全 文 ：第 29 卷 第 1 期 河南大学学报(医学版) Vol.29　No.1
2010 年 2 月 Journal o f Henan University (Medical Science) Feb.2010
桂花(晚银桂 、窈窕淑女和贵妃红)α-葡萄糖苷酶抑制活性
曹乃锋1 ,李元元2 ,崔维恒1 ,许启泰1 ,康文艺1＊
(1.河南大学药学院 天然药物研究所 , 河南 开封 475004;2.河南省医药学校 , 河南 开封 475001)
摘　要:目的:对 3 个品种(桂花贵妃红 、晚银桂和窈窕淑女)的桂花叶和花石油醚提取物α-葡萄糖苷酶抑制作用
进行研究。方法:采用索氏提取法提取桂花的叶和花提取物 , 以 96微孔板法测定α-葡萄糖苷酶抑制作用。结果:3
种桂花的叶和花均有较好的α-葡萄糖苷酶抑制作用 ,其中以贵妃红叶提取物的活性最好(IC50 =68.26 mg/ L), 其
次为晚银桂叶和窈窕淑女叶部分提取物(IC50 =145.25 mg/ L和 145.08 mg/ L),远低于阳性对照 Acarbo se(IC50 =
1081.27 mg/ L)。结论:3 个品种的叶和花部分提取物对α-葡萄糖苷酶活性的抑制效果均很好。
关键词:桂花;α-葡萄糖苷酶;抑制活性
中图分类号:R284.1　　　文献标识码:A 文章编号:1672-7606(2010)01-0021-03
　收稿日期:2009-12-10
　基金项目:河南省教育厅青年骨干教师资助计划(2008-755)
　作者简介:曹乃峰(1985-), 男 ,河南信阳人 , 硕士研究生 ,从事中药药理学研究工作。
　＊通讯作者:康文艺(1971-), 男 ,黑龙江尚志人 ,博士 , 副教授 ,从事天然药物活性成分的研究工作。
α-glucosidase inhibitory activity of Osmanthus f ragrans Lour.
(Wanyingui , Yaotiaoshunv and Guifeihong)
CAO Nai-feng 1 , LI Yuan-yuan2 , CUI Wei-heng1 , XU Qi-tai1 , KANG Wen-yi1＊
(1 .Institute o f Natural Prod ucts of P harmaceutical College , Henan University , Kai f eng 475004 , China;2 .
Henan P harmaceutical School , Kai f eng 475001 , China)
Abstract:Objective:　To investiga te α-g lucosidase inhibito ry ac tivity of three species Guifeihong , Wanyingui and
Yao tiaoshunv Osmanthus f ragrans Lour.petr oleum ethe r ex trac ts.Methods:　 The diffe rent ex trac ts we re
extr acted by Soxhlet , andα-g lucosidase inhibito ry activity w as screened by the 96-microplate-ba sed method.Results:
The leaves and flow ers of three species O.f ragrans showed good inhibito ry activ ity.The petr oleum ethe r ext ract o f
Guifeihong had the highe st inhibito r activity(IC50 =68.26 mg/L), and followed by Wanyingui(IC50 =145.25 mg/L)
and Yao tiao shunv (IC50 =145.08 mg/L), w hich is more lower than tha t o f Acarbose (IC50 =1081.27 mg/L).
Conclusion:　All ex tracts from Osmanthus f ragrans Lour.have good inhibito ry activity o fα-g lucosidase.
Key words:Osmanthus f ragrans Lour.;α-g luco sidase;Inhibitory activity
　　木犀属桂花(Osmanthus f ragrans Lour.)为常
绿灌木或小乔木 ,品种繁多 ,根据花色主要可以分为
金桂(O.f ragrans var .thunbergii Makino)、银桂
(O.f ragrans var .1atius Makino)、丹 桂 (O.
f ragrans var.aurant iacus)和四季桂(O.f ragrans.
var.semper f lorens Hort.)[ 1] 。桂花含挥发油 ,可配
制高级香料;花及根皮药用 ,能散寒破结 、化痰生津和
祛风除湿[ 2] 。张俊会[ 3] 对桂花的体外抗氧化作用研
究结果表明 ,桂花具有一定的体外抗氧化作用 。另有
文献[ 4-5] 报道 ,桂花精油中的芳梓醇 、苯甲醇具有抗菌
活性和抗炎活性。对桂花精油的进一步研究还发现 ,
桂花精油中含有多种邻苯二甲酸酯类化合物 。邻苯
二甲酸酯是一种内分泌干扰物质 ,具有微弱的毒性及
雌激素效应 ,已确认为环境雌激素 ,具有生殖毒性 ,会
导致生物繁殖能力下降和生殖器官畸形等[ 6] 。在研
究我国桂花醋酮提取物过程中 ,发现其具有清除自由
基活性和潜在的抗酪氨酸酶的能力[ 7] 。但未见文献
对其 α-葡萄糖苷酶抑制活性的报道。
DOI :10.15991/j.cnki.41-1361/r.2010.01.006
22　 河南大学学报(医学版), 2010 年 , 第 29 卷第 1 期
我们首次对贵妃红(丹桂类)、晚银桂(银桂类)和
窈窕淑女(银桂类)3个桂花品种的叶和花进行 α-葡
萄糖苷酶抑制活性研究。
1　仪器与材料
Multiskan MK3酶标仪(美国 Thermo Elect ron
公司);LRH-150恒温培养箱(上海一恒科技有限公
司);DELTA 320 型 pH 计(美国 Mettler-Toledo 公
司);电子天平(美国 Mett ler-Toledo 公司);旋转蒸发
仪(德国 Heidolph公司)。
α-葡萄糖苷酶(α-g lucosidase , EC 3.2.1.20)、
4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(4-N-t ropheny l-α-D-
glucopy ranoside , PN PG , 026K1516)、阿卡 波糖
(Acarbose , Lot 16869)和二甲亚砜(DMSO)均购自
美国 Sigma公司 。
桂花于 2006年 6月采集于广西桂林 ,经河南大
学天然药物研究所袁王俊博士鉴定 ,标本存于河南大
学天然药物研究所。
2　实验部分
2.1　提取
将 3种桂花的叶和花粉碎 ,放入索氏提取器内 ,
分别用石油醚提取 ,浓缩后将其甲酯化 ,再浓缩后得
到浸膏。
2.2　α-葡萄糖苷酶抑制活性的筛选方法
2.2.1　α-葡萄糖苷酶活力的测定　酶活力单位定
义:37 ℃、pH 6.8系统条件下 ,每分钟水解底物产生
1μmol对硝基苯酚的酶量 ,定义为一个酶活力单位
(U)。酶活力测定:112 μL 磷酸钾缓冲液 (pH 6.8)
加入 0.2 U/mL 的α-葡萄糖苷酶 20 μL 和 DMSO 8
μL ,37 ℃恒温 15 min后加入 2.5 mmol/L PNPG 20
μL , 37 ℃恒温反应 15 min ,再加入 0.2 mol/ L 的
Na2CO 3 溶液 80μL ,于 405 nm 波长下测 OD值 。
2.2.2　标准曲线制作　根据采用的反应体系 ,用磷
酸缓冲液(pH 6.8)配置 1 000 μmo l/L PNP , 稀释
成 200 、150 、100 、50 、25 、5和 0 μmol/L。分别取 7 种
不同浓度的 PNP 溶液各 160 μL , 加入 0.2 mol/L
Na2CO 3 溶液 80μL ,混匀 ,在 405 nm 下测定 OD值 ,
测 3组取平均值 。以 OD值为纵坐标 ,对硝基苯酚浓
度为横坐标 ,做出标准曲线。
2.2.3　α-糖苷酶抑制活性的检测　以张丽等[ 8-11] 建
立的 96微孔板筛选方法 ,405 nm 处检测其 OD 值。
同时做相同体系下的样品空白组 ,不加样品 、酶和底
物的空白对照组 ,不加样品的阴性对照组和以阿卡波
糖为抑制剂的阳性对照组。用 O rigin软件求出相应
IC50值。
酶活性抑制率=OD样品-OD样品空白
OD阴性-OD空白 ×100%
3　结果与讨论
3.1　3种桂花提取物α-葡萄糖苷酶抑制活性
从图 1可以看出 ,3种桂花的叶和花部分在浓度
为 1.5 g/L 时各提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性
均较高(抑制率接近 100%),且均高于阳性对照药阿
卡波糖(68.43%),表明 3 种桂花的叶和花提取物具
有较好的 α-葡萄糖苷酶抑制活性 。
图 1　不同提取物α-糖苷酶抑制活性比较
为进一步研究抑制活性 ,对 3种桂花的叶和花提
取物的初筛终浓度依次对半稀释进行 IC50值计算。
各提取物的 IC50值大小为:晚银桂叶和花部分的 IC50
分别为 145.25 mg/L 和 297.42 mg/L;窈窕淑女叶
和花部分的 IC50分别为 145.08 mg/L 和368.65 mg/L;
贵妃红叶和花部分的 IC50分别为 68.26 mg/ L 和
304.21 mg/ L。它们都远低于阳性对照 Acarbo se
(1081.27 mg/ L)。
不同部位比较 ,3种桂花的叶部分的 IC50值均高
于其花部分的 IC50值 。晚银桂叶 、窈窕淑女叶和贵妃
红叶部分的 IC50值分别为145.25 mg/L 、145.08 mg/L
和 68.26 mg/L;晚银桂花 、窈窕淑女花 、贵妃红花部
分的 IC50值分别为 297.42 mg/ L 、368.65 mg/L 和
304.21mg/ L。
3.2　提取物浓度对α-葡萄糖苷酶抑制活性的影响
图 2显示 ,桂花不同部位提取物的 α-葡萄糖苷
酶抑制活性均呈剂量依赖性 ,而且 ,当抑制率达到一
定程度时 ,再增加提取物质量浓度 ,抑制活性不会提
高。其中 ,晚银桂叶和贵妃红叶提取物在 0.2 g/L
时 ,就达到了它的最大抑制率 ,此后再增加提取物浓
曹乃峰 , 等:桂花(晚银桂 、窈窕淑女和贵妃红)α-葡萄糖苷酶抑制活性 23　
度抑制率不再变化 。其他的几个提取物在 0.4 g/L
时也达到了最大抑制率 ,此后再增加浓度 ,抑制率也
不会再变化。说明桂花的各种提取物具有良好的 α-
葡萄糖苷酶抑制活性 。
图 2 　提取物浓度对α-葡萄糖苷酶活性的影响
4　结论
我们采用体外α-葡萄糖苷酶体外抑制模型对桂
花几个品种的叶和花的α-葡萄糖苷酶抑制活性进行
了研究 ,发现桂花各提取物均具有一定的α-葡萄糖
苷酶抑制活性 ,且所有提取物的活性高于阳性对照
Acarbose ,其中 ,桂花叶的提取物活性好于花的活性。
桂花提取物的抑制活性均与浓度呈正相关性 ,说明其
抑制活性具有剂量依赖性 。
参考文献:
[ 1] 吴光洪 ,胡绍庆 ,宣子灿 ,等.桂花品种分类标准与应用
[ J] .浙江林学院学报 , 2004 , 21(3):281-284.
[ 2] 丁宝章 ,王遂义.河南植物志:3 卷[ M] .郑州:河南科学
技术出版社 , 1997:243.
[ 3] 张俊会.桂花体外抗氧化活性初探[ J] .农产品加工:学
刊 , 2005 , 34(3):73-75.
[ 4] Mar tin S , Padilla E , Ocete M A , et al.Anti-Inflammato ry
Activity of the Essential Oil of Bupleurum fruticescens[ J] .
P lanta Med , 1993 , 59(6):533.
[ 5] Lo rente I , Ocete M A , Zarzuelo A , e t al .Bioactivity o f
the Essential Oil o f Bupleurum frutico sum [ J] .J Nat
P rod , 1989 , 52(2):267.
[ 6] 胡雄星 , 韩中豪 ,刘必寅 , 等.邻苯二甲酸酯的毒性及其在
环境中的分布[ J] .环境科学与管理 , 2007 , 32(1):37-40.
[ 7] Li-chen Wu , Li-Hui Chang , Si-Han Chen , et al.Antioxidant
activity and melanogenesis inhibitory effect of the acetonic
ex tract of Osmanthus f rag rans:A po tential natural and
functional food flavor additive [ J] .LWT - Food Science and
Technolo gy , 2009 , 42(9):1513-1519.
[ 8] 康文艺 , 张东娣 ,刘瑜新 , 等.七种菊花对α-葡萄糖苷酶的
抑制活性[ J] .精细化工 , 2009 , 26(4):351-354.
[ 9] 康文艺 , 张丽 ,宋艳丽.滇丁香中抑制α-葡萄糖苷酶活性
成分研究[ J] .中国中药杂志 , 2009 , 34(4):406-409.
[ 10] 康文艺 ,张丽 , 宋艳丽.茜草抑制α-葡萄糖苷酶活性成分
研究[ J] .中国中药杂志 , 2009 , 32(5):1104-1107.
[ 11] 张丽 ,李晓梅 , 李彩芳 ,等.加拿大蓬α-葡萄糖苷酶抑制
作用研究[ J] .河南大学学报:医学版 , 2008 , 27(4):39-
41.
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