全 文 ：EDIBLEFUNGI食用菌 2008(1)
蜜环菌A9培养基的筛选 *
卢学琴
(西南科技大学生命科学与工程学院,四川绵阳 621000)
摘 要 蜜环菌与天麻共生,为天麻生长提供所需的营养物
质。试验选用适宜于天麻生长的蜜环菌A9菌株,采用完全随机
设计,对试验中采用3种培养基和5种琼脂凝固剂量进行筛选
试验。结果表明:蜜环菌A9在含有5g牛肉膏浸提液的培养基
上生长最快,菌索最健壮,满管时间最短。
关键词 蜜环菌 培养基 筛选
文章编号 1000-8357(2008)01-0025-02
*四川省科技厅重点应用基础研究项目(01NY051-07)。
天麻生长的基本营养物质来源于蜜环菌[Armilariela
melea(Vahl.ex.Fr)Karst]。王贺[1]等发现蜜环菌是通过菌索
侵染天麻,而天麻皮层的大型细胞消化蜜环菌而获得营养。
兰进[2]等利用 3H-葡萄糖以打孔浇灌标记天麻,追踪标记化
合物,显微镜放射显影的结果表明,蜜环菌能从天麻中获取
营养,蜜环菌与天麻之间存在营养物质的相互交流,菌麻之
间存在着特殊的共生关系。为了使所获得的优良蜜环菌菌
株较快的应用到天麻优质高产栽培中,王秋颖[3]等收集了国
内外近 20种蜜环菌,并进行了复壮,选择了其中 11个有代
表性的菌株培养成菌枝,进行了伴栽天麻试验。得到的试验
结果表明,菌株A9是生长最快且生长较强壮的菌株。孙士青[4]
等采用不同生物学类型的蜜环菌对同一品种的天麻进行了
侵染试验,结果表明,不同类型的蜜环菌对天麻生物量及药
效的影响差异显著。但是,前人对不同培养基对蜜环菌生长
发育的影响研究不多。试验拟对蜜环菌 A9进行培养基成分
的筛选,以期找出适合蜜环菌生长的最优培养基成分配方,
为与天麻之间的共生,提供良好的基础,最终实现天麻优质
高产。
1 材料与方法
1.1 试验材料 试验于2007年在江油市含增镇天麻繁育基
地组培室进行,蜜环菌A9由该试验基地提供。
1.2 试验设计 试验采用完全随机设计,重复 5次。培养基
装量为试管的 1/4。恒温 25℃培养。基础培养基的成分:每
1000mL的培养基,含有 200g马铃薯浸提液,20g葡萄糖,
20g琼脂。在基础培养基中分别加入3种成分,形成 3种处
理:①加入 5g牛肉膏;②加入 50g麸皮浸提液;③加入 50g
松针浸提液。
1.3 试验管理和数据分析 将蜜环菌 A9接种于上述 3种不
同配方的培养基斜面中部,在 25℃下恒温培养,每天观察菌
丝生长状况,记录复活时间、长势、菌索萌发时间,菌索长势及
菌索满管时间。
将所得数据按不同的培养基成分整理,采用方差分析,F
测验。
入氨基酸多元微肥可明显促进菌丝生长,以 50kg培养料加
15mL效果最好。
2.2 氨基酸多元微肥对子实体采收期的影响 氨基酸多元
微肥不同加量对子实体采收期无明显差别,但与 CK比采收
始期第 1潮提前 2d,第 2潮提前 13d,且第 2潮采收历期缩
短2d;中心菇柄平均达14.8cm,高出CK1.7cm。说明氨基酸
多元微肥能促进金针菇子实体的生长,改善品质,缩短出菇
期,出菇相对集中,尤以第2潮菇最为显著。
2.3 氨基酸多元微肥对产量的影响 由表 2知,各处理的金
针菇产量都极显著高于 CK,说明氨基酸多元微肥能明显提高
金针菇产量。
2.4 氨基酸多元微肥对子实体品质的影响 选取加氨基酸
多元微肥15mL组、对照的子实体进行蛋白质(粗蛋白)分析。
结果施用氨基酸多元微肥的子实体蛋白质质量分数 33.75%,
比对照提高 12.5%。可见使用氨基酸多元微肥能明显改善金
针菇子实体的品质。
3 结论与讨论
3.1 氨基酸多元微肥能明显促进菌丝生长和子实体发育,缩
短出菇期,提高其产量,增产达26.24%。
3.2 氨基酸多元微肥是一种高浓缩有机复合微生物菌肥,在
金针菇菌丝体生长尤其是子实体发育后期(第2潮菇后)施用,
可及时补充营养,对恢复菌丝生长、促进菌丝愈合及菌丝成熟
作用明显,促使早现蕾、多现蕾,从而提高产量,改善品质。
参考文献
[1] 毕志树,郑国扬,李泰辉.广东大型真菌志[M].广东:广东科技出版
社,1994.
[2] 徐锦堂.中国药用真菌学[M].北京:北京医科大学、中国协和医科
大学联合出版社,1997.
[3] 卢青达,马启明,张长铠.食用真菌[M].济南:山东科技出版社,
1986.
[4] 刁治民,刘禹宏,田玉华.青海药用蕈菌[M].西宁:青海人民出版
社,1994.
[5] 卯晓岚.中国大型真菌[M].郑州:河南科学技术出版社,2000.
[6] 武汉医学院.营养与食品卫生学[M].北京:人民卫生出版社,1985.
[7] 李学梅,李宗义,单广福,等.金针菇蛋白质及氨基酸含量的测定
与分析[J].中国食用菌,1999,18(6):20-22.
表2 氨基酸多元微肥对金针菇产量的影响
表1 不同加量氨基酸多元微肥对金针菇菌丝生长的影响
氨基酸多元微
肥加量/mL
8天菌丝
生长量/cm
日均长速
/(cm·d-1)
满袋
/d
菌丝长势
5 4.15 0.52 26.3 较粗壮、浓白
10 4.31 0.54 25.8 粗壮、浓白
15 4.36 0.55 24.9 粗壮、浓白
20 4.28 0.54 25.4 粗壮、浓白
25 4.00 0.50 27.1 较粗壮、浓白
CK 3.75 0.47 28.2 较粗壮、浓白
氨基酸多元
微肥加量/mL
生物学
效率/%
产量/kg 差异显著性
1潮 2潮 小区平均 0.05 0.01
15 142.28 7.173 7.055 4.743 a A
10 138.81 7.092 6.789 4.627 b B
20 136.49 7.069 6.580 4.550 c BB
5 135.79 7.033 6.546 4.526 c
25 132.48 6.946 6.302 4.416 d C
CK 116.04 6.813 4.791 3.868 e D
25- -
EDIBLEFUNGI食用菌 2008(1)
2 结果与分析
2.1 蜜环菌 A9在不同培养基上的生长动态趋势 从试验中
我们发现:3月 1日-4月 1日期间,蜜环菌的菌丝复活时间,
菌索萌发时间,以及从菌索开始萌发到长满培养基质的时间,
在不同的培养基上,表现不同。从其中可初步得到在牛肉膏培
养基上的蜜环菌生长最好,无论是色泽,健壮度,还是分枝都
表现为最佳。
蜜环菌 A9在不同的培养基上的生长特征和动态趋势结
果详见表1、表2。
从表1中我们可以观察到,蜜环菌 A9在 3种培养基上均
可以生长,但培养特征存在较明显的差异:在牛肉膏培养基上
菌索浓密,生长势强,菌索顶端整齐度高;在麸皮浸提液培养
基上,则呈现蜜环菌菌索较稀,生长势较弱,菌索顶端整齐度
较差;松针浸提液培养基中,菌索稀少,生长速度慢,菌索顶端
整齐度较差。比较3种培养基上菌索颜色的区别,牛肉膏培养
基上菌索表现为红褐色,麸皮培养基上是黑褐色,松针培养基
上为浅褐色。根据菌索自身的生物学特性分析,可得到牛肉膏
培养基上的菌索生长较好,繁殖能力旺盛,麸皮浸提液培养基
的菌索生长较差,有老化的趋势,逐步的失去繁殖能力,而松
针培养基上的菌索生长状况则位于两者之间。
从表 2也可明显的看出:在接种后,3种培养基上蜜环菌
的菌丝复活所需的时间最短的是牛肉膏培养基,只用了3d,
麸皮和松针浸提液培养基都需要5d;菌索萌发时间也是牛肉
膏培养基最短5d,但是在复活菌丝时间相同的麸皮浸提液及
松针浸提液之间,菌丝萌发时间后者比前者早一天。菌丝的生
长情况及菌索满管时间都与前两个生理指标的效果呈同趋势
变化。总的来说,牛肉膏培养基上的蜜环菌生长情况最好,松
针浸提液培养基次之,而麸皮浸提液上的蜜环菌长势最差。
2.2 3种不同培养基的显著差异性比较 将 3种处理上蜜环
菌的生长共经历的时间列入表3。
从表3可知,牛肉膏培养基上的蜜环菌日平均增长速度
最快,且各管长速较为一致;麸皮上的日平均增长速度最慢,
各管的长速最不整齐;松针上的日平均增长速度一般,但是
3种培养基中,蜜环菌长势最为整齐的配方。
经过F测验,可得到F=45.06>>1,3种培养基配方之间存
在极显著差异,方差分析见表4。
进一步多重比较见表5。
从表 5可知,麸皮,松针,牛肉膏 3种配方之间存在显著
性差异,而且牛肉膏与麸皮,松针培养基之间存在极显著性差
异。通过统计分析表明,试验中菌丝长势、长速最佳的培养基
为牛肉膏培养基。
3 小结与讨论
试验中供试的3个培养基上,接种后都未出现大量蜜环
菌菌丝,造成这一现象的原因,可能与所选择的蜜环菌 A9的
种性有关,也可能与培养基的成分、栽培条件有关,在类似的
培养基上如何才能出现大量的蜜环菌应进一步研究和观察。
试验表明,牛肉膏培养基的优越性在于能够提高蜜环菌
的生长速度,生长整齐度,以及生长密度等方面的生物性状,
是本试验中较为优良培养基。当然,该培养基培养的蜜环菌对
天麻的影响有待进一步研究。
参考文献
[1] 王 贺,王震宇,张福锁,等.天麻大型细胞消化蜜环菌过程中溶
酶体小泡的作用[J].植物学报,1992,34(6):405-409.
[2] 兰 进,徐锦堂,李京淑,等.蜜环菌和天麻共生营养关系的放射
性自显影研究[J].真菌学报,1994,13(3):219-222.
[3] 王秋颖,郭顺星,关凤斌,等.不同来源蜜环菌对天麻产量影响的
研究[J].中草药,2001,32(9):838-841.
[4] 孙士青,陈贯红.不同来源蜜环菌对天麻生物产量的影响和天麻
素含量的影响[J].山东科学,2003,16(2):7-10.
表1 蜜环菌A9菌索在不同培养基上的生长特征
菌索密度 菌索顶端整齐度 菌索颜色
牛肉膏培养基 ++++ 整齐 红褐色
麸皮浸提液 ++ 较整齐 黑褐色
松针浸提液 ++ 较整齐 浅褐色
表2 不同培养基上蜜环菌A9的生长状况
培养基添加成分 牛肉膏 麸皮浸提液 松针浸提液
菌丝复活时间/d 3 5 5
菌索萌发时间/d 5 7 6
菌丝长势
菌丝健壮,
色泽更白
菌丝纤细,颜色
灰白,易于核化,
生长状况介于牛肉
膏、松针浸液之间
菌索长满培养基
质的时间/d
10 15 13
表5 3种培养基间存在的显著性差异
表3 蜜环菌的生长历期
培养基 生长时间/d 总和 平均
牛肉膏 16 18 18 17 21 90 18
麸皮 26 29 24 27 29 135 27
松针 22 23 25 25 25 120 24
表4 3种培养基对蜜环菌生长时间的方差分析
变异来源 DF SS MS F F0.05 F0.01
处理间试验误差 212 238210 1052.33 45.06** 3.89 6.33
总变异 14 28
培养基
平均生长
时间/d
差异显著性
5% 1%
麸皮 27 a A
松针 24 b A
牛肉膏 18 c BC
▲菇农好消息 (供应优质棉子壳) 山西省运城市方向正物
流有限公司有大型停车场,厂价直销棉子壳。备有仓库常年储存
大量棉子壳,并有大批返程车发往全国各地,空车配载比火车皮
更快捷方便。我公司经营棉子壳已18年,年销售在3万t以
上。与用户合作一次,将成为永久信赖的合作伙伴。
地址:山西省运城市北郊运风高速引道300m路北。
农行卡号:9559983040520728018
邮政卡号:601811012200031035
联系电话:0359-2161956(棉壳专线)0359-8687025
#












$
%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%$













$
培养基
26- -