，植株的长势，成活率都是最好
的，成活率达到了 92%。 移栽驯化过程中，移栽的成
活率不仅与基质和基质配比有关，还与移栽后，光、
温、水、肥等环境控制有很大的联系，调控(下转 P91)
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水利工程
(上接 P62）一个适宜的移栽驯化环境，是保证移栽成活率的前
提。
在整个试验过程中，在保证试验成功的前提下，选择价格
较低和丰富的材料为总原则,以便降低生产成本。为以后的科学
试验和生产提供可靠的理论基础。
［参考文献］
［1］ 朱梅 ,任桂红 ,孙海明，等 .大丽花的研究进展 ［J］.吉林农业 ,2012
（03）:227-228.
［2］ 李伊嘉.大丽花的栽培［J］.特种经济动植物，2003(02).
［3］ 宋爱仙.大丽花的管理［J］.河南农业,2000(03).
［4］ 王金丽.大丽花及其栽培［J］.农村天地,1995(03):33-33.
［5］ 庄琳 .大丽花盆栽技术 ［J］.花木盆景 ：花卉园艺 ,1994(02):12-12.
［6］ 师向东.球根花卉的瑰宝—临洮大丽花［M］.北京:中国农业科技出
版社,2005.
［7］ 陈少萍,沈汉国.广东地区大丽花春节适时开花技术［J］.中国花卉
园艺,2006(24):34-35.
［8］ 罗芒生.大理花栽培技术［J］.农家科技,2004(03):24-25.
［9］ 拉巴次仁.浅谈大丽菊在高原地区栽培与繁殖［J］.西藏科技,2015
(01):64-65.
［10］ 曹涤环, 刘建武 .大丽花繁殖方法及其栽培技术［J］.农村实用技
术,2015(06):34-35.
鲁浩强，等：从兴山县看我国农村饮水工程可持续发展的对策
工程建设质量的基础。 另外饮水安全工程的建设一定要符合
规范，杜绝出现工程质量劣质，导致后期难以管理。
2.2 设置合理水价对运营的影响
设置合理的水价， 是农村饮水安全工程实现可持续发展的前
提。 在经济较为落后的农村，要根据实际情况，设置较为合理的
水价。 不管水价的过高或者过低都会影响到农村安全饮水工程
的可持续发展。
2.3 输水安全和正常运行的影响
在农村饮水安全工程中供水安全环节是其中重要一环，在
近几年的新闻报道中引用水安全事件时有发生，管网的质量和
管理方式也会直接影响供水系统的安全性。 从而影响到安全饮
水工程的可持续发展。
2.4 企业管理和群众参与的影响
水务局应该提高管理人员的综合素质，应该对其管理人员
进行培训 ，实行考核 ，对考核不合格的进行教育 ，健全内部制
度，使农村安全饮水安全工程可持续发挥作用。 农村饮水安全
工程是惠民工程、民生工程，只有广大农民群众参与支持工程
建设，工程项目才能进行下去，才能做到可持续发展。
2.5 各种特殊和紧急情况的影响
在农村饮水安全工程中，我们随时可能遇到各种各样的问
题。 特大雨雪也可能导致供水设施的损坏，而且水污染情况在
我国极为严重，而这些都极大地影响了农村饮水安全工程的可
持续发展。
3 我国农村饮水安全工程可持续发展的对策
3.1 加大资金投入，保证工程完工
各级政府的财政投入一直是农村饮水安全工程建设资金
的主要来源，目前这里面中央财政资金和省级资金投入占绝大
部分。 为确保农村饮水安全工程的顺利实施，除了中央财政资
金和省级资金投入外，还应加强融资，积极吸纳社会资金。
3.2 加强建设管理，保证工程达标
在农村饮水安全工程的建设过程中，应做好前期的规划设
计工作，为工程项目建设顺利完成奠定基础。 在工程建设管理
方面，应采取招投标方式选择专业高效的施工队伍参与工程的
建设和管护。
3.3 设置合理水价，保证农民用水
农村饮水安全工程首先追求的是社会效益，其次才是经济
效益。 所以，建立合理的水价制度是饮水安全工程良性运行的
有力保证。 建立合理的水价，鼓励农民使用安全工程供应的水，
提高水的利用率，要让农民亲身感受到水价合理，使得更多的
农民使用安全水， 这样就达到国家建设安全饮水工程的初衷，
也使用水市场更加完善。
3.4 加强水质监管，保证水质安全
对于农村饮水安全工程来说， 水质安全肯定是第一位的。
首先需要建立农村安全饮水工程的安全检测系统，另外还要和
疾病监控中心等相关部门协调， 对供水工程各阶段进行检测，
让人民群众喝上放心水。
3.5 建立管理制度，保证工程可持续发展
目前有关部门对于农村饮水安全工程的文件通知，很多是
对工程建设方面，对运行管理及可持续发展方面却没有明确表
述， 对于运行管理及可持续发展相关部门应制定相应制度，并
通过立法来保障农村饮水工程的可持续发展。
3.6 做好水资源保护，使民众吃上放心水
水务局要积极对饮用水水源地污染源进行高效监管，严厉
打击水源保护区内一切威胁水质安全的违法行为。 对于突发性
污染，要进行及时有效控制，并向上级部门报告。 同时，要向农
民宣传保护水的有关知识，并且指导农民使用有机肥，使水资
源免受污染。
［参考文献］
［1］ 王会林，赵国强，马静.浅析单村农村集中饮水安全项目设计［J］.科
技资讯，2014（05）.
［2］ 杨静.浅述农村饮水安全工程可持续发展的对策［J］.建筑工程技术
与设计，2014（15）.
［3］ 陈亚敏，陈有鹏.地方中小型水利工程施工质量评价方法［J］.现代
农业科技，2014（17）.
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