全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 5 期 2011 年 5 月

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王不留行中王不留行黄酮苷的分离与鉴定
孟 贺，陈玉平，秦文杰*，叶祖光*
中药复方新药开发国家工程研究中心 北京中研同仁堂医药研发有限公司，北京 100079
摘 要：目的 分离鉴定王不留行药材中的特征成分。方法 利用硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶柱色谱进行分离，通过理化常数、
核磁共振、变温核磁共振和质谱等多种技术鉴定化合物。结果 分离得到一个化合物，鉴定为王不留行黄酮苷。结论 王不
留行黄酮苷在王不留行中的量较高，可以作为王不留行及其炮制品质量控制的指标性成分；首次报道了王不留行黄酮苷的
13C-NMR 数据及其旋转异构现象。
关键词：王不留行；王不留行黄酮苷；13C-NMR 数据；旋转异构体；指标性成分
中图分类号：R284.1 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2011)05 - 0874 - 03
Isolation and identification of vaccarin from Vaccariae Semen
MENG He, CHEN Yu-ping, QIN Wen-jie, YE Zu-guang
National Engineering Research Center for R & D of TCM Multi-ingredient Drugs, Beijing Zhongyan Tongrentang Chinese
Medicine R & D Co., Ltd., Beijing 100079, China
Key words: Vaccariae Semen; vaccarin; 13C-NMR data; rotamers; index component

王不留行为石竹科植物麦蓝菜 Vaccaria
segetalis (Neck.) Garcke 的干燥成熟种子。具有活血
通经、下乳消肿等功效，用于乳汁不下、经闭、痛
经、乳痈肿痛等[1]。文献报道王不留行中主要含有
三萜皂苷、黄酮苷、环肽、类脂和脂肪酸、单糖等
成分[2-3]。为了建立其质量标准，本课题组对其进行
了化学成分的研究，从中分离并鉴定了王不留行黄
酮苷。采用核磁共振技术研究表明，王不留行黄酮
苷在常温下存在旋转异构现象，当温度升高时该现
象减弱甚至消失；并首次报道了王不留行黄酮苷的
13C-NMR 数据。
1 材料与试药
VNS—600M 核磁共振仪（美国 Inova 公司），
QTRAP LC-MS-MS SYSTEM 型质谱仪（美国
Applied Biosystem 公司），柱色谱用硅胶和薄层硅胶
板（青岛海洋化工厂），聚酰胺薄膜（浙江省台州市
路桥四甲生化塑料厂），Sephadex LH-20（美国
Pharmacia 公司）。
王不留行药材购自北京同仁堂药店，经中国药
品生物制品检定所标本馆馆长张继鉴定为石竹科植
物麦蓝菜Vaccaria segetalis (Neck.) Garcke的干燥成
熟种子，为《中国药典》2010 版收载的正品王不
留行。
2 提取分离
药材粗粉 2 kg，用 8 倍量 70%乙醇加热回流 2
次，每次 2 h，合并提取液。减压浓缩得 70%乙醇
提取物，待挥至无醇味后，混悬于水中，依次用醋
酸乙酯和正丁醇萃取，分别回收溶剂后得醋酸乙酯
萃取物和正丁醇萃取物。
取正丁醇萃取物，进行硅胶柱色谱，氯仿-甲醇-
水（13∶7∶1）等度洗脱，接收液经 TLC 检识后合
并为 Fr. 1、2、3。TLC 检识 Fr. 2 以黄酮为主。将
Fr. 2 进行反复硅胶柱色谱和 Sephadex LH-20 柱色
谱（甲醇、80%甲醇-水洗脱），接收液经聚酰胺薄
膜检识后合并，得王不留行黄酮苷（vaccarin）。
3 结构鉴定
本品为淡黄色颗粒状结晶。易溶于甲醇、甲醇-
水、乙醇、乙醇-水等，难溶于氯仿、醋酸乙酯、石
油醚等。与 AlCl3试剂作用显示亮黄色荧光，Mg-HCl
反应和 Molish 反应均呈阳性，提示为黄酮苷。ESI-

收稿日期：2010-06-12
基金项目：国家药典委员会课题，《中国药典》2010 版一部标准研究（YD-158, 159）
*通讯作者 秦文杰 Tel: (010)87632624 E-mail: zzwenjieqin@yahoo.com.cn
叶祖光 Tel: (010)87632601 E-mail: yezuguang@sina.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 5 期 2011 年 5 月

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MS 给出正准分子离子峰 727.6 [M＋H]＋，负准分子
离子峰 725.7 [M－H]－，推断相对分子质量为 726，
结合核磁共振氢谱和碳谱，推测分子式为
C32H38O19，应为黄酮三糖苷。ESI-MS＋还给出了
565.6 [M－162＋H]＋和 433.6 [M－162－132＋H]＋
的峰，分别为脱去 1 个六碳糖、进而再脱去 1 个五
碳糖的离子峰，说明分子中存在 2 个六碳糖和 1 个
五碳糖。薄层酸水解检测到葡萄糖和阿拉伯糖。
常温（25℃）下，1H-NMR 图谱中 8 位 H（δ 6.89）
裂分为 d 峰，2′、6′位 H（δ 7.91）裂分为 dd 峰；升
温至 80 ℃时，8 位 H 变为宽单峰，2′、6′位 H 变为
d 峰。将 25 ℃和 80 ℃下的 1H-NMR 图谱结合分析，
给出 6 个芳氢信号，δ 6.77 (1H, s, 3-H), δ 6.89 (1H, s,
8-H), δ 6.94 (2H, d, J = 9.0 Hz, 3′, 5′-H), δ 7.91 (2H,
d, J = 8.4 Hz, 2′, 6′-H)，提示黄酮母核的 5、6、7、4′
位有取代；以及 3 个端基氢信号，δ 4.12 (1H, d, J =
6.0 Hz), 4.88 (1H, d, J = 9.6 Hz) 和 5.01 (1H, d, J =
6.6 Hz)。
常温（25℃）下，13C-NMR 图谱中出现多组成
对出现且高度不等的信号，δ 182.3 和 182.0，δ 164.1
和163.9，δ 156.6和156.3，δ 110.2和109.8以及δ 93.9
和 93.6。升温至 60、80、100 ℃时，成对出现的信
号中较矮的信号逐渐减弱甚至消失，推测该化合物
在常温时存在 2 种比较稳定的旋转异构体，升高
至一定温度时这种旋转异构现象消失。将各温度下
的 13C-NMR 图谱结合分析，给出 32 个碳信号，其
中 15 个为黄酮母核的碳信号，余下 17 个碳信号：δ
104.8、100.8、80.8、80.8、78.1、77.2、75.9、73.7、
72.1、71.3、70.8、69.8、69.5、66.7、64.2、60.9、
60.4 为糖碳信号。与异肥皂草苷的碳谱数据[4]对照，
多出一组五碳糖信号，即为阿拉伯糖的信号；黄酮
母核的碳信号没有明显变化，因此推断阿拉伯糖连
接在葡萄糖上而不是黄酮母核上，同时 C-葡萄糖的
C-2″的信号向低场位移了 8 个单位，由此推断碳苷
葡萄糖的 2″位被取代。由此确定该化合物为王不留
行黄酮苷（vaccarin）：5,7,4′-三羟基-6-C-α-L-阿拉伯
糖(1→2) β-D-葡萄糖-4′-β-D-葡萄糖苷（图 1）。其核
磁数据归属见表 1。
4 讨论
文献报道[5]，黄酮 5-OH、7-OCH3、6-C-单糖苷
和黄酮 5-OH、7-OCH3、6-C-1,2 连接双糖苷存在旋
转异构现象，而黄酮 5-OH、7-OH、6-C-单糖苷或
者黄酮 5-OH、7-OH、6-C-1,2 连接双糖苷则不存在

图 1 王不留行黄酮苷的结构
Fig. 1 Structure of vaccarin
表 1 王不留行黄酮苷的 1H-NMR 和 13C-NMR 数据
（DMSO-d6）
Table 1 1H-NMR and 13C-NMR data of vaccarin
(in DMSO-d6)
编号 1H-NMR 13C-NMR
2 − 162.5
3 6.77 (1H, s) 103.0
4 − 181.8
5 − 159.6
6 − 109.8
7 − 164.0
8 6.89 (1H, s) 93.5
9 − 156.4
10 − 104.5
1′ − 120.8
2′ 7.91 (1H, d, J = 8.4 Hz) 128.3
3′ 6.94 (1H, d, J = 9.0 Hz) 115.9
4′ − 161.3
5′ 6.94 (1H, d, J = 9.0 Hz) 115.9
6′ 7.91 (1H, d, J = 8.4 Hz) 128.3
1″ 4.88 (1H, d, J = 9.6 Hz) 73.7
2″ 3.10～4.80* 80.9
3″ 3.10～4.80* 78.1
4″ 3.10～4.80* 71.3
5″ 3.10～4.80* 80.9
6″ 3.10～4.80* 60.4
1′′′ 5.01 (1H, d, J = 6.6 Hz) 100.8
2′′′ 3.10～4.80* 72.1
3′′′ 3.10～4.80* 77.2
4′′′ 3.10～4.80* 70.8
5′′′ 3.10～4.80* 75.9
6′′′ 3.10～4.80* 60.9
1′′′′ 4.12 (1H, d, J = 6.0 Hz) 104.8
2′′′′ 3.10～4.80* 66.7
3′′′′ 3.10～4.80* 69.5
4′′′′ 3.10～4.80* 69.8
5″″ 3.10～4.80* 64.2
*-信号重叠；−-无信号
*- overlap signal; −- no signal
O
O
O
HO
OH
O OHO
O
OH
OH
OH
HO
O OH
H
1
2
3 45
6
7 8 9
10
1′
2′
3′
4′
5′
6′
1′′
2′′
3′′ 4′′
5′′
6′′
1′′′
2′′′
3′′′
4′′′
5′′′
6′′′
1′′′′
2′′′′
4′′′′
5′′′′
OH
HO
3′′′′
HO
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旋转异构现象，因此旋转异构现象存在的主要原因
为 7-OCH3 的空间位阻作用阻碍了碳苷键的自由旋
转。此外，还有文献报道 酮碳苷也存在旋转异构
现象[6]，发现 酮 1-OH、3-OH、2-C-1,2 连接的双
糖苷存在旋转异构现象，而 酮 1-OH、3-OH、2-C-
单糖苷或者 酮 1-OH、3-OH、2-C-1,6 连接双糖苷
不存在旋转异构现象，因此笔者认为 C-2 位糖链的
长度以及糖之间的连接位置将影响 酮碳苷旋转异
构现象的存在与否。本课题组分离得到的王不留行
黄酮苷为黄酮 5-OH、7-OH、6-C-1,2 连接双糖苷，
也存在旋转异构现象。分析认为王不留行黄酮苷母
核上 5 和 7 位均为羟基取代，并且 6 位所连糖链为
1,2 位连接的双糖，4′位羟基与葡萄糖成氧苷，这些
空间位阻作用使得碳苷键在常温时不能自由旋转，
出现两种比较稳定的旋转异构体。升高温度，克服
了旋转异构体自由旋转的阻力，碳苷键得以自由旋
转，在核磁共振图谱上出现一组信号。
黄酮 5-OH、7-OH、6-C-1,2 连接双糖苷的旋转
异构现象，为首次报道，丰富了存在旋转异构现象
的化合物种类，为进一步研究旋转异构现象的规律
提供了依据。
致谢：中国医学科学院药物研究所分析测试中
心代测 NMR、ESI-MS 谱，中国药品生物制品检定
所标本馆馆长张继老师帮助鉴定药材。
参考文献
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[2] 李 帆, 梁敬钰. 王不留行的研究进展 [J]. 海峡药学,
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56(45): 8915-8920.
[6] Jiang Y, Zhang W, Tu P F, et al. Xanthone glycosides
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