全 文 ：冷水七活性部位镇痛抗炎作用的研究＊
赵晓亚 ,向　明 ,张勇慧 ,阮汉利 ,皮慧芳 ,吴继洲
(华中科技大学同济医学院药学院 ,武汉　430030)
[ 摘　要] 　目的　研究冷水七活性部位 I(IPB-I)的镇痛抗炎作用。方法　 采用热板法 、醋酸扭体法研究 IPB-I 对
小鼠的镇痛作用 ,并与 0.9%氯化钠注射液 、盐酸吗啡作对照;采用二甲苯致小鼠耳肿胀 、醋酸致小鼠腹膜毛细血管通透
性增加的实验研究 IPB-I 抗炎作用 ,并与 0.9%氯化钠注射液 、氢化可的松对照。结果　IPB-I对两种痛刺激有非常显著
的镇痛作用;对两种实验性炎症有非常显著的抑制作用。结论　IPB-I具有显著的镇痛抗炎作用。
[ 关键词] 　冷水七;镇痛作用;抗炎作用
[ 中图分类号] 　R285.5　　　[ 文献标识码] 　A　　　[ 文章编号] 　1004-0781(2005)01-0010-03
Anti-inflammatory and Analgesic Effects of Active Extract of Lengshuiqi
ZHAO Xiao-ya , XIANG Ming , ZHANG Yong-hui , RUAN Han-li , PI Hui-fang , WU Ji-zhou(School of
Pharmacy , Tongji Medical College , Huazhong University of Science and Technology , Wuhan 　430030 ,
China)
ABSTRACT　Objective　To study the anti-inflammatory and analgesic effects of the extract from the valid fraction of
lengshuiqi (IPB-I).　Method　 The ho t-plate test and acetic acid w rithing method were adopted in the experiment.And ear
edema induced by dimethy lbenzene and abdominal capillary permeability by acetic acid in mice were used to study the anti-
inflammatory effects.　Results　 IPB-I fraction could pro long the latencies of paw licking(P <0.01), decrease mice writhing ,
inhibit ear edema(P <0.01), and reduce the abdominal capillary permeability. 　Conclusion 　The IPB-I has anti-
inflammatory and analgesic effects.
KEY WORDS　 Lengshuiqi;Analgesic effect;Anti-inflammation ecffect
(no te:Lengshuiqi is one traditional Chinese herb.)
　　冷水七(Impat iens pritzelli i Hook .f .var..
hupehensis Hook.f.)为凤仙花科凤仙花属植物 ,其根
茎入药 ,性味辛 、甘 、凉 ,毒性小 ,具有祛风除湿 ,散瘀消
肿 ,镇痛止血 ,清热解毒之功效 。用于风湿疼痛 、四肢
麻木 、关节肿大 、急性脘腹疼痛 、食积腹胀泄泻 、月经不
调 、经来腹痛 ,肠炎痢疾等症[ 1] 。为了开发冷水七 ,使
其成为新的镇痛抗炎药 ,笔者对其活性部位进行研究。
1　材料
1.1　药材　冷水七根茎 ,购自湖北省恩施州 ,由湖北
省药品检验所万定荣主任药师鉴定 。
1.2　试剂　氢化可的松注射液(湖北中天爱百科药业
有限公司 ,每支 25 mg ,用纯化水稀释成所需浓度);二
甲苯(分析纯 ,北京化工厂);依文思蓝(上海化学试剂
采购供应站 ,实验时用纯化水配成所需浓度)。
1.3　仪器　恒温水浴锅;光电分析天平;754型分光
光度计;GJ- 8402型热板测痛仪。
1.4　动物　清洁级昆明种小鼠 ,雌雄兼用 ,均购自华
[ 收稿日期] 　2004-03-23　　　[ 修回日期] 　2004-05-10
[ 基金项目] 　＊国家自然科学基金资助项目(基金编号:
30371733)
[ 作者简介] 　赵晓亚(1978 -), 女 , 河北石家庄人 , 博士 ,
从事天然药物药效物质基础研究。
[ 通讯作者] 　吴继洲 , 男 , 教授 , 博士生导师 , 电话:027-
83692739 , E-mail:yw jz@mails.tjmu.edu.cn。
中科技大学同济医学院实验动物中心。
2　方法与结果
2.1　供试液的制备　取供试药材适量 ,用甲醇水浴加
热提取 ,得甲醇总提取浸膏 ,总浸膏用适量水溶解后分
别依次用不同极性的溶剂萃取 ,各萃取液回收溶剂后 ,
水浴浓缩得到不同极性部位浸膏。经试验冷水七活性
部位 I(IPB-I)为其活性部位 。取 IPB-I 部分浸膏适
量 ,用纯化水配成 30 g·kg-1(按生药材计算),备用 。
2.2　对小鼠热板法致疼痛作用的影响　参照文献[ 2]
进行热板法实验 。先将镇痛测定仪水温恒温至
(55.0±0.5)℃,对昆明种雌性小鼠进行筛选(以 30 s
内舔后足者为合格);将筛选合格的小鼠进行随机分
组 ,每组 10只 。阴性对照组:给予 0.9%氯化钠注射
液 20 mL·kg-1 , ig;阳性对照组:给予盐酸吗啡 10
mg·kg-1 , ip;治疗组:给予 IPB-I 30 g·kg-1 。给药后分
别于 15 ,30 ,60 , 90 , 120 min测定一次 ,如痛阈值超过
60 s ,即停止测试 ,按 60 s计算 ,然后统计痛阈值。结
果见表1 ,表明 IPB-I对热刺激引起的小鼠疼痛有明显
的抑制作用。
2.3　对醋酸诱发小鼠腹痛的影响　取健康昆明种小
鼠 ,雌雄各半 ,随机分为 3组 ,每组 10只 。阴性对照组
给予 0.9%氯化钠注射液 20 mL·kg-1 , ig;阳性对照组
给予盐酸吗啡 10 mg·kg-1 , ip;治疗组给予 IPB-Ⅰ 30
g·kg-1 。各组给药 30 min后腹腔注射 0.7%醋酸 0.3
·10· Herald of M edicine Vol.24 No.1 January 2005
　　　　　　　　　　　　　　　　表 1　IPB-I 部分对小鼠热板法致疼痛的影响 x ±s
组别 动物数/只 药物 剂量
给药前痛
阈值
给药后不同时间痛阈值/ s
15 min 30 min 60 min 90 min 120 min
治疗组 10 IPB-Ⅰ 30 g·kg-1 19.8±5.1 29.6±6.8 41.5±5.0＊1 38.3±7.0 44.7±4.5＊1 42.3±2.3
阳性对照组 10 盐酸吗啡 20 mg·kg-1 20.1±3.8 60.0±0.0 60.0±0.0＊1 43.5±5.1 35.2±3.6　 30.0±10.5
阴性对照组 10 0.9%氯化钠注射液 20 mL·kg-1 19.5±3.5 19.7±5.2 19.8±5.1　 21.3±4.5 19.6±4.8　 18.9±4.0
　　注:与阴性对照组比较 , ＊1P<0.01
mL·(20 g)-1 。记录注射醋酸后 15 min内扭体反应的
次数[ 2] 。结果阴性对照组扭体(28.5±4.3)次 ,阳性对
照组扭体 0次 ,治疗组扭体(13.7±3.9)次 ,治疗组与
阴性对照组比较 ,差异有极显著性(P <0.01),表明
IPB-I部分对炎性疼痛有明显的镇痛作用 。
2.4　对二甲苯诱发小鼠耳肿胀的影响　取健康昆明
小鼠 30只 ,随机分为 3组 ,每组 10只 。治疗组连续灌
胃给予 IPB-Ⅰ 30 g·kg-1 , qd , 3 d;阴性对照组给予
0.9%氯化钠注射液 20 mL·kg-1 , ig;阳性对照组给予
氢化可的松 10 mg·kg-1 , ip。第 3天给药 30 min 后涂
二甲苯于小鼠左耳致炎 , 15 min后脱臼致死 ,用打孔器
扣取双耳 ,称重 ,左右耳的重量差作为肿胀度 ,比较组
间差异显著性。肿胀抑制率(%)=(对照组平均肿胀
度-给药组平均肿胀度)/对照组平均肿胀度×100%,
结果见表 2。从表 2可看出 IPB-Ⅰ对二甲苯引起的炎
性反应有非常显著的抑制作用 ,与氢化可的松比较 ,差
异无显著性。
2.5　对醋酸致小鼠腹膜毛细血管通透性增高的影响
取健康昆明小鼠 30只 ,随机分为 3组 ,每组 10只 。治
疗组连续灌胃给予 IPB-I 30 g·kg-1 , 3 d , qd ,阴性对照
组给予 0.9%氯化钠注射液 20 mL·kg-1 , ig;阳性对照
组给予氢化可的松 10 mg·kg-1 , ip。第 3天给药30 min
后尾静脉注射依文思蓝水溶液 0.1 mL·(20 g)-1 ,然后
腹腔注射醋酸 0.3 mL·(20 g)-1 ,20 min 后脱臼处死 ,
腹腔注射 0.9%氯化钠注射液 6.0 mL ,使腹腔液混合
均匀 ,吸出腹腔液 ,离心 ,取上清液在 590 nm 处测定吸
收度[ 3 ,4] 。结果见表 3。结果表明 IPB-Ⅰ对醋酸致小
鼠腹膜毛细血管通透性增高有一定程度的抑制作用 ,
但作用弱于氢化可的松 。
3　讨论
①从镇痛抗炎的实验结果看 , 冷水七活性部位
IPB-Ⅰ能明显延长小鼠痛阈值 ,减少扭体反应的次数;
同时 ,抑制二甲苯诱发的小鼠耳肿胀和醋酸所致的小
鼠腹膜毛细血管通透性增高 , 提示冷水七活性部位
IPB-Ⅰ发挥镇痛抗炎的作用。 ②当前用于风湿病的中
药效果不理想 ,而且毒性比较大 。冷水七在民间主要
用于风湿病的治疗 ,所以本实验对冷水七活性部位抗
炎镇痛作用进行了研究 。在镇痛实验中 , IPB-Ⅰ对由
化学刺激和物理刺激引起的疼痛都有非常显著的抑制
作用 ,且起效比较快 ,基本在 30 min就有非常好的镇
痛效果 ,持续时间长 ,实验中观察到 2 h仍具显著镇痛
作用 ,说明该活性部位镇痛起效快 ,药效持续久 。在二
甲苯诱发小鼠耳肿胀的实验中 ,此部分的抗炎效果强 ,
与氢化可的松相当;在醋酸诱发小鼠腹腔毛细血管通
透性增高的实验中表现了明显的抑制作用 ,推测其是
通过抑制毛细血管的扩张 ,降低通透性 ,使渗出减少以
达到抗炎作用 。实验发现治疗组小鼠体重的增加与阴
性对照组一致 ,说明此部分毒性小 ,对小鼠无消耗性。
冷水七的毒性研究也表明其毒性低 ,用药安全。 ③冷
水七的抗炎镇痛效果好 ,毒性低 ,为寻找新的镇痛抗炎
药提供参考。冷水七的抗炎镇痛机制尚不清楚 ,尚需
进一步研究确定。
表 2　IPB-Ⅰ对二甲苯致小鼠耳廓炎症的影响
组别 动物数/只 药物 剂量 肿胀度/ mg 抑制率/ %
治疗组 10 IPB-Ⅰ 30 g·kg-1 2.00±1.36＊1 77.9
阳性对照组 10 氢化可的松 20 mg·kg-1 2.01±1.14＊1 77.7
阴性对照组 10 0.9%氯化钠注射液 20 mL·kg-1 9.03±4.80　 -
　　注:与阴性对照组比较 , ＊1P<0.01
表 3　IPB-Ⅰ对小鼠腹膜毛细血管通透性的影响
组别 动物数/只 药物 剂量 A590 抑制率/ %
治疗组 10 IPB-Ⅰ 30 g·kg-1 0.078 3±0.013 2＊1 27.5
阳性对照组 10 氢化可的松 20 mg·kg-1 0.061 8±0.013 8＊2 42.8
阴性对照组 10 0.9%氯化钠注射液 20 mL·kg-1 0.108 0±0.037 0　 -
　　注:与阴性对照组比较 , ＊1P<0.05 , ＊2P <0.01
·11·医药导报 2005年 1月第 24卷第 1期
[ 参考文献]
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北京:人民卫生出版社 , 1991.693-694.
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炎作用及使用方法的药理研究[ J] .中药材 , 1994 , 17
(12):21-24.
骨碎补总黄酮急性毒性实验＊
赵晋宁 ,谢雁鸣 ,张文军 ,王　智 ,刘玉琦
(中国中医研究院西苑医院实验动物中心 ,北京　100091)
[ 摘　要] 　目的　评价骨碎补总黄酮的安全性 ,给临床实验提供依据 ,从而保证临床用药安全。方法　①小鼠灌胃
最大耐受量测定:20 只 NIH 小鼠给予 0.40 g·mL-1骨碎补总黄酮溶液 30 m L·kg-1 ,分 2 次(8 ∶30 , 16 ∶30)灌胃给药 , 观
察其饮食 、活动 、精神状态 、皮毛肤色 、大小便及体重变化。 ②大鼠灌胃最大耐受量测定:20 只Wistar大鼠灌胃给予 0.40
g·mL-1骨碎补总黄酮溶液 30 mL·kg-1 , 分 2 次(8 ∶30 , 16 ∶30)给药 , 观察其饮食 、活动 、精神状态 、皮毛肤色 、体重 、摄食
量变化及大小便。 ③小鼠腹腔注射给药急性毒性实验(LD50):设置 7 个浓度的药液进行腹腔注射 ,一次给药后观察 7 d。
结果　小鼠 、大鼠灌胃给药后 , 其饮食 、活动 、精神状态等体征均无异常变化 , 体重变化在正常范围内(P>0.05)。小鼠
急性毒性实验 ,尸检可见动物腹腔内有少量残留药液 ,重要脏器未见明显病理变化 ,总黄酮 LD50=5.99 g·kg-1 。结论　
骨碎补总黄酮急性毒性实验未显示毒性作用 ,预期临床应用安全性良好。
[ 关键词] 　骨碎补总黄酮;毒性实验 , 急性;最大耐受量;半数致死量
[ 中图分类号] 　R285.5;R965.3　　　[ 文献标识码] 　A　　　[ 文章编号] 　1004-0781(2005)01-0012-03
Acute Toxicity Test of Total Flavoids from Rhizome of Drynariae
ZHAO Jin-ning , XIE Yan-ming , ZHANG Wen-jun , WANG Zhi , LIU Yu-qi(X iyuan Hospital , Academy
of Traditional Chinese Medicine , Beijing 100091 , China)
ABSTRACT　Objective　To provide evidence for clinical trial and to evaluate the safety of to tal flavonoids from rhizome of
drynariae.　Methods　The maximum tolerance of gastrog avage in mice:twenty mice were fed 30 mL·kg-1 w ith the to tal
flavonoids solution(0.40 g·mL-1)by gastrog avage , the bite and sup , activity , psycho sis , coat and skin , urine and faeces , and
body weight were observed.The maximum tolerance of gastrogavage in rats:twenty ra ts were given the same dose to tal
flavonoids solution , and the same observation were done.The acute toxicity trial in mice , LD50 w as carried out by abdominal
injection with 7 dosage groups , and the mice w ere observ ed for 7 days after one injection.　Results　The mice and rats had no
abnormal changes in bite and sup , activity , psychosis , coa t and skin , urine and faeces , and body w eight.There were no
significant changes(P>0.05).Only a little remain of the fed sample was found in the abdomen anatomizing.And there were
no remarkable patholo gical changes in all o rgans.The median lethal dose of the total flavonoids was 5.99 g·kg-1.　Conclusion
　There are no abnormal changes in the acute tox icity trial with total flavonoids from rhizome of drynariae , and the flavonoids
are safe in clinical use.
KEYWORDS　 Total flavonoids from rhizome of drynariae;Acute tox icity trial;Max imum tolerance;Median lethal dose
　　为了对骨碎补总黄酮的安全性做出评价 ,给临床
实验提供依据 ,笔者进行了该药的急性毒性实验 ,确定
半数致死量(LD50)或最大耐受量。
1　材料
1.1　药物　骨碎补总黄酮样品 ,由四川省中药研究所
提供 ,批号:961214 ,每 1.0 g 提取物相当于生药66.67
[ 收稿日期] 　2004-01-14　　　[ 修回日期] 　2004-02-25
[ 基金项目] 　＊国家“九·五”科技攻关重大疾病课题(基金
编号:96-906-09-04)。
[ 作者简介] 　赵晋宁(1961-),男 , 北京人 , 主管技师 , 硕
士 ,主要从事中药药理 、毒理学工作。
g 。用纯化水配成 0.40 g·mL-1骨碎补总黄酮溶液。
1.2　动物　N IH 小鼠 110 只 ,雌雄各半 , 5 ～ 6周龄 ,
体重(20.30±1.54)g ,购自解放军总医院医学实验动
物中心 ,动物合格证号:医动字第 01-3076 号 ,每笼 5
只 ,雌雄分笼 ,饲养观察 1周 ,均健康存活 。Wistar 大
鼠40只 ,雌雄各半 ,由军事医学科学院实验动物中心
提供 ,动物合格证号:医动字第 01-3039 号。8 ～ 10周
龄 ,体重(156.20±10.99)g ,每笼 5 只 ,雌雄分笼 ,饲
养 1周 ,均健康存活 ,动物受试环境:中国中医研究院
西苑医院实验动物中心 ,医学实验动物环境二级标准 ,
合格证号:医动字第 01-4010 。饲料 、饮水 、垫料均符
·12· Herald of M edicine Vol.24 No.1 January 2005