全 文 ：文章编号:1006-446X (2006)01-0049-04
川芎和抚芎的多糖和重金属含量分析
王晓亚　鲁建丽
(浙江大学医学院附属第一医院 , 浙江　杭州 310003)
摘　要:为提高川芎质量 , 控制重金属含量, 采用苯酚-硫酸法测定了川芎和抚芎中的多糖含量 ,
采用原子吸收光谱法测定了其中重金属含量。结果表明, 川芎和抚芎多糖含量分别为 (25.35±
0.23)和 (23.52±0.51)mg/ g , 重金属铅 、 汞 、 镉的含量分别为 (1.28±0.12)、 (0.21 ±0.22)、
(0.25±0.11)μg/ g 和 (2.24±0.21)、(0.16±0.22)、 (0.35±0.20)μg/g。苯酚-硫酸法简单 、 快速 、
准确度高 , 重现性好 , 用于测定川芎和抚芎多糖结果可靠。川芎汞含量有一定超标 , 抚芎镉含量超
标 , 应引起注意。
关键词:川芎;抚芎;多糖;重金属;分析
中图分类号:R 284.1　　文献标识码:A
中药川芎始载于 《神农本草经》 , 是伞形科多年生草本植物川芎 Ligusticum chuanxiong Hort.
的干燥根茎 , 是常用中药材之一 , 具有活血化瘀 , 祛风止痛的功效[ 1] 。四川省是川芎主要栽培
地 , 川芎为著名的川产道地药材之一 , 现陕西 、 湖北 、 上海 、 浙江 、 福建等地均有种植。抚芎
Ligusticum chuanxiong Hort.cv.Fuxiong 又名茶芎 , 始载于 《丹溪心法》 , 是江西省的道地药材之
一。与川芎生药有效成分相似 , 临床疗效相近 , 并且在商品外形上易于混淆。抚芎在市场上是川
芎的补充品。
近年来川芎化学成分的研究已有大量报道 , 主要集中于川芎的挥发油[ 2-4] 、内酯[ 5] 、 酚性物
质[ 6] 、生物碱及有机酸[ 7]等 , 对川芎和抚芎中多糖和重金属的研究报道较少[ 8-9] 。当前 , 进口中
药材和中成药的国家对其重金属含量作了严格要求 , 如美国禁止含有汞 、 铅等重金属中药材与中
成药销售 。川芎是我国主要出口中药材之一 , 但据资料报道 , 饮片有6次因重金属检验问题被德
国药检部门销毁而不能出口 , 严重制约了川芎出口。为推进我国川芎中药现代化 , 作者对应用较
多的川芎和抚芎的多糖和重金属含量进行了研究 , 以提高川芎药材质量 , 控制有害重金属 , 提供
一定依据 。
1　实验部分
1.1　试剂与药材
川芎 (Ligusticum chuanxiong Hort.)产 地 为 四 川 灌 县 , 抚 芎 (Ligusticum chuanxiong
Hort.Fuxiong)产地为江西九江 , 由浙江中医学院植物鉴定教研室姚振生教授鉴定 。测重金属所
用水为双蒸水 , 试剂为优级纯 。D -葡萄糖标准品 (浙江省药检所提供), 5%苯酚 (重蒸馏制备
苯酚溶于水中), 其它试剂均为分析纯 。
收稿日期:2005-11-22
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DOI :10.16755/j.cnki.issn.1006-446x.2006.01.012
1.2　仪　器
UV-265型紫外可见分光光度计 (日本岛津), Z-5000偏振塞曼原子吸收光谱仪 (日本日立
公司)。
1.3　实验方法
1.3.1　多糖的测定[ 10]
(1)多糖提取:分别称取粉碎过 40目的川芎和抚芎干粉 100 g , 用 500 mL 石油醚 (沸程 60
～ 90℃)回流 2 h , 脱去表面的脂肪 , 抽滤 、 风干 , 重复一次 。滤渣加入 8倍体积的水 , 水蒸气
蒸馏 4 h , 趁热抽滤 , 滤渣复加水回流两次 , 每次 2 h , 抽滤 , 合并三次滤液 , 旋转蒸发浓缩至小
体积后 , 加入 Sevag 试剂 V(氯仿)+V(正丁醇)=5+1除蛋白 , 反复操作至无蛋白层为止 (8次
以上), 流水透析过夜 , 浓缩后 , 向其中加入无水乙醇至含醇 80%, 沉淀多糖 , 静置过夜 , 抽
滤。沉淀分别用 95%乙醇 、无水乙醇 、 丙酮 、乙醚洗涤 , 干燥得川芎和抚芎总多糖 。
(2)标准品溶液供试品溶液的制备:精密称取 D-葡萄糖 0.516 g 于 250 mL 容量瓶中 , 加蒸
馏水稀释至刻度得质量浓度为 2.064μg/mL的标准品溶液。分别精密称取川芎和抚芎总多糖样品
0.253 8 、 0.251 0 g 于 250 mL 容量瓶中 , 加蒸馏水稀释至刻度 , 作为供试品溶液 。
(3)实验条件的确定:①λmax的确定:精密吸取标准品溶液和供试品溶液各 2 mL , 加 5%苯
酚水溶液 1 mL , 缓缓加入 5mL 浓 H2SO4摇匀 , 放冷至室温再补加1 mL蒸馏水 , 摇匀 , 同行试剂
空白 , 于 265型紫外可见分光光度计上于400 ～ 600 nm 进行扫描。结果标准品和供试品均在 330 、
490 nm处有最大吸收 , 取 λmax为490 nm 进行测定 。②稳定性试验:取上述供试溶液 , 按苯酚-硫
酸法操作 , 于 490 nm 处测定不同时间内所对应吸光度 , 吸光度在 4.5 h 内稳定 。
(4)标准曲线的制作 :精密吸取标准品溶液 0.5 、 1 、 2 、 3 、 4 、 5 nL , 加蒸馏水稀释至 5 mL
制得不同质量浓度的标准品溶液 , 按苯酚—硫酸法测得所对应的吸光度 A , 由 A 对 C 回归得方
程A=0.183 2 C-3.211×10-3 (C的单位:μg/mL), r=0.999 1 , 线性关系良好。
(5)精密度试验:精密吸取标准品溶液1 mL , 按苯酚-硫酸法操作 , 重复 5次测定 , 相对标
准差 RSD为 2.15%, 表示本法有较好的精密度。
(6)回收率实验:取供试品溶液 , 加入 D -葡萄糖标准品 , 采用加样回收法 , 按苯酚-硫
酸法测定 A , 依线性关系计算出总糖质量浓度 , 计算回收率 , 结果平均回收率为97.58%, 表示
本法有较好的准确度 。
(7)多糖的含量测定:取供试品溶液 2 mL ,
按苯酚 -硫酸法操作 , 单味药材重复 5次测定 ,
计算多糖含量。测定结果见表 1。
表 1　川芎和抚芎多糖含量测定结果 (n=5)
川 芎 抚 芎
w(多糖)/(mg/ g) 25.35±0.23 23.52±0.51
RSD/ % 1.25 3.12
1.3.2　重金属的分析
(1)样品制备:将原药用药部分除去其中的杂草和尘土 , 先后用自来水 、 蒸馏水和高纯水冲
洗 , 于60℃烘干 , 粉碎 、 研细 、过 80目筛 , 再于 80℃干燥至恒重 , 装于广口试剂瓶中再放保干
器中保存备用。
(2)样品预处理:在参考相关文献的基础上 , 选择 V(HNO3)+V(H2O2)=4+1混酸作为样品
的消解液 , 湿消化法消解样品 。
(3)重金属的测定:取样品消解液 , 在 Z-5000 偏振塞曼原子吸收光谱仪上分别测定 Pb 、
Hg 、 Cd 的含量 。测定结果见表 2。
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表 2　川芎和抚芎重金属含量测定结果 (n =5) 单位:μg/g
样 品 Pb Hg Cd
川芎 1.28±0.12 0.21±0.22 0.25±0.11
抚芎 2.24±0.21 0.18±0.22 0.35±0.20
3　讨　论
(1)多糖系由9个以下的单糖构成的聚合物 , 其相对分子质量在 2 000 ～ 6 000之间 , 广泛存在
于动植物中 , 一般情况下多视为无效成分在提取时予以放弃。近年来 , 发现其具有免疫活性而引起
注意。实验结果表明川芎和抚芎均含 2%以上的多糖 , 但其药效研究未见报道 , 有待进一步研究 。
(2)按 《药用植物及制剂进出口绿色行业标准要求》 , 实验测定的川芎和抚芎 Pb 含量合格 ,
而川芎汞含量有一定超标 , 抚芎镉含量超标 , 应引起注意 , 这可能与植物的产地和生长环境有一
定相关性 。铅 、 镉 、 汞等是目前公认的对人体健康有害的微量元素 。摄入过多的铅会损伤神经系
统 、 消化系统 、 造血系统;镉过量会使组织代谢系统发生障碍以及抑制多种酶的活性;汞对中枢
神经系统和肾脏等器官有危害作用 。
(3)近年来 , 由于环境污染日益严重以及药农在种植药材过程中使用农药 、 有机肥等原因 ,
大多数中药材中含有一定量的有害重金属元素 , 致使中药材中一些有害重金属元素含量超标 。开
展川芎药材种植中水 —土壤—川芎药用植物生长有关的微 、 宏观环境中重金属元素迁移 、循环 、
转化的系统研究 , 降低生药中有害元素含量 , 是扩大中药川芎出口的迫切需要 , 也是实现中药现
代化的必然要求 , 应引起各级政府和学术界的高度重视。
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Determination of Polysaccharides and Heavy Mentals in
Ligusticum chuanxiong Hort and Ligusticum
chuanxiong Hort cv.Fuxiong
WANG Xiao_ya , LU Jian_li
(The First Affiliared Hospital , Medical College , Zhejiang University , Hangzhou 310003 , China)
Abstract:To determine the content of the the polysaccharides and heavy mentals in Ligusticum chuanxiong
Hort and Ligusticum chuanxiong Hort.cv.Fuxiong.A phenol_sulfuric acid method was used for the determi-
nation of the polysaccharide content , andAAS method for the determination of the heavy mentals content.The
results show that in Ligusticum chuanxiong Hort and Ligusticum chuanxiong Hort.cv.Fuxiong , the content
of polysaccharides was(25.35±0.23)mg/g and (23.52±0.51)mg/g respectively , and the content of
heavy metal lead , mercury and cadmium were (1.28±0.12)μg/g , (0.21±0.22)μg/g , (0.25±0.11)
μg/g and(2.24±0.21)μg/g , (0.16±0.22)μg/g , (0.35±0.20)μg/g respectively.It concluded the
phenol_sulfuric acid method was easy , quick and reliable , so it was available to determine the content of
polysaccharides in Ligusticum chuanxiong Hort and Ligusticum chuanxiong Hort.cv.Fuxiong.The content
of mercury in Ligusticum chuanxiong Hort and cadmium in Ligusticum chuanxiong Hort.cv.Fuxiong exceed
the limit , this is a matter of serious concern.
Key words:Ligusticum chuanxiong Hort;Ligusticum chuanxiong Hort.cv.Fuxiong;polysaccharides;
heavy mentals;analysis
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