全 文 ：2011年第 1期 　　　　　　　 青海师范大学学报(自然科学版)Journal of Qinghai No rmal U niversi ty(Natural Science)　　　　　　　　2011No.1
收稿日期:2010-12-20
作者简介:沈宁东(1972-),女,江苏滨海人 ,教授。
风花菜茎尖初代培养的研究
沈宁东
(青海大学 农牧学院 ,青海 西宁　810016)
摘　要:以风花菜的茎尖为试验材料 ,研究了不同的生长调节剂对风花菜茎尖初代培养的影响.结果表明:初代培养的最佳生长调
节剂配比为:NAA0.5mg/ L+6-BA1.5mg/ L ,每外植体产生芽数 5.1个 ,株高为 5.21cm .
关键词:风花菜[ Ror ipp a is land ica (Oed.)Borb.] ;茎尖;初代培养
中图分类号:Q949.748.3　　　　　文献标识码:A　　　　文章编号:1001-7542(2011)01-0049-03
风花菜[ Rorippa island ica (Oed.)Borb.] ,属十字花科(C ruci ferae)蔊菜属(Rorippa)植物 ,又名沼生
蔊菜 ,常生于湿生环境 ,这种植物分布相当广泛 ,全国各地均有分布[ 1] .目前 ,关于风花菜的研究主要有马成
亮[ 2 ]关于风花菜栽培的研究;梁明等[ 3 ]关于风花菜糖类含量的研究;浦惠明[ 4] 关于风花菜种子休眠的研究;
马玉心等[ 5] 关于风花菜根异常次生结构的解剖学观察.而关于风花菜组织培养的研究还未见报道.本试验重
在研究风花菜的茎尖的组织培养技术.
1　材料与方法
1.1　材料　风花菜的嫩茎.于 2009年 4月下旬 ,采自青海省西宁市陶家寨村田间的水沟边.
1.2　方法
1.2.1　外植体的制备 　在生长旺盛的无病害的风花菜植株上 ,摘取长 5cm 左右的幼嫩的顶芽或侧芽 ,用洗
衣粉浸泡 0.5h ,再用流动水不断冲洗 30min 左右 ,在无菌条件下 ,剥取 0.5mm 左右的茎尖 ,接种前用 75%
乙醇消毒 30s ,0.1 %HgCl溶液灭菌 45s ～ 1min ,无菌水冲洗 3 ～ 5次 ,接种于已置备好的各培养基上.
1.2.2　培养基设计　在培养基中添加不同种类和浓度的生长调节剂 ,细胞分裂素有 6-BA 和 K T ,浓度是
0.1 、0.5 、1.0 、1.5 、2.0 、2.5mg/ L ,生长素有NAA 和 IBA ,其浓度是0.5mg/L ,分别与不同浓度的 6-BA 配合
使用.各生长调节剂配比见表 1.
1.3　培养基和培养条件　基本培养基是 MS 琼脂培养基 ,蔗糖 30g/L ,琼脂 7.0g/L , pH5.8 ～ 6.2.培养室
温度(24±2)℃,光照 1400 ～ 1600Lx , 10 ～ 12h/d.
1.4　测定方法及指标　每隔 10d观察记录 1次 ,50d 后对结果进行统计分析.观测的指标主要有:
芽数:指每株外植体新产生的芽数 ,以个数表示;叶数:指各芽产生叶片的平均值;株高:指各株的平均高
度值 ,以 cm 表示.其他情况 :主要记载长势 、污染 、异常情况等.
2　结果与分析
表 1　风花菜初代培养试验设计的各生长调节剂配比(单位:mg/ L)
编号 6-BA 编号 K T 编号 NAA 与 6-BA 组合 编号 IBA 与 6-BA 组合
A1 0.1 B1 0.1 C1 NAA0.5+6-BA0.1 D1 IBA0.5+6-BA0.1
A2 0.5 B2 0.5 C2 NAA0.5+6-BA0.5 D2 IBA0.5+6-BA0.5
A3 1.0 B3 1.0 C3 NAA0.5+6-BA1.0 D3 IBA0.5+6-BA1.0
A4 1.5 B4 1.5 C4 NAA0.5+6-BA1.5 D4 IBA0.5+6-BA1.5
DOI :10.16229/j.cnki.issn1001-7542.2011.01.022
青海师范大学学报(自然科学版) 2011年
　　续表:
编号 6-BA 编号 K T 编号 NAA 与 6-BA 组合 编号 IBA 与 6-BA 组合
A5 2.0 B5 2.0 C5 NAA0.5+6-BA2.0 D5 IBA0.5+6-BA2.0
A6 2.5 B6 2.5 — — — —
2.1　细胞分裂素对茎尖诱导成芽的影响
植物生长调节剂是培养基中的关键物质 ,对植物组织的培养起着重要的调节作用[ 6 ～ 8] .从表 2可知 ,在
MS 培养基上 ,经 50d的培养 ,每份材料可形成的芽数仅为 1.8个 ,且试管苗芽的长势弱 ,基部的叶片发黄.
在培养基中附加细胞分裂素 6-BA 或 K T 则可有效地促进芽的生成 ,形成的芽数均高于未添加生长调节剂
的.6-BA浓度在 0.1-1.5mg/ L 范围内 ,芽诱导率在 90%以上 ,随着浓度的升高 ,芽数和株高也逐渐升高 ,
在 1.5mg/ L 时 ,芽数可达 4.5个 ,株高 4.09cm ,当 6-BA 浓度超过 1.5mg/L 时 ,随着浓度的升高 ,芽数和株
高逐渐下降;K T 浓度在 0.1-2.0mg/L 范围内 ,芽诱导率在 80%以上.随着浓度的升高 ,芽数和株高也逐渐
升高 ,当K T 浓度超过2.0mg/ L 时 ,随着浓度的升高 ,芽数和株高逐渐下降.从观测数据分析 6-BA 对芽的诱
导效果好于 KT ,其中 6-BA1.5mg/L 对芽的诱导效果好.
表 2　不同浓度的 6-BA 和 K T 对茎尖诱导形成芽的影响＊
细胞分裂素 浓度(mg/ L)
接种数
(个)
成芽数
(个)
芽诱导率
(%)
芽数/外植体
(个)
株高
(cm)
6-BA
0.1 30 27 90.0 1.8 2.24
0.5 30 28 93.0 2.7 2.87
1.0 30 26 86.7 3.2 3.59
1.5 30 30 100.0 4.5 4.09
2.0 30 23 76.7 4.0 3.52
2.5 30 21 70.0 3.1 2.85
KT
0.1 30 24 80.0 1.9 1.86
0.5 30 26 86.7 2.1 2.41
1.0 30 25 83.3 2.8 3.02
1.5 30 30 100.0 3.5 3.24
2.0 30 30 100.0 4.1 3.73
2.5 30 19 63.3 3.6 3.02
对照 0 30 23 76.7 1.8 1.75
　　＊注:此表数据是培养 50d时观测的结果.
2.2　细胞分裂素和生长素混用对茎尖诱导成芽的影响
生长素和细胞分裂素配合使用 ,对芽的诱导效果好于细胞分裂素单独作用时(见表 3),即细胞分裂素在
一定浓度下 ,添加适量生长素可有效提高芽的诱导率 ,因为生长素可促进腋芽的生长[ 8] .
当 6-BA 与生长素 NAA 组合使用时 ,随着细胞分裂素浓度的升高 ,芽诱导率可达 100%.6-BA 浓度 0.
5mg/L 时 ,观察到有少数茎尖有愈伤组织出现;6-BA浓度在 1.5mg/ L 时 ,芽数为 5.1个 ,株高为5.21cm ,此
时植株生长健壮;当浓度升高到 2.0mg/L 时 ,芽诱导率降低 ,芽数为 4.5个 ,对芽表现为一定的抑制作用.当
6-BA 与生长素 IBA 组合时 ,随着细胞分裂素浓度的升高 ,芽数逐渐增多 , 6-BA 浓度在2.0mg/L时 ,芽诱导
率为 100%,芽数为 4.9个 ,株高为 5.09cm .由表 2中数据可见 , NAA 与6-BA的混配效果优于 IBA 与6-BA
的混配效果 ,其中对茎尖诱导成芽的最佳浓度组合为NAA 0.5mg/ L+6-BA1.5mg/L(见表 3).
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第 1期 沈宁东:风花菜茎尖初代培养的研究
表 3　不同生长素与 6-BA 配合使用对茎尖诱导形成芽的影响＊
生长素浓度
(mg/ L)
细胞分裂素浓度
(mg/ L)
接种数
(个)
成芽数
(个)
芽诱导率
(%)
芽数/外植体
(个)
株高
(cm)
NAA 0.5
6-BA 0.1 30 29 96.7 2.5 2.58
6-BA 0.5 30 30 100.0 3.1 3.21
6-BA 1.0 30 30 100.0 4.2 4.02
6-BA 1.5 30 30 100.0 5.1 5.21
6-BA 2.0 30 25 90.0 4.5 4.38
IBA 0.5
6-BA 0.1 30 28 93.3 2.6 2.21
6-BA 0.5 30 30 100.0 3.4 3.18
6-BA 1.0 30 30 100.0 4.2 3.96
6-BA 1.5 30 30 100.0 4.4 4.94
6-BA 2.0 30 29 96.7 4.9 5.09
对照 0 30 23 76.7 1.8 1.75
　　＊注:此表数据是培养 50d时观测的结果.
3　结论与讨论
单独使用细胞分裂素 6-BA 可以促进茎尖诱导成芽 , 6-BA 的浓度在 1.5mg/ L 时 ,对芽的诱导效果最
好 ,芽诱导率为 100%,芽数可达 6.4个 ,株高 4.09cm .细胞分裂素主要作用是促进细胞分裂和器官分化 ,促
进侧芽分化和生长 ,延缓组织衰老 ,诱导不定芽的产生.初代接种时 ,剥取的是比较鲜嫩未分化的茎尖 ,加入
不同浓度的细胞分裂素后 ,芽数逐渐上升.在低浓度时 ,芽数增加地较快 ,芽诱导率较高;高浓度时 ,芽数增加
的较慢 ,芽诱导率偏低.6-BA和 K T 的性能都比较稳定.综合各方面的因素 , 6-BA对芽的诱导效果稍好于
KT ,且浓度在 1.5mg/ L 时 ,对芽的诱导效果最好 ,芽诱导率达到 100%.
对茎尖诱导成芽的最佳浓度组合为 NAA0.5mg/ L+6-BA1.5mg/L ,芽的诱导率为 100%,芽数可达5.1
个.生长素有促进细胞生长和生根的作用.生长素和细胞分裂素配合使用 ,对于器官形成和植株再生可以起
到调控作用.当 6-BA 与生长素组合使用时 ,随着 6-BA 浓度的升高 ,芽数逐渐增多 , 6-BA浓度在1.5mg/L
时 ,芽诱导率可达 100%.NAA0.5mg/ L+6-BA1.5mg/L ,芽数可达5.1个 ,株高为 5.21cm.IBA0.5mg/L +
6-BA1.5mg/L ,芽数为4.4个 ,株高为 4.94cm.综合各方面的因素 , 6-BA与 NAA 组合对芽的诱导效果稍好
于 6-BA 与 IBA 的.
参考文献:
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Study on Primary Culture of Rori ppa Islandica Stem Apex
SHEN N ing-dong
(Agricul ture and A nimal Husbandry College of Qinghai University ,Xining 810016 ,China)
Abstract:The ef fect of g row th regulator on primary culture o f Rorip pa island ica stem apex w as stud-
ied .The result indicated that:The optimum combinat ion was NAA0.5mg/L and 6-BA 1.5mg/ L in the
primary cul ture proce ss , The each explant generating numbe r of buds w ere 5.1 , plant height w as 5.21
cm.
Key words:Rorip pa islandica (Oed.)Bo rb.;stem apex;primary cul ture
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