全 文 ：sult:1． Cirenshen effective part (60% ethanol elution liquid)to improve sleep has dose effect relationship． The experimental results show
that the effective part，Cirenshen (60% ethanol elution liquid)on improving sleep effect appears certain dose-effect relationship． Primarily
prolong pentobarbital sodium in mice induced by sleep duration (P ＜ 0． 05)and shorten their sleep latency (P ＜ 0． 05)． Effective dose
for16g /kg，the optimal effective dose of 64g /kg． 2． The experimental results show that the effective parts，Cirenshen (60% ethanol elution
liquid)and improving sleep effect appears certain time-effect relationship． Primarily prolong pentobarbital sodium in mice induced by sleep
duration (P ＜ 0． 05)and shorten their sleep latency (P ＜ 0． 05)． Effective delivery time is 5days，the best delivery time for7days． 3． Ciren-
shen effective parts (64g /kg)administered 7 days significantly increased the content of DA(p ＜ 0． 01)、NE(p ＜ 0． 05)and NO(p ＜ 0． 01)in
hippocampus in mice． However，reduce the content of DA (p ＜ 0． 05)NE (p ＜ 0． 05) ，and NO (p ＜ 0． 05)in cortex and hypothala-
mus． Have the trend of lower 5-HT and NOS content in brain regions of mice． Conclusion:1． Cirenshen effective parts in a certain time and
drug dosage range have significant improvements in the role of improve sleep． The best effective dose for 64 g /kg，the best dosage time for 7
days． 2． The sleep improvement function of cirenshen effective parts related to central neurotransmitter(DA、NE and 5-HT )regulation mech-
anism and nitric oxide adjustment mechanism．
Key words Cirenshen(刺人参) ;sleep;mechanism of sleep
苦木提取物对原发性高血压大鼠的降压作用研究
*
赵文娜，苏 琪，何 姣，赵丽娜，谢人明，孙文基＊＊
(西北大学陕西省生物医药重点实验室，西安 710069)
摘 要 目的:探讨苦木提取物(PQB)对原发性高血压大鼠(SHR)的降压作用及其降压机制。方法:40 只雄性 SHR被随机
分为 5 组，高血压对照组，卡托普利组，PQB高剂量组，PQB中剂量组，PQB 低剂量组，每组 8 只。每日给予各组大鼠相应药物灌胃，
高血压对照组给予等量蒸馏水。6 周末，自大鼠颈动脉取血，用于测定血清一氧化氮 (NO)及超氧化物歧化酶 (SOD)含量，同时取
胸主动脉组织 2cm左右用中性甲醛固定，用免于免疫组织化学法测定内皮一氧化氮合酶(eNOS)表达。结果:与高血压对照组相
比，PQB中剂量组(100 mg /kg /d)和高剂量组(200 mg /kg /d)NO 及 SOD及含量明显升高(分别为 P ＜ 0． 05 和 P ＜ 0． 01) ;而卡托普
利组(12． 5 mg /kg /d)和小剂量组(50 mg /kg /d)效果不显著(P ＞ 0． 05)。胸主动脉 eNOS 蛋白表达逐步增强。结论:PQB 可显著升
高 SHR大鼠血清 NO和 SOD水平，使 eNOS蛋白表达增强，推测其降压机制主要是通过影响胸主动脉 eNOS蛋白表达，增加血管舒
张因子 NO的含量，从而使血管扩张，血压下降。
关键词 苦木;原发性高血压;一氧化氮;超氧化物歧化酶;蛋白表达
苦木(Picrasma quassioides (D． Don)Benn)以苦味著称，又
称苦胆木，熊胆树，苦皮树，为苦木科(Simaroubaceae)苦木属植
物。主要用于风热感冒，咽喉肿痛，湿疹，湿热泻痢，毒蛇咬伤
等［1］。现代药理研究表明，苦木中化学成分主要包括苦木苦味
素类和生物碱类，具有抗菌消炎、降压、降低转氨酶、解热、抗疟、
抗癌以及抗蛇毒等作用。
高血压(hypertension)可分为原发性高血压(essential hyper-
tension，EH)和继发性高血压(secondary hypertension，SH)两大
类，临床上主要表现为体循环动脉压增高，出现头昏、头胀、失
眠、易怒、以及前额部或枕后部疼痛等，出现的并发症主要有心
肌梗死，中风及肾功能衰竭等疾病。EH 发病因素主要包括:肾
素-血管紧张素-醛固酮系统，交感神经活性增加，血管内皮功能
异常，血管平滑肌重构与功能异常，胰岛素抵抗以及氧自由基
的参与等。目前治疗 EH的药物主要有血管紧张素转化酶抑制
剂，受体拮抗剂，利尿药，钙通道阻滞药及 β 受体阻断药等，这
些药物虽然效果显著，但由于高血压是一种多因素引起的疾
病，并且其产生的中风、心力衰竭等心血管并发症严重危害着高
血压病人的生命，因此研究开发出新的降血压药是一个非常重
要的任务。目前中医药实验研究高血压病主要是依靠西医高血
压病模型，比如肾性高血压大鼠(RHR) ，原发性高血压大鼠
(SHR)等。本文拟通过给 SHR 大鼠灌胃 PQB 后，观察其对小
鼠血清中 NO，SOD 及胸主动脉 eNOS 蛋白表达的影响，探讨
PQB的降压机制。
1 材料与方法
1． 1 试验药物 苦木药材购自西安万寿路药材市场，经西北
大学王亚洲副教授鉴定为苦木科苦木的干燥茎及枝，标本(KM
090512)保存在陕西省生物医药重点实验室。实验用苦木药材
4． 0 公斤，粉碎过 20 目筛，用 80%的乙醇回流提取三次，减压浓
缩乙醇提取液，得到粗提物 97． 5 g，粗提物用 pH = 2 的酸水酸
化后先用乙酸乙酯萃取 8 ～ 10 次，然后用 NaOH 碱水溶液和
Na2CO3把余下的酸水碱化到 pH = 10 左右，碱水层再用二氯甲
801 中药药理与临床 2012;28(5)
* 基金项目:西北大学研究生创新基金(10YZZ34) ＊＊通讯作者
DOI:10.13412/j.cnki.zyyl.2012.05.074
烷萃取 8 ～ 10 次，直到无生物碱反应为止。回收二氯甲烷萃取
液并蒸干，粉碎，得到粗总生物碱约 30． 0g，备用。给药前再用
生理盐水配置为给药浓度分别为 50 mg /kg、100 mg /kg 及 200
mg /kg的溶液。阳性药卡托普利片，山西津华晖星制药有限公
司，批号:10306。给药前用生理盐水配置成 12． 5 mg /kg 的溶
液。
1． 2 动物 SHR大鼠，雄性，10 周龄，体重 220g ～ 250g，购自北
京维通利华(Vital River)实验动物技术有限公司(美国 Charies
River Inc中国总代理) ，动物许可证号:SCXK(京 2011-0001)。
1． 3 试剂 生理盐水(S) :生理盐水，由西安京西双鹤药业有
限公司生产，批号:120218174。大鼠 SOD试剂盒及 NO试剂盒，
南京建成生物工程研究所。eNOS抗体，北京博奥森生物技术有
限公司。
1． 4 仪器 ALC-NIBP 动物无创血压测量分析系统，上海奥尔
科特生物科技有限公司。德国 1512 Leitz旋转式切片机。日立
7160 全自动生化仪。奥林巴斯 DP-71 显微照相系统，Motic Ima-
ges 2000 图像处理软件。
1． 5 方法
1． 5． 1 动物分组及各组给药方法 所有购入大鼠均饲养于西
北大学陕西省生物医药重点实验室实验动物中心 SPF (Specific
Pathogen Free)级屏障设施内，昼夜节律 12 小时 /12 小时，无特
殊实验要求时正常供应饲料和饮水。适应性饲 1 周并每天测定
血压使其适应环境。给药前随机将 40 只大鼠分为 5 组，每组 8
只。即对照组、阳性药卡托普利组及苦木提取物 3 个给药组。
空白对照组灌胃给生理盐水 1ml /100g，苦木提取物小剂量组按
50g 提取物 /kg、中剂量组按 100g 提取物 /kg、大剂量组按 200g
提取物 /kg 给药，阳性药组给卡托普利 12． 5 mg /kg，实验过程中
每周测量一次体重，并根据动物体重变化调整各组给药剂量，
连续给药六周。
1． 5． 2 动物血压的测定 将大鼠分别装入固定器中并在鼠尾
近心端套上压脉套，并在鼠尾 1 /3 处放置换能器，打开恒温系统
预热使保温毯温度维持在 38℃左右，利用充气气囊调节压力，
待大鼠相对稳定并在显示器上出现规则的脉搏波形时，开始测
量大鼠尾动脉收缩压。测量时间均选在上午灌药一小时后进
行。给药期间每周测一次血压，每次测 3 个数值并取平均数。
1． 5． 3 动物血清样本的采集 连续给药六周后，于末次给药后
将动物禁食不禁水 12h，称重并用 10%的乌拉坦麻醉，颈动脉取
血处死大鼠。取 4 ml血于离心管中，4℃静置一段时间后，用离
心机 3000 rpm离心 10 min，分离血清，以备测定血清超氧化歧
化酶(SOD)及一氧化氮(NO)含量。
1． 5． 4 动物胸主动脉样本的采集 连续给药六周后，于末次给
药后将动物禁食不禁水 12h，称重并用 10%的乌拉坦麻醉，颈动
脉取血处死大鼠。取胸主动脉约 2 cm段放入 10%的中性甲醛
中固定，石蜡包埋并切片，以备进行免疫组化检测。
1． 5． 5 血清中 SOD及 NO的检测 取制备好的血清，按照 NO
试剂盒采用硝酸还原酶法检测血清 NO 含量;按照 SOD 试剂盒
采用黄嘌呤氧化酶法检测 SOD活性。
1． 5． 6 统计方法 实验数据均采用平均值 ±标准差(X ± S)表
示，运用 SPSS 17． 0 软件 t检验进行统计分析，计算得到 P值，讨
论实验结果是否有显著性差异。P ＜ 0． 05 有统计学意义。
2 结果
2． 1 苦木提取物对 SHR 大鼠血压的影响 表 1，表 2 所示为
苦木灌胃给药六周 SHR大鼠血压变化情况。由表 1、表 2 可以
看出，在给药前各组大鼠血压 (收缩压和舒张压)基本没有显
著差异，给药后各组血压明显下降，6 周后，卡托普利组和苦木
各剂量组均明显降低了自发性高血压大鼠的收缩压和舒张压，
并且各治疗组与高血压对照组比较均有显著性差异(P ＜ 0．
01)。
表 1 给药前后大鼠收缩压(SBP)变化(珋x ± s)
组别
剂量
(mg /kg)
鼠数
(只)
给药前
(mmHg)
给药后血压 (mmHg)
一周 两周 三周 四周 五周 六周
对照 8 206． 50 ± 10． 19 203． 24 ± 6． 65 205． 34 ± 4． 50 204． 09 ± 9． 16 201． 23 ± 5． 69 201． 24 ± 6． 17 201． 30 ± 6． 89
卡托普利 12． 5 8 209． 66 ± 7． 95 196． 07 ± 9． 35 184． 03 ± 9． 46＊＊ 181． 28 ± 10． 15＊＊184． 43 ± 5． 83＊＊ 183． 67 ± 8． 26＊＊ 176． 82 ± 4． 30＊＊
苦木提取物 50 8 204． 20 ± 5． 49 199． 73 ± 9． 52 188． 47 ± 1． 89 182． 95 ± 10． 50＊＊183． 26 ± 10． 02＊＊182． 28 ± 6． 59＊＊ 178． 36 ± 5． 66＊＊
苦木提取物 100 8 204． 38 ± 4． 92 194． 35 ± 8． 52 183． 48 ± 9． 46＊＊ 181． 88 ± 9． 89＊＊ 180． 58 ± 7． 81＊＊ 176． 78 ± 6． 12＊＊ 179． 96 ± 4． 58＊＊
苦木提取物 200 8 206． 59 ± 7． 95 185． 26 ± 5． 79＊＊ 181． 02 ± 9． 46＊＊ 180． 90 ± 10． 19＊＊180． 58 ± 8． 51＊＊ 177． 60 ± 9． 24＊＊ 178． 31 ± 6． 19＊＊
与对照组比较 * P ＜0． 05，＊＊P ＜0． 01(下同)
表 2 给药前后大鼠舒张压(DBP)变化 (珋x ± s)
组别
剂量
(mg /kg)
鼠数
(只)
给药前
(mmHg)
给药后血压 (mmHg)
一周 两周 三周 四周 五周 六周
对照 8 149． 13 ± 14． 59 145． 85 ± 8． 05 149． 31 ± 13． 29 149． 62 ± 4． 85 147． 15 ± 7． 95 142． 76 ± 7． 73 146． 11 ± 9． 62
卡托普利 12． 5 8 150． 60 ± 13． 05 142． 21 ± 2． 85 134． 28 ± 14． 50* 132． 71 ± 10． 15＊＊137． 20 ± 9． 57* 136． 51 ± 5． 08* 132． 78 ± 9． 33＊＊
苦木提取物 50 8 141． 67 ± 9． 27 144． 79 ± 8． 71 141． 40 ± 3． 78 136． 16 ± 11． 66* 138． 51 ± 12． 30* 136． 60 ± 9． 35* 132． 65 ± 6． 52＊＊
苦木提取物 100 8 142． 45 ± 13． 14 136． 82 ± 10． 93 133． 02 ± 8． 95* 133． 24 ± 11． 47* 134． 52 ± 6． 77* 132． 31 ± 9． 02＊＊ 131． 61 ± 4． 03＊＊
苦木提取物 200 8 147． 75 ± 7． 30 138． 12 ± 5． 08 135． 79 ± 14． 98* 138． 02 ± 11． 10* 132． 07 ± 10． 49＊＊133． 01 ± 9． 50＊＊ 129． 82 ± 7． 79＊＊
2． 2 苦木提取物对 SHR大鼠心脏和肾脏重量的影响
从表 3 可以看出，给药六周后，高血压对照组大鼠心脏和肾
脏质量明显高于各给药组，卡托普利组和苦木中剂量组和大剂
量组与对照组比较心脏质量减小具有显著性意义(P ＜ 0． 05) ，
说明苦木和卡托普利均能逆转 SHR心室重塑，小剂量组也起到
一定的降低作用，但不具有显著性意义(P ＞ 0． 05)。肾脏是高
血压最易累及的靶器官之一，高血压病理状态下，出现肾小球和
肾小管的萎缩及代偿性肥大，各给药组最终使肾脏质量降低，说
明卡托普利和苦木在一定程度上具有保护靶器官的作用。
901中药药理与临床 2012;28(5)
表 3 给药六周后各组大鼠心脏和肾脏质量(珋x ± s)
组别
剂量
(mg /kg)
鼠数
(只)
心脏重量
(g)
肾脏重量
(g)
对照 6 1． 52 ± 0． 19 2． 33 ± 0． 15
卡托普利 12． 5 6 1． 28 ± 0． 07* 2． 04 ± 0． 07＊＊
苦木提取物 50 6 1． 47 ± 0． 19 2． 23 ± 0． 16
苦木提取物 100 6 1． 30 ± 0． 88* 2． 21 ± 0． 04
苦木提取物 200 6 1． 26 ± 0． 13* 2． 07 ± 0． 15*
2． 3 苦木提取物对大鼠血清超氧化歧化酶(SOD)及一氧化氮
(NO)的影响 由表 4 可知，苦木各剂量组均能升高原发性高血
压大鼠血清超氧化歧化酶(SOD)及一氧化氮(NO) ，并且中剂量
组和大剂量组的效果与对照组比较具有显著性差异(分别为 P
＜ 0． 05 和 P ＜ 0． 01) ，而阳性药卡托普利与对照组比较虽然具
有明显的升高作用，但是同苦木小剂量组一样，不具有显著意
义(P ＞ 0． 05)。
表 4 给药六周后各组大鼠血清 SOD及 NO含量变化(珋x ± s)
组别
剂量
(mg /kg)
鼠数
(只)
超氧化歧化酶
(U /ml)
一氧化氮
(μmol /ml)
对照组 6 57． 45 ± 3． 97 24． 71 ± 3． 21
卡托普利 12． 5 6 60． 20 ± 5． 57 28． 94 ± 6． 70
苦木提取物 50 6 62． 48 ± 9． 49 26． 31 ± 6． 71
苦木提取物 100 6 64． 25 ± 5． 15* 32． 98 ± 4． 59*
苦木提取物 200 6 79． 22 ± 6． 71＊＊ 35． 72 ± 6． 09＊＊
2． 4 苦木提取物对 SHR 大鼠胸主动脉内皮一氧化氮合酶
(eNOS)表达的影响 大鼠胸主动脉免疫组化切片在 200 倍显
微镜下观察，结果见图 1。
图 1 大鼠胸主动脉 eNOS表达
从图 1 可以看出，原发性高血压大鼠对照组胸主动脉内皮
一氧化氮合酶(eNOS)阳性颗粒很少见(图 1A 和图 1B) ，而卡
托普利组(图 1C)和苦木小剂量组(图 1D) ，中剂量组(图 1E)
及大剂量组(图 1F)各给药组内皮细胞及平滑肌细胞中的棕黄
色阳性颗粒明显增多，可以看出，随着苦木给药剂量的增高，
eNOS蛋白表达逐步增强。
3 讨论
原发性高血压大鼠(SHR)是一种最接近人类原发性高血
压的发病特征的遗传高血压模型，被国际上广泛用于研究高血
压疾病。马树德等［2］人实验发现苦木总生物碱(1mg /kg)静脉
注射对麻醉犬、兔有明显降压作用(P ＜ 0． 01) ，灌胃(40 mg /kg)
对正常大鼠和肾型高血压大鼠均有明显降压作用(P ＜ 0． 05) ，
且降压强度随剂量增大而增大。杜志德［3］等对大鼠以苦木总
生物碱 200 mg /kg灌胃给药时，其作用非常明显并与静脉给药
取得了一致的降压效果。其他文献资料还报道了苦木在临床
上对高血压病人具有很好的降压效果［4 ～ 7］。为了观察苦木对
血压的影响及其机制，本实验采用 SHR大鼠作为动物模型进行
了相关的实验研究，并观察了给药过程中各组大鼠的收缩压和
舒张压的变化，从结果来看，苦木大、中、小剂量灌胃给药均能使
SHR血压出现不同程度的下降，其中大剂量组和中剂量组与阳
性药卡托普利的降压效果几乎相当。
血管外周阻力增加是高血压的重要发病因素。生理情况
下，NO是由内皮型一氧化氮合酶(eNOS)合成和释放的一种舒
血管活性物质，是血管张力的主要调节因子，在高血压的发病机
制中占着非常重要的地位。研究表明高血压患者及动物体内内
皮型一氧化氮合酶含量下降，血清 NO 含量显著降低［8，9］。在
高血压病理状态下，机体的天然抗氧化酶超氧化物歧化酶
(SOD)明显降低，SOD 可在维持体内自由基的动态平衡，避免
机体的组织细胞损害。本实验研究结果表明，各给药组均能增
加大鼠血清 NO和 SOD含量，以苦木中剂量组和高剂量组较为
显著(分别是 P ＜ 0． 05 和 P ＜ 0． 01) ，而阳性降压药卡托普利治
疗后却效果不显著(P ＞ 0． 05)。免疫组织化学实验表明给药后
各组大鼠胸主动脉 eNOS蛋白表达明显高于对照组。说明苦木
可能是通过促提高 eNOS表达，促进内皮源性因子 NO的合成和
释放，从而使血管扩张，血压下降。
参考文献
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版，2010∶ 186
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synthase in spontaneously hypertensive rats． Proe Natl Acad Sci USA，1996;
93∶ 11996 ～ 12001
Studies of Picrasma quassiodes extracts on the antihypertensive effect in spontaneously hypertensive rats
Zhao Wenna，Su Qi，He Jiao，Zhao Lina，Xie Renming，Sun Wenji
(Biomedicine Key Laboratory of Shaanxi Province，Northwest University，Xi＇an 71069)
Objective:To explore the antihypertensive effect of extracts from PQB on SHR and its mechanism． Methods:40 male SHR were ran-
domly divided into five groups，SHR control group;captopril group;PQB high dose group;PQB middle dose group and PQB low dose group，
each group had eight rats． Given rats corresponding drug orally，the hypertension the control group with distilled water． After 6 weeks treat-
ment，blood was collected from the rat carotid artery for determination of serum nitric oxide (NO)and superoxide dismutase (SOD)activity，
at the same time about 2cm of the thoracic aorta was embedded in paraf?n for immunohistochemical analysis of eNOS expression． Results:
Compared with the SHR control group，the NO and SOD of PQB administration in middle dose group (100 mg /kg /d)and high dose group
(200 mg /kg /d)increased (P ＜ 0． 05 and P ＜ 0． 01) ;however，the low dose group (50 mg /kg /d)and captopril group (12． 5 mg /kg /d)
had no significant effect． The expression of eNOS gradually enhanced． Conclusion:PQB could significantly elevated serum NO and SOD lev-
els of SHR，increased the expression of eNOS，the results suggested that the antihypertensive mechanism may be by increasing expression of
important proteins in NO pathway namely eNOS and improving NO availability which infers relaxation of the vessel wall to control blood pres-
sure．
Key words Picrasma quassiodes(苦木) ;essential hypertension;nitric oxide;superoxide dismutase;protein expression
大鲵皮肤和黏液抑菌效果及其中药膏制剂对烫伤的影响
*
陈 曦，王杨科，陈德经
(陕西理工学院 /陕西省资源生物重点实验室，汉中 723000)
摘 要 目的:研究大鲵皮肤、黏液抑菌效果，及大鲵皮肤、黏液中药膏对大鼠皮肤烫伤的治疗作用。方法:用 80 ﹪甲醇获取
大鲵皮肤、黏液提取物，采用滤纸片扩散法观察提取物对绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌四种菌的抑菌作用，以土
霉素作阳性对照。建立 SD大鼠背部深 II度烫伤模型，分为大鲵皮肤中药膏组、大鲵黏液中药膏组、阳性对照组、模型对照组，观察
其对大鼠皮肤烫伤的治疗作用。结果:大鲵皮肤浸提物对绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌有较强的抑菌作用，而对大肠杆菌
无抑制作用，大鲵黏液对这四种菌抑制作用不显著。大鲵皮肤和黏液中药膏能明显缩短烫伤后大鼠创面愈合时间，其愈合速度快，
使创面缩小明显，显微镜下观察真皮内皮肤附件结构完整，未见水肿、炎性细胞浸润。结论:大鲵主要抗菌部位在皮肤;大鲵皮肤和
黏液中药膏具有促进烫伤大鼠创面愈合的作用。
关键词 大鲵;皮肤;粘液;抑菌;中药膏;烫伤模型
中国大鲵(Andrias davidianus Blanchard)俗名娃娃鱼，属
于国家二级保护动物［1］。《本草纲目》中记载，大鲵的皮肤、肌
肉、脏器、骨骼等均可入药［2］。大鲵机体中含有 50 多种天然生
物活性物质，其中肌肉蛋白质的氨基酸组成全面，种类高达 18
种，其氨基酸总量、必需氨基酸总量、呈味氨基酸的质量分数都
相当高［3，4］。大鲵脂肪富含多种不饱和脂肪酸，其饱和脂肪酸
(SFA)为 20． 2%，单不饱和脂肪酸(MUFA)为 42． 8%，多不饱和
脂肪酸(PUFA)为 28． 5%，是治疗烫伤、烧伤的特效药［5］。大鲵
皮肤及黏液中含有大量的胶原蛋白及表皮活性蛋白因子，在医
学和美容方面有着非常重要的意义［6］。在民间验方中，鲵皮黏
液拌桐油具有治疗烫伤作用，但是目前对于大鲵皮服和黏液治
疗烫伤的研究未见报道。本文对大鲵的皮肤和黏液抑菌作用进
111中药药理与临床 2012;28(5)
* 基金项目:陕西省社会发展项目(2008k16-07) ;陕西省教育厅项目(09JS050)