全 文 ：EDIBLEFUNGI食用菌 2008(1)
冬夏漫长,春秋短暂,根据这一气候特点,玉米秆栽培应在小
麦播种完后,从11月开始堆料,12月和翌年元月播种,3月气
温回升后开始出菇,6月夏收前后结束。这样既避开了农忙季
节,又能保证在适宜的气温条件下生长,这一时期病虫很少发
生,所以蘑菇质量好,加工后成品率高。
4 菌种生产工艺的改进 传统的菌种制作办法是用 750mL
菌种瓶装入粪草培养料,经高压灭菌后接种培养。这种方法制
作的菌种成本高、用量大、容易退化。而使用塑料袋生产,在制
作和运输中容易碰破而导致污染。现改用葡萄糖瓶制作麦粒菌
种,成本低、用量少、播种面积大,每一颗麦粒就是一个发菌中
心。播种时将棚内清扫干净,喷洒石灰水和少量杀虫剂消毒、防
虫,先将发酵料平铺在畦床上,厚25cm,1m2用麦粒菌种两瓶
撒播在料面,播后用手将料抖动,使麦粒与料紧密结合,然后用
木板拍平压实,上面覆盖报纸或地膜。播种后3~4d菌丝吃料生
长,这时菇棚内要黑暗,空气湿度70%左右,每天揭开两头棚膜
通风30min。选择吸水、通气性好、腐殖质含量高的土壤,当菌
丝长满料厚2/3时覆土,覆土厚2.5~3.0cm,使土层料面均匀一
致,覆土后保持土层潮湿。一般覆土后15~20d可见菇蕾。这时
管理以调控水分和通气为主,见菇蕾轻喷水,小菇长大时重喷
水。要适时采菇,每采1潮菇后,及时清理床面,挑老根补新土,
通风换气,使水、气、温协调,满足蘑菇生长的要求。
鸡油菌及其伴生真菌LBJ016
营养成分对比分析
王茂胜 1 连 宾 2 陈 烨 3
(1贵州省烟草科学研究所,贵阳 550003;2中国科学院地球化学研
究所环境地球化学国家重点实验室,贵阳 550002;3贵州大学化学工
程学院,贵阳550003)
摘 要 在分离野生鸡油菌(Canthareluscibarius)的过程中获
得一株伴生真菌LBJ016,对比研究了鸡油菌子实体及其伴生
真菌菌丝体的营养成分。对鸡油菌子实体及LBJ016菌丝体中
的微量元素、氨基酸、多糖含量及其单糖组成分析表明:LBJ016
菌丝体中微量元素含量与鸡油菌子实体基本一致,氨基酸含量
大约是鸡油菌子实体的 2倍;LBJ016菌丝体多糖含量为
8.28%,鸡油菌子实体多糖含量为12.59%,LBJ016菌丝体和鸡
油菌子实体粗多糖各由3种单糖组成,其中LBJ016菌丝体多
糖的单糖组分是葡萄糖、半乳糖和甘露糖,鸡油菌子实体的单
糖组分是葡萄糖、半乳糖和核糖。
关键词 鸡油菌 微量元素 氨基酸 多糖
文章编号 1000-8357(2008)01-0046-02
鸡油菌(Canthareluscibarius)是一种外生菌根真菌,曾广
泛分布于贵州省。鸡油菌子实体富含 VA(胡萝卜素)、VC、多
糖和矿物元素等,具有较高的营养价值和药用价值。中医认为
鸡油菌具有明目、抗肿瘤、治疗心血管疾病、抗病毒、抗菌等功
效[1]。然而,由于生态环境逐步恶化和乱采乱伐现象导致原本
极为常见的鸡油菌逐步沦为稀缺品种。鉴于鸡油菌作为重要
药食兼用真菌以及其在森林生态系统中的作用,有必要进一
步开展研究。EricDanel[2]和 GSraatsma[3]报道,鸡油菌子实体
有许多伴生菌存在,笔者在尝试分离野生鸡油菌菌种的过程
中亦获得一株有类似其子实体气味的伴生真菌 LBJ016。为此
对 LBJ016菌丝体与鸡油菌子实体中一些营养成分含量的分
析,为开展进一步的开发利用提供基础资料。
1 材料与方法
1.1 伴生真菌分离与培养 新鲜鸡油菌子实体采自贵阳市近
郊,利用PDA培养基在分离野生鸡油菌菌种的过程中获得一株
有类似其子实体气味的伴生真菌LBJ016,纯化后的LBJ016为
白色菌丝,经液体发酵、烘干后散发出与野生鸡油菌类似香味。
1.2 微量元素测定与氨基酸分析
1.2.1 微量元素测定方法 准确称取0.6000g样品,加入消
化瓶(5mLHNO3+2mLHF)中,140℃下水解 1h,用浓度为
0.1mol/LHNO3溶解定容至25mL,采用原子吸收分光光度仪
(FAS986型)测定[4]。
1.2.2 氨基酸分析方法 准确称取0.5000g样品置于棕色瓶
中,再加入 1mL浓度为 6mol/LHCl,110℃下水解,24h后过
滤蒸干,最后用浓度为0.1mol/LHCl溶解定容至25mL。采用
高效液相色谱仪(HPLC-1100型)FDBN柱前衍生法测定。层
析柱:Zor-baxCl8;流动相:磷酸二氢钾和乙晴水溶液[V(水)∶
V(乙晴)=45∶55][4],[5]。
1.3 多糖含量及其单糖组成分析
1.3.1 多糖提取 参照有关文献[7]并根据预实验结果,对鸡
油菌子实体和LBJ016菌丝体粗多糖的提取采用以下方法:称
取10g子实体或菌丝体干粉(200目),加入 25倍样品干重蒸
馏水,在温度为 80℃的水浴中浸提 40min,重复 3次过滤,合
并滤液后,加入等量 sevag试剂[8]离心、除蛋白,上清液为多糖
提取液。
1.3.2 多糖含量测定 标准曲线制作参照文献[10]。
1.3.3 单糖组成分析 取 60mL多糖提取液浓缩到 12mL,
再加入等体积的乙醇过夜(或离心),收集沉淀,最后依次用丙
酮、乙醚各洗涤3次,真空挥发,得粗多糖用于单糖组成分析。
单糖组成分析采用薄层色谱法[9]进行。
2 结果与分析
2.1 微量元素与氨基酸分析 鸡油菌子实体与 LBJ016菌丝
体的微量元素含量测定结果见表1。
由表1可知,鸡油菌子实体与LBJ016菌丝体中元素 K、
Na、Ca和 Mg含量都很丰富,而重金属元素 Pb、Cd、As和 Hg
的含量均较低。元素Zn在鸡油菌子实体中为 76.4ug/g,而在
LBJ016菌丝体中为143ug/g,这一数值几乎是鸡油菌子实体
的2倍;鸡油菌子实体中Fe的含量比LBJ016菌丝体高。
鸡油菌子实体与 LBJ016菌丝体中氨基酸含量分析结果
见表2。
由表2可以看出,鸡油菌子实体与LBJ016菌丝体至少含
有 14种氨基酸,而 LBJ016菌丝体中几乎任何一种氨基酸含
量都是鸡油菌子实体的两倍,可见,LBJ016菌丝体在氨基酸
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
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EDIBLE FUNGI食用菌 2008(1)
表3 多糖水解物薄层色谱的Rf值
样品 Rf值
标准
样品
半乳糖 0.227
葡萄糖 0.314
甘露糖 0.422
核 糖 0.455
LBJ016菌丝体多糖水解物 0.227 0.314 0.411
鸡油菌子实体多糖水解物 0.225 0.306 0.462
表1 鸡油菌子实体与LBJ016菌丝体中微量元素含量
微量元素
微量元素含量/(μg·g-1)
鸡油菌子实体 LBJ016菌丝体
K 1.00×16 1.060×16
Na 0.020×106 0.073×106
Ca 0.110× 06 0.042×106
Mg 0.130× 06 0.130×16
Zn 76.400 143
Cu 46.400 13.300
Fe 1700 294
Mn 80.200 27.300
Pb 27.500 6.200
Cd 3.600 0.160
P 0.500 1.180
As ﹤0.500 0.500
Hg 0.001 0.001
图1 葡萄糖标准曲线
表2 鸡油菌子实体与LBJ016菌丝体氨基酸含量
含量上优于鸡油菌子实体。
2.2多糖含量及单糖组成分析结果 在 622nm处测定吸光
度,以吸光度OD值为纵坐标,葡萄糖的质量浓度 C为横坐标
绘制标准曲线,根据所测数据,得回归方程 OD=0.009731C+
0.003714,R2=0.9998。
根据图1结果所得回归方程,求出 OD值对应的多糖质
量浓度 C,然后,根据 1.3.2中列出的公式求出鸡油菌子实体
和LBJ016菌丝体多糖含量。结果表明,鸡油菌子实体多糖含
量为12.59%,LBJ016菌丝体多糖含量为8.28%。
由薄层色谱法分析鸡油菌子实体与 LBJ016菌丝体多糖
的单糖组成,单糖的Rf值见表3。
结果表明,鸡油菌子实体多糖水解物主要由葡萄糖、甘露
糖和核糖组成,LBJ016菌丝体多糖水解物主要由半乳糖、葡
萄糖和甘露糖组成。
3 小 结
微量元素、氨基酸以及多糖是鸡油菌子实体和 LBJ016
菌丝体的主要成分。野生鸡油菌具有增强免疫和抗肿瘤、抗突
变、抗辐射以及降血压等功能显然与其含有丰富的微量元素、
氨基酸以及多糖等有关[111-[15]。研究发现,LBJ016菌丝体所含微
量元素与鸡油菌子实体含量基本一致;LBJ016菌丝体氨基酸含
量非常丰富,大约是鸡油菌的2倍;LBJ016菌丝体和鸡油菌子
实体粗多糖含量较高,且只有一种单糖组分不同。因此,LBJ016
菌丝体作为野生鸡油菌的替代品具有很好的应用前景。
当然,仍有必要对LBJ016菌丝体的药理作用和安全性作
进一步的研究。
参考文献
[1] Stephen J.M,Mdachi,Mayunga H.H. Nkunya,Vitus A. Nyigo,Isa
T. Urasa,Amino acid composition of some Tanzanian wild mush-
rooms[J].FoodChemistry,2004,86:179-182.
[2] Eric Danell,Sadhna Alstrom,Anders Ternstrom,Pseud onas
fluorscens In association with fruit bodies Of the ectomycorrhizal
mushroomcantharelluscibarius[J].1993,Mycol.Res,97(9):1148-
1152.
[3] GSraatsma,RNHKonings,VanGriensvenL,A traincollectionof
themycorrhizalmushroomCantharelluscibariusobtainedbygermi-
nation ofsporesand cultureoffruitbodytissue [J].Trans.Br.mycol.
soc,1985,85:689-697.
[4]邓百万,陈文强.美味牛肝菌营养菌丝体与野生子实体品质分
析[J].中国食用菌,2004,23(5):44-45.
[5] DuraliMendil,Erdo_ganHasdemir,Deter nationoftraceelements
onsomewildediblemushroomsamplesfromKastamonu[J].Turkey.
FoodChemistry,2004.88:2 1-285.
[6] Stephen J.M. Mdachi,Mayunga H.H. Nkunya,Vitus A. Nyigo,Isa
T. Urasa.,Amino acid composition of some Tanzanian wild mush-
rooms[J].FoodChemistry,2004,86:179-182.
[7]严慧如,黄绍华,余迎利.菊糖的提取及纯化[J].天然产物研究与
开发,2001,14(1):65-69.
[8]张惟杰.糖复合物生化研究技术 [M].杭州:浙江大学出版社,
1999.
[9] J.Schiller,K.Arnold,in:R.A.Meyers(Ed.),EncyclopediaofAna-
lyticalChemistry[M].Wiley,Chichester,2000,559-585.
[10] Dubois M,Gilles K.A,Hamilton J.K,Rebers PA,Smith F,Colori-
metricmethodfordeterminationofsugarsandrelatedsubstances[J].
AnalChem,1956,28:350-356.
[11] Breene,W.M.,Nutritional and medicinal value of specialty
mushrooms[J].Journaloffoodprotection,1990,53:883-994.
[12] Jane C Onweluzo,M. R. Vijayalakshmi,Detarium Microcarpum
PolysaccharideasaStabilizerinProcessedFruitProducts [J].Food
ScienceandTechnology,1999,32(8):521-526.
[13] Liu,J.L,Fei,Y,The activity of cordyceps taii and cordyceps
pruinosapolysaccharideseffectonmacrophagecell [J].Immunol J,
2001,17(3):189-191.
[14] Quanbin Zhang,Pengzhan Yu,A tioxidant activities of sulfated
polysaccharide .fractions from Porphyrahaitanesis [J]. Journal of
AppliedPhycology,2003,15(4):305-310.
[15] Breene,W.M.Nutritionalandmedicinalvalueofspeciltymushroom
[J].JournalofFoodprotection,1990,53:883-994.
氨基酸
氨基酸含量/%
鸡油菌子实体 LBJ016菌丝体
Asp 1.07 2.01
Thr 0.36 0.62
Ser 0.45 0.73
Glu 1.94 3.06
Gly 0.65 1.43
Ala 1.10 2.82
Val 1.22 2.34
Met 1.22 2.39
Ile 0.55 1.00
Tyr 0.36 0.66
Phe 0.64 1.00
His 0.67 1.12
Lys 2.86 5.09
Arg 1.04 2.11
葡萄糖/(!g·mL-1)
O
D(
6
2
2
m
m
)
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