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大叶风兰的组织培养



全 文 :大叶风兰的组织培养
胡如善 1 , 杨玉珍1 , 秦书林 2 , 余晓丽 3
(1.河南南阳农业学校组织培养中心 ,河南南阳 473000;2.南阳市园林处 ,河南南阳 473000;
3.南阳师范学院生命科学系 ,河阳南阳 473000)
  摘要:以大叶风兰为材料 ,应用组织培养技术 , 对适合原球茎诱导 、不定芽分化和生根的培养基 、培养基质等
进行了系统的研究 , 并对培养基激素进行了筛选 ,结果表明 , 利于原球茎诱导的培养基为 MS+4.0 mg/L6-BA+
0.5 mg/LNAA, 利于不定芽生长的培养基为 MS+1.0mg/L6-BA+0.5 mg/LNAA,增殖率为 4.5, 利于生根的培
养基为 1/2MS+0.5 mg/LNAA, 栽培基质以水苔为佳。
  关键词:大叶风兰;原球茎;组织培养
  中图分类号:S682.310.36  文献标识码:A  文章编号:1002-1302(2005)05-0082-02
收稿日期:2005-03-19
基金项目:河南省重点科技攻关项目 “西洋兰的快速繁殖与栽培养
护技术研究 ”(编号:2002-10)。
作者简介:胡如善(1958—),男 ,河南南阳人 ,高级讲师 ,主要从事教
学与植物组织培养研究工作。 Tel:(0377)63393832;E-mail:
hurushan1958@sina.com。
  大叶风兰(Neofinetiafalcate)属附生兰类 ,原产
韩国。风兰喜欢在通风 、湿度高的地方生长 ,并由此
得名。植株娇小 ,几乎无茎 ,似蝴蝶兰 。叶片革质 ,
花淡黄色 ,有芳香 。风兰的根 、茎 、叶和花都是观赏
对象 ,观赏价值很高 ,深受人们的喜爱 ,现在日本 、韩
国等国家有大量栽培 ,但我国少有栽培 ,也未见关于
大叶风兰组织培养的研究报道。我们从 2002年开
始引进 ,并进行组织培养繁殖和栽培技术研究 。大
叶风兰若采用传统的分株繁殖 ,一年一株仅繁殖 2
~ 3个芽 ,繁殖系数很低 ,繁殖速度慢 、周期长 ,难以
迅速占领市场 ,满足需求。应用组织培养技术 ,可以
加快繁殖速度 ,进行工业化生产。我们以新引进的
大叶风兰优良品种为材料 ,对大叶风兰茎尖进行了
组织培养研究 ,成功地诱导分化形成了再生植株 ,达
到快速繁殖的目的。
1 材料与方法
1.1 材料与地点
供试大叶风兰为韩国引进品种。试验地点设在
河南南阳农业学校组织培养中心。
1.2 方法
1.2.1 取材与消毒 于 2002年 4 ~ 6月切取有 3 ~
4枚叶片的嫩芽 ,剪去叶片 ,暴露顶芽 ,用自来水冲
洗 30min,剥去叶柄的基部(露出指环),用 70%的
酒精浸泡 20 s,再用 0.1%的 HgCl2溶液灭菌 15
min,无菌水冲洗 5次 ,用无菌滤纸吸干水分。然后
在超净工作台上剥取顶芽的生长点作为外植体。生
长点部分带有 2 ~ 4枚叶原基 ,除去叶原基后 ,切成
大小约 0.5 ~ l.0 mm的方块 ,接种在一定激素配比
的 MS培养基上 [ 1] 。
1.2.2 培养基 基本培养基为 MS和 1/2MS,根据
不同培养阶段的需要[ 2, 3] ,添加 0.01 ~ 6.0 mg/L6
-BA、0.05 ~ 0.5 mg/LNAA、0.2 ~ 0.5 mg/LIBA、
30g/L蔗糖 、6.0g/L琼脂 , pH值 5.6。培养温度 25
℃,光照度 2 000lx,光照时间 14h/d。
2 结果与分析
2.1 原球茎的诱导培养
经消毒处理后的茎尖 , 接种于诱导培养基上
(基本培养基为 MS),不同激素配比下的诱导情况
见表 1。
表 1 不同激素配比对大叶风兰茎尖诱导形成原球茎的影响
激素浓度(mg/L)
6-BA NAA
40d后诱导原球茎情况
平均诱导
原球茎个
数(个)
1.0 0.1 无反应 0
2.0 0.1 外植体周围有许多疏松愈伤组织 0.50
3.0 0.1 外植体周围有少许颗粒状愈伤组织 3.21
4.0 0.5 外植体周围形成较多原球茎 4.10
5.0 0.5 外植体周围有少许褐色愈伤组织 2.46
6.0 0.5 外植体褐化 1.50
  由表 1可看出 ,相同浓度的 NAA下 ,高浓度 6
-BA对原球茎增殖有明显促进作用 , 但高于 6.0
mg/L则会抑制其生长。原球茎诱导最佳激素配比
以 4.0 mg/L6-BA、0.5 mg/LNAA为宜 。 25 d左
—82— 江苏农业科学 2005年第 5期DOI :10.15889/j.issn.1002-1302.2005.05.030
右外植体周围出现许多白色颗粒状愈伤组织 ,继续
培养逐渐转为绿色 , 40 d后可形成原球茎 。原球茎
的继代培养在诱导培养基上进行 ,当原球茎培养 40
d后 ,将来源于茎尖的原球茎取出 ,分割成小块 ,转
入新鲜的培养基中培养。
2.2 不定芽的诱导
将生长健壮的原球茎转入不同激素配比的分化
培养基(基本培养基为 MS)中 ,进行不定芽的诱导 ,
结果见表 2。
从表 2可以看出 ,在不同的细胞分裂素与生长
表 2 不同激素配比对大叶风兰不定芽诱导的影响
激素浓度(mg/L)
6-BA NAA
接种原球
茎数(个)
不定芽诱导
数(个)
分化率
(%)
平均苗高
(cm) 不定芽生长情况
0.5 0.05 20 1 5 0.1 愈伤组织过于致密 ,不定芽少或无 ,色黄 、低矮
1.0 0.05 20 7 35 2.0 不定芽萌动长出小植株 ,芽丛健壮
2.0 0.05 20 6 30 2.3 不定芽萌动长出小植株 ,并诱导出较多幼根
1.0 0.1 20 5 25 1.5 愈伤组织较松散 ,不定芽少或无
1.0 0.5 20 14 70 3.5 不定芽分化率高 ,芽丛健壮 ,叶色深绿
2.0 0.5 20 13 65 3.4 不定芽分化率高 、纤细 、丛生状
3.0 0.5 20 8 40 3.0 不定芽分化率低 、长势较弱 ,叶色淡绿
素配比条件下 , 不定芽有不同的分化能力 , 随着
6-BA浓度的升高 ,分化的芽也随之增加。当 6 -
BA浓度为 1.0mg/L、NAA为 0.5 mg/L时 ,诱导出
的不定芽数量多 ,苗粗壮 ,叶色浓绿;随着 6-BA浓
度的继续升高 ,诱导出的不定芽数量逐渐减少 ,且苗
生长不正常 。细胞分裂素与生长素配比合适时 , 30
d后原球茎开始分化 ,逐步诱导出不定芽。继续培
养 30 d左右可发育成不具根的幼芽 ,细胞分裂素与
生长素配比接近时有利于芽的生长。当激素配比为
1.0 mg/L6 -BA+0.5 mg/LNAA时 ,较有利于不
定芽的分化。
2.3 根的诱导
当不定芽长到 1.5 ~ 2.5 cm、具 3 ~ 4片叶时 ,
转入生根培养基内诱导生根 。每瓶 5 ~ 6个小苗 ,分
别接种在不同浓度的 NAA和 IBA中 , 25d后观察试
管苗生长状况 ,结果见表 3。
表 3 不同生长素种类和浓度对大叶风兰不定芽生根的影响
培养基 试验株数(株)
生根率
(%) 诱导生根情况
1/2MS+0.5mg/LNAA 30 93 每株生根 4~ 5条 ,根黄白色 ,粗壮 ,根毛丰富,长 4~ 5cm,呈放射状
1/2MS+0.2mg/LNAA 30 76 每株生根 3~ 4条 ,根粗壮 ,呈放射状
1 /2MS+0.5mg/LIBA 30 53 每株生根 3~ 4条 ,根较细弱
1 /2MS+0.2mg/LIBA 30 30 每株生根 1~ 2条 ,根细弱
  从表 3可看出 , 生根培养基以 1/2MS+0.5
mg/LNAA较好 ,不仅在 28 ~ 30 d生出 4 ~ 5条根 ,
且根粗壮 ,苗生长旺盛 。
3 试管苗的移栽与温室管理
当苗长出 4 ~ 5片叶 、根长到 4 cm左右时 ,即可
开盖于温室内炼苗。炼苗 2 d后即可将苗取出 ,用
清水洗净根部琼脂 ,种植于温室苗床内 ,苗床底部垫
以碎石 、碎砖块 ,每种基质 50棵苗。用低浓度的营
养液喷雾 ,温度保持在 10 ~ 25℃,移栽 30d后开始
上盆 ,同时调查幼苗生长状况 ,计算成活率。结果见
表 4。
表 4 不同栽培基质植株生长情况
栽培基质 苗数(株)
成活率
(%) 根系生长情况 植株生长情况
小石子+椰壳粉(1∶1) 50 44 每株生根 2 ~ 3条 ,根长 3~ 4cm,根较细弱 幼苗低矮 ,叶色淡绿 ,长势较弱
小石子+小树皮(1∶2) 50 72 每株生根 4 ~ 5条 ,根长 5~ 6cm,根较细 幼苗较健壮,叶色淡绿 ,长势较弱
椰壳粉+小树皮(1∶2) 50 58 每株生根 3 ~ 4条 ,根长 3~ 4cm,根色灰暗 幼苗细弱 ,植株低矮
水苔 50 80 每株生根 5 ~ 6条 ,根粗 ,长 6~ 8 cm,根毛多,健壮 幼苗健壮 ,叶色深绿
(下转第 84页)
—83—胡如善等:大叶风兰的组织培养
套袋对梨果实品质的影响
蔺 经 , 李晓刚 , 颜志梅 , 盛宝龙 , 常有宏
(江苏省农业科学院园艺研究所 ,江苏南京 210014)
  摘要:研究了不同类型果袋对华酥 、翠冠和丰水梨果实品质的影响 , 结果表明:套袋处理使梨果皮颜色变淡
而且均匀 ,果面也由暗变亮 , 果锈由多变少 , 果点由明显变为不明显 ,套袋明显改善了果实的外观;不同类型果袋
相比 ,套 “好果袋”牌果袋的梨果实外观品质最好;套袋对华酥梨的糖度 、酸度无影响 , 对翠冠和丰水梨的酸度没
有影响 ,但对糖度有一定影响 ,不同处理间虽有一定差异 , 但与对照相比差异不明显。
  关键词:套袋;梨;果实品质
  中图分类号:S661.201  文献标识码:A  文章编号:1002-1302(2005)05-0084-02
(上接第 83页)
上盆后 ,先置于光线较弱的温室(20 ~ 25 ℃)
中 , 3 ~ 4周后将光线提高到正常种植的栽培光度 。
春季和秋季遮光 50%,夏季遮光 70% ~ 80%,冬季
遮光 30%。冬季保持最低气温在 5 ℃以上。
大叶风兰喜欢较高的空气湿度 ,空气相对湿度
不宜低于 80%。因此要经常保持盆内的基质湿润 ,
在植株生育期 ,当水苔的表面水分不足时即喷水 ,
春 、秋季 1 ~ 2 d1次 ,夏季 1d1 ~ 2次 ,冬季根系的
吸水活动减缓 , 7 ~ 10 d1次 。在炎热的夏季应在植
株周围的地面 、台架 、道路和植株上喷水 ,以增加空
气湿度 ,否则会影响其生长 。
栽培大叶风兰除保持相对较大的湿度外 ,从春
季到秋季室内还要保持良好的通风 ,否则生长不良 ,
也易发生腐烂病。大叶风兰怕药害 ,建议尽量不要
施药 。
参考文献:
[ 1]曹孜义 ,刘国民.实用植物组织培养技术 [ M] .兰州:甘肃科学技
术出版社 , 1996.154~ 155.
[ 2]杨柏云 ,杨宁生.风兰的离体繁殖 [ J] .植物生理学通讯 , 1997,
33(2):125.
[ 3] PyatiAN, Murthy.Embryocultureandseedlingdevelopmentof
Aeridescrispumlindl.(Orchidaceae)[ J] .JournaloftheIndianBo-
tanicalSociety, 1999, 78:(1-2):147~ 149.
  果实套袋在国外已有 50多年的历史 ,最早多用
于防止食果害虫与病菌。近年来随着果实高品质化
生产的发展和市场对绿色果品需求的增加 ,果实套
袋技术作为生产安全 、高品质果品的重要措施之一 ,
被迅速应用于苹果 、梨 、葡萄 、桃以及荔枝等生产中 ,
对提高果实的外观品质和商品果率有较好的效
果 [ 1 ~ 3] 。本文研究了不同类型果袋对梨果实外观和
营养品质的影响 ,旨在探讨套袋技术对改善品质的
效果 ,为优质梨生产提供技术支撑。
1 材料与方法
1.1 材料
收稿日期:2005-03-09
基金项目:江苏省科技攻关项目(编号:BE2005307)。
作者简介:蔺 经(1970—),男 , 陕西吴旗人 , 硕士 ,助理研究员 , 主
要从事果树栽培研究。 Tel:(025)84390224;E-mail:lj@jaas.ac.
cn。
试验于 2003年在江苏省农业科学院(南京市)
梨园进行 ,供试梨品种为华酥 、翠冠和丰水 , 5年生 ,
小冠形树形 ,行株距 4m×3 m,管理水平一般 。
1.2 套袋处理
试验树按照距离法疏果 ,每花序只留单果 ,使试
验树的负载量基本一致 。定果后于 4月 30日进行
套袋 ,每处理随机套 50个以上果实 。不同类型果袋
处理为:(1)对照 ,不套袋;(2)套 “佳田”牌单层袋;
(3)套 “好果袋 ”牌双层袋;(4)套丰县产内红外灰
双层袋;(5)套丰县产内黑外灰双层袋;(6)套丰县
产内黑外黄双层袋 。
1.3 理化指标的检测
2003年 7月 21日 、7月 30日 、8月 21日分别采
收华酥 、翠冠和丰水的试验果 ,带回室内 ,除袋后 ,对
果实的果皮颜色 、果点 、果锈等外观指标进行鉴定 ,
并由 5名专家对各处理果实进行综合评分 (1 ~ 5
分)。同时 ,每处理随机抽取 30个果实测定可溶性
—84— 江苏农业科学 2005年第 5期