全 文 ：天然产物研究与开发 Nat Prod Ｒes Dev 2015，27:1853-1857
文章编号:1001-6880(2015)11-1853-05
收稿日期:2015-07-22 接受日期:2015-09-21
基金项目:中央高校基本科研业务费专项(JUSＲP51412B)
* 通讯作者 Tel:86-013861690781;E-mail:qiulydoc@ sina． com
王不留行黄酮苷软膏剂的制备工艺研究
侯 豹1，冯 磊2，王 旭2，刘艳玲1，蔡维维2，邱丽颖2*
1江南大学药学院天然药物研究室;2江南大学无锡医学院，无锡 214122
摘 要:为了研究“王不留行黄酮苷软膏剂”的制备工艺及制剂稳定性，本研究采用多因素配比实验筛选软膏剂
处方，采用乳化法制备软膏剂，通过 HPLC测定制剂含量。优化后的软膏剂处方为:15%硬脂酸甘油酯(质量分
数)、20%液状石蜡、2%硬脂酸、6%十八醇、25%纯甘油、30%蒸馏水、2%十二烷基硫酸钠、0． 1%羟苯乙酯和
0. 1%王不留行黄酮苷。实验结果表明该工艺简单可行，王不留行黄酮苷软膏剂质量稳定可控。
关键词:王不留行黄酮苷;软膏剂;制备工艺;高效液相
中图分类号:Ｒ283． 6 文献标识码:A DOI:10． 16333 / j． 1001-6880． 2015． 11． 003
Preparation of Vaccarin Ointments
HOU Bao1，FENG Lei2，WANG Xu2，LIU Yan-ling1，CAI Wei-wei2，QIU Li-ying2*
1School of Pharmaceutical Science，Jiangnan University;2Wuxi Medical School，Jiangnan University，Jiangsu Wuxi 214122，China
Abstract:The aim of this study was to investigate the preparation process of vaccarin ointment and its stability． Multifac-
tor ratio experiment with the emulsion process was adopted to prepare ointment． The content determination was carried
out by HPLC method． The optimal formulation contained 15% (mass fraction)stearic acid glyceride，20% liquid paraf-
fin wax，2% stearic acid，6% octadecanol，25% pure glycerin，30% distilled water，2% sodium dodecyl sulfate，0． 1%
hydroxy ethyl benzene and 0． 1% vaccarin． The optimized process was simple and feasible． The quality of vaccarin oint-
ment prepared using the optimized process was stable and controllable．
Key words:vaccarin;ointment;preparation;high Performance liquid chromatography
王不留行(Vaccaria segetalis)为双子叶植物石
竹科麦蓝菜的干燥成熟种子［1］，为常见中药，具有
下乳消肿、活血通经功效［2］。主要含有三萜皂苷、
黄酮苷、环肽、类脂和脂肪酸等成分，王不留行黄酮
苷为一种黄酮糖苷，为淡黄色颗粒结晶，易溶于甲
醇、水、甲醇-水［3］。
研究表明王不留行黄酮苷具有促内皮细胞增殖
的作用［4］，可以加快开放性创伤的愈合速度，可用
来治疗糖尿病足、冻伤、皲裂和机械创伤等开放性创
伤［5］。因此，本研究拟开发王不留行黄酮苷软膏
剂，用于治疗开放性创伤，方便病人使用。现对王不
留行黄酮苷软膏剂的处方、制备工艺及制剂稳定性
进行了研究，以制得性质稳定的王不留行黄酮苷软
膏剂，拓宽王不留行黄酮苷的应用前景，更充分的开
发王不留行黄酮苷的药用价值。
1 材料与方法
1． 1 材料
王不留行黄酮苷标准品(上海士峰生物科技公
司)。硬脂酸、十二烷基硫酸钠、单硬脂酸甘油酯、
对羟基苯甲酸乙酯、十八醇、甘油、液状石蜡、凡士林
均购自国药集团化学试剂有限公司。甲醇为色谱
纯，其它试剂均为分析纯。
1． 2 仪器
Waters e2695 型高效液相色谱仪，配 2489 UV
检测器及 Empower Pro 色谱数据工作站(美国 Wa-
ters公司)，STAＲTEＲ 3100 pH 计，NDJ-1 旋转粘度
计，AL104 型分析天平(梅特勒-托利多仪器有限公
司)，TDZ4A型台式离心机。
1． 3 实验方法
1． 3． 1 王不留行黄酮苷软膏剂的制备方法
首先将王不留行黄酮苷研细后过 60 目筛备用，
然后取硬脂酸甘油酯、液状石蜡、硬脂酸和十八醇加
热融化为油相。另取纯甘油和蒸馏水加热至 90 ℃，
再加入十二烷基硫酸钠和羟苯乙酯融化为水相，将
水相缓缓倒入油相中，边加边搅拌，直至冷凝即得
O /W乳剂。随后将过筛以后的王不留行黄酮苷以
0． 1%用量加入至此乳剂中，搅匀即得王不留行黄酮
苷软膏剂［6］。
1． 3． 2 王不留行黄酮苷软膏剂外观性状检测标准
软膏剂应均匀、细腻、具有适当的粘稠性，宜涂
布于皮肤或黏膜上并且无刺激。
均匀性是指取软膏约 1 g，置于表面光洁的玻璃
板中间，小心再盖上同样大小的玻璃板(不要带入
气泡)，用夹子夹紧四周，对着日光观察，应无颗粒
状，色泽均匀、细腻。
1． 3． 3 王不留行黄酮苷软膏剂的稳定性检查
将软膏装入带塞试管中，分别于 55 ℃恒温放置
6 h与零下 15 ℃恒温放置 24 h，观察应无液化、粗
化、分层等现象。将软膏置于 10 mL离心管中，离心
30 min(3000 rpm)应无分层现象。
1． 3． 4 王不留行黄酮苷软膏剂 pH测定
将 1 g 软膏稀释至 10 g 去离子水中，然后用
STAＲTEＲ 3100 pH计测定其 pH值。
根据中国药典二部附录ⅥH规定的乳剂型基质
PH要求，W/O 型乳剂基质 pH 应不大于 8． 5、O /W
型乳剂基质 pH应不大于 8． 3，但作为开放性创伤的
软膏剂其基质 pH值应该在人体组织液 pH 值(7． 0
～ 7． 4)范围内，所以下面实验进行软膏剂配方筛选
pH值应在(7． 0 ～ 7． 4)范围内。
1． 3． 5 王不留行黄酮苷软膏剂粘度测定
本研究使用 NDJ-1 旋转粘度计，检测软膏剂的
粘度。由于王不留行黄酮苷软膏剂是用于体表的涂
抹，所以其适宜粘度应在 102 ～ 105mpas范围内。
1． 3． 6 王不留行黄酮苷软膏剂中黄酮苷的含量测
定
1． 3． 6． 1 对照品溶液制备
取王不留行黄酮苷对照品 20 mg，精密称定，置
100 mL 量瓶中，用 70%甲醇溶液溶解并稀释至刻
度，摇匀，作为标准品贮备液;再分别量取标准贮备
液适量，配制成浓度依次为 0． 005、0． 01、0． 02、
0. 05、0． 1 mg /mL的溶液备用。
1． 3． 6． 2 供试品溶液制备
精密称取王不留行黄酮苷软膏 2． 0 g至 100 mL
量瓶中，加入甲醇适量，60 ℃超声 20 min使其溶解，
放冷后加入甲醇稀释至刻度过滤，弃去初滤液，取续
滤液作为供试品溶液。
1． 3． 6． 3 色谱条件
色谱柱为 Agilent C18 (4． 6 mm × 250 mm，5
μm);流动相为甲醇-0． 3%磷酸溶液;流速为 0． 5
mL /min;检测波长为 280 nm;柱温为 30 ℃;进样量
为 10 μL。
1． 3． 6． 4 含量测定
分别在软膏制备后 1 天和 2 个月时间点精密称
取 3 批次王不留行黄酮苷软膏，依法制备供试品溶
液按照上述色谱条件进样、测定。
2 结果与分析
2． 1 王不留行黄酮苷软膏剂处方筛选
2． 1． 1 王不留行黄酮苷软膏剂三元油相组成的筛
选
在筛选三元油相种类时，选择水相:15%纯甘油
和 40%蒸馏水，乳化剂:2%十二烷基硫酸钠和 15%
硬脂酸甘油酯，防腐剂:0． 1%羟苯乙酯。然后从液
体石蜡、硬脂酸、蜂蜡、十八醇四种油相中筛选出一
组较佳的油相配方，按 2． 1 软膏剂的制备方法制备。
然后按上述软膏剂的检测方法检测软膏剂的各项指
标。
由表 1 所给出的各项指标结果，可知液体石蜡:
蜂蜡:十八醇为(5 ∶ 1 ∶ 1)时软膏剂的 pH 值稍微偏
大，不符合要求。液体石蜡:硬脂酸:蜂蜡为(5∶ 1∶ 1)
和液体石蜡:硬脂酸:十八醇为(5∶ 1∶ 1)时各项指标
皆符合要求。但考虑到十八醇在软膏剂的制备过程
中处理较方便，比蜂蜡廉价、易得等优点，故选取液
体石蜡、硬脂酸和十八醇作为三元油相辅料。
表 1 三元油相种类的筛选实验
Table 1 Screening of different ternary oil phases
处方
Prescription
外观
Appearance
稳定性
Stability pH
黏度(25 ℃)
Viscosity
液体石蜡∶硬脂酸∶蜂蜡(5∶ 1∶ 1) 均匀、细腻 55 ℃、-15 ℃、3000 rpm不分层 7． 18 8． 0 × 104mpas
液体石蜡∶硬脂酸∶十八醇(5∶ 1∶ 1) 均匀、细腻 55 ℃、-15 ℃、3000 rpm不分层 7． 01 7． 5 × 104mpas
液体石蜡∶蜂蜡∶十八醇(5∶ 1∶ 1) 均匀、细腻 55 ℃、-15 ℃、3000 rpm不分层 7． 70 9． 0 × 104mpas
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2． 1． 2 王不留行黄酮苷软膏剂三元油相配比的筛
选
在筛选三元油相配比时，选择水相:15%纯甘油
和 40%蒸馏水，乳化剂:2%十二烷基硫酸钠和 15%
硬脂酸甘油酯，防腐剂:0． 1%羟苯乙酯。然后改变
三元油相液体石蜡、硬脂酸和十八醇的配比，按 2． 1
软膏剂的制备方法制备。然后按上述软膏剂的检测
方法检测软膏剂的各项指标。
表 2 三元油相配比的筛选实验
Table 2 Comparison of different ternary oil phase ratios
液体石蜡∶硬脂酸∶十八醇
Liquid paraffin∶ Stearic
acid∶ Octadecanol
外观
Appearance
稳定性
Stability pH
黏度(25 ℃)
Viscosity
5∶ 1∶ 3 均匀、细腻 55 ℃、-15 ℃ 、3000 rpm不分层 7． 24 6． 8 × 104mps
5∶ 1∶ 2 均匀、细腻 55 ℃、-15 ℃ 、3000 rpm不分层 7． 16 7． 8 × 104mps
5∶ 1∶ 1 均匀、细腻 55 ℃、-15 ℃ 、3000 rpm不分层 7． 01 7． 5 × 104mps
5∶ 2∶ 1 均匀、细腻 55 ℃、-15 ℃ 、3000 rpm不分层 6． 81 6． 7 × 104mps
5∶ 3∶ 1 均匀、细腻 55 ℃、-15 ℃ 、3000 rpm不分层 6． 78 7． 6 × 104mps
由表 2 所给出的各项指标结果，可知液体石蜡
∶硬脂酸∶十八醇为(5∶ 2 ∶ 1)和(5∶ 3 ∶ 1)时软膏剂的
pH值稍微偏低，不符合要求。液体石蜡∶硬脂酸∶十
八醇为(5∶ 1∶ 3)、(5∶ 1∶ 2)和(5∶ 1∶ 1)时各项指标皆
符合要求且无明显差别。但十八醇价廉易得，且当
液体石蜡∶硬脂酸∶十八醇为(5∶ 1∶ 3)时软膏剂黏度
较小适宜开放性创伤的涂抹。故选取石蜡∶ 硬脂酸
∶十八醇为(5∶ 1∶ 3)作为三元油相的配比。
2． 1． 3 王不留行黄酮苷软膏剂二元水相配比的筛
选
在筛选二元水相配比时，选择油相:20%液体石
蜡、2%硬脂酸和 6%十八醇，乳化剂:2%十二烷基
硫酸钠和 15%硬脂酸甘油酯，防腐剂:0． 1%羟苯乙
酯。然后改变二元水相纯甘油与蒸馏水的配比，按
2． 1 软膏剂的制备方法制备。然后按上述软膏剂的
检测方法检测软膏剂的各项指标。
表 3 二元水相配比的筛选实验
Table 3 Comparison of different dual water phase ratios
纯甘油∶蒸馏水
Glycerinum∶
Distilled water
外观
Appearance
稳定性
Stability pH
黏度(25 ℃)
Viscosity
3∶ 8 均匀、细腻 55 ℃、-15 ℃ 、3000 rpm不分层 7． 24 6． 8 × 104mps
4∶ 7 均匀、细腻 55 ℃、-15 ℃ 、3000 rpm不分层 7． 12 7． 0 × 104mps
5∶ 6 均匀、细腻 55 ℃、-15 ℃ 、3000 rpm不分层 7． 14 7． 2 × 104mp
6∶ 5 均匀、细腻 55 ℃、-15 ℃ 、3000 rpm不分层 6． 75 7． 6 × 104mps
7∶ 4 均匀、细腻 55 ℃、-15 ℃ 、3000 rpm不分层 6． 74 8． 4 × 104mps
8∶ 3 均匀、细腻 55 ℃、-15 ℃ 、3000 rpm不分层 6． 81 9． 3 × 104mps
由表 3 所给出各项指标结果，可知纯甘油:蒸馏
水为(6∶ 5)、(7∶ 4)和(8∶ 3)时软膏剂的 pH 值稍微
偏低，不符合要求。纯甘油:蒸馏水为(3∶ 8)、(4∶ 7)
和(5∶ 6)时各项指标皆符合要求且无明显差别。但
是考虑到本品为王不留行黄酮苷软膏剂，其中的王
不留行黄酮苷可溶于水，并且水量越多越容易分解
而降低药效。故蒸馏水的用量越少越好，所以选取
纯甘油:蒸馏水为(5∶ 6)作为二元水相配比。
2． 1． 4 王不留行黄酮苷软膏剂油相与水相配比筛
选
在筛选油相与水相的配比时，选择油相:液体石
蜡、硬脂酸和十八醇的配比为(5 ∶ 1 ∶ 3)，水相:纯甘
油和蒸馏水的配比为(5 ∶ 6)，乳化剂:2%十二烷基
硫酸钠和 15%硬脂酸甘油酯，防腐剂:0． 1%羟苯乙
酯。然后改变油相与水相的配比，按 2． 1 软膏剂的
制备方法制备。然后按上述软膏剂的检测方法检测
软膏剂的各项指标。
由表 4 所给出各项指标结果，可知油相:水相为
(1∶ 1)、(2∶ 1)和(3∶ 1)时软膏剂的外观不均匀、稳定
性较差，不符合要求。油相:水相为(1∶ 3)和(1∶ 2)
软膏剂的各项指标皆符合要求且无明显差别。但是
考虑到本品为王不留行黄酮苷软膏剂，其中的王不
5581Vol. 27 侯 豹等:王不留行黄酮苷软膏剂的制备工艺研究
表 4 油相与水相配比筛选实验
Table 4 The screening experiment of oil and water phase ratio
油相∶水相
Oil phase∶
Water phase
外观
Appearance
稳定性
Stability pH
黏度(25 ℃)
Viscosity
1∶ 3 均匀、细腻 55 ℃、-15 ℃、3000 rpm不分层 7． 21 6． 8 × 104mps
1∶ 2 均匀、细腻 55 ℃、-15 ℃、3000 rpm不分层 7． 16 7． 2 × 104mps
1∶ 1 不均匀、粗糙 55 ℃液化分层、-15 ℃ 、3000 rpm不分层 7． 18 大于 1． 0 × 105mps成固体状
2∶ 1 不均匀、粗糙颗粒状 55 ℃液化分层、-15 ℃ 、3000 rpm不分层 7． 13 大于 1． 0 × 105mps成固体状
3∶ 1 不均匀、粗糙颗粒状 55 ℃液化分层、-15 ℃ 、3000 rpm不分层 7． 15 大于 1． 0 × 105mps成固体状
留行黄酮苷可溶于水，并且水量越多越容易分解而
降低药效。故水相的用量越少越好，所以选取油相:
水相为(1∶ 2)作为油相与水相的配比。
2． 1． 5 在软膏剂基质中加入王不留行黄酮苷后平
行三组实验其指标列表
在检测在软膏剂基质中加入王不留行黄酮苷后
其各项指标时，平行制备三批次软膏，按实施例 1 中
软膏剂的制备方法。将王不留行黄酮苷研细后过
60 目筛备用，取 15%硬脂酸甘油酯(15%为硬脂酸
甘油酯在软膏剂中的质量分数，且以下试剂的用量
皆为质量分数)、20%液状石蜡、2%硬脂酸和 6%十
八醇加热融化为油相。另取 25%纯甘油和 30%蒸
馏水加热至 90 ℃，再加入 2%十二烷基硫酸钠和
0. 1%羟苯乙酯溶解为水相。然后将水相缓缓倒入
油相中，边加边搅拌，直至冷凝即得 O /W 乳剂。随
后将过筛以后的王不留行黄酮苷以 0． 1%用量加入
至此乳剂中，搅匀即得王不留行黄酮苷软膏剂。然后
按上述软膏剂的检测方法检测软膏剂的各项指标。
表 5 在软膏剂基质中加入王不留行黄酮苷后平行三组实验
Table 5 Three parallel experiments of adding V． segetalis flavonoid glycosides into ointments matrix
组别
Group
外观
Appearance
稳定性
Stability pH
黏度(25 ℃)
Viscosity
1 均匀、细腻 55 ℃、-15 ℃、3000 rpm不分层 7． 27 7． 5 × 104mps
2 均匀、细腻 55 ℃、-15 ℃、3000 rpm不分层 7． 31 7． 3 × 104mps
3 均匀、细腻 55 ℃、-15 ℃、3000 rpm不分层 7． 24 7． 3 × 104mps
由表 5 所给出各组软膏剂各项指标结果，可知
各组软膏剂的各项指标皆符合实施例 1 中软膏剂的
检测标准，且批次间差异较小。故本发明研究出的
这种王不留行黄酮苷软膏剂的制备方法，制备出的
软膏剂工艺稳定重复性好符合软膏剂制备标准。
2． 2 王不留行黄酮苷软膏剂中黄酮苷含量的测定
2． 2． 1 线性关系考察
按照 1． 3． 6． 3 项下色谱条件进行测定，记录色
谱图，以峰面积 Y 为纵坐标，以相应浓度 X 为横坐
标进行线性回归，得到如下回归方程:Y =2． 2E + 7X
+5452． 4，r2 = 0． 9997。结果表明:王不留行黄酮苷
在 0． 005 ～ 0． 100 mg /mL 浓度范围内与峰面积线性
关系良好。
2． 2． 2 黄酮苷含量测定
分别在软膏制备后 1 天和 2 个月时间点精密称
取 3 批次王不留行黄酮苷软膏，依法制备供试品溶
液按照上述色谱条件进样、测定结果见表 6。
表 6 王不留行黄酮苷含量测定结果
Table 6 Content determination results of V． segetalis flavonoid glycosides in ointments
批次
Group
1 天黄酮苷含量
Vaccarin content
(one day)(mg /g)
ＲSD (%)
2 个月黄酮苷含量
Vaccarin content
(two months) (mg /g)
ＲSD (%)
1 1． 00 0． 34 1． 00 0． 76
2 1． 001 0． 42 0． 99 0． 27
3 0． 98 0． 72 0． 98 0． 63
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0.012
0.010
0.008
0.006
0.004
0.002
0
A B
5.
18
7
20
.0
80
AU
0% 5 10% 15% 20% 25% 30% 35% 40% 45
保留时间
Retention%time(min)
0% 5 10% 15% 20% 25% 30% 35% 40% 45
保留时间
Retention%time(min)
0.012
0.010
0.008
0.006
0.004
0.002
0
AU
5.
15
7
20
.0
80
图 1 王不留行黄酮苷标准品(A)及供试品(B)的 HPLC色谱图
Fig. 1 HPLC chromatograms of vaccarin standard (A)and ointment sample (B)
3 讨论与结论
王不留行黄酮苷易溶于水，但是水量过多时又
容易分解，因此水相的用量在制备工艺筛选过程中
属于研究重点。软膏剂的外观和黏度在研究过程中
差异不明显，均应符合中国药典要求。本研究采用
多因素配比实验筛选软膏剂处方，并采用十二烷基
硫酸钠和硬脂酸甘油酯分别作为水相和油相乳化剂
协同作用，成功制备王不留行黄酮苷软膏，外观细腻
光滑，稳定性良好。该工艺简单、可行，产品质量稳
定可控，拓宽了王不留行黄酮苷的应用前景，同时也
拓宽了开放性创伤的治愈渠道。
在王不留行黄酮苷含量测定过程中，因为有油
沫的存在，供试品溶液的定容可能存在误差，导致王
不留行黄酮苷的含量偏高，但测定结果相对准确。
本研究参考了中国药典中王不留行黄酮苷的 HPLC
测定方法。经方法学考察，表明该方法操作简便、结
果准确可靠。
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