全 文 :鞘柄乌头体外抗肿瘤细胞增殖活性初步研究
徐晓峰 1, 2 ,皮慧芳 3 ,杨 静 1 ,朱 田 3 ,阮汉利 3 ,张勇慧 3 ,吴继洲 3
(1.武汉大学医学院药理学系 , 430071;2.湖北省十堰市人民医院药剂科 , 442000;3.华中科技大学同济医学院药
学院天然药化教研室 ,武汉 430030)
[摘 要 ] 目的 研究鞘柄乌头体外抗肿瘤细胞增殖活性。方法 MTT法检测鞘柄乌头醇提物在体外对肿瘤细
胞生长的抑制作用。结果 鞘柄乌头醇提物在体外可以有效抑制肿瘤细胞增殖。体外对小鼠 S180肿瘤细胞半数抑制浓
度 (IC
50
)为 (0.521±0.272)mg· mL-1。结论 鞘柄乌头醇提物可能具有一定的抗肿瘤作用。
[关键词 ] 鞘柄乌头;抗肿瘤细胞增殖
[中图分类号 ] R332;R286 [文献标识码 ] A [文章编号 ] 1004-0781(2008)08-0918-01
乌头类中药为毛茛科乌头属(Aconitum)植物 , 主要用于治
疗寒湿痹痛 、心腹冷痛 、阴疽肿毒。该类药物辛热 , 有大毒 , 主
要含二萜生物碱 , 其中双酯型二萜生物碱毒性很大 , 但其水解
产物醇胺类生物碱毒性很小或无毒 [ 1] 。 鞘柄乌头(Aconitum
vaginatum)是湖北使用的一种药用草乌 , 目前国内外对鞘柄乌
头的研究仅限于生药学 ,而化学成分和生物活性研究笔者尚未
见报道。笔者在本实验中对鞘柄乌头醇提物进行了体外抗肿
瘤细胞增殖活性研究 ,发现鞘柄乌头醇提物在体外可以有效抑
制小鼠肿瘤细胞 S-180增殖。
1 材料与方法
1.1 实验动物与细胞 昆明种小鼠 ,体重(20±1)g, 由湖北省
实验动物研究中心提供。小鼠 S
180
细胞株由本院生物化学实验
室提供。
1.2 实验用药的制备 鞘柄乌头用 90%乙醇加热回流提取 ,
得到醇提物。将该提取物用 0.9%氯化钠溶液(加 0.1%PVP)
混悬备用 , 实验时配成所需各浓度。 实验同时设空白对照组和
阳性对照组 , 阳性药选用氟尿嘧啶。
1.3 试剂 RPMI-1640培养基 、胎牛血清 、胰蛋白酶均为 Gibco
产品;氟尿嘧啶购于上海旭东海普药业有限公司 (批号:
061004)。
1.4 仪器 酶标仪。
1.5 实验方法
1.5.1 MTT法检测鞘柄乌头提取物对小鼠肿瘤细胞 S
180
增殖
的作用 取对数生长期细胞 , 用含 10%胎牛血清的 RPMI-1640
培养基稀释为 2×106· mL-1 , 接种于 96孔板中 , 每孔 100 μL,
之后依次加入待测药物 、阴性对照药 、阳性对照药 , 另设仅加培
养基组为空白组 , 药物浓度见表 1。随后在 37 ℃5%二氧化碳
培养箱中连续培养 24 h, 然后每孔加入 5 mg· mL-1MTT溶液
[收稿日期 ] 2007-05-20
[作者简介 ] 徐晓峰(1975 -),男 ,湖北十堰人 ,在读硕士 , 主管药
师 ,主要从事医院药学工作。电话:0719 -8637262;E-mail:xxf 120@
yahoo.com.cn。
[通讯作者 ] 杨 静, 男 ,教授 ,硕士生导师, 主要从事药理学研
究。
10 μL, 连续培养 4 h。吸去上清液 , 每孔加入 DMSO100 μL,在
570 nm波长处用酶标仪测吸光度值(A)。用下面的公式计算细
胞增殖抑制率 , 并利用公式 T/C(%)=A阴性 /A样品 ×100%做回
归 ,计算药物的半数抑制浓度 IC50。
细胞增殖抑制率(%)=A空白 -A样品A空白 ×100%
1.5.2 统计学方法 实验资料以(x±s)表示 , 用 SAS软件进
行组间 t检验处理。
2 结果
见表 1。鞘柄乌头醇提物各浓度对小鼠 S180肿瘤细胞的增
殖有抑制作用 ,且呈良好的量效关系。鞘柄乌头醇提物组肿瘤
抑制率同对照组的肿瘤抑制率比较差异有极显著性(P<0.
01)。鞘柄乌头醇提取物对小鼠 S180的半数抑制浓度 IC50为(0.
521±0.272)mg· mL-1。
表 1 5组肿瘤细胞抑制率测定结果 x±s
样品 浓度 /(mg· mL-1) 吸光度(A)
抑制率 /
%
鞘柄乌头醇提物
高剂量组 1.000 0.423±0.079 52.39
中剂量组 0.100 0.519±0.095 41.46
低剂量组 0.010 0.652±0.098 26.99
阳性对照组 0.083 0.406±0.095 49.6
阴性对照组 - 0.887±0.205 -
3 讨论
中医理论认为 , “阴寒内盛 , 气血凝滞 ”是恶性肿瘤发病的
重要病机之一 ,因此乌头 、附子在抗肿瘤方面具有潜在的研究
价值和良好的临床应用前景 [ 2] 。本实验结果表明鞘柄乌头对
小鼠 S180肿瘤细胞的增殖有抑制作用 , 可能具有一定的抗肿瘤
活性。
[参考文献 ]
[ 1] 黄永溶.乌头抗癌研究概述 [ J].福建中医药 , 1999, 22(1):54 -
56.
[ 2] 彭 波 ,杨华元.乌头 、附子及其生物碱的研究进展 [ J] .华西药学
杂志 , 1993, 8(3):158-161.
·918· HeraldofMedicineVol.27 No.8 August2008