全 文 ：Mycosystema
菌 物 学 报 15 November 2008, 27(6): 915-921

jwxt@im.ac.cn
ISSN1672-6472 CN11-5180Q
©2008 Institute of Microbiology, CAS, all rights reserved.






亚侧耳菌丝生物学特性研究
邹莉* 王义 王轶 高博
东北林业大学林学院 哈尔滨 150040


摘 要：亚侧耳是中国东北地区著名野生食用菌，味道鲜美，营养丰富，为了开发利用这一自然资源，
采用组织分离法，分离出野生亚侧耳菌丝并对其生物学特性进行了研究。结果表明：在 5 种供试碳源中，
亚侧耳菌丝以利用葡萄糖最好；在 6 种供试氮源中，以利用酵母浸粉和蛋白胨最佳；亚侧耳菌丝能在碳
氮比 10/1-60/1 范围内生长，但以 20/1-40/1 为宜；最适生长温度为 23℃-25℃；最适 pH 范围为 5.4-5.8。
关键词：组织分离，培养条件，碳源，氮源，最适温度，最适 pH 值


Biological characteristics of Hohenbuehelia serotina
mycelia
ZOU Li WANG Yi WANG Yi GAO Bo
School of Forestry, Northeast Forestry University, Harbin 150040, China
Abstract: Hohenbuehelia serotina is one of the well-known wild edible fungi in northeast of China which is
delicious and rich in nutrition. The mycelia were isolated from the wild and the biological characteristics were
studied. The results showed that the optimal carbon source was glucose and the optimal nitrogen source was
yeast extract powder and peptone. The range of C/N value for mycelial growth was 10/1-60/1 and 20/1-40/1 was
most suitable. The optimal temperature and pH were found to be 23-25 and ℃ 5.4-5.8 respectively.
Key words: isolation, culture condition, carbon source, nitrogen source, optimal temperature, optimal pH

亚侧耳 Hohenbuehelia serotina（Pers.: Fr.）Sing.又名晚生亚侧耳，俗名元蘑，隶属伞

基金项目：黑龙江省科技攻关项目资助（No. GB06B04-3-1）；哈尔滨市科技攻关项目资助（No. 2005AA3CN184）
*Corresponding author. E-mail: we0470@163.com
收稿日期：2008-01-02，接受日期：2008-01-28
DOI:10.13346/j.mycosystema.2008.06.017
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菌目，侧耳科，亚侧耳属 Hohenbuehelia，是我国东北地区著名野生食用菌。现代药理研究
表明，亚侧耳多糖蛋白（Ⅰ）对小鼠体内 S-180，肝癌 H22 均有显著的抑制作用（卯晓岚
2000）。亚侧耳以细嫩清香著名，早已见于《奉天通志》，在民间有很长的食用历史。此外，
亚侧耳还是一种地方性草药，有祛风活络、清热燥湿的功效，民间用于治疗癫痫、肝硬化
腹水、风湿肌肉痛和目赤痛等症。亚侧耳有很高的开发价值，由于长期大量采集，留存量
逐年减少，野生资源难以满足需求。食药用菌母种培养基的研究在我国已有一些报道（杨
民和等 2000；周选围等 2000；宫致远等 2002；田景华等 2004；邓百万和陈文强 2004；
刘春静等 2005；汤洪敏等 2007）。但关于亚侧耳母种培养基的研究很少，由于碳、氮营
养及碳氮比和生长条件是影响食用菌生长发育的重要因素，是食用菌能否获得高产的关
键，为此，本文研究了葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、淀粉五种碳源，蛋白胨、酵母浸粉、
硝酸铵、硫酸铵、硝酸钾、尿素六种氮源和不同碳氮比、温度、pH 对菌丝生长的影响，
从中选出菌丝生长的最适培养基配方和生长条件，为亚侧耳高效生产栽培提供科学依据。
1 材料与方法
1.1 供试菌株
亚侧耳菌株采自黑龙江省尚志市亚布力山区，记录下子实体形态特点，并对子实体做
种类鉴定，通过柄盖组织分离法分离培养，将纯化后得到的菌丝进行生物学特性研究。
1.2 培养基
1.2.1 基础培养基：葡萄糖 20g、蛋白胨 2g、磷酸二氢钾 0.5g、硫酸镁 0.5g、氯化钙 0.5g、
维生素 B1 10mg、琼脂 18g、蒸馏水 1000mL。
1.2.2 加富培养基：葡萄糖 20g、蛋白栋 2g、马铃薯 200g、硫酸镁 0.5g、磷酸氢二钾 1g、
维生素 B1 10mg 、琼脂 18g、蒸馏水 1000mL。
1.3 试验方法
1.3.1 同步菌丝的制备：取在 PDA 培养基上生长的菌落，用内径 5mm 打孔器取菌落边缘菌
饼，接入相应培养基上。待菌丝萌发后，用十字交叉法每天测一次菌丝生长量，并记录各
配方培养基上的菌丝生长情况。
1.3.2 碳源试验：以供试基础培养基中 20g 葡萄糖的含碳量为标准，分别用和 20g 葡萄糖
相等含碳量的蔗糖、麦芽糖、乳糖、淀粉四种碳源，代替供试培养基中葡萄糖，每处理 5
次重复，pH6.0，25℃恒温培养箱中避光培养，观测不同碳源对菌丝生长的影响。
1.3.3 氮源试验：以供试基础培养基中 2g 蛋白胨的含氮量为标准，分别用和 2g 蛋白胨相
等含氮量的酵母浸粉、硝酸铵、硫酸铵、硝酸钾、尿素五种氮源，代替培养基中的蛋白胨，
pH6.0，25℃恒温培养箱中避光培养，每处理 5 次重复，观测不同氮源对菌丝生长的影响。
1.3.4 碳氮比试验：在供试基础培养基中，添加不同重量蛋白胨，配成培养基碳氮比为 10/1、
20/1、30/1、40/1、50/1、60/1，pH6.0，25℃恒温培养箱中避光培养，每处理 5 次重复，观
测不同碳氮比对菌丝生长的影响。
1.3.5 温度筛选试验：用上述试验最适碳氮源更换加富培养基中的碳源、氮源，调整碳氮
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比为上述试验最适碳氮比，配成马铃薯加富（PDY）培养基（培养基中含碳量与 20g 葡萄
含碳量相等，马铃薯中含碳氮量忽略不计），分别在 15℃、20℃、23℃、25℃、27℃、30℃
下恒温培养，pH6.0，每处理 5 次重复，观测不同温度对菌丝生长的影响。
1.3.6 pH 筛选试验：以 PDY 培养基，分别调 pH 值为 4.5、5.0、5.4、5.8、6.2、7.0、8.0，
在前面试验最适温度下，恒温培养箱中避光培养，每处理 5 次重复，观测不同 pH 对菌丝
生长的影响。
2 结果与分析
2.1 亚侧耳子实体及菌丝形态观察
亚侧耳子实体群生，半球形至肾形，黄绿色，有粘液和短绒毛，表皮上有胶质层，边
缘内卷，菌肉白色，菌柄短或无柄，侧生，孢子印白色。分离的菌丝在接种到 PDA 平板
培养基 4d 后开始萌发，萌发 7d 后生长 1.2cm。菌落呈絮状，菌丝洁白，但稀疏。如图 1
所示，在光学显微镜下菌丝无色透明，多分支，锁状联合明显。


图 1 亚侧耳菌丝锁状联合（600×）
Fig. 1 Clamp connections of Hohenbuehelia serotina mycelia (600×).

2.2 碳源对菌丝生长的影响
碳源的主要作用是构成细胞物质和提供生长发育所需的能量。由表 1 看出：不同碳源
的培养基对亚侧耳菌丝生长有明显影响。菌丝生长由快到慢的碳源依次为蔗糖、麦芽糖、
葡萄糖、淀粉、乳糖。在 5%和 1%显著水平，菌丝在以蔗糖和麦芽糖为碳源的培养基上生
长速度没有显著差异，但与其它 3 种碳源培养基有极显著差异。葡萄糖与淀粉培养基之间
没有显著差异，菌丝浓密洁白，但它们都与乳糖培养基有显著差异。虽然在蔗糖和麦芽糖
培养基上菌丝生长速度快，但菌丝稀疏、微弱。在乳糖培养基上，菌丝不仅生长缓慢而且
干燥。因此，综合菌丝生长速度和菌丝长势，应优先选用葡萄糖和淀粉作为碳源。本试验
PDY 培养基选取的碳源为葡萄糖。
2.3 氮源对菌丝生长的影响
氮源是食用菌合成核酸、蛋白质和酶类的主要原料，对生长发育有重要作用。由表 2
看出：亚侧耳菌丝在不同的氮源培养基上生长具有显著差异。菌丝生长速度以酵母粉和蛋
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白胨为氮源最快，两者之间无显著差异；其次是硫酸铵、硝酸铵和尿素；最慢的是硝酸钾。
从菌丝长势看，以酵母粉和蛋白胨为氮源的菌丝浓密洁白，长势最佳；其次是硫酸铵和硝
酸铵；最差的是尿素和硝酸钾，在以尿素为氮源的培养基上菌丝干燥而且发黄，而以硝酸

表 1 碳源对亚侧耳菌丝体生长的影响
Table 1 Effect of carbon sources on mycelial growth of Hohenbuehelia serotina
差异显著性
Significance of difference 碳源
C- sources
日生长量（mm/d）
Growth rate (mm/d)
0.05 0.01
菌丝长势
Mycelial growth vigor
蔗糖
Sucrose
3.589 a A +
麦芽糖
Maltose
3.556 a A +
葡萄糖
Glucose
2.311 b B +++
淀粉
Starch
2.289 b B +++
乳糖
Lactose
1.211 c C +
注：表中数字为 5 次重复的平均数. 表中不同英文字母，大写表示 1%显著水平，小写表示 5%显著水平；+、++、+++ 分别表
示菌丝长势稀疏、一般、健壮，下同.
Note: The numbers in the table are the mean of 5 time observation; values in the same column with different letter are
significantly different (level of significance is 5% for letters in lowercase, and 1% for those in uppercase); +, weakly; ++,
ordinarily; +++, vigorous. similarly hereinafter.

表 2 氮源对亚侧耳菌丝生长的影响
Table 2 Effect of nitrogen sources on mycelial growth of Hohenbuehelia serotina
差异显著性
Significance of difference 氮源
N-sources
日生长量（mm/d）
Growth rate（mm/d）
0.05 0.01
菌丝长势
Mycelial growth vigor
酵母浸粉
Yeast extract powder
2.367 a A +++
蛋白胨
Peptone
2.217 a A +++
硫酸铵
(NH4)2SO4
1.528 b B ++
硝酸铵
NH4NO3
1.889 b BC ++
尿素
Urea
1.130 bc BC +
硝酸钾
KNO3
0.728 c C +
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钾为氮源的菌丝稀疏，生长非常微弱。综合菌丝生长速度和生长势，在以上六种氮素营养
中，最好选用酵母浸粉和蛋白胨为氮源。本试验 PDY 培养基选取的氮源为酵母浸粉。
2.4 碳氮比对菌丝生长的影响
由表 3 看出：不同碳氮比对菌丝生长有明显影响。亚侧耳菌丝在碳氮比 10/1-60/1 范围
均可生长，但以 20/1-40/1 生长最为适宜，菌丝生长快，浓密洁白，在此之间菌丝生长没有
显著差异。碳氮比在 10/1 菌丝生长变缓，而且发黄；而碳氮比在 50/1-60/1 菌丝生长慢，
而且稀疏。因此菌丝培养最适碳氮比为 20/1-40/1。本实验 PDY 培养基选取的碳氮比为 30/1。

表 3 碳氮比对亚侧耳菌丝生长的影响
Table 3 Effect of carbon-nitrogen ratio on mycelial growth of Hohenbuehelia serotina
差异显著性
Significance of difference 碳氮比
C/N ratio
日生长量（mm/d）
Growth rate（mm/d）
0.05 0.01
菌丝长势
Mycelial growth vigor
30/1 2.400 a A +++
20/1 2.389 a A +++
40/1 2.311 a A +++
10/1 1.900 b B ++
50/1 1.783 bc B ++
60/1 1.583 c B ++

2.5 温度对菌丝生长的影响
温度是影响食用菌生长发育的重要因子，不同食用菌有不同的极限温度和适宜温度。
由图 2 看出：温度对亚侧耳菌丝生长具有明显的影响。在 23-27℃菌丝生长迅速，但温度
为 27℃时菌丝颜色微黄，而温度在 23-25℃菌丝致密洁白，且菌丝生长速度快。当温度达
到 30℃时菌丝完全停止生长。在低于 23℃时，虽然菌丝仍然稠密洁白，但生长速度减慢。
因此最适培养温度为 23-25℃。本实验选取的最适培养温度为 25℃。
2.6 pH 值对菌丝生长的影响
培养基的 pH 是影响细胞透性、酶活性及代谢活动的重要因素。由图 3 可以看出，亚
侧耳菌丝随 pH 的升高，生长速度逐渐变慢。pH 在 4.5-5.0 菌丝生长迅速，但菌丝稀疏，
微弱，菌丝发黄。pH 在 5.8-8.0，菌丝浓密，洁白，但 pH 高于 5.8 时菌丝生长速度慢，因
此，综合菌丝长势和菌丝状态以选取 5.4-5.8 最佳。
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3 结论
本文通过对亚侧耳菌丝生长特性的研究结果表明：在葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、
淀粉 5 种供试碳源中，亚侧耳菌丝生长的最适碳源为葡萄糖，其次为淀粉；在蛋白胨、酵
母浸粉、硝酸铵、硫酸铵、硝酸钾、尿素 6 种供试氮源中，菌丝生长的最适氮源为酵母浸
粉和蛋白胨；在基础培养基供试的 6 种碳氮比中，菌丝生长最适碳氮比为 20/1-40/1，在此
范围，菌丝生长快，菌丝洁白浓密；菌丝在 15-30℃培养温度中，最适范围为 23-25℃，在
温度达到 30℃时停止生长；pH 在 4.5-8.0 范围内菌丝均可生长，最适 pH 范围为 5.4-5.8。
此研究结果可为亚侧耳生产栽培提供更科学的理论依据。

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图 2 温度对亚侧耳菌丝生长的影响
Fig. 2 Effect of temperature on mycelial growth of
Hohenbuehelia serotina.
图 3 pH值对亚侧耳菌丝生长的影响
Fig. 3 Effect of pH on mycelial growth of
Hohenbuehelia serotina.
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