作 者 ：郭益童Organ-单位: 福建农林大学
期 刊 ：福建农林大学 2010年 04期 页码：67
关键词：银耳芽孢；紫外线诱变；农杆菌介导转化；人胰岛素基因；
摘 要 ：以银耳Tr21为出发菌株,采用紫外线诱变方法处理对数生长期银耳芽孢,挑取12180个菌落,经过两轮筛选后得到5个对潮霉素敏感的菌株,在传代培养10代后,除一个菌株恢复对潮霉素抗性外,另外4个菌株保持突变性状,稳定遗传。 通过冻融法将含有人胰岛素BCA基因及潮霉素磷酸转移酶hph基因的质粒pCB-BCA和pBHg-BCA分别单独转到根癌农杆菌EHA105和GV3101中。在质粒pCB-BCA中,目的基因及筛选标记基因前端所带启动子为花椰菜病毒35S启动子(P35S),pBHg-BCA所带启动子为双孢蘑菇gpd启动子。用以上携带不同质粒的农杆菌与银耳芽孢共培养后,在含有潮霉素...