全 文 ：2011 .10
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大叶桉叶提取物
对农业有害生物的生物活性研究
□云南农业大学 650201 刘鑫龙 许玉贵
摘 要：作物病虫害生物防治是发展生态农业、保障农产品质量安全的重要途径。大叶桉是云南荒山
造林的主要树种之一，资源较为丰富。本研究以家蝇、水稻纹枯病菌和稻瘟病菌为供试对象，试验结果
说明大叶桉叶提取物对家蝇具有一定的生物活性，对植物病原菌具有较强的生物活性，为大叶桉提取物
在农业生物防治中的应用研究提供了一定的科学依据。
关键词：大叶桉；提取物；生物活性
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桉树是桃金娘科（Myrtaceae）桉树属
（Eucalyptus）植物，具有生长速度快、轮
伐期短、适应性强、用途广等特点。具有
非常强烈的化感作用是桉树的一大特
点。桉树自然挥发物显著抑制萝卜和马
占相思的幼苗生长。桉树中提取的桉叶
油及其他成分对 4种细菌及 7种真菌具
有明显的抑制作用。
本研究以化感物质含量丰富的桉树
叶为研究对象，以敏感生物为测试对象，
研究我省主要栽培品种大叶桉树叶对农
业害虫、病原菌及杂草的生物活性，系统
评价大叶桉对农业有害生物的生物活
性，为利用大叶桉控制农业有害生物奠
定理论基础，为大叶桉的综合利用开辟
新的途径。
1材料与方法
1.1供试材料
大叶桉（Eucalyptus robusta）；家蝇
（Musca domestica）； 水 稻 纹 枯 病 菌
（Rhizoctonia solani）；水稻稻瘟病 菌
（Pyricularia grisea）。
以上材料取自云南农业大学校内实
验基地。
1.2实验过程
1.2.1大叶桉叶提取物制备。将采集的大
叶桉叶阴干，置于 50℃电热恒温鼓风干
燥箱中烘干，用粉碎机粉碎成粉状，用索
氏提取法进行提取。用旋转蒸发仪在
45±1℃下把提取液浓缩至膏状，冷却至
室温，获得提取物，在 4℃避光环境下保
存。
1.2.2 大叶桉叶提取物对家蝇的生物活
性测定。家蝇的饲养：将产卵饲料加入罐
头瓶中，待成虫产卵。一般 2~3d即可孵
化为幼虫，5~8d后即可化蛹，3~5d 后即
可羽化。家蝇羽化后，在笼中加入成虫饲
料和水，供成虫取食。取羽化后 2~4d的
成虫供试。养虫室内的相对湿度在 75%
以上，温度为 25±1℃。
先准确称取 1g 白砂糖于直径为
2.5cm、高为 7.5cm的试管中。称取一定
量的大叶桉叶提取物，用丙酮溶解，配制
成 10mg/mL、5mg/mL、2.5mg/mL、1.25mg/mL
和 0.625mg/mL的药液。分别取 1mL配
置好的药液加入盛白砂糖的试管中，摇
匀，用风扇吹干备用。挑选羽化后 2~4d
整齐一致的家蝇，用乙醚麻醉后，迅速向
每管中接入 10头家蝇。设三次重复，用
丙酮作空白对照。记录死亡虫数，计算死
亡率。
1.2.3 大叶桉叶提取物对植物病原菌的
生物活性测定。以水稻纹枯病菌为供试
对象，以菌丝生长速率法测定对植物病
原菌菌丝生长的影响；以稻瘟病菌为供
试对象，以测定对植物病原菌孢子萌发
的影响。
①大叶桉叶提取物对水稻纹枯病菌
菌丝生长的抑制作用测定。
马铃薯蔗糖琼脂（PDA）固体培养基
的制备：将马铃薯洗净去皮，称取 200g，
切成小块放锅中，加水 1 000mL，煮沸
0.5h，稍冷后用双层纱布过滤，在滤液中
加 17g琼脂加热熔化，然后加蔗糖 15g，
混匀并加水补足至 1 000mL，趁热分装
在三角瓶中，加棉花塞后灭菌。
称取一定量的大叶桉叶提取物，用
70%丙酮溶解，配制成 100mg/mL、50mg/
mL、25mg/mL、12.5mg/mL 和 6.25mg/mL
的药液。准确吸取配置好的药液 1mL加
入到 9mL融化的 PDA培养基中（50℃
左右），在培养皿（φ9cm）内混合均匀，制
得 10mg/mL、5mg/mL、2.5mg/mL、1.25mg/mL
和 0.625mg/mL的带毒培养基。用打孔
器（φ0.6 cm）打取生长整齐一致的水
稻纹枯病菌菌饼，置于平板中央，每皿
1 个，每处理重复 3 次。以 70％丙酮代
替药液作为对照。置于 25±1℃黑暗条
件下培养。36h 后，用十字交叉法测量
菌落直径，并按下式计算菌丝生长抑
制率：
试验研究
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试验研究
菌丝生长抑制率（%）=
（对照菌落直径 - 菌饼直径）
对照菌落直径 - 菌饼直径
- （处理菌落直径 - 菌饼直径）
对照菌落直径 - 菌饼直径 ×100
②大叶桉叶提取物对水稻稻瘟病菌
孢子萌发的抑制作用测定。
稻瘟病菌孢子的制备：燕麦片培养
基繁殖孢子的方法为分盛在 100ml的三
角瓶中，每瓶 50~80ml；灭菌后，每瓶可
倒 4~5个培养皿。先将稻瘟菌在适当培
养液（如酵母浸膏 5g，蔗糖或葡萄糖
20g，水 1 000ml）中振荡培养，得到菌丝
体悬浮液。每个培养皿接种菌丝体悬浮液
5ml，在 26℃条件下 7d左右，琼脂平板上即长
满菌丝体。除去培养皿盖，用毛笔刷或流水
洗，剔去气生菌丝，在荧光灯下照 1~2d，表
面就产生大量孢子。
称取一定量的大叶桉叶提取物，用
丙酮溶解，配制成 10mg/mL、5mg/mL、
2.5mg/mL、1.25mg/mL 和 0.625mg/mL 的
孢子悬浮液。取 1滴加入凹形载玻片，放
入保湿培养皿中，置于 26℃恒温培养。
6h后镜检，计算孢子萌发抑制率。
2结果
2.1植物害虫试验结果
以家蝇为供试对象，测定了大叶桉
叶提取物对农业害虫的生物活性，结果
表明，大叶桉叶提取物具有一定的杀虫
活性（见表 1）。
2.2植物病原菌试验结果
以水稻纹枯病菌为供试对象，以菌
丝生长速率法测定了大叶桉叶提取物对
植物病原菌菌丝生长的影响；以稻瘟病
菌为供试对象，测定了大叶桉叶提取物
对植物病原菌孢子萌发的影响，结果表
明，大叶桉叶提取物具有较强的杀菌活
性（见表 2和表 3）。
3结论
3.1大叶桉叶提取物对农业害虫的生物
活性
通过实验数据我们可以看出随着供
试液体浓度的增加，家蝇的死亡率在增
加，对家蝇的毒力回归方程为 y= 0.8199x
+1.4170（R=0.9908），LC50为 23.4485mg/mL，
说明大叶桉叶提取物对农业害虫具有一
定的生物活性。我们可以利用大叶桉叶
提取物来控制农业害虫，达到提高农作
物产量的目的，同时又避免对农作物造
成伤害，防止污染环境。
3.2大叶桉叶提取物对植物病原菌的生
物活性
在实验中，随着大叶桉叶提取物浓
度的上升，对植物病原菌的抑制作用在
逐渐增强，其中对水稻纹枯病菌的毒力回
归方程为 y=1.0593x+1.8488（R= 0.9813），
EC50为 0.9438mg/mL；对水稻稻瘟病菌的
毒力回归方程为 y=0.738287x+2.352164
（R=0.9965），EC50为 3.8588mg/mL，说明
大叶桉叶提取物对植物病原菌具有较强
的生物活性。
4讨论与展望
本次实验用大叶桉叶提取物对部分
农业有害生物的生物活性进行研究，由
于时间和条件限制，选择供试对象较少，
但具有一定典型性。依据实验结果，我们
看出大叶桉叶提取物对家蝇具有一定的
生物活性，对植物病原菌具有较强的生物
活性。因此可以得出初步结论，大叶桉叶
提取物对农业有害生物具有不同程度的
生物活性，可应用大叶桉叶提取物制造生
物制剂来防治农业害虫和植物病原菌。
利用大叶桉叶提取物开发新型农药
前景广阔。一是成本低，大叶桉种植广
泛，原料来源充足，提取物制作过程简
单，开发各种制剂不需要复杂的设备和
技术。二是化学农药对环境的不利影响
日渐明显，生物防治手段更加受到政府
和农业生产者的重视。三是大叶桉作为
主要的绿化树种之一，利用桉叶提取物
制作农药可大大增加桉树种植的经济效
益，从而提高农民植树造林的积极性，可
谓一举多得，促进经济效益、生态效益和
社会效益的有机结合。
[参考文献]
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国农业出版社. 1991.
表 3 大叶桉叶提取物对稻瘟
病菌孢子萌发的影响
供试浓度(mg/mL)
孢子萌发抑制率
（X±S.E.）（％）
10
5
2.5
1.25
0.625
63.25±0.84
52.17±0.75
43.15±0.46
36.64±0.32
28.27±0.27
表 1 大叶桉叶提取物对家蝇的毒杀作用
供试浓度(mg/mL) 死亡率（X±S.E.）（％）
10
5
2.5
1.25
0.625
36.67±3.33
30.00±5.77
23.33±3.33
13.33±3.33
10.00±0.00
表 2 大叶桉叶提取物对水稻纹
枯病菌菌丝生长的影响
供试浓度(mg/mL)
菌丝生长抑制率
（X±S.E.）（％）
10
5
2.5
1.25
0.625
86.98±1.10
79.58±1.66
60.87±0.52
55.43±0.30
45.07±1.60
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