全 文 ：高效液相色谱法测定
不同生长期武当玉兰中木兰脂素含量
李志浩，孙新建，李鹏
(湖北医药学院附属东风医院药学部，湖北十堰 442008)
摘 要 目的 建立测定不同生长期武当玉兰中木兰脂素含量的反相高效液相色谱法。方法 采用 Agilent HC-C8
( 250 mm ×4． 6 mm，5 μm) 色谱柱，流动相为乙腈-四氢呋喃-水( 35∶ 1∶ 64) ，流速为 1． 0 mL·min －1，柱温 30 ℃，检测波
长为 278 nm。结果 木兰脂素在 0． 05 ～ 1． 02 mg·mL －1 ( r = 0． 999 8) 范围有良好的线性关系，平均加样回收率为 97．
9% ; RSD ＜ 2． 0%。结论 树龄 10 ～ 15 年武当玉兰中木兰脂素含量最高。
关键词 木兰脂素;武当玉兰; 不同生长期;色谱法，高效液相
中图分类号 R286; R927． 1 文献标识码 A 文章编号 1004 － 0781( 2013) 02 － 0237 － 02
武当玉兰为木兰科植物武当玉兰(Magnolia
sprengeri Pamp．)的干燥花蕾，具有通鼻窍、散风寒的功
效，鄂西北尤其是十堰地区广泛用于治疗风寒头痛、鼻
渊、鼻塞，为多种中药复方制剂以及中成药的主要药
味，也是中药辛夷的来源植物。2010 年版《中华人民
共和国药典》一部［1］规定辛夷质量控制指标，其中包
括木兰脂素含量。由于本地区采收武当玉兰时并无严
格生长时限限制，导致盲目采收。为提高武当玉兰药
材质量，保护十堰地区武当玉兰药材资源，笔者在本实
验中采用反相高效液相色谱法测定不同树龄武当玉兰
中木兰脂素的含量，以期确定最佳采集树龄。
1 仪器与试药
1． 1 仪器 德国 Dionex-U3000 液相色谱仪(德国戴
安公司，Dionex Chemeleon色谱工作站，二极管阵列检
测器) ，SK5200H超声波清洗机(上海科导超声仪器有
限公司) ，岛津 AEU-210 型电子天平(d = 0． 1 mg，日本
岛津)。
1． 2 试药 木兰脂素对照品(购于中国食品药品检
定研究院，供含量测定用，批号:110882-200505) ，武当
玉兰分别于 2010 年 1 月 28 日 ～ 2 月 23 日和 2011 年
1 月 15 日 ～ 2 月 20 日采摘于湖北省十堰市武当山特
区，树龄由当地种植户确认，经湖北省十堰市药品检验
所陈银华副主任中药师鉴定为木兰科植物武当玉兰
(Magnolia sprengeri Pamp．)的花蕾，甲醇、乙腈均为色
收稿日期 2012 － 06 － 20 修回日期 2012 － 07 － 11
作者简介 李志浩(1979 －) ，男，湖北武汉人，主管中药
师，硕士，主要研究方向:中药分析。电话:0719 － 8272348，E-
mail:lizhihaojack@ 126． com。
通讯作者 李鹏(1968 －) ，男，湖北十堰人，副主任药师，
主要研究方向:药物分析。电话:0719 － 8272348，E-mail:dfyylp
@ 126． com。
谱纯，水为双蒸水，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2． 1 对照品溶液的制备 分别取经减压干燥器干燥
至恒重的木兰脂素对照品适量，精密称定，加甲醇制成
木兰脂素浓度为 1． 02 mg· mL －1的溶液，摇匀，即得。
2． 2 供试品溶液的制备 取本品粗粉约 1 g，精密称
定，置具塞锥形瓶，精密加入乙酸乙酯 20 mL，密塞，称
定质量，浸泡 30 min，超声处理(功率 250 W，频率
33 kHz)30 min，放冷，再称定质量，用乙酸乙酯补足减
失质量，摇匀，滤过，精密量取续滤液 3 mL，加在中性
氧化铝(100 ～ 200 目，2 g，内径 9 mm，湿法装柱，用乙
酸乙酯 5 mL 预洗)上，用甲醇 15 mL 洗脱，收集洗脱
液，置 25 mL量瓶，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，滤液作
为供试品溶液。
2． 3 色谱条件［2-4］ 色谱柱:Agilent HC-C8(250 mm
×4． 6 mm，5 μm) ;流动相:乙腈-四氢呋喃-水(35∶1
∶64) ;流速:1． 0 mL·min －1;柱温:30 ℃;进样量:
10 μL;检测波长 278 nm。在此色谱条件下，木兰脂素
色谱峰理论板数不低于 9 000。色谱图见图 1。
图 1 木兰脂素对照品(A)与供试品(B)HPLC图
1．木兰脂素
2． 4 标准曲线与线性范围 精密量取木兰脂素对照
·732·医药导报 2013 年 2 月第 32 卷第 2 期
品溶液 0． 5，1． 0，2． 0，5． 0，8． 0，10． 0 mL，置 10 mL 量
瓶，加甲醇至刻度，摇匀。分别精密吸取 10 μL注入液
相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积，以对照品色谱
峰面积对对照品浓度进行线性回归，回归方程为:Y =
0． 074 1X － 0． 033 4，r = 0． 999 8，表明木兰脂素在
0． 05 ～ 1． 02 mg·mL －1范围内线性关系良好。
2． 5 精密度实验 取木兰脂素对照品溶液，按上述色
谱条件，重复进样 6 次，测定峰面积，RSD为1． 29%。
2． 6 稳定性实验 精密吸取“2． 2”项供试品溶液，室
温放置 12 h，分别在 0，2，4，8，12 h 测定，记录木兰脂
素色谱峰面积，计算得 RSD 为 1． 79%，表明处理后的
供试品溶液在 12 h内稳定。
2． 7 重复性实验 取同一批武当玉兰 9 份，每份约
1． 0 g，精密称定。照“2． 2”项平行制备供试品溶液，按
上述色谱条件测定，记录色谱峰面积，按外标两点法计
算样品中木兰脂素的含量，结果木兰脂素的平均含量
为 4． 38 mg·g －1，RSD为 1． 78%。
2． 8 加样回收率实验 精密称取已知含量的武当玉
兰 9 份，每份 0． 5 g，分为 3 组，每组 3 份，精密加入对
照品溶液 3． 0，4． 0，5． 0 mL。按“2． 2”项方法制备供试
品溶液，进样 10 μL。测定回收率，结果见表 1。平均
加样回收率 97． 9%，RSD =1． 30%。
2． 9 样品测定 取不同批武当玉兰，按“2． 2”项方法
制备供试品溶液，照上述色谱条件进样测定，外标两点
法计算样品中木兰脂素的含量。结果树龄 1 ～ 3 年，～
5 年，～ 10 年，～ 15 年，＞ 15 年样品中木兰脂素的含量
分别为 4． 38，4． 42，4． 85，5． 69，4． 71 mg·g －1。
3 讨论
由于武当玉兰目前没有实现大规模人工种植，所
以本研究中树龄的确定相当困难，研究组到当地种植
有武当玉兰的农户家中调查，确定植株的生长年限，第
2 年花蕾期进行采摘。每个生长年限段的树种选取有
代表性的植物进行分析。
表 1 木兰脂素加样回收率实验结果
取样量 /
g
原有量 加入量 测得量
mg
回收率 /
%
0． 499 2 2． 411 1 3． 06 5． 423 1 98． 4
0． 486 8 2． 351 2 3． 06 5． 306 6 96． 6
0． 511 0 2． 468 1 3． 06 5． 504 0 99． 2
0． 501 6 2． 422 7 4． 08 6． 393 8 97． 3
0． 497 4 2． 402 4 4． 08 6． 437 2 98． 9
0． 494 1 2． 386 5 4． 08 6． 451 0 99． 6
0． 498 4 2． 407 3 5． 10 7． 290 0 95． 7
0． 506 1 2． 444 4 5． 10 7． 406 2 97． 3
0． 515 3 2． 488 9 5． 10 7． 487 4 98． 0
武当玉兰均在早春(每年 1 ～ 2 月)花蕾未放时采
摘，剪去枝梗，干燥后供实验研究。从分析结果看，树
龄10 ～ 15 年武当玉兰中木兰脂素的含量最高，超过 15
年含量有所下降。由于本次考察资源有限，有待进一
步大规模资源考察时再补充样本比较分析。
武当玉兰作为重要的中药材，与望春花、玉兰等作
为辛夷入药，但是武当玉兰与另外两种药材作为不同
植物，其化学成分的差别及具体药理作用有何不同都
有待再进一步深入研究。
参考文献
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京:中国医药科技出版社，2010:169．
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［3］ 马玉良，韩桂秋．辛夷中木脂素成分的研究［J］．中国中药
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［4］ 苏中兴．武当木兰花挥发油化学成分的研究［J］．中药材，
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DOI 10． 3870 /yydb． 2013． 02． 034
·832· Herald of Medicine Vol. 32 No. 2 February 2013