全 文 ：第 50 卷 第 2 期
2011 年 3 月
中山大学学报 ( 自然科学版)
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS SUNYATSENI
Vol. 50 No. 2
Mar. 2011
鸡血藤提取物中缩合鞣质的含量测定及其
抗肿瘤活性初步研究*
程 悦1，符 影1，王志宇2，杨得坡1，陈建萍2，王冬梅1
( 1． 中山大学药学院，广东 广州 510006; 2． 香港大学中医药学院，香港)
摘 要: 对鸡血藤 /φ = 60%醇提物及不同极性溶剂萃取物中总黄酮和缩合鞣质含量进行测定，并测定它们对肿
瘤细胞增殖的抑制活性。采用紫外分光光度法测定各样品中总黄酮含量; 采用香草醛硫酸法测定各样品中缩合
鞣质含量，结果显示，鸡血藤 /φ = 60%醇提物、乙酸乙酯不溶物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、水层留余
物的总黄酮含量分别为 ( 6. 49 ±1. 99) %、( 7. 36 ±0. 13) %、( 9. 35 ±0. 22) %、( 8. 41 ± 0. 27) %、( 4. 48 ± 1. 53) % ;
缩合鞣质含量分别为 ( 51. 09 ± 0. 37) %、 ( 52. 34 ± 4. 73) %、 ( 73. 22 ± 2. 72) %、 ( 83. 11 ± 5. 87) %、 ( 29. 74 ±
2. 12) %。采用MTT法测定各样品对乳腺癌MCF － 7 和结肠癌 HT － 29 细胞增殖的抑制活性，结果不同样品对 HT
－ 29 和 MCF － 7 细胞增殖表现出不同程度的抑制活性，其中正丁醇萃取物对肿瘤细胞增殖的抑制活性最强。
关键词: 鸡血藤; 缩合鞣质; 总黄酮; 抗肿瘤细胞增殖
中图分类号: R962 文献标志码: A 文章编号: 0529 － 6579 ( 2011) 02 － 0075 － 06
Determination on the Contents of Condensed Tannins in Spatholobus suberectus
Dunn． Extracts and Primary Study on their Anti-tumor Activities
CHENG Yue1，FU Ying1，WANG Zhiyu2，YANG Depo1，CHEN Jianping2，WANG Dongmei1
( 1． School of Pharmaceutical Sciences，Sun Yat-sen University，Guangzhou 510006，China;
2． School of Chinese Medicine，The University of Hong Kong，Hong Kong，China)
Abstract: The contents of total flavonoids and condensed tannins in the ethanol extract of Spatholobus
suberectus Dunn and its different solvents partitioned extracts were determined by ultraviolet spectropho-
tometry and Vanillin-H2SO4 method，respectively． The contents of total flavonoids in the φ = 60% etha-
nol extract，ethyl acetate insoluble extract，ethyl acetate partitioned extract，n-butanol partitioned ex-
tract，water residue were ( 6. 49 ± 1. 99 ) %， ( 7. 36 ± 0. 13 ) %， ( 9. 35 ± 0. 22 ) %， ( 8. 41 ±
0. 27) %， ( 4. 48 ± 1. 53 ) %，respectively，while their contents of condensed tannins were ( 51. 09 ±
0. 37) %，( 52. 34 ± 4. 73) %，( 73. 22 ± 2. 72) %，( 83. 11 ± 5. 87) %，( 29. 74 ± 2. 12) %，respec-
tively． The inhibitory activities on the proliferation of HT － 29 and MCF －7 tumor cells were determined
by MTT． The extract samples all showed inhibitory activities in different extent on the proliferation of HT
－ 29 and MCF －7 tumor cells． The n-butanol partitioned extract had the strongest inhibitory activities on
the proliferation of both tumor cells．
Key words: Spatholobus suberectus Dunn; condensed tannins; total flavonoids; anti- proliferation of
tumor cell
鸡血藤为豆科密花豆属植物密花豆 Spatholobus
suberectus Dunn． 的干燥藤茎。中医认为其具有补
血、活血、通络之功效，临床上常用鸡血藤治疗贫
血、各种原因 ( 如放疗、化疗) 引起的白细胞、
* 收稿日期: 2010 － 12 － 12
基金项目: 科技部国际合作资助项目 ( 2009DFA31230)
作者简介: 程悦 ( 1987 年生) ，女，硕士研究生; 通讯作者: 王冬梅，陈建萍; E-mail: lsswdm@ mail. sysu. edu. cn
中山大学学报 ( 自然科学版) 第 50 卷
血小板、红细胞等全血象减少和再生障碍性贫血等
疾病，具有较好的疗效［1］。此外，现代药理学研
究证明，它还有抗肿瘤、抗病毒、免疫调节、抗
炎、抗氧化、镇静催眠等作用［2］。迄今为止，从
鸡血藤中发现的化合物结构类型主要有黄酮类、萜
类、甾醇类、蒽醌类、内酯类、挥发油类等类型的
化合物，近年来，对鸡血藤的化学成分研究主要集
中在黄酮类化合物［3 － 11］，而其他结构类型的化合
物研究较少。
经过对鸡血藤 /φ = 60%醇提物化学成分系统
预试试验，发现除黄酮类、萜类、蒽醌及其苷、香
豆素及其苷、酚类化合物的系统预试结果为阳性
外，缩合鞣质的特征反应结果也为阳性，但已有文
献中并无任何关于鸡血藤中含有缩合鞣质类成分的
报道。
缩合鞣质，又称为原花青素，是一类广泛存在
于植物界的多酚类物质。缩合鞣质由儿茶素或没食
子酸儿茶素等黄烷 － 3 －醇类化合物以碳 －碳键聚
合而形成的化合物，通常三聚体以上才具有鞣质的
性质，根据其黄烷 － 3 －醇结构的差别分为 procya-
nidins和 prodelphinins。缩合鞣质具有多种显著的
生物活性，其抗氧化和抗癌活性的研究已备受关
注［12］。
故本论文对鸡血藤 /φ = 60%醇提物及其不同
极性溶剂萃取部位中的缩合鞣质及总黄酮含量进行
测定，同时考察了各萃取物对肿瘤细胞增殖的抑制
活性，可对鸡血藤抗肿瘤活性部位的制备提供科学
依据。
1 材料与仪器
1. 1 供试材料
鸡血藤药材，产地广西，购自香港大学中医药
学院临床教研中心大药房，经中山大学药学院生药
学与天然药化实验室杨得坡教授鉴定为豆科密花豆
属植物密花豆 ( Spatholobus suberectus Dunn) 的藤
茎。
1. 2 实验试剂与仪器
TU －1810 紫外可见分光光度计 ( 北京普析通
用仪器有限责任公司) ，酶联免疫检测仪 ELK －
800 型 ( Bio-Tek ) ，倒置显微镜 ( TS100F，日本
NIKON公司) ，HPLC 色谱仪: LC － 20AB 泵、SIL
－ 20A 自动进样器、SPD-M20A 二极管阵列检测器
( 日本岛津公司) ，Ultimate AQ － C18 色谱柱 ( 5
μm，4. 6 mm × 250 mm，美国 Welch 公司) ，Milli-
pore 超纯水系统，通用水套 CO2 培养箱 ( 美国
Thermo公司) 。
DMEM培养基、1640 培养基 ( 美国 Gibco 公
司) ，胎牛血清 ( FBS) ( 美国 Hyclone 公司) ，四
甲基噻唑蓝 ( MTT) 、dm5825 抗生素 ( 青、链霉
素) 、儿茶素均购自美国 Sigma 公司，芒柄花素
( w ＞ 99%，HPLC，西安慈缘生化科技有限公
司) ，石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、95%乙醇、甲
醇、硫酸、香草醛为国产分析纯试剂。人乳腺癌细
胞 MCF －7 和人结肠癌细胞 HT － 29 均由香港大学
中医药学院提供。
2 方法与结果
2. 1 鸡血藤 /醇提物及其各萃取部位的制备
将鸡血藤药材 1. 5 kg，经粉碎后，加入 10 倍
φ = 60%乙醇超声提取 2 次，每次 1 h，减压回收溶
剂后，得到鸡血藤 /φ = 60%醇提物 ( 以下简称醇
提物) 约 195 g。称取 180 g 醇提物均匀分散于适
量的水溶液中，分别用等体积的石油醚、乙酸乙
酯、正丁醇萃取，分别得石油醚萃取物、乙酸乙酯
不溶物，乙酸乙酯萃取物，正丁醇萃取物和水层留
余物，其结果如表 1 所示。
表 1 鸡血藤醇提物各萃取部位的收率
Table 1 The yields of different extracts from Spatholobus
suberectus Dunn
石油醚
萃取物
乙酸乙酯
不溶物
乙酸乙酯
萃取物
正丁醇
萃取物
水层
留余物
m /g 0. 53 26. 78 13. 47 36. 26 100. 01
收率 /% 0. 29 14. 88 7. 44 20. 14 55. 56
2. 2 鸡血藤醇提物及各萃取部位对肿瘤细胞增殖
的抑制活性
采用噻唑兰 ( MTT) 法测定鸡血藤醇提物及
各个萃取部位对肿瘤细胞增殖的抑制活性。人结肠
癌细胞 HT －29 培养在含 RPMI1640 培养液中 ( 含
100 mL /L加热灭活胎牛血清，青霉素，链霉素各
10 × 105 U /L) ，人乳腺癌细胞 MCF － 7 培养在含
DMEM培养液中 ( 含 100 mL /L 加热灭活胎牛血
清，青霉素，链霉素各 10 × 105 U /L) ，培养条件
为 37 ℃，φ = 5% CO2，2 ～ 3 d 换液 1 次。取对数
生长期细胞进行实验。
分别取对数生长期的各细胞每孔 100 μL 接种
于 96 孔板，细胞浓度为 5 × 104 /mL，培养 24 h 待
细胞贴壁后，换无血清培养基，24 h 后吸除旧培
养基，再分别加入 90 μL 无血清培养基和 10 μL
67
第 2 期 程 悦等: 鸡血藤提取物中缩合鞣质的含量测定及其抗肿瘤活性初步研究
500 μg /mL 的药液 ( 含 0. 2% DMSO) ，使药液终
浓度为 50 μg /mL; 空白对照组加入 10 μL含 0. 2%
DMSO的磷酸盐缓冲液，每组设 6 个平行孔，置于
37 ℃、φ = 5% CO2 细胞培养箱中培养 48 h。之后
加入 10 μL的 5 mg /mL的 MTT 溶液，再培养 4 h，
弃去培养液，加 150 μL DMSO，轻轻振荡 15 min，
待完全溶解显色后，用酶联免疫检测仪于 540 nm
波长下测每孔的吸光度 A 值，按照如下公式求出
增殖抑制率，结果如表 2 所示。
抑制率 = ［( 对照组平均 A值 －药物组平均 A
值) /对照组平均 A值］ × 100 %
表 2 鸡血藤 /醇提物及各萃取部位对 HT － 29 和
MCF － 7 细胞增殖的抑制活性
Table 2 Inhibitory activities of different extracts on the
proliferation of HT － 29 and MCF － 7cells
样品
抑制率 /%
HT － 29 MCF － 7
醇提物 58. 27 ± 0. 31 61. 90 ± 3. 96
石油醚萃取物 29. 76 ± 4. 72 25. 41 ± 3. 08
乙酸乙酯不溶物 39. 44 ± 5. 86 49. 71 ± 4. 77
乙酸乙酯萃取物 48. 24 ± 1. 24 62. 91 ± 3. 91
正丁醇萃取物 62. 78 ± 0. 55 77. 08 ± 2. 77
水层留余物 60. 54 ± 4. 47 55. 01 ± 4. 26
2. 3 鸡血藤醇提物及各萃取部位的高效液相色谱
分析
以乙腈和水为流动相，乙腈浓度 ( φ ) 10%
( 0 min) － 15% ( 10 min) － 30% ( 35 min ) －
60% ( 45 min ) － 90% ( 60 min ) － 90% ( 70
min) ; 流速 1 mL /min; 进样量 20 μL; 检测波长
250 nm; 结果如图 1 所示。鸡血藤 /醇提物、乙酸
乙酯不溶物、正丁醇萃取物有明显的 “包峰”，表
明其中可能含有大分子物质。
2. 4 鸡血藤醇提物及各萃取部位总黄酮含量测定
由于鸡血藤中黄酮类化合物以芒柄花素的含量
较高，故以其作为鸡血藤总黄酮含量测定的指标成
分。在一定浓度范围内，芒柄花素的浓度与其最大
吸收波长处的吸光度成正比，可以通过吸光度的测
定来计算鸡血藤样品中总黄酮的浓度。由于鸡血藤
/石油醚萃取物的收率很低且其对肿瘤细胞增殖抑制
活性很弱，故不对其进行总黄酮和鞣质的含量测定。
2. 4. 1 对照品溶液的制备 精密称取芒柄花素对
照品 5. 2 mg，用少量 φ = 95%乙醇溶解后置 25 mL
容量瓶中，并用 φ = 95%乙醇稀释至刻度，摇匀作
为对照品储备液 ( 0. 208 mg /mL) 。
图 1 鸡血藤醇提物及各萃取物的 HPLC
分析图谱 ( 250 nm)
Fig. 1 HPLC chromatograms of Spatholobus suberectusn
Dunn extracts detected at 250 nm
2. 4. 2 检测波长的确定 将对照品溶液在 200 ～
800 nm范围进行扫描，在 250 nm波长处有最大吸
收，故选用 250 nm作为测定波长。
2. 4. 3 供试品溶液的制备及测定 精密称取醇提
取物和各萃取物样品各约 1 mg，置 10 mL 容量瓶
中，加入 φ = 95% 乙醇 1 mL，超声溶解，用 φ =
95%乙醇稀释至刻度，摇匀，得供试液，用紫外分
光光度法测定供试品溶液的 A250，计算其中总黄酮
的含量。
2. 4. 4 含量测定的方法学考察
1) 标准曲线和线性范围。
精密量取上述对照品储备液 0. 1、0. 2、0. 3、
0. 4、0. 5 mL分别置于 10 mL容量瓶中，分别加入
φ = 95%乙醇稀释至刻度，摇匀，在 250 nm处测定
吸收度。以对照品吸光度 A250 ( Y) 为纵坐标，以
对照品溶液的浓度 ( X，μg /mL) 为横坐标，绘制
标准曲线。结果表明，总黄酮浓度在 2. 08 ～ 10. 40
μg /mL 范 围 内 线 性 关 系 良 好，回 归 方 程 为
Y = 0. 116 9X + 0. 146 4，R2 = 0. 999 9。
2) 精密度试验。
精密吸取对照品储备液 0. 3 mL 分别置于 10
mL容量瓶中，加入 φ = 95%乙醇稀释至刻度，摇
匀，连续测定 6 次 A250，RSD为 0. 20%，表明仪器
77
中山大学学报 ( 自然科学版) 第 50 卷
精密度良好。
3) 重复性试验。
分别精密称取 1 mg 鸡血藤醇提物 6 份，按照
2. 4. 3 项下制备供试液样品 6 份并分别测定 A250，
计算总黄酮含量均值为 6. 58%，RSD 为 1. 69%，
表明该方法重复性良好。
4) 稳定性试验。
精密称取 1 mg 鸡血藤醇提物，按照 2. 4. 3 项
下制备供试液样品，同一供试液分别于第 0、1、
2、4、8、16 h 进行测定 A250，共测定 6 次，RSD
为 0. 65%，表明样品溶液在 16 h内稳定性良好。
5) 加样回收率试验。
称取 0. 5 mg已知总黄酮含量的鸡血藤醇提取
物 9 份，分别加入相当于其含量 120% ( 高浓度) 、
100% ( 中浓度) 、80% ( 低浓度) 的芒柄花素对
照品溶液，每个浓度平行 3 份，按照 2. 4. 3 项下制
备供试液样品 9 份，并分别测定 A250，结果如表 3
所示，加样回收率为 101. 26%，RSD值为 1. 40%，
表明该方法的准确度良好。
表 3 总黄酮含量测定的加样回收率试验
Table 3 Recovery test result of the total flavonoids content
高浓度 ( 120% ) 中浓度 ( 100% ) 低浓度 ( 80% )
取样质量 /mg 0. 43 0. 42 0. 47 0. 48 0. 46 0. 45 0. 47 0. 53 0. 51
样品中原有质量 /μg 27. 95 27. 30 30. 55 31. 20 29. 90 29. 25 30. 55 34. 45 33. 15
加入质量 /μg 33. 54 32. 76 36. 66 31. 20 29. 90 29. 25 24. 44 27. 56 26. 52
测得质量 /μg 61. 39 60. 02 67. 60 63. 18 60. 62 59. 33 55. 06 62. 75 59. 59
加样回收率 /% 99. 69 99. 87 101. 07 102. 51 102. 73 102. 85 100. 27 102. 70 99. 70
回收率均值 /% 101. 26
RSD /% 1. 40
2. 4. 5 鸡血藤醇提物及各萃取部位中总黄酮的含
量测定 分别称取鸡血藤醇提物、乙酸乙酯不溶
物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、水层留余物
各 3 份，按照 2. 4. 3 项下制备供试液样品溶液，并
分别测定 A250，计算其中的总黄酮含量，结果显
示，鸡血藤 /醇提物、乙酸乙酯不溶物、乙酸乙酯
萃取物、正丁醇萃取物、水层留余物的总黄酮含量
分别为 ( 6. 49 ± 1. 99 ) %、 ( 7. 36 ± 0. 13 ) %、
( 9. 35 ± 0. 22 ) %、 ( 8. 41 ± 0. 27 ) %、 ( 4. 48 ±
1. 53) %。
2. 5 鸡血藤醇提物及各萃取部位缩合鞣质含量测定
采用香草醛硫酸法，酸性条件下，缩合鞣质 A
环的化学活性较高，其上的间苯二酚或间苯三酚可
与香草醛发生缩合，产物在浓酸作用下形成有色的
正碳离子。采用分光光度法测其吸光度，根据标准
曲线即可得到样品中缩合鞣质含量，硫酸作为反应
过程的催化剂［13］。经过显色反应条件优化试验，
最终确定香草醛甲醇溶液的体积浓度为 3%，浓硫
酸甲醇溶液的体积浓度为 30%，避光显色 20 min
为反应条件。
2. 5. 1 对照品溶液的制备 精密称取儿茶素对照
品 52. 59 mg 置于 50 mL 容量瓶中，用甲醇溶解并
稀释至刻度，摇匀，为对照品贮备液 ( 1. 051 8
mg /mL) 。
2. 5. 2 供试品溶液的制备 称取醇提取物和各萃
取物样品各约 2 mg，置于 5 mL容量瓶中，加入甲
醇，超声溶解后，用甲醇稀释至刻度，摇匀，为供
试品溶液。
2. 5. 3 缩合鞣质含量测定方法 取供试品溶液
0. 5 mL，加入包有锡箔的试管中，分别加入 2. 5
mL φ = 3%香草醛甲醇溶液和 2. 5 mL φ = 30%浓硫
酸甲醇溶液，摇匀，避光显色 20 min 后，在 500
nm处测定吸光度 A500。
2. 5. 4 缩合鞣质含量测定的方法学考察
1) 标准曲线和线性范围。
精密量取儿茶素对照品贮备液 1、2、3、4、5
mL分别置于 10 mL 容量瓶中，分别加入甲醇稀释
定容至刻度，摇匀，备用。分别取上述各浓度对照
品溶液 0. 5 mL，按照 2. 5. 3 项下测定，以对照品
溶液的浓度 ( X，mg /mL) 为横坐标，吸光度值
A500 ( Y) 为纵坐标，进行回归分析。结果显示，
儿茶素对照品浓度在 0. 105 2 ～ 0. 525 9 mg /mL 范
围内与吸光度的线性关系良好，回归方程为 Y =
2. 282 8X － 0. 119 9，R2 = 0. 999 3。
2) 精密度试验。
取对照品溶液 0. 5 mL，按照 2. 5. 3 项下测定，
连续测定 6 次 A500，RSD为 0. 19%，表明仪器精密
度良好。
87
第 2 期 程 悦等: 鸡血藤提取物中缩合鞣质的含量测定及其抗肿瘤活性初步研究
3) 重复性试验。
精密称取 2 mg 鸡血藤醇提取物 6 份，按照
2. 5. 2 项下制备供试液，按照 2. 5. 3 项下测定 A500，
计算缩合鞣质含量均值为 51. 71%，RSD 为
2. 06%，表明该方法重复性良好。
4) 稳定性试验。
精密称取鸡血藤醇提取物 2 mg，按照 2. 5. 2
项下制备供试液，同一供试品溶液分别于第 0、1、
2、4、8、16 h按照 2. 5. 3 项下测定 A500，共测定
6 次，RSD为 3. 12%，表明样品溶液在 16 h 内稳
定性良好。
5) 加样回收率试验。
称取 1. 2 mg已知缩合鞣质含量的鸡血藤醇提
取物 9 份，分别加入相当于其含量 120% ( 高浓
度) 、100% ( 中浓度) 、80% ( 低浓度) 的儿茶素
对照品溶液，每个浓度平行 3 份，按照 2. 5. 2 项下
制备供试液样品 9 份，按照 2. 5. 3 项下测定 A500，
结果如表 4 所示，儿茶素的加样回收率为
99. 93%，RSD值为 1. 86%，表明该方法的准确度
良好。
表 4 缩合鞣质含量测定的加样回收率试验
Table 4 Recovery test result of the total condensed tannins content
高浓度 ( 120% ) 中浓度 ( 100% ) 低浓度 ( 80% )
取样质量 /mg 1. 19 1. 20 1. 18 1. 24 1. 22 1. 23 1. 17 1. 20 1. 19
样品中原有质量 /mg 0. 62 0. 62 0. 61 0. 64 0. 63 0. 64 0. 61 0. 62 0. 62
加入质量 /mg 0. 74 0. 74 0. 73 0. 64 0. 63 0. 64 0. 48 0. 50 0. 49
测得质量 /mg 1. 34 1. 36 1. 33 1. 27 1. 26 1. 29 1. 10 1. 12 1. 10
加样回收率 /% 98. 27 98. 81 98. 81 98. 09 99. 95 103. 26 102. 58 100. 42 99. 20
回收率均值 /% 99. 93
RSD /% 1. 86
2. 5. 5 鸡血藤醇提物及各萃取部位中缩合鞣质的
含量测定 分别称取鸡血藤醇提物、乙酸乙酯不溶
物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、水层留余物
各 3 份，按照 2. 5. 2 项下制备供试液样品，按照
2. 5. 3 项下测定 A500，结果显示，0. 6 mg /mL 鸡血
藤醇提物、乙酸乙酯不溶物、乙酸乙酯萃取物、正
丁醇萃取物、水层留余物的缩合鞣质含量分别为
( 51. 09 ± 0. 37) %、 ( 52. 34 ± 4. 73 ) %、 ( 73. 22 ±
2. 72) %、( 83. 11 ± 5. 87) %、( 29. 74 ± 2. 12) %。
3 讨 论
由于缩合鞣质分子中含有较多的酚羟基，性质
活泼，不稳定，容易氧化，形成极性更大聚合度更
高的复杂多聚体，与其他天然产物相比，分离鉴定
都有较大难度，其化学结构和组成复杂，但却有良
好的生物活性。本论文首次报道中药鸡血藤中含有
大量缩合鞣质类化合物，并对鸡血藤醇提物及各萃
取部位的缩合鞣质和总黄酮含量进行了测定。
3. 1 鸡血藤醇提物及各萃取物的总黄酮和缩合鞣
质含量的差异
鸡血藤醇提物中，总黄酮含量为 ( 6. 49 ±
1. 99) %，缩合鞣质含量为 ( 51. 09 ± 0. 37 ) %，缩
合鞣质的含量远远高于总黄酮。在各萃取部位中，
总黄酮含量大小顺序为乙酸乙酯萃取物 ＞正丁醇萃
取物 ＞乙酸乙酯不溶物 ＞水层留余物，缩合鞣质含
量的大小顺序为正丁醇萃取物 ＞乙酸乙酯萃取物 ＞
乙酸乙酯不溶物 ＞水层留余物。可知总黄酮及缩合
鞣质均在正丁醇萃取物和乙酸乙酯萃取物中含量较
高，其次是乙酸乙酯不溶物，说明经过萃取，鸡血
藤中的黄酮类化合物和缩合鞣质得到了一定程度的
富集。
3. 2 鸡血藤抗肿瘤物质基础的研究
鸡血藤化学成分复杂，药理作用多样，多年来
对其研究主要围绕鸡血藤刺激骨髓造血功能，对其
抗肿瘤活性研究较少，近年来有文章报道鸡血藤粗
提物及其黄酮分离产物 SSCE 在细胞水平和整体动
物水平都表现出抗肿瘤活性［14 － 16］，具体的作用机
制至今仍未被阐明，物质基础亦不明确。本论文研
究结果显示，鸡血藤 /醇提物及各萃取物对两种肿
瘤细胞的增殖均有一定程度的抑制活性，对 MCF
－7 的抑制活性高于 HT － 29，其中正丁醇萃取物
浓度为 50 μg /mL时对 MCF － 7 肿瘤细胞增殖的抑
制活性明显高于其它萃取物，抑制率为 77. 08%，
且其缩合鞣质含量高达 83. 11%，说明除了黄酮类
化合物之外，缩合鞣质也可能是其发挥抗肿瘤作用
的药效物质基础。正丁醇萃取物总黄酮和缩合鞣质
含量均较高，且对肿瘤细胞增殖抑制作用强，可作
为鸡血藤抗肿瘤的有效部位，为下一步抗肿瘤活性
97
中山大学学报 ( 自然科学版) 第 50 卷
单体的获得提供了指导。
3. 3 鸡血藤质量控制方法的研究
目前对鸡血藤药效物质基础的研究尚很薄弱，
而药典中对鸡血藤的质量控制，只关注了芒柄花素
单一化合物，因此鸡血藤药材现有的质量控制方法
有着很大的局限性。本实验发现鸡血藤中缩合鞣质
含量远高于其它类型化合物，同时，黄酮类成分被
认为是鸡血藤的活性成分［2］，因此本文通过建立
鸡血藤中的总黄酮和缩合鞣质的含量测定方法，可
为鸡血藤药材的质量控制提供一定的参考和依据。
参考文献:
［1］ 郑虎占． 中药现代研究与应用．鸡血藤［M］．北京: 学
苑出版社，1997: 2539．
［2］ 邓家刚，梁宁，周程艳，等．鸡血藤药效及作用机理研
究进展［J］．广西中医药，2006，29( 6) : 311 － 313．
［3］ 崔艳君，刘屏，陈若芸，等． 鸡血藤的化学成分研究
［J］．药学学报，2002，37( 10) : 784 － 787．
［4］ 郑岩，刘桦，白焱晶，等．鸡血藤黄酮类化合物的研究
［J］．中国中药杂志，2008，33( 2) : 251 － 253．
［5］ 崔艳君，刘屏，陈若芸，等．鸡血藤有效成分研究［J］．
中国中药杂志，2005，30( 2) : 121 － 123．
［6］ YOON J S，SUNG S H，PARK J H，et al． Flavonoids
from Spatholobus suberectus［J］． Archive of Pharmacal
Research，2004，27( 6) : 589 － 582．
［7］ LEE M H，LIN Y P，HSU F L，et al． Bioactive constitu-
ents of Spatholobus suberectus in regulating tyrosinase-re-
lated proteins and mRNA in HEMn cells［J］． Phytochem-
istry，2006，67: 1262 － 1270．
［8］ ZHANG S W，XUAN L X． New Phenolic Constituents
from the stems of Spatholobus suberectus［J］． Helvetica
Chimica Acta，2006，89: 1241 － 1245．
［9］ 成军，梁鸿，王媛，等． 中药鸡血藤化学成分的研究
［J］．中国中药杂志，2003，28( 12) : 1153 － 1154．
［10］ 严启新，李萍，胡安明，等． 鸡血藤化学成分的研究
［J］．中草药，2003，34( 10) : 876 － 878．
［11］ 严启新，李萍，王迪，等．鸡血藤脂溶性化学成分的研
究［J］．中国药科大学学报，2001，32( 5) : 336 － 338．
［12］ TOSHIHIKO S，SAEKO M，NINA M，et al． Apple
( Malus pumila) procyanidins fractionated according to
the degree of polymerization using normal-phase chroma-
tography and characterized by HPLC-ESI /MS and MAL-
DI-TOF /MS［J］． Journal of Chromatography A，2006，
1102( 1 － 2) : 206 － 213．
［13］ 孙芸，谷文英．硫酸 －香草醛法测定葡萄籽缩合鞣质
含量［J］．生产与科研经验，2003，29: 43 － 46．
［14］ 唐勇，王笑民，何薇，等．鸡血藤提取物体外抗肿瘤
实验研究［J］． 中国中医基础医学杂志，2007，13
( 4) : 306 － 308．
［15］ 唐勇，何薇，王玉芝，等．鸡血藤黄酮类组分抗肿瘤
活性研究［J］．中国实验方剂学杂志，2007，13 ( 2) :
51 － 54．
［16］ 薛丽君，韩景光，李定光，等．鸡血藤提取物的抗肿瘤
作用研究［J］．现代医药卫生，2009，25( 1) : 3 － 4．
08