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武当玉兰与望春花嫁接辛夷的抗炎镇痛作用试验



全 文 :46 CHINA MEDICINE AND PHARMACY Vol.6 No.7 April 2016
2 0 1 6 年 4 月 第 6 卷 第 7 期·药物研究·
武当玉兰与望春花嫁接辛夷的抗炎镇痛作用试验
马  羚1    周兵冰1    马逾英2▲    蒋运斌2
1. 重庆三峡医药高等专科学校药学系,重庆 404020;2. 成都中医药大学药学院,四川成都 611137
[ 摘要 ] 目的 探讨武当玉兰(砧木)+ 望春花(接穗)嫁接辛夷的抗炎镇痛药理活性。 方法 观察嫁接辛夷与
武当玉兰(砧木)、望春花(接穗)对二甲苯致小鼠耳廓肿胀及醋酸致小鼠扭体的影响。 结果 (1)抗炎试验:
望春花具有明显的抗炎作用,武当玉兰 + 望春花嫁接品种显示出了一定的抗炎趋势,而武当玉兰则未表现
出抗炎作用。(2)镇痛试验:三种辛夷均显示出镇痛作用,其镇痛作用的强度依次为望春花>嫁接品种 >
武当玉兰。 结论 武当玉兰(砧木)+ 望春花(接穗)辛夷显示了一定的抗炎镇痛效果,其作用强度优于武当
玉兰,为其临床应用及川辛夷基地品质改良提供实验依据。
[ 关键词 ]武当玉兰;望春花;嫁接;抗炎;镇痛
[ 中图分类号 ] R284      [ 文献标识码 ] A      [ 文章编号 ] 2095-0616(2016)07-46-03
Experiment of anti-inflammatory and analgesic effects of
sprenger magnolia bark and magnolia biondii pamp grafted on
flos magnoline
MA  Ling
1
    ZHOU  Bingbing
1
    MA  Yuying
2
    JIANG  Yunbin
2
1.Department of Pharmacy,Chongqing Three Gorges Medical College,Chongqing 404120,China;2.School of
pharmacy,Chengdu University of Traditional Chinese Medicine,Chengdu 611137,China
[Abstract] Objective To explore pharmacological activities of anti-inflammatory and analgesic effect of sprenger
magnolia bark (stock) and mgnolia biondii pamp (scion) grafted on flos magnoline. Methods Effect of sprenger
magnolia bark (stock) grafted on flos magnoline and mgnolia biondii pamp (scion) grafted on flos magnoline on mouse
auricular swelling caused by xylene and mouse writhing caused by acetic acid. Results (1)Anti-inflammatory
experiment:Mgnolia biondii pamp had significant anti-inflammatory effect.Grafted species of sprenger magnolia bark
and mgnolia biondii pamp showed a certain anti-inflammatory trend. But sprenger magnolia bark did not show anti-
inflammatory effect.(2)Analgesic experiment:All three flos magnoline showed analgesic effect.Analgesic effect of
mgnolia biondii pamp was more significant than grafted species,followed by sprenger magnolia bark. Conclusion
Sprenger magnolia bark (stock) grafted on flos magnoline and mgnolia biondii pamp (scion) grafted on flos magnoline
shows certain anti-inflammatory and analgesic effect and the effect intensity was better than sprenger magnolia
bark,which provide experimental references for its clinical application and quality improvement in Sichuan flos
magnoline base.
[Key words] Sprenger magnolia bark;Mgnolia biondii pamp;Graft;Anti-inflammatory;Analgesic
辛 夷(magnoliae flos)是 一 种 常 用 中 药,具 散
风寒、通鼻窍等功效。用于风寒头痛、鼻塞、鼻渊、
鼻流浊等症,为治疗鼻疾之要药。辛夷除供药用
外,尚出口作为高级香料的生产原料 [1]。市场需求
量大 [2]。《中国药典》2015 版记载辛夷的来源为木
兰科植物望春花 Magnolia biondii Pamp、玉兰 M.、
denudate Desr.、武 当 玉 兰 M.sprengeri Pamp. 的 干
燥花蕾 [3]。四川北川县的川辛夷基地,为品种改良
以武当玉兰为砧木,嫁接望春花的枝条,栽培出了
嫁接品种。其嫁接品种能否等同辛夷入药亟待研究。
根据现有报道 [4-6] 本实验选取镇痛、抗炎药理作用着
重探讨嫁接品种、望春花、武当玉兰的药理作用
强弱程度及差异,为嫁接品种的临床应用提供实验依据。
1  材料与方法
1.1  材料来源
药材样品来源见表 1,并均经成都中医药大学
马逾英教授鉴定。
1.2  药物制备
照《中国药典》2015 年版一部挥发油测定法甲
法(附录 XD)提取挥发油。分别称取三种辛夷药
材各 75g,加 10 倍量的蒸馏水浸泡 1h,加热至沸,
并保持微沸 1.5h,停止加热,放置片刻,收集挥发油;
另滤过收集水提液,药渣再加 8 倍量水,煎煮两次,
每次 30min,合并 3 次水煎液,减压浓缩至 300mL,
即得水提液。见表 2。

通讯作者
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2 0 1 6 年 4 月 第 6 卷 第 7 期 ·药物研究·
表1    样品来源
样品 来源 产地 备注
武当玉兰+望春花 武当玉兰M. sprengeri+望春花M. biondii 四川省北川县 以下简称嫁接辛夷
武当玉兰 武当玉兰M. sprengeri 四川省北川县
望春花 望春花M. biondii 河南省南召县
表3    不同品种辛夷对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响(x ± s,n=10)
组别 计量(g生药/kg) 耳朵肿胀度(mg) 抑制率(%)
空白对照组 等体积 14.320±1.296
阳性对照组 0.75 9.60±1.4453*** 33
武当玉兰+望春花 高剂量组 5 12.740±3.1732 15
低剂量组 2.5 12.810±2.8792 11
武当玉兰 高剂量组 5 12.140±5.6502 11
低剂量组 2.5 13.570±1.9044 5.2
望春花 高剂量组 5 10.760±2.5518* 25
低剂量组 2.5 10.960±0.9770*ΔΔ 23
F 2.597
P 0.026
注:与空白对照组比较,***P < 0.05,*P < 0.05;与武当玉兰低剂量组比较,ΔΔP < 0.05。
表2    不同辛夷样品液制备结果
样品
挥发油 水提液
颜色颜色,透明度 收集体积(mL)
武当玉兰+望春花 黄色,透明 0.8 棕色
武当玉兰 黄色,半透明 0.35 棕褐色
望春花 淡黄色,透明 1.40 黄棕色
分别于水提液中加入挥发油,以相当于挥发油
体积 40%的吐温 80 助溶,混匀,备用。(样品液每
1mL 含 0.25g 原生药材)。
1.3  阳性药物
贝诺酯片(扑炎痛,地奥集团成都药业股份有
限公司,060215)。二甲苯 ( 分析纯,成都科龙化工
试剂厂 )、醋酸 ( 分析纯,成都科龙化工试剂厂 )。
1.4  动物
昆明种小鼠,全雄,160 只,川实动管第 11 号。
1.5  二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验[7-8]
取健康雄性小鼠 80 只,按照体重随机分为 8
组,分别为空白对照组,阳性药对照组,嫁接品种
高、低 剂 量 组(5g/kg、2.5g/kg),武 当 玉 兰 高、低 剂
量组(5g/kg、2.5g/kg),望春花高、低剂量组(5g/kg、
2.5g/kg);每组动物按 0.2mL/10g 体重连续灌胃给
药 5d,空白对照组给予等体积蒸馏水,每日一次,末
次给药前禁食 18h,末次给药 30min 后,将 20μL 二
甲苯涂于小鼠左耳廓两面致炎,右耳不涂为对照,
致炎 4h 后脱颈处死小鼠,用直径 12mm 的打孔器
取下左右耳片精密称量,右耳与左耳质量之差即为
肿胀度。计算肿胀抑制百分率。计算公式:
抑制率=
空组二耳重量差-供试组二耳重量差
×100%空白组二耳重量差
1.6  醋酸扭体法试验[9]
取健康雄性小鼠 80 只,按体重随机分为 8 组,
组别同上。每组动物按 0.2mL/10g 体重连续灌胃给
药 7d,空白对照组给予等体积蒸馏水,每日一次,末
次给药前禁食 18h,末次给药 30min 后,每只鼠腹腔
注射 0.6%醋酸溶液 0.2mL,记录随后 30min 内小鼠
扭体次数,计算各药抑制率。计算公式:
抑制率=
空白对照组扭体反应次数-给药组扭体反应次数
×100%
空白对照组扭体反应次数
1.7  统计学处理
采用统计软件 SPSS16.0,各组数据均以(x ± s)表
示,进行方差齐性检验,方差齐性用单因素方差分
析中的 LSD 法进行组间比较;方差不齐性用单因
素方差分析中的 Tamhane’s T2 法进行组间比较。
P < 0.05 为差异具有统计学意义。
2  结果
2.1  对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响
望春花高低剂量组对二甲苯引起的小鼠耳廓
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肿胀均有显著的抑制作用(P < 0.05),高剂量组的
活性最强抑制率为 25%;武当玉兰 + 望春花辛夷组
与空白组比较无显著性差异,但显示出了一定的抑
制趋势抑制率为 15%。从组间比较看,武当玉兰与
望春花比较有显著性差异(P < 0.05),表明武当玉
兰未显示出抗炎药理作用,见表 3。
2.2  对醋酸所致小鼠疼痛的影响
望春花的高剂量组、嫁接品种高、低剂量组、武当
玉兰高剂量组均能够减少醋酸所致小鼠扭体次数,与
空白对照组比较差异有统计学意义(P < 0.05)。以
望春花的高剂量组为最高抑制率为 52%。其次是
嫁接品种的抑制率为 45%。其作用强度依次为望
春花>嫁接品种 > 武当玉兰,见表 4。
表4    不同品种辛夷对醋酸所致小鼠疼痛的影响(x ± s,n=12)
组别
计量
(g/kg)
扭体反应次数
抑制率
(%)
空白对照组(蒸馏水) 等体积 23.60±5.739
阳性对照组(贝诺酯) 0.75 3.10±2.846* 87
嫁接品种 高剂量组 5 14.50±12.808* 0.067
低剂量组 2.5 13.10±9.374* 0.105
武当玉兰 高剂量组 5 19.10±8.999* 0.136
低剂量组 2.5 21.80±14.117 0.126
望春花 高剂量组 5 11.30±9.604* 0.002
低剂量组 2.5 15.60±8.540 0.014
F 7.546
P 0.000
注:与空白对照组比较,*P < 0.05
3  讨论
本实验结果显示,在抗炎试验中,与空白对照组
比较,仅望春花对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的抑制
作用有统计学意义(P < 0.05),组间比较看,望春花
与武当玉兰低剂量组有显著性差异(P < 0.05)。镇
痛试验中,与空白对照组比较,除武当玉兰低剂量组、
望春花低剂量组对醋酸致小鼠疼痛的影响无统计学
意义外,其余各组有显著的镇痛作用(P < 0.05)。望
春花的抗炎作用有统计学意义,嫁接品种有抗炎趋
势,而武当玉兰几无抗炎作用,可能与挥发油的含
量有关;在镇痛试验中,三种辛夷都有镇痛的药理
作用,以望春花和武当玉兰 + 望春花辛夷为好,其
次是武当玉兰。
辛夷不仅是大宗常用中药,也具有较高的经济价
值 [11-12],现在改进栽培技术提高产量的报道 [13-14] 较
多,但品质评价鲜见报道。四川省北川县是辛夷的
种植基地,其主流品种是武当玉兰,为品种改良尝
试,培育了嫁接品种。本文根据其功效及现有文献
报道 [15],注重探讨了武当玉兰、望春花、嫁接辛夷三
者的药效差异。武当玉兰 + 望春花辛夷其挥发油
含量较武当玉兰高了 2 倍。显示了明显的镇痛作用,
也表现出了抗炎药理作用趋势,且作用强度均优于
武当玉兰,本试验为其临床应用提供依据,为川辛
夷基地的品种改良提供参考。
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(收稿日期:2016-01-28)