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不同采收时期内野老鹳草中活性成分的动态变化研究
李丰文1，金 欣2，姚 岚2，董彩霞2，巩玉静2，刘丽芳2*
(中国药科大学 1. 中药学院;2. 中药分析教研室，江苏 南京 211198)
摘要 目的:测定不同采收时期野老鹳草中活性成分没食子酸及鞣花酸的含量，为最佳采收期的确定提供依
据。方法:采用 HPLC对不同采收期的野老鹳草中没食子酸及鞣花酸的含量进行测定。色谱条件:色谱柱为 Dia-
monsil C18色谱柱(150 mm ×4. 6 mm，5 μm) ;流动相为乙腈-0. 1%磷酸溶液梯度洗脱;流速为 1. 0 mL /min;检测波长
为 274 nm;柱温为 25 ℃。结果:没食子酸及鞣花酸的线性范围分别是:0. 075 ～ 5. 00 μg(r = 0. 9995)、0. 05 ～ 2. 00
μg(r = 0. 9995) ，平均回收率分别是 99. 88%(RSD = 1. 19%)、99. 08%(RSD = 2. 81%)。结论:野老鹳草中没食子
酸及鞣花酸的含量均在开花期开始上升，于始果期达到最高。
关键词 HPLC;野老鹳草;没食子酸;鞣花酸;采收期
中图分类号:R284. 1 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2010)10-1545-04
Study on the Dynamic Variation of Active Components in Geranium
carolinianum from Different Collection Time
LI Feng-wen1，JIN Xin2，YAO Lan2，DONG Cai-xia2，GONG Yu-jing2，LIU Li-fang2
(China Pharmaceutical University，1. School of Traditional Chinese pharmacy;2. The Department of Analysis of Chinese Medicines，
Nanjing 211198，China)
Abstract Objective:To determine the contents of the active components，gallic acid and ellagic acid in Geranium carolinianum
from different collection time and to define the best collection time for this herb. Methods:The contents of gallic acid and ellagic acid in
each samples of Geranium carolinianum were determined by HPLC. The HPLC method was performed on a Diamonsil C18 column(150
mm ×4. 6 mm，5 μm)with acetonitrile-0. 1%H3PO4 as mobile phase. The flow rate was 1. 0 mL /min，the detection wavelength was 274
nm and the column temperature was 25 ℃ . Results:The calibration curve of gallic acid and ellagic acid were linear in the range of
0. 075 ～ 5. 00 μg(r = 0. 9995)and 0. 05 ～ 2. 00 μg(r = 0. 9995) ，respectively. The average recovery of gallic acid and ellagic acid were
99. 88%(RSD = 1. 19%)and 99. 08%(RSD = 2. 81%) ，respectively. Conclusion:The content of gallic acid and ellagic acid in Gera-
nium carolinianum both began to increase in flowering stage and increased to the maximum value in immature-fruit stage.
Key words HPLC;Geranium carolinianum L.;Gallic acid;Ellagic acid;Collection time
收稿日期:2010-03-09
基金项目:国家药典委员会 2010 版一部标准研究(YS-229、YS-230)
作者简介:李丰文(1949-) ，男，副教授，主要从事中药制剂和成分分析研究;E-mail:lifengwen49@ hotmail． com。
* 通讯作者:刘丽芳，Tel:025-86185446，E-mail:liulifang69@ 126． com。
老鹳草是我国常用中药，具有祛风湿、通经络、
止泻痢之功效。2005 年版中国药典中收载正品老
鹳草为牻牛儿苗科植物牻牛儿苗 Erodium stephania-
num Willd. 、老鹳草 Geranium wilfordii Maxim. 或野
老鹳草 Geranium carolinianum L. 的干燥地上部分。
多为野生，夏、秋二季果实近成熟时采割〔1〕。老鹳
草的主要成分为鞣质、黄酮类、有机酸及挥发油
等〔2〕，其具有广谱抗菌、抗病毒及抗氧化等多种药
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DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2010.10.027
理作用〔3，4〕。在不同时间采收的老鹳草生药中各成
分含量不同，Okuda T 等〔5〕曾对不同发育期童氏老
鹳草中老鹳草素的含量进行了测定比较，李克明
等〔6〕曾用 HPLC对不同采收月份牻牛儿苗中柯里拉
京的含量进行了测定比较，而对于作为我国民间习
用药材应用较多的野老鹳草，则未见相关文献报道。
本文以没食子酸和鞣花酸为指标，用 HPLC 对野老
鹳草在不同采收期内的含量变化进行测定，对确定
其最佳采收期有一定的指导意义。
1 仪器与试药
Agilent 1100 HPLC Series 液相色谱仪;Diamon-
sil C18色谱柱，(150 mm ×4. 6 mm，5 μm) (Dikma，美
国) ;KH3200E型超声波清洗器(昆山禾创超声仪器
有限公司) ;没食子酸对照品(中国药品与生物制
品检定所，批号:110831-200302) ;鞣花酸对照品
(自制，纯度大于 98%)。老鹳草(笔者采于南京
江宁)由中国药科大学中药学院刘丽芳教授鉴定
为野老鹳草 Geranium carolinianum L. ，标本存放于
中国药科大学中药分析实验室;乙腈为色谱纯(Dik-
ma，美国) ;水为乐百氏纯净水;其他试剂均为分析
纯。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 色谱柱采用 Diamonsil C18色谱柱，
(150 mm × 4. 6 mm，5 μm)。流动相为乙腈-0. 1%
磷酸溶液，洗脱程序见表 1。流速 1. 0 mL /min，检测
波长 274 nm，柱温 25 ℃。
表 1 洗脱程序
梯度时间 /min
流动相
乙腈 /% 0. 1%磷酸 /%
0. 00 2 98
15. 00 10 90
25. 00 15 85
35. 00 30 70
45. 00 50 50
2. 2 供试品溶液的制备 取本品细粉约 1 g(过 4
号筛) ，精密称定，置锥形瓶中，加盐酸-50% 甲醇
(1∶ 9)50 mL，加热回流 0. 5 h，滤过。残渣同法再提
取 1 次，滤过，合并滤液，减压回收溶剂，残渣用
50%甲醇溶解并定容至 50 mL量瓶中，摇匀，精密移
取 10 mL 蒸干，残渣用 50%甲醇溶解并定容至 25
mL量瓶中，摇匀，用微孔滤膜(0. 45 μm)滤过，取续
滤液，即得。
2. 3 对照品溶液的制备 精密称取没食子酸对照
品适量，加 50%甲醇制成每 1 mL 中含 50 μg 的溶
液;精密称取鞣花酸对照品适量，加二甲基亚砜制成
每 1 mL中含 5 μg的溶液，即得。
2. 4 标准曲线的绘制
2. 4. 1 没食子酸标准曲线的绘制:精密吸取 0. 25
mg /mL的没食子酸对照品溶液 0. 15、1. 0、3. 0、5. 0、
7. 0 mL加 50%甲醇稀释定容至 10 mL，摇匀，分别
进样 20 μL，按“2. 1”项下色谱条件测定。以进样量
(μg)为横坐标，测得的峰面积积分值为纵坐标绘制
标准曲线，回归方程:Y1 = 2752. 5X1 + 54. 156，r1 =
0. 9995。结果表明在 0. 075 μg ～ 5. 00 μg之间有良
好的线性关系。
2. 4. 2 鞣花酸标准曲线的绘制:精密吸取 0. 10
mg /mL的鞣花酸对照品溶液 0. 25、1. 5、2. 5、3. 5、
5. 0 mL加二甲基亚砜稀释定容至 10 mL，摇匀，分别
进样 20 μL，按“2. 1”项下色谱条件测定。以进样量
(μg)为横坐标，测得的峰面积积分值为纵坐标绘制
标准曲线，回归方程:Y2 = 2998. 7X2 + 44. 347，r2 =
0. 9995。结果表明在 0. 05 ～ 2. 00 μg之间有良好的
线性关系。
2. 5 稳定性试验 精密吸取(090508)供试品溶
液，分别于 0、3、6、9、12 h 测定，没食子酸的 RSD =
1. 71%，鞣花酸的 RSD =3. 36%，表明供试品溶液在
12 h内稳定。
2. 6 精密度试验 精密吸取等体积的对照品溶液
注入液相色谱仪，重复 6 次，没食子酸的 RSD =
0. 34%，鞣花酸的 RSD = 2. 23%，表明仪器精密度良
好。
2. 7 重复性试验 取同一样品(090430)5 份，按
“2. 2”项方法制备，在“2. 1”项条件下测定，没食子
酸含量分别为 1. 39%、1. 37%、1. 36%、1. 36%、
1. 38%，平均值为 1. 37%，RSD = 0. 83%;鞣花酸含
量分别为 0. 65%、0. 67%、0. 70%、0. 66%、0. 66%，
平均值为 0. 67%，RSD =2. 88%，表明方法的重复性
良好。
2. 8 检测限及定量限 分别将没食子酸和鞣花酸
对照品溶液逐渐稀释后进样，取 S /N = 3 时的浓度
为检测限，经测定，没食子酸检测限为 0. 075 μg /
mL，鞣花酸检测限为 0. 25 μg /mL;取 S /N = 10 时的
浓度为定量限，经测定，没食子酸定量限为 0. 25
μg /mL，鞣花酸定量限为 0. 70 μg /mL。
2. 9 加样回收率试验 精密称取已知含量的样品
(090430)共 5 份，分别精确加入一定量的没食子酸
对照品和鞣花酸对照品，混匀后，按“2. 8”项下方法
测定含量，计算平均回收率，结果见表 2。结果表
明，本法较好。
·6451· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 33 卷第 10 期 2010 年 10 月
表 2 回收率测定
对照品 峰面积 样品称样量
/
g
样品中含量 /
mg
加入量 /
mg
实测量 /
mg
回收率 /
%
平均回收率 /
%
RSD /
%
没食子酸 6390. 6 0. 5186 7. 11 7. 20 14. 33 100. 27 99. 88 1. 19
6417. 8 0. 5197 7. 12 7. 20 14. 39 100. 97
6360. 6 0. 5253 7. 20 7. 20 14. 27 98. 19
6394. 7 0. 5168 7. 08 7. 20 14. 34 100. 83
6274. 9 0. 5056 6. 93 7. 20 14. 07 99. 16
鞣花酸 3278. 5 0. 5186 3. 48 3. 50 6. 85 96. 28 99. 08 2. 81
3335. 2 0. 5197 3. 48 3. 50 6. 98 100. 00
3404. 4 0. 5253 3. 51 3. 50 7. 13 103. 43
3297. 4 0. 5168 3. 46 3. 50 6. 90 98. 28
3250. 1 0. 5056 3. 38 3. 50 6. 79 97. 43
2. 10 样品的含量测定 取 2009 年 3 月下旬至 6
月上旬于南京江宁采集的共 12 批野老鹳草药材，经
干燥、粉碎后，按“2. 2”项下方法处理。精密吸取供
试品溶液，进样 20 μL，用外标法测定含量，结果见
表 3，不同采收期内没食子酸和鞣花酸含量变化趋
势见图 1。
表 3 样品测定结果
批 号 生长周期 采集时间
没食子
酸含量
/%
鞣花酸
含量
/%
1
2
幼苗期
(三月下旬)
090320 0. 50 0. 05
090329 0. 48 0. 06
3
4
5
生长期
(四月上旬至中旬)
090404 0. 76 0. 05
090412 1. 20 0. 09
090418 1. 30 0. 10
6
7
开花期
(四月中旬至下旬)
090424 1. 39 0. 28
090430 1. 37 0. 67
8
9
始果期
(五月上旬至中旬)
090508 1. 87 0. 74
090516 2. 26 0. 15
10
11
12
果实成熟期
(五月中旬至六月上旬)
090523 1. 47 0. 14
090529 1. 89 0. 13
090608 1. 69 0. 14
图 1 没食子酸、鞣花酸含量动态变化图
3 讨论
老鹳草素为老鹳草中的一种鞣质类化合物，可
水解为其他鞣质和有机酸，其中没食子酸和鞣花酸
为其主要分解产物。没食子酸对结肠运动呈现显著
的抑制作用，因此老鹳草总鞣质有较好的治疗腹泻
作用;鞣花酸具有抗氧化功能，抗癌、抗突变性能，对
人体免疫缺陷病毒有抑制作用，二者均为老鹳草中
有效活性成分〔7-9〕。本文以它们为指标对老鹳草药
材的主流品种野老鹳草中活性成分的动态变化进行
了研究，对确定野老鹳草的最佳采收期具有一定指
导意义。由结果可以看出，野老鹳草中没食子酸和
鞣花酸含量在幼苗期均较低且变化不大，生长期及
开花期含量逐渐上升，处于积累过程，在始果期含量
上升较快至最高，果实成熟期后呈降低趋势。另外，
没食子酸含量在总体趋势中也包含波动，原因可能
是因为没食子酸是由多种多酚类化合物的水解产
物，而这些多酚类化合物在植物中不稳定，因而，在
外界环境等因素的影响下，在不同的生长时期内的
这类化合物的总量有所波动，但总体上还是具有一
定的规律。因此，根据两者的含量变化规律，可确定
野老鹳草从花期到果实近成熟时期为最佳采收期，
此时有效成分总量最高，这个研究结果验证了中国
药典规定老鹳草须在果实近成熟时采收〔1〕的规定
是合理的。
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不同采收期亳白芍中芍药苷与白芍总苷的含量变化
金传山1，蔡一杰2，吴德玲1
(1. 安徽中医学院药学院现代中药安徽省重点实验室，安徽 合肥 230031;2. 安徽省兽药饲料监察所，安徽
合肥 230022)
摘要 目的:研究亳白芍的最佳采收期。方法:采用高效液相色谱法测定不同采收期亳白芍药材中芍药苷与白
芍总苷的含量，进行比较。结果:4 年生亳白芍在 9 月 ～ 10 月芍药苷与白芍总苷含量最高。结论:亳白芍生长 4 年，
在 9 月 ～ 10 月为最佳采收期。
关键词 亳白芍;芍药苷;白芍总苷;最佳采收期
中图分类号:R284. 1 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2010)10-1548-03
收稿日期:2010-03-09
基金项目:安徽省教育厅重点项目资助(Kj2008A051) ;美国许氏基金会项目(XSZY2007-CN-1)
作者简介:金传山(1963-) ，男，副教授，主要从事中药炮制学与中药材加工学教学与科研;Tel:0551-5169044，E-mail:jinchsh63@ sina． com。
白芍为毛茛科植物芍药 Paeonia lactiflora Pall.
的干燥根。具有平肝止痛、养血调经、敛阴止汗等功
效，主产地有安徽亳州、浙江、四川、山东等地。其
中，亳白芍为安徽四大名药之一，以其产量大、色
白、粉性足、质量好而享誉全国。2005 年版中国
药典仅以芍药苷含量作为其质量控制指标〔1〕;然
而，现代药理研究认为白芍总苷为白芍药材的主
要活性成分，具有镇静、镇痛、抗炎、保肝等活
性〔2〕。文献研究未见以白芍总苷为控制标准，所
以本文以芍药苷和白芍总苷为考察指标，对不同
年份，不同月份的亳白芍进行测定，研究探讨亳
白芍采收时节与药材产量及主要有效成分的变
化规律，以期为确定亳白芍最佳采收期提供理论
依据。
1 材料与仪器
1. 1 材料 白芍药材采集于亳州市十八里镇羊庙
行政村汤庄，样品经安徽中医学院中药与中药资源
教研室周建理教授鉴定为毛茛科植物芍药 Paeonia
lactiflora Pall. 的根。白芍药材按月按时定点采集
不同年份样品各一份，每份样本为采集地 10 株植物
的根混合。每批样品采集后洗净，切片，60 ℃烘干，
密封袋保存备用。
1. 2 仪器与试药 日本岛津公司 LC-20AT高效液
相色谱仪(SPD-20A 紫外检测器) ，N2010 色谱工作
站(浙江大学) ，Autoscience 公司 AT-130 型色谱柱
恒温箱。德国 Sartorius公司 CP225D 型十万分之一
电子天平等。甲醇(上海振兴化工一厂，色谱纯) ，
水为重蒸馏水。芍药苷对照品(中国药品生物制品
检定所，批号 110736 -200629) ;苯甲酸对照品(上海
来泽精细化学厂，批号:20071013)。
2 方法与结果
2. 1 芍药苷含量测定
2. 1. 1 色谱条件:色谱柱:SHIMADZU(VP-ODS
柱，250 mm × 4. 6 mm，5 μm) ;流动相:水-甲醇(70
∶ 30) ;柱温:30 ℃;流速:1. 0 mL /min;检测波长:230
nm;进样量:20 μL。
2. 1. 2 对照品制备:精密称取在五氧化二磷减
压干燥器中干燥 36 h 芍药苷对照品 3. 05 mg 至
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