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白花败酱草提取物对小鼠前列腺增生的实验研究



全 文 :CHINA MODERN MEDICINE 中国当代医药
2013 年 11月第 20卷第 33期 ·实验研究·
白花败酱草 (Patrina Villosa Juss,PVJ)为是败酱科草
本植物的根茎及带根全草,是一种常用植物药,在我国分
布极广。 败酱科味辛、苦性寒 [1],具有清热利湿、解毒排脓、
活血化瘀、清心安神功效。 1977 年版《中国药典》将其收载
为正品败酱草[2]。 白花败酱草含有正三十二碳酸(Ⅰ)、正三
十二烷醇(Ⅱ)、棕榈酸(Ⅲ)、齐墩果酸 (Ⅳ)、aurentiamide
acetate(Ⅴ)、胡萝卜苷(Ⅵ)、β-谷甾醇(Ⅶ)、7β-羟基-β-谷
甾醇(Ⅷ)、豆甾醇(Ⅸ)[3],更新研究发现从白花败酱草醋酸
乙酯和正丁醇萃取部位共分离出 7 个化合物,分别鉴定为
5-羟基-7、3′、4′-三甲氧基黄酮(Ⅰ),5-羟基-7、4′-二甲氧
基黄酮(Ⅱ),木犀草素(Ⅲ),槲皮素(Ⅳ),异荭草苷(V),异
牡荆苷 (Ⅵ),8-C-葡萄糖基-7-甲氧基-4′、5-二羟基黄酮
(Ⅶ)[4]。 现代研究表明白花败酱草提取物(PVJE)具有中枢
抑制作用、抗 U14 宫颈癌作用、耐缺氧作用,还有抑菌活性
和抑制胃癌 SGC7901 细胞生长并诱导其发生凋亡等作
用 [5-14]。 本文研究 PVJE对小鼠前列腺增生的作用,报道如下。
1 材料与方法
1.1 药品
白花败酱草购自赣州市医药公司,取干燥白花败酱草
100 g,加双蒸水过液面 2 cm,煮沸 3 次。 每次 30 min,合并
滤液,浓缩至 200 ml。加 3 倍量 95%的乙醇,放冰箱静置过
夜,次日减压过滤,并回收滤液中乙醇,继续浓缩滤液得无
醇味的提取物。 提取物加双蒸水至 100 ml使药液相当于生
药 1 g/ml。用 0.5%NaOH溶液调整 pH为 7.0。置冰箱中备用。
1.2 动物
雄性成年昆明种小鼠,体重为(22±2) g,由湖南长沙实
验动物中心提供。
1.3 试剂
丙酸睾酮注射液 (上海通用药业股份有限公司生产,
批号:国药准字 030519),普乐安,睾丸酮放射免疫试剂盒
(购自天津九鼎医学生物工程有限公司, 批号: 国药准字
G120103),雌二醇(购自天津九鼎医学生物工程有限公司,
批号:国药准字 A12101106)放射免疫试剂盒。 睾丸酮(T)
白花败酱草提取物对小鼠前列腺增生的实验研究
郭晓秋 1 徐 洁 1 曾 玲 1 张文然 1 曾 靖 2▲
1.江西省中医院药剂科,江西南昌 330006;2.赣南医学院药学院,江西赣州 341000
[摘要] 目的 研究白花败酱草提取物(PVJE)对小鼠前列腺增生的抑制作用。 方法 小鼠随机分为对照组、模型
组、普乐安组、小剂量 PVJE组、大剂量 PVJE组。 对照组皮下注射花生油溶液 0.1 ml/只,其余各组均皮下注射丙
酸睾酮溶液 5 mg/(kg·d),同时普乐安组给予 5 g/(kg·d)的普乐安溶液灌胃,小剂量 PVJE 组、大剂量 PVJE 组分
别给予 0.02、0.04 g/(kg·d)的白花败酱草提取物溶液灌胃,共给药 12 d。研究小鼠前列腺湿重、前列腺指数、性激
素水平和光镜下前列腺形态学的变化。 结果 与模型组比较,PVJE 能明显抑制由丙酸睾丸酮诱发的小鼠前列
腺增生,小鼠血清睾丸酮(T)、和雌二醇(E2)含量明显降低。 结论 PVJE 对丙酸睾丸酮所致小鼠前列腺增生具
有显著的拮抗作用。
[关键词] 白花败酱草;提取物;前列腺增生;小鼠
[中图分类号] R282.71 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2013)11(c)-0033-02
Experimental study of Patrina Villosa Juss. extractive on benign prostatic
hyperplasia model of mice
GUO Xiao-qiu1 XU Jie1 ZENG Ling1 ZHANG Wen-ran1 ZENG Jing2▲
1.Department of Pharmacy, Hospital of Traditional Chinese Medicine in Jianxi Province, Nanchang 330006;2. Phar -
macy College of Gannan Medical College in Jianxi Province, Ganzhou 341000,China
[Abstract] Objective To study inhibiting effect of Patrina Villosa Juss extractive(PVJE) on benign prostatic hyperpla-
sia of mice. Methods Mice were divided into five groups including positive control group, model group, Pulean tablets
treating group, low dose PVJE group and high dose PVJE group. The mice in control group were injected subcuta -
neously with peanut oil solution(0.1 ml), while in other groups testosterone propionate solution [5 mg/(kg·d)] was em-
ployed instead of the oil. Meanwhile Pulean group was given gavage with Pulean 5 g/(kg·d), and low dose PVJE group
and high dose PVJE group were given PVJE gavage [0.02, 0.04 g/(kg·d)] for 12 consecutive days. Wet weight of
prostate, prostate health index, sex hormone levels and prostate morphological changes under light microscope were
compared among different groups. Results Compared with model group, PVJE can apparently inhibit prostatic hyper -
plasia in mice induced by testosterone propionate, reduce the serum testosterone(T), estrodiol(E 2) contents. Conclusion
PVJE have significant inhibiting effect on benign prostatic hyperplasia induced by testosterone propionate in mice.
[Key words] Patrina Villosa Juss; Extractive; Prostatic hyperplasia; Mice
[基金项目] 国家自然科学基金(30560173)
[作者简介] 郭晓秋(1972-),女,江西南昌人,学士,副主任药师,药学
专业
▲通讯作者:曾靖(1958-),男,江西赣州人,教授,硕士生导师,主要从
事心脑血管药理、中药药理研究
33
中国当代医药 CHINA MODERN MEDICINE
·实验研究· 2013 年 11月第 20卷第 33期
和雌二醇(E2)含量测定均按试剂盒说明书测定。
1.4 方法
1.4.1 分组 小鼠随机分为 5 组,分别为对照组、模型组、普
乐安组、小剂量 PVJE组、大剂量 PVJE组。
1.4.2模型制备 对照组皮下注射花生油溶液 0.1 ml/只,其余
各组均皮下注射丙酸睾酮溶液 5 mg/(kg·d), 同时普乐安组
给予 5 g/(kg·d)的普乐安溶液灌胃,小剂量 PVJE 组、大剂
量 PVJE 组分别给予 0.02、0.04 g/(kg·d) 的白花败酱草提
取物溶液灌胃,共给药 12 d。
1.4.3 指标的测定 于最后 1 次给药后的次日经颈总动脉
取血,分离血清,按试剂盒操作说明,测定小鼠血清 E2和 T
的含量,比较各组小鼠 E2和 T含量的变化。 同时分离前列
腺组织, 按前列腺湿重 /小鼠体重计算前列腺湿重指数
(PI), 比较各组小鼠列腺湿重和 PI。 前列腺以 Bouin 液固
定,常规石蜡包埋,连续切片,HE 染色,在光镜下观察其给
药前后的结构变化[15]。
1.5 统计学方法
应用 SPSS 14.0 统计学软件进行数据分析, 计量资料
均以 x±s 表示,组间各指标的总体比较采用单因素方差分
析,组内各指标的多重比较采用 SNK-q 检验,以 P<0.05 为
差异有统计学意义。
2 结果
2.1 PVJE 对小鼠前列腺湿重和 PI的影响
与模型组相比,小剂量 PVJE组、大剂量 PVJE组小鼠前
列腺湿重和 PI均下降,且与 PVJE呈一定的量效关系(表1)。
表 1 PVJE 对小鼠前列腺湿重和 PI 的影响(x±s,n=8)
与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01
2.2 PVJE 对小鼠血清性激素水平的影响
与模型组相比,小剂量 PVJE 组、大剂量 PVJE 组小鼠
血清 E2和 T 的含量均有显著下降,且 T/E2 的比值亦有显
著下降,且与 PVJE呈一定的量效关系(表 2)。
表 2 PVJE 对小鼠血清性激素水平变化的影响(x±s,n=8)
与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01
2.3 PVJE 对前列腺结构的影响
模型组与对照组比较,腺体明显增生,腺体呈锯齿样
扩张明显,腺体的大部分呈现乳头状向腔内突出;腺腔不
规则,体积增大且质较稀少,细胞核增大,腔内酸性分泌物
明显增加;腺上皮细胞核呈卵圆形,可见核仁,腺上皮部分
呈高柱状;酸性分泌物增多。小剂量 PVJE组前列腺较模型
组缩小,腺体腺上皮有一部分增生,少量呈现乳头状向腔
内突出;上皮为单层柱状或高柱状,腔内分泌物较模型组
明显减少;腺上皮细胞胞浆呈透明状。小剂量 PVJE组前列
腺增生程度显著减轻,腺体细胞大小趋于一致,且腺体细
胞排列整齐,腺体接近正常腺体。
3 讨论
前列腺增生症是老年男性的常见疾病,发病率随年龄
递增。 随着老龄社会的到来,前列腺增生症发病数明显增
加。 我国 60~69 岁年龄段老年人中重度前列腺增生的患病
率约为 66%,70 岁以上老年人的患病率则高达 70%。 因此
前列腺增生症已成为中国老年医学研究的重要课题。 临床
目前对前列腺增生的治疗还缺少有效药物。 因此,迫切需
要寻找高效低毒的治疗前列腺增生的药物。 前列腺增生的
关键诱因是雌、雄激素比例的变化,血清中 T的含量和 E2水
平对前列腺增生有重要影响。 同时前列腺湿重、PI 及前列
腺组织形态也是反映增生程度及确定是否增生的关键指
标。本实验采用小鼠皮下注射丙酸睾酮建立前列腺增生模型。
研究结果表明每天给予 0.02、0.04 g/kgPVJE 可明显减
轻前列腺湿重和 PI, 使小鼠血清中的 E2和 T 的含量均有
下降; 在病理学检查中研究发现 0.04 g/(kg·d)PVJE 能显
著减轻前列腺增生程度,使腺体细胞大小趋于一致,且腺
体细胞排列整齐,接近正常腺体。 以上研究结果显示 PVJE
对丙酸睾丸素所致的前列腺增生具有显著的治疗效果。
[参考文献]
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(收稿日期:2013-08-30 本文编辑:魏玉坡)
对照组
模型组
普乐安组
小剂量 PVJE 组
大剂量 PVJE 组
-
-
5
0.02
0.04
106.4±10.2
138.2±12.5
112.3±9.4
126.8±11.2*
118.5±9.6**
3.04±0.29
3.95±0.35
3.21±0.27
3.62±0.32*
3.39±0.34**
组别 剂量[g/(kg·d)] 前列腺湿重(mg) 前列腺指数(mg/g)
对照组
模型组
普乐安组
小剂量 PVJE 组
大剂量 PVJE 组
-
-
5
0.02
0.04
22.30±2.50
40.82±3.70
26.26±2.20
31.75±2.90
27.88±2.40
2.51±0.56
7.65±0.92
2.98±0.67
5.42±1.52*
3.98±1.12**
0.113±0.03
0.187±0.02
0.113±0.03
0.171±0.04*
0.143±0.04**
组别 剂量[g/(kg·d)] E2(ng/L) T(μg/L) T/E2
34