全 文 ：作者简介　文德鉴(1973-),男 , 湖北恩施人 ,讲师 , 主要研究方向:中草药药理。
冷水七抗炎作用有效部位的筛选研究
文德鉴 ,艾明仙 ,李德清
湖北民族学院医学院(湖北 恩施 445000)
【摘要】目的　观察冷水七醇提物各分离部位的抗炎作用 , 并确定其抗炎作用的活性部位。方法　通过二甲苯致小
鼠耳廓肿胀实验及醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性实验 ,观察冷水七醇提物各分离部位对炎症的影响。结果　冷
水七醇提物正丁醇提取部位高 、低剂量组对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的抑制率分别为 53.04%、 26.62%, 与生理盐
水组比较有显著性差异(P<0.05, P<0.01),对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性实验 , 正丁醇提取部位高 、低剂量
组腹腔洗涤液光密度值(A)分别为 0.7896 ±0.3561、1.2809 ±0.2343, 与生理盐水组比较也有显著性差异(P<
0.01)。结论　冷水七醇提物正丁醇提取部位具有明显的抗炎作用 ,是冷水七发挥抗炎作用的主要有效部位。
【关键词】冷水七;抗炎作用;药理作用
【中图分类号】R285.5　　【文献标识码】A　　【文章编号】1008-8164(2007)02-0013-02
StudyonScreeningValidFractionwithAnti-inflammatoryEffects
inImpatiensPritzeli.var.Hupehensi
WENDe-jian, AIMing-xian, LIDe-qing
(MedicalColegeofHubeiInstituteforNationalities, Enshi445000 , China)
【Abstract】ObjectiveTostudyanti-inflammatoryeffectsofseparatefractionofethanolextract
ofImpatienspritzeli.var.hupehensis, andfindthevalidfractionofImpatienspritzeli.var.hu-
pehensisonanti-inflammatoryeffects.MethodsEaredemainducedbydimethylbenzeneand
abdominalcapilarypermeabilitybyaceticacidinmicewasusedtostudytheanti-inflammato-
ryeffects.ResultsThen-BuOHfractionofImpatienspritzeli.var.hupehensis(10 mgand20
mg∕ kg)couldinhibitearedemaP<0.05, P<0.01), andreducetheabdominalcapilaryperme-
ability(P<0.01), andtheotherfractionshavenottheeffects.ConclusionThen-BuOHfrac-
tionofImpatienspritzeli.var.hupehensishasanti-inflammatoryefects;itisthevalidfraction
ofImpatienspritzeli.var.hupehensisonanti-inflammatoryefects.
【Keywords】Impatienspritzeli.var.hupehensis;Anti-inflammatoryefect;Pharmacological
activities
　　冷水七(ImpatienspritzeliHook.f.var.hupehen-
sisHook.f.)为凤仙花科凤仙花属植物 ,是恩施土家
族常用民药 , 药用部位为冷水七根茎 ,其性味辛 、
甘 、凉 ,毒性小 ,具有祛风除湿 ,散瘀消肿 ,镇痛止血 ,
清热解毒之功效 。用于风湿疼痛 、四肢麻木 、关节肿
大 、急性脘腹疼痛 、食积腹胀泄泻 、月经不调 、经来腹
痛 ,肠炎痢疾等症[ 1] 。药理实验已证实冷水七乙醇
提取物对小鼠炎症模型具有抗炎作用 [ 2] 。为了更
进一步探讨冷水七抗炎作用的活性部位 ,本实验对
冷水七醇提物进行了初步分离 ,并对各个部位进行
了抗炎作用研究。
1　材料和方法
1.1　动物　昆明种小鼠 , 18 ～ 22g,湖北省实验动
物中心提供。
1.2　药物　冷水七由湖北民族学院附属医院药剂
科提供。取供试药材 500g,用 50%乙醇超声提取 2
次 ,每次 45min,合并 ,回收乙醇 ,得总浸膏 ,总浸膏
第 24卷第 2期(第 13页)
2007年 　　　 　　 湖北民族学院学报·医学版JournalofHubeiInstituteforNationalities· MedicalEdition　　　 　　Vol.24 No.2 P.132007
再分别用氯仿 、正丁醇 、乙酸乙酯依次超声提取 ,得
氯仿部位 、正丁醇部位 、乙酸乙酯部位及剩余物部
分 ,除去有机溶剂 ,分别配制成 1g/ml、2g/ml(相当
于原药材)的水溶液或混悬液 ,备用 。二甲苯(AR,
北京化学试剂厂);阿司匹林(南京第二制药厂 ,临
用前用超声波制备成 10mg/ml混悬液);0.6%醋酸
的配制:取 0.6ml冰醋酸(AR,武汉市江水化学试剂
有限责任公司)加入 100ml蒸馏水中搅匀即可;2%
伊文思蓝(Ffluka进口分装 ,上海化学试剂供应站经
销)生理盐水的配制:取 2g伊文思蓝加入 100ml生
理盐水中搅匀即可;其它化学试剂均为分析纯 。
1.3　仪器　CQ-250超声波清洗器(上海弘兴超
声电子仪器有限公司), 722分光光度计(上海第三
分析仪器厂);电子天平(上海天平仪器厂);6mm
打孔器 。
1.4　二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验　按文献 [ 3]取
18 ～ 20g小鼠 100只 ,每组 10只 ,随机分为 10组 ,
即 A组(生理盐水组 ,给予等体积的生理盐水)、B
组(阿司匹林组给药剂量为 0.2g/kg)、CH组(氯仿
部位高剂量组);CL组(氯仿部位低剂量组);DH组
(正丁醇部位高剂量组);DL组(正丁醇部位低剂量
组);EH组(乙酸乙酯部位高剂量组);EL组(乙酸
乙酯部位低剂量组);FH组(剩余物高剂量组);FL
组(剩余物低剂量组),高 、低剂量组均分别灌胃各
提取物 20g/kg和 10g/kg。各组灌胃给药每天一
次 ,连续 3d,于最后一次给药 30min后 ,将二甲苯
0.3ml涂于小鼠右耳正反两面 , 15min后颈锥脱臼
处死 ,用直径 6mm打孔器在左右两耳廓相同部位打
孔取样 ,及时秤重 ,以左右耳片重量之差为肿胀度 ,
按下式计算抑制率 ,并与对照组进行比较 。
抑制率 =(对照组肿胀度 -给药组肿胀度)÷
对照组肿胀度 ×100%
1.5　醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性实验　按文
献 [ 4]取 18 ～ 20g昆明种小鼠 100只 ,分组及给药
方法同上。末次给药 30min后尾静脉注射 2%的伊
文思蓝生理盐水 0.01ml/g,立即腹腔注射 0.6%醋
酸 0.2ml/只 , 20min后 ,脱颈处死小鼠 ,剪开腹腔 ,
用 5ml生理盐水冲洗腹腔数次 ,收集洗涤液 , 2500r/
min离心 5min,取上清液于 590nm处比色 ,测定光
密度值(A)。
1.6　统计方法　各组数据以 x±s表示 ,组间差异
比较用 t检验 , α=0.05,由 SPSS11.5系统完成 。
2　结果
2.1　冷水七醇提物各分离部位对二甲苯所致小鼠
耳廓肿胀度的影响　冷水七醇提物正丁醇分离部位
高 、低剂量组对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有抑制作
用 ,与生理盐水组比较差异有显著性。结果见表 1。
表 1　冷水七醇提物各分离部位对二甲苯
所致小鼠耳廓肿胀度的影响(x±s, n=10)
组别 剂量(g/kg)右耳重量(mg) 左耳重量(mg) 肿胀度 抑制率(%)
A组 28.23±3.22 12.45±2.77 15.78±3.53
B组 0.2 17.10±1.08 11.75±1.15 5.35±1.24＊＊66.10
CL组 10 26.75±3.53 12.35±2.57 14.40±3.18 8.75
CH组 20 26.16±2.97 11.65±2.83 14.51±2.89 8.05
DL组 10 24.27±1.32 12.69±1.12 11.58±1.77＊ 26.62
DH组 20 20.13±2.86 12.72±1.58 7.41±3.34＊＊53.04
EL组 10 28.82±3.16 13.68±3.14 15.14±3.21 4.06
EH组 20 29.00±3.30 12.88±2.98 16.12±2.64 -2.15
FL组 10 27.31±3.81 12.02±3.92 15.29±3.84 3.11
FH组 20 27.76±2.63 13.79±2.98 14.97±3.15 5.13
　　与生理盐水组比较＊P<0.05, ＊＊P<0.0 1
2.2　冷水七醇提物各分离部位对醋酸所致小鼠腹
腔毛细血管通透性的影响　冷水七醇提物正丁醇分
离部位高 、低剂量组对 0.6%醋酸所致小鼠腹腔毛
细血管通透性有抑制作用 , 与生理盐水组比较差异
有显著性 。结果见表 2。
表 2　冷水七醇提物各分离部位
对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响(x±s)
组别 剂量 g/kg A值
A组 1.7411±0.2353
B组 0.2 0.7421±0.2665＊＊
CL组 10 1.7253±0.4377
CH组 20 1.6872±0.2432
DL组 10 1.2809±0.2343＊＊
DH组 20 0.7896±0.3561＊＊
EL组 10 1.7281±0.3164
EH组 20 1.7069±0.2647
FL组 10 1.6925±0.3556
FH组 20 1.7302±0.2612
　　与生理盐水组比较 ＊＊P<0.01
3　讨论
二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验和醋酸致小鼠腹腔
毛细血管通透性实验是研究药物抗炎作用的常用实
验方法 , 二甲苯可引起耳廓急性炎症水肿 , 醋酸可
引起小鼠腹腔毛细血管通透性增加。从冷水七醇提
物各分离部位的抗炎结果看 , 冷水七正丁醇部位能
抑制二甲苯诱发的小鼠耳廓肿胀和醋酸所致的小鼠
腹腔毛细血管通透性增高 ,具有一定的抗炎作用。
其作用机制可能与降低毛细血管通透性 、减少渗出
有关 。 (下转第 17页)
14
　　　　　　　　　　　　　　　　　湖北民族学院学报·医学版　　　　　　　　　　　　　　第 2期
异性催化 GSH过氢化氧化物还原反应 ,而清除细胞
内有害的过氧化代谢产物 ,以阻断脂质过氧化连锁
反应 ,从而对保护细胞代谢的正常进行起到重要作
用 [ 7] 。
众多研究表明 ,体内 MDA水平随着年龄的增
长而升高。当机体衰老时 ,体内组织细胞中的自由
基代谢水平就会失调 ,机体对自由基的防御能力也
会下降 ,过量自由基可使生物膜质双分子层中的不
饱和脂肪酸过氧化 ,而形成脂质过氧化物 ,从而使膜
结构和功能发生障碍 , 过氧化脂质的代谢产物
MDA,进一步与磷脂酰乙醇胺和蛋白质交联 ,生成
无活性脂褐质沉积于组织细胞 ,破坏细胞膜结构 ,最
后导致细胞无法维持正常代谢而死亡 。因此自由基
导致的脂质过氧化 、细胞破裂和退行性病变是衰老
的主要原因 , MDA可作为致衰老的指标之一 [ 8] 。
在短时间内建立将年轻动物变为类似自然衰老
动物的模型是目前国内外研究衰老机制的常用方
法 ,本实验是采用氟派啶醇制作衰老动物模型 ,检测
大鼠海马 、皮质 SOD、GSH-PX和 MDA含量的变
化 。结果显示何首乌水提液能明显提高大鼠海马和
皮质中 SOD和 GSH-PX活性 ,抑制自由基的脂质
过氧化反应 ,降低脂质代谢产物 MDA的水平 ,提示
何首乌水提液是通过上调抗氧化酶 SOD、CSH-PX
和下调过氧化物 MDA的表达作用来提高机体抗氧
化能力 ,清除衰老机体产生过多的自由基而引起延
缓衰老的作用。
综上 ,何首乌水提液具有一定的抗衰老作用 ,其
机制可能是通过上调抗氧化酶 SOD、GSH-PX和下
调过氧化物 MDA的表达来提高机体抗氧化能力 ,
清除衰老机体产生的过多自由基 ,抑制机体组织细
胞的脂质过氧化过程 ,而起到延缓衰老的作用。
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[收稿日期 2007-04-15]
(本文承蒙黄丽亚副教授悉心指导 ,特此致谢)
(上接第 14页)
冷水七在恩施民间被用于治疗风湿性 、类风湿
性关节疼痛等疾病 ,药理实验已证实冷水七水提取
物具有明显的镇痛 [ 5] 、抗炎作用 [ 2] ,对胶原蛋白 I
诱导的小鼠关节炎模型也有明显的效果 [ 6] ,冷水七
镇痛作用的主要活性部位是正丁醇部位 [ 7] ,本实验
结果也表明冷水七醇提物的正丁醇部位具有明显的
抗炎作用 ,其作用强度与文献 [ 2]报道的冷水七醇
提物相似 ,因此 ,正丁醇部位是冷水七发挥抗炎和镇
痛作用的主要活性部位。本研究可为今后研究开发
冷水七相关制剂提供理论依据 ,同时也为继续寻找
冷水七的抗炎镇痛活性成分奠定了基础。冷水七的
抗炎机制尚不清楚 ,尚需进一步研究 。
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[收稿日期 2007-01-25]
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第 2期　　　　　　　　　　　　　　湖北民族学院学报·医学版