全 文 ：车前草的不同提取物抗菌活性比较研究
陈红云，申元英* (大理学院公共卫生学院，云南大理 671000)
摘要 ［目的］研究车前草不同提取物的抗菌活性，比较提取物的抗菌能力。［方法］将车前草以 8种不同溶剂进行室温提取，采用分光
光度比浊法测定不同提取物在 96孔板中对 3种细菌的抗菌活性。［结果］抗菌活性最好的是车前草无水乙醇提取物(P ＜0． 05)，乙醚提
取物和无水甲醇提取物次之，自来水和超纯水提取物没有抗菌活性。［结论］车前草的不同溶剂提取物均具有一定的抗菌活性，对金黄
色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制作用最为明显，对绿脓杆菌的抑制作用也较好。
关键词 车前草(Plantago asiatica L);抗菌活性;比较
中图分类号 S567 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2012)14 －08155 －02
Comparison of the Antibacterial Activity of Different Extracts from Plantago asiatica L．
CHEN Hong-yun et al (School of Public Health，Dali University，Dali，Yunnan 672100)
Abstract ［Objective］The aim was to study the antibacterial activity of different extracts from Plantago asiatica L．，and compare their antibac-
terial capacity． ［Method］The Plantago asiatica L． was extracted with eight different solvents under room temperature，and the antibacterial ac-
tivity of different extracts against three bacteria in the 96 － wells dish was determined by spectrophotometry． ［Result］The best antibacterial ac-
tivity was found in the anhydrous ethanol extracts (P ＜0． 05)，then followed by the ether and anhydrous methanol extracts，the extracts by run-
ning water and ultrapure water had no antibacterial activity． ［Conclusion］The extracts of Plantago asiatica L． with different solvents all show
certain antibacterial activity，especially against Staphyloccocus aureus and Escherich coli，the inhibitive effect against P． aeruginosa was also
good．
Key words Plantago asiatica L．;Antibacterial activity;Comparison
作者简介 陈红云(1981 －) ，男，云南大理人，实验师，硕士，从事分子
流行病学的研究，E-mail:chyyn@ 163． com。* 通讯作者，教
授，硕士，从事病原生物学及流行病学研究，E － mail:yuany-
ingshen@ 163． com。
鸣 谢 大理学院基础医学院病原微生物学实验室的王涛老师，以
及公共卫生学院领导的帮助和支持!
收稿日期 2012-02-14
车前草(Plantago asiatica L．)始载于《神农本草经》，被
列为上品，具有清热利尿、祛痰、凉血和解毒等功效，主治水
肿尿少、热淋涩痛、暑湿泻痢、痰热咳嗽、吐血衄血和痛肿疮
毒等［1 －3］。《本经》、《别录》、《本草经集注》、《本草图经》等
论著中，都记载了车前草在药用中的作用，具有清热利尿、渗
湿止泻、明目和祛痰的功能，主要治疗小便不利、淋浊带下、
水肿胀满、暑湿泻痢、目赤障翳和痰热咳喘等。研究表明，车
前草水浸剂具有抗病原微生物作用，在试管内对同心性毛癣
菌、羊毛状小芽孢癣菌和星状奴卡菌等有不同程度的抑制作
用［2］。笔者研究了 8 种车前草提取物对 3 种细菌的抗菌活
性，以期为应用车前草抗细菌的有效成分及新药研究打下
基础。
1 材料与方法
1． 1 材料
1． 1． 1 研究对象。车前草，于 2011 年 7 月采于云南省大理
市苍山脚下，海拔高度为 1 981 m的将军洞，样品经大理学院
药学院生药学教研室教师鉴定为车前草(Plantago asiatica
L．)［4］，洗净备用。
1． 1． 2 主要仪器。MLS-3780 高压蒸汽灭菌器，购自日本日
本三洋电机株式会社;隔水式恒温培养箱，购自上海一恒科
技有限公司;Bio-TEK ELX800UV 酶标仪，购自美国基因
公司。
1． 1． 3 主要试剂。牛肉膏(生化试剂) ，购自北京奥博星生
物技术有限责任公司;营养琼脂(NA) ，购自上海中科昆虫生
物技术开发有限公司;氢氧化钠(分析纯) ，购自天津市大茂
化学试剂厂;其余所用药品均为分析纯，市售。
1． 1． 4 供试菌种。金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、
大肠杆菌(Escherichia coli)、绿脓杆菌(Pseudomonas aerugino-
sa) ，由大理学院基础医学院病原微生物学实验室提供，均为
标准菌。
1． 2 方法
1． 2． 1 车前草提取物的制备。分别称取 8 份车前草粗粉各
200． 00 g，分别加入自来水、超纯水、无水乙醇、无水甲醇、乙
醚、石油醚、三氯甲烷和苯 200 ml，每次冷提取 24 h，平行 4
次，提取液浓缩至干，备用［5 ～8］。
1． 2． 2 供试菌悬液的制备。将各供试菌种斜面活化，细菌
在 37 ℃培养 24 h。取活化好的斜面菌落 3 ～ 5个，用无菌生
理盐水制成浓度 1 × 106 cfu /ml 的菌悬液，于 15 min 内接种
于混有提取物的液体培养基中进行抑菌测试［9 －10］。
1． 2． 3 抗菌活性的测定。采用液体培养法用 96 孔板经过
分光光度计比色比较各提取物的稀释液浓度［10］。稀释样浓
度由原生药浓度稀释(表 1)。用无菌液体培养基，作空白对
照，各孔中均为300 μl，于37 ℃隔水式恒温培养箱中培养，每
24 h测量 1次 OD值，进行抗菌测试［4］。
1． 2． 4 数据统计方法。用统计学软件 SPSS16． 0 版统计处
理。单样本 t检验，以 P =0． 05为比较水准，P ＜ 0． 05有统计
学差异。
2 结果与分析
2． 1 供试菌悬液的抗菌活性测定 由表 2 可知，所用 8 种
溶剂提取物对所有测试菌均具有不同程度的抑制作用。自
来水、超纯水提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌
最低抑菌浓度为 250． 000 0 mg /ml，没有抑菌作用，表明车前
草的超纯水及自来水提取物里面没有抑菌活性物质，可以作
为阳性对照;石油醚、三氯甲烷、苯提取物对金黄色葡萄球菌
安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2012，40(14):8155 － 8156 责任编辑 石金友 责任校对 卢瑶
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2012.14.107
的抑菌效果比较明显，在浓度为 0． 003 8 mg /ml 时就能抑制
金黄色葡萄球菌生长;乙醚提取物对大肠杆菌的抑制作用明
显;乙醇提取物也有很好的抗菌活性(P ＜0． 05)。
车前草无水乙醇提取物的抗菌活性最好，乙醚提取物次
之，其次为无水甲醇提取物，石油醚提取物对绿脓杆菌的抑
制作用相对最弱。自来水、超纯水提取物没有抗菌活性。
表 1 各提取物的稀释液浓度 mg /ml
稀释液 1 2 3 4 5 6 7 8 9
自来水提取物 250． 000 83． 333 27． 778 9． 259 3． 085 1． 029 0． 343 0． 114 0． 004
超纯水提取物 250． 000 83． 333 27． 778 9． 259 3． 085 1． 029 0． 343 0． 114 0． 004
无水乙醇提取物 250． 000 83． 333 27． 778 9． 259 3． 085 1． 029 0． 343 0． 114 0． 004
无水甲醇提取物 250． 000 83． 333 27． 778 9． 259 3． 085 1． 029 0． 343 0． 114 0． 004
乙醚提取物 250． 000 83． 333 27． 778 9． 259 3． 085 1． 029 0． 343 0． 114 0． 004
石油醚提取物 250． 000 83． 333 27． 778 9． 259 3． 085 1． 029 0． 343 0． 114 0． 004
三氯甲烷提取物 250． 000 83． 333 27． 778 9． 259 3． 085 1． 029 0． 343 0． 114 0． 004
苯提取物 250． 000 83． 333 27． 778 9． 259 3． 085 1． 029 0． 343 0． 114 0． 004
表 2 各种提取物最低抑菌浓度(MIC)测试结果 mg /ml
细菌 d e f g h i j k
金黄色葡萄球菌 250． 000 0▲ 250． 000 0▲ 0． 343 0 1． 028 8▼ 0． 343 0 0． 003 8◆ 0． 003 8◆ 0． 003 8◆
大肠杆菌 250． 000 0▲ 250． 000 0▲ 1． 028 8▼ 0． 343 0 0． 003 8◆ 0． 343 0 0． 114 3 0． 114 3
绿脓杆菌 250． 000 0▲ 250． 000 0▲ 27． 777 8 83． 333 3 83． 333 3 250． 000 0▲ 27． 777 8 27． 777 8
注:d、e、f、g、h、i、j、k分别是是自来水、超纯水、无水乙醇、甲醇、乙醚、石油醚、三氯甲烷和苯的提取物稀释液;▲为与阴性管比较有统计学差异(P ＜
0． 05) ，单样本 t检验;▼与◆为有统计学差异(P ＜0． 05)。
3 结论与讨论
试验结果表明，车前草的不同溶剂提取物均具有一定的
抗菌作用，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌抑制作用尤为明显，
对绿脓杆菌的抑制作用也较好。
研究表明，车前草不同的有机溶剂提取物对 3种菌株的
MIC值不同，并且对同一菌株的 MIC也不相同。说明不同有
机溶剂提取的车前草中提取物是由不同种的化学成分组成，
不同化学成分对不同菌株的抗菌机制也有所不同，其结果差
异和作用机制有待进一步研究。该试验为体外抗菌试验，至
于在体内能否有抗菌效果，还需要通过动物模型进行体内试
验研究。
参考文献
［1］罗晶，李景辉．车前草中有机酸的含量测定［J］．中国民族民间医药，
2010(11):34 －41．
［2］杨亚军，周秋贵，曾红，等．车前草化学成分及新生物活性研究进展
［J］．中成药，2011，33(10):1771 －1776．
［3］ZHANG L，HE L X，FENG X W，et al． study on technology of extracting ur-
solic Acid from plantain by cellulase Method［J］． Medicinal Plant，2010，1
(1):32 －34．
［4］丁迪红，霍春雁．云南植物志，第十六卷，种子植物［M］．北京:科学出版
社，2006:334 －340．
［5］陈红云，奖金元，王超芬，等．绵马贯众的抗菌活性研究［J］．大理学院
学报，2005，4(3):22 －23．
［6］孔涛，范杰平，胡小芳，等．响应面法优化超声辅助提取车前草中的熊
果酸［J］．食品科学，2011，32(6):80 －84．
［7］钱莺，傅旭春，白海波，等．车前草醇提液降大鼠血尿酸作用的研究
［J］．中国现代应用药学，2011，28(5):406 －408．
［8］申元英，杨占秋，刘建军，等．大黄提取液抗柯萨奇病毒 B3的实验研究
［J］． 北京中医药大学学报，1999，22(5):65 －69．
［9］张卓然．医学微生物实验学［M］． 2版．北京:科学出版社，2007．
［10］张显忠，郭爱军，李艳玲，等．中草药提取物的体外抑菌活性研究［J］．
中华医院感染学杂志，2006，16(5):
檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪
563 －565．
(上接第 8154页)
针对草果的威胁和劣势，提出几点建议。
2． 1 加大宣传力度，让商家了解更多信息 目前文山州对
草果近年来的概况没有进行宣传及介绍，而且麻栗坡县和西
畴县还未有相关的网页宣传和介绍，这对商家了解文山州草
果的实际产业情况很不利。为了让商家了解情况，州、县及
其乡镇的相关单位应该加强宣传方面的工作，及时更新网站
的信息，加大宣传力度。
2． 2 加强草果品牌的包装，让草果直接走进市场 目前文
山州的云盛草果产业已推出相关的草果品牌，是值得肯定
的，但也应该加强其他草果产品的包装，同时及时进驻市场，
让消费者对草果产品有挑选的机会。
2． 3 加大种植面积，保证市场供应 目前草果的主产区在
云南、广西、贵州及东南亚等，每年草果产量都不能满足市场
的需要。因此应加大种植面积，增加产量，保证市场供应。
2． 4 加大草果的加工利用，让草果利用多元化 目前草果
主要是满足饮食上的需要，但由于草果还具有挥发油及特殊
的药用成分，所以应该加大这方面的研究和开发，让草果的
利用多元化。
2． 5 政府制定相关优惠政策，保障农户种植积极性 文山
州的各级相关单位应该大力扶持草果产业，这不仅能够带动
边、贫、少等地区的农民收入，同时能够产生相关的效益。所
以应该多出台相关的政策鼓励农户种植的积极性，让农户觉
得草果产业是个黄金产业，种植草果能够致富，从而改变以
前的靠天吃饭的种植方式，让农户能够花更多的时间和精力
去种植草果。
参考文献
［1］徐国钧，王强，等．常用中药材品种整理和研究(第三册)［M］．福州:福
建科学技术出版社，1997．
［2］郑昆，杨俊敏，肖正昆．草果无公害烘干设备及工艺的效益分析［J］．农
产品加工学刊，2006(3):78 －79．
［3］明建鸿，胡耀华．草果产销动态分心［J］．中药材，2004，27(6):499 －
451．
［4］2000 －2010年草果10年价格历史记录、走势、分析［EB/O］．(2010 －12
－11)． http:/ /www． caoguowang． com/cn /news_view_38_105． html．
6518 安徽农业科学 2012 年